高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉平滑肌细胞中巨噬细胞炎性蛋白lα和C-C型趋化因子受体1的表达

目的 通过检测高同型半胱氨酸血症大鼠胸主动脉平滑肌细胞中巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)和C-C型趋化因子受体1(CCR1)蛋白的表达,探讨高同型半胱氨酸血症引起动脉粥样硬化(AS)的机制.方法 8周龄SD雄性大鼠16只随机分为对照组和高蛋氨酸组,每组8只.对照组给予普通饲料喂养,高蛋氨酸组在普通饲料喂养的基础上加质量分数2%的蛋氨酸.喂养8周后处死大鼠,心脏采血,取胸主动脉.肉眼及光镜下观察血管形态学改变,采用高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度,S-P免疫组织化学染色法检测MIP-1α和CCR1的表达.结果 (1)血浆Hey浓度:高蛋氨酸组大鼠血浆Hcy浓度(45.74±9.65)mmol·L-1显著高于对照组(7.38±2.28)mmol·L-1(P<0.01).(2)形态学改变:肉眼观可见对照组大鼠胸主动脉内膜光滑,高蛋氨酸组胸主动脉内膜粗糙、隆起;光镜下可见对照组大鼠主动脉内膜内皮细胞排列整齐,高蛋氨酸组内膜细胞排列紊乱,脂质沉积.(3)免疫组织化学染色结果 :MIP-1α和CCR1蛋白的阳性表达表现为细胞质呈棕褐色.MIP-1α和CCR1蛋白在高蛋氨酸组的阳性表达强于对照组,二者在高蛋氨酸组的阳性表达平均灰度值明显低于对照组(P<0.01).结论 高同型半胱氨酸血症可诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞MIP-1α及其受体CCR1的表达,引起血管壁的炎症,导致AS形成.     

同型半胱氨酸对单核细胞NF-κB活化及巨噬细胞炎性蛋白-1α表达的影响

为探讨同型半胱氨酸对体外培养的人单核细胞株THP1核因子κB(NFκB)、抑制因子(IκBα)活性的影响及其与巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)表达上调的关系,对THP1单核细胞分别用同型半胱氨酸和NFκB抑制剂PDTC预处理后,应用Northernblot和流式细胞术分别检测MIP1αmRNA和蛋白的表达,并应用Western蛋白印迹进一步检测核蛋白NFκB蛋白含量和胞质IκBα含量。与未加任何处理因素的对照组比较,MIP1αmRNA和蛋白在0.1mmol/L同型半胱氨酸处理后明显增加,分别为对照组的3.69倍和1.16倍(P<0.01),同时NFκBP65亚基核转位亦增加。而加入…     

高糖、糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞巨噬细胞炎性蛋白1α表达的影响

目的:探讨高糖浓度和糖基化终产物(AGEs)对大鼠主动脉平滑肌细胞巨噬细胞炎性蛋白(MIP)1αmRNA及蛋白表达的影响.方法:将培养的大鼠主动脉平滑肌细胞分别用不同浓度AGEs(100,200,400 mg/L)单独培养24h;400mg/L AGEs和22mmol/L葡萄糖联合培养24 h.RT-PCR方法及流式细胞仪检测MIP-1α mRNA及蛋白的表达.结果:对照组平滑肌细胞内MIP-1α呈弱表达;100,200,400 mg/L AGEs培养平滑肌细胞24 h及22mmol/L葡萄糖和400 mg/L AGEs联合孵育24 h后显著增高MIP-1α mRNA的表达,其电泳条带相对积分吸光度值分别为对照组的1.36,1.75,2.45及2.76倍(P＜0.05);各组平滑肌细胞MIP-1α蛋白的平均荧光强度分别为对照组的1.24,1.63,2.37及2.68倍(P＜0.05).结论:AGEs能刺激平滑肌细胞MIP-1α mRNA及蛋白表达增加,且与高糖具有协同作用.     

叶酸降低高同型半胱氨酸血症大鼠单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的探讨补充叶酸对高蛋氨酸喂养所致的高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠主动脉内皮及外周血单个核细胞(PBMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达和释放的影响.方法健康清洁级SD雄性大鼠30只随机分为3组:正常对照(Control)组、高同型半胱氨酸(Hhcy)组、补充叶酸(FA)组.每组10只,分别给予普通饲料;普通饲料加1.7%蛋氨酸;普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%叶酸.饲养45 d,采用高效液相色谱法测定血浆总同型半胱氨酸浓度,用双抗体夹心ELISA方法测定3组大鼠氧化型低密度脂蛋白诱导后PBMC释放炎症趋化因子MCP-1的含量,免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠主动脉MCP-1的表达.结果大鼠喂以高蛋氨酸饲料45 d可诱导高同型半胱氨酸血症,同时补充叶酸可显著降低血浆总同型半胱氨酸水平(P＜0.01);与Contro1组相比,Hhcy组大鼠血浆总同型半胱氨酸升高,主动脉内皮MCP-1的表达和氧化型低密度脂蛋白诱导的PBMC释放的MCP-1水平均显著升高(P＜0.05,P＜0.01);FA组大鼠血浆总同型半胱氨酸水平降低,主动脉内皮MCP-1的表达及氧化型低密度脂蛋白诱导的PBMC释放的MCP-1水平较Hhcy组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论叶酸治疗Hhcy大鼠可以降低血同型半胱氨酸水平,同时降低主动脉内皮细胞和外周血PBMC炎症趋化因子MCP-1的表达与释放.     

高同型半胱氨酸血症对平滑肌细胞的氧化损伤

目的观察同型半胱氨酸血症对兔颈动脉平滑肌细胞氧化损伤,进而从细胞及分子水平探讨同型半胱氨酸血症对活体动物平滑肌细胞的氧化损伤的发病机制。方法以高蛋氨酸饮食饲喂新西兰大白兔,3个月后分离颈动脉,分离得到的兔颈动脉平滑肌用胰蛋白酶消化处理,取消化后的细胞进行培养。采用黄嘌呤氧化比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活力。用可见光比色法测定细胞内过氧化氢(catalase,CAT)的活力。结果在高蛋氨酸饮食作用下,兔颈动脉平滑肌细胞内CAT、SOD的含量明显增高,与2%的蛋氨酸低饲喂浓度及对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论同型半胱氨酸血症可加速动脉血管壁平滑肌细胞的增生,并可能在一定剂量范围内造成动脉血管壁平滑肌细胞的氧化损伤加重,使机体动脉粥样硬化的进程加速。     

高同型半胱氨酸血症对大鼠脑内NMDA受体亚单位蛋白表达的影响

目的：分析高同型半胱氨酸血症对大鼠脑内NMDA受体亚单位蛋白表达的影响。方法研究时间2015年7月—2016年4月,将36只SD大鼠随机分为模型组(皮下注射用生理盐水配成的蛋氨酸溶液)和对照组(相应体积的生理盐水),检测不同时间点大鼠血浆同型半胱氨酸含量及脑内NMDA受体亚单位(NR1、NR2A、NR2B)的蛋白含量。结果模型组中第3小组大鼠的Hcy、脑内NMDA受体NR1、NR2A、NR2B分别为(21.46±1.37)、(0.99±0.13)、(0.95±0.18)、(1.47±0.25),均高于第2小组和第1小组(P<0.05),第1小组大鼠上述指标含量均为最低,分别为(10.14±1.13)、(0.74±0.11)、(0.70±0.23)、(0.68±0.13)。模型组3个小组大鼠的脑内NMDA受体NR1、NR2A、NR2B含量均高于对照组中对应小组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高同型半胱氨酸血症会导致大鼠脑内NMDA受体亚单位的蛋白表达上升,加重大鼠脑神经损伤。     

病毒巨噬细胞炎性蛋白与趋化因子受体结合的效应分析

目的: 探讨人疱疹病毒8K6基因编码的产物病毒巨噬细胞炎性蛋白(viral macrophage inflamm atory protein,vMIP)是否具有结合趋化因子受体以及趋化作用。方法: 受体配体交联试验检测vMIP与受体结合能力。趋化实验及细胞内钙流检测判断vMIP的生物学活性。结果: vMIP可与外周血单个核细胞(PBMCs)膜上的趋化因子受体结合,抑制hMIP-1α对PBMC的趋化能力,EC₅₀为3.39 ng/ml。其本身只有较弱的趋化能力。钙流实验证实vM IP轻度升高胞内钙离子浓度,但可明显抑制hMIP-1α所引起的胞内钙离子高峰。结论: 重组vMIP与hMIP-1α受体(CCR5)结合后,可有效的阻断人源性趋化因子的结合与信号传导,但其本身对细胞未有明显的激活作用,因此可作为趋化因子受体的天然阻断剂,可用于免疫移植中的排斥反应或HIV-1病毒感染等。     

高同型半胱氨酸血症致动脉粥样硬化机制的研究进展

近年来,大量的实验研究、临床资料和流行病学调查均表明,作为心脑血管疾病重要且独立的危险因素,血浆同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）升高引起的高同型半胱氨酸血症（hyperhomocysteinemia,HHcy）可以促进动脉粥样硬化及血栓的形成。     

同型半胱氨酸对人单核细胞株THP-1表达趋化因子受体CCR1 mRNA的影响

目的　探讨同型半胱氨酸对人单核细胞株THP 1表达趋化因子受体CCR1mRNA的影响。方法　在THP 1单核细胞培养基中加入不同浓度的同型半胱氨酸 ,孵育 8h ;或加入终浓度 0 1mmol/L的同型半胱氨酸 ,分别孵育 4、8、 16h ,再分别用逆转录多聚酶链反应和原位杂交检测各组THP 1单核细胞CCR1mRNA。结果　对照组THP 1单核细胞表达较低水平的CCR1mRNA ,加同型半胱氨酸后各实验组CCR1mRNA表达随浓度和时间的增加而增强 ,且PCR产物经测序证实。原位杂交显示 ,THP 1单核细胞表达CCR1mRNA为胞质内紫蓝色颗粒。图像分析显示 ,经同型半胱氨酸处理后 ,各组细胞胞质内CCR1mRNA表达明显增加 ,并呈剂量和时间依赖性。方差分析表明 ,组间差异极为显著(P <0 0 1)。结论　同型半胱氨酸能诱导THP 1单核细胞表达CCR1mRNA ,且与同型半胱氨酸的浓度和时间呈正相关 ,并可能通过促进招募单核细胞进入内皮下间隙 ,在动脉粥样硬化发病机制中起重要作用     

大鼠高同型半胱氨酸血症对抑郁的影响

目的探讨高同型半胱氨酸血症（HHcy）对大鼠抑郁和动脉粥样硬化（As）的影响。方法20只Wistar雄性大鼠随机分为HHcy模型组及正常对照组,每组10只,模型组连续给予高L-蛋氨酸灌胃建立HHcy模型,在4、6、8周检测血浆总同型半胱氨酸（THcy）和“强迫游泳不动法”的动物不动时间以反映HHcy引发抑郁的情况,并通过主动脉内膜脂质斑块检测观察第8周AS情况。结果在给药的第6周,模型组动物血浆THcy（15．36±3．6gmol／L）和“强迫游泳”不动时间（193．8±27．7S）、第8周,腹主动脉内膜脂质斑块百分率（7．45％±3．99％）较正常组（分别为11．38±1．78μmol／L、113．1±27．39S和4．05％±2．22％）有显著的增高（P〈0．01或P〈0．05）。结论高同型半胱氨酸血症模型大鼠血浆THcy升高,“强迫游泳”不动时间延长,内膜脂质斑块百分率增大,表现出明显的抑郁症状和AS样改变。     

低剂量叶酸对高同型半胱氨酸血症患者血浆同型半胱氨酸及趋化因子水平的影响

目的观察低剂量叶酸治疗对高同型半胱氨酸血症(HHcy)患者血浆同型半胱氨酸及趋化因子水平的影响。方法给予40名HHcy患者叶酸0.8mg/d治疗6个月,在治疗前、后分别采集空腹静脉血,检测血浆Hcy、叶酸、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-8(IL-8)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。结果叶酸治疗6个月后,HHcy患者的血浆Hcy水平为(25.8±12.0)μmol/L,明显低于治疗前的(57.1±18.0)μmol/L(P<0.05)。患者的MCP-1、IL-8、SOD和MDA水平则在治疗前、后差异均无显著性。结论低剂量叶酸治疗可降低HHcy患者的Hcy水平,但对趋化因子的水平无影响。     

天然及氧化型低密度和极低密度脂蛋白诱导培养的内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1α和血管细胞粘附分子1

为探讨天然及氧化修饰脂蛋白对培养的内皮细胞 MIP- 1α及 VCAM- 1m RNA表达的作用 ,取正常人新鲜血液 ,用超速梯度离心法分离出 L DL 和 VL DL 后 ,加 Cu2 使之氧化 ,成为 OX- L DL 和 OX- VL DL。培养人脐静脉内皮细胞 (EC) ,待其汇合后分别加入 L DL、OX- L DL 、VL DL、OX- VL DL,使其终浓度为 2 5 μg/ ml,对照组不加脂蛋白。培养 2 4h后 ,收集 EC,用异硫氰酸胍法提取其总 RNA,用地高辛标记的 MIP- 1α和 VCAM- 1c DNA探针进行斑点杂交。结果显示 ,培养的 EC能表达 MIP- 1α和 VCAM- 1m RNA,当其暴露于 L DL 和 VL DL 后 ,其 MIP- 1α和 VCAM- 1m RNA表达轻度增加 ,而当 EC暴露于 OX- L DL 和 OX- VL DL 后 ,其 MIP- 1α m RNA表达水平明显增高 ,分别为对照组的 3.2倍和 2 .5倍 ;VCAM- 1m RNA的表达分别为对照组的 2 .6倍和 2 .17倍。提示脂蛋白 ,特别是氧化修饰的脂蛋白 ,可促进 EC表达 MIP- 1α和 VCAM- 1m RNA,在动脉内膜单核细胞的募集中起重要作用     

高同型半胱氨酸血症对球囊损伤大鼠颈动脉核转录因子和单核细胞趋化因子蛋白-1表达的影响

目的 观察高蛋氨酸饮食诱导的高同型半胱氨酸(Hcy)血症对大鼠颈动脉球囊损伤后血管组织核转录因子(NF-κBP65)蛋白及单核细胞趋化因子蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨血管成形术后Hcy对新内膜增生的可能机制.方法 采用免疫组织化学方法分别检测血管组织NF-κB P65蛋白和MCP-1蛋白表达.结果 低及高蛋氨酸组血管组织NF-κB P65蛋白和MCP-1蛋白的表达[分别为(12.32±2.37)μmol/L,(21.33±4.32)μmol/L和(26.32±3.34)panol/L,(33.35±3.87)μmol/L]均高于对照组[(5.17±1.49)μmoL/L,(15.78±2.13)μmol/L](P<0.05,P<0.01),高蛋氨酸组血管组织NF-κB P65蛋白和MCP-1蛋白表达与低蛋氨酸组比较也有明显差异(P<0.05);而且血管组织MCP-1蛋白表达与NF-κB P65蛋白的表达呈显著正相关(r=0.643,P<0.01).结论 高Hcy血症能使球囊损伤后颈动脉组织NF-κB P65、MCP-1蛋白过度表达;推测同型半胱氨酸有可能通过激活NF-κB通路上调血管内皮损伤后动脉组织MCP-1蛋白的表达,这可能是其促进血管成形术后新内膜过度增生的机制之一.     

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞死亡受体蛋白表达的影响

目的 通过对同型半胱氨酸诱导人血管平滑肌细胞凋亡过程中死亡受体蛋白表达的研究,探索血管平滑肌细胞在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化中的分子机制.方法 免疫细胞化学Envision二步法和Western blot观察血管平滑肌细胞死亡受体Fas和重组人肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)蛋白的表达.结果 免疫细胞化学结果Fas、TNFR1在胞膜和胞浆中均可见到棕褐色颗粒状物,同型半胱氨酸使血管平滑肌细胞Fas、TNFR1蛋白的表达上调,呈浓度和时间依赖性(P<0.05);Western blot方法与上述结果相符.结论 同型半胱氨酸可诱导人血管平滑肌细胞死亡受体Fas、TNFR1表达增加,Fas、TNFR1介导的信号途径可能是同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞发生动脉粥样硬化的机制之一.     

腹腔镜联合胆道镜治疗急性胆源性胰腺炎伴胆囊结石疗效及对患者血清巨噬细胞炎性蛋白-1α、巨噬细胞炎性蛋白-1β和单核细胞趋化因子蛋白-1水平的影响

目的:观察腹腔镜联合胆道镜治疗急性胆源性胰腺炎伴胆囊结石疗效及对患者血清巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)及单核细胞趋化因子蛋白-1(MCP-1)水平的影响.方法:选取急性胆源性胰腺炎伴胆囊结石患者90例,根据治疗方法不同分为传统组(38例)和双镜组(52例).传统组给予开腹...     

2型糖尿病患者动脉粥样硬化动脉内膜巨噬细胞炎性蛋白-1α的免疫组化研究

目的探讨巨噬细胞炎性蛋白-1α(macrophageinflammatoryprotein-1α,MIP-1α)在2型糖尿病患者和非糖尿病患者动脉粥样硬化动脉内膜中的表达与分布。方法采用免疫组织化学方法分别检测13例2型糖尿病患者动脉粥样硬化动脉内膜、15例非糖尿病患者动脉粥样硬化动脉内膜及7例健康人正常动脉内膜MIP-1α的表达和分布,并利用计算机图像分析仪对免疫组化染色切片进行灰度扫描,作相对定量分析。结果正常动脉内膜未见MIP-1α阳性表达,平均灰度值为234.27±8.04。MIP-1α在非糖尿病患者不同期的动脉粥样硬化动脉内膜中呈不同程度的表达:MIP-1α在脂纹期动脉内膜平均灰度值为168.40±7.69,主要分布在内皮细胞及泡沫细胞中;MIP-1α在纤维斑块期动脉内膜平均灰度值为173..67±6.56,主要分布在泡沫细胞,而内皮细胞仅有弱的MIP-1α染色。在糖尿病患者脂纹期及纤维斑块期动脉内膜中,内皮细胞及泡沫细胞中皆有较强的MIP-1α染色,脂纹期动脉内膜MIP-1α平均灰度值为132.73±6.01,纤维斑块期动脉内膜MIP-1α平均灰度值为138.68±9.41。结论正常动脉内膜未见MIP-1α阳性表达。MIP-1α在非糖尿病患者脂纹期动脉内膜中的表达明显增多,在纤维斑块期动脉内膜中的表达逐渐减弱。MIP-1α在糖尿病患者脂纹期动脉内膜中的表达显著增高,与非糖尿病患者脂纹期动脉内膜中的表达相比差异有显著性(P<0.05);在糖尿病患者纤维斑块期动脉内膜中仍有较强的表达,与非糖尿病患者纤维斑块期动脉内膜中的表达相比差异有显著性(P<0.05)。     

同型半胱氨酸对人单核细胞株THP—1表达趋化因子受体CCRl mRNA的影响

目的 探讨同型半胱氨酸对人单核细胞株THP-1表达趋化因子受体CCR1 mRNA的影响。方法 在THP-1单核细胞培养基中加入不同浓度的同型半胱氨酸，孵育8h；或加入终浓度0．1mmol／L的同型半肮氨酸，分别孵育4、8、16h，再分别用逆转录多聚酶链反应和原位杂交检测各组THP-1单核细胞CCRl mRNA。结果 对照组THP-1单核细胞表达较低水平的CCR1 mRNA，加同型半胱氨酸后备实验组CCRl mRNA表达随浓度和时间的增加而增强，且PCR产物经测序证实。原位杂交显示，THP-1单核细胞表达CCR1 mRNA为胞质内紫蓝色颗粒。图像分析显示，经同型半胱氨酸处理后，各组细胞胞质内CCRl mRNA表达明显增加，并呈剂量和时间依赖性。方差分析表明，组间差异极为显著(P＜0．01)。结论 同型半胱氨酸能诱导THP-1单核细胞表达CCRl mRNA，且与同型半胱氨酸的浓度和时间呈正相关，并可能通过促进招募单核细胞进入内皮下间隙，在动脉粥样硬化发病机制中起重要作用。     

高同型半胱氨酸血症中肝脏的脂肪变性

目的 研究高同型半胱氨酸血症中肝脏组织脂肪变性,探讨同型半胱氨酸导致脂肪变性的机理.方法 40只小鼠随机分为空腹正常对照组、空腹高同型半胱氨酸血症组、进食正常对照组和进食高同型半胱氨酸血症组,每组10只;空腹高同型半胱氨酸血症组和进食高同型半胱氨酸血症组用含1.5％的蛋氨酸饮水3个月制造高同型半胱氨酸模型.3个月后,各组取血分别测定同型半胱氨酸、血糖、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇,计算胰岛素抵抗指数;利用HE染色方法检测肝脏组织的形态学变化.结果 与空腹正常对照组比较,空腹高同型半胱氨酸血症组葡萄糖、胰岛素和胰岛素抵抗指数增加(P＜0.05);甘油三酯和胆固醇含量上升(P＜0.05).与进食正常对照组比较,进食高同型半胱氨酸血症组葡萄糖和胰岛素增加(P＜0.05);甘油三酯和胆固醇含量上升(P＜0.05).在空腹和进食高同型半胱氨酸血症组中,肝脏组织HE染色出现小叶肝细胞排列紊乱,脂肪细胞数目增多,呈现脂肪变性的改变.结论 同型半胱氨酸诱导胰岛素抵抗,影响肝脏的脂类代谢,可能是HHcy导致脂肪变性、形成脂肪肝的因素之一.     

葡萄糖浓度对血管内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1αmRNA及蛋白的影响

目的:探讨葡萄糖浓度对人脐静脉内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1αt)mRNA及蛋白的影响.方法:将培养的人脐静脉内皮细胞用不同浓度(5.6,11.1,16.7,22.0,28.0 mmol/L)的葡萄糖孵育10 d及同一浓度(22.0 mmol/L)葡萄糖孵育0,5,10,15 d.采用原位杂交方法及Western Blot检测MIP-1αmRNA及蛋白的表达水平.结果:在一定浓度范围内(5.6～28.0 mmol/L),随着葡萄糖浓度增加,内皮细胞内MIP-1 α表达明显增加,22.0 mmol/L时表达最高,28.0 mmol/L时表达稍降低;各组内皮细胞内MIP-1α mRNA表达的平均积分光密度值分别为12.54±2.78,17.69±1.38,23.35±2.13,32.23±2.25及28.46±2.46(P＜0.05);各组内皮细胞内MIP-1α蛋白的表达量分别为5.6 mmol/L葡萄糖组的1.42倍、1.87倍、2.58倍及2.12倍(P＜0.05).同一浓度葡萄糖(22.0 mmol/L)孵育后,随着作用时间延长,内皮细胞内MIP-1α表达逐渐增加,至15 d时表达最高;各组内皮细胞内MIP-1α mRNA表达的平均积分光密度值分别为10.43±2.13,18.67±1.46,32.23±2.25及38.28±3.14(P＜0.05);各组内皮细胞内MIP-1α蛋白的表达量分别0 d组的1.75倍、3.06倍及3.64倍(P＜0.05).结论:葡萄糖浓度可促进内皮细胞MIP-1α mRNA及蛋白的表达,这种作用与葡萄糖的浓度及作用时间呈正相关.     

桃红四物汤对高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉死亡受体途径凋亡的干预作用

目的：观察桃红四物汤对高同型半胱氨酸大鼠主动脉死亡受体途径凋亡的影响。方法：40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、桃红组、叶酸组,每组10只,正常组给予普通饲料,模型组、桃红组、叶酸组给予高蛋氨酸饮食（普通饲料添加2%蛋氨酸）喂养,桃红组采用桃红四物汤水煎液,按4.59 g生药/（kg.d）灌胃;叶酸组采用叶酸混悬液,按1.35 mg/（kg.d）灌胃;模型组及正常组给双蒸水2 mL/（只.d）灌胃。12周后,Elisa法检测血清hcy、TNF-α、MCP-1浓度,免疫组化检测主动脉Cleaved Caspase3表达,RT-PCR法检测主动脉TNF-α、Fas mRNA表达。免疫印迹法检测主动脉TNF-α的表达。结果：12周后,模型组大鼠血Hcy显著升高,血清TNF-α浓度升高,血清MCP-1浓度有升高趋势;主动脉内皮细胞连续性受损,受损部位下的血管平滑肌细胞Cleaved Caspase3呈片状黄褐色阳性染色。主动脉全层行RT-PCR示TNF-α、Fas mRNA表达上调,western blot示TNF-α表达上调。相对于模型组,桃红组和叶酸组大鼠血清TNF-α浓度降低,主动脉未发现片状Cleaved Caspase3阳性染色,TNF-αmRNA表达明显下调,Fas mRNA表达有下调趋势,TNF-α蛋白表达下调。但叶酸组伴有血同型半胱氨酸浓度的下降,而桃红组没有降低血同型半胱氨酸浓度的作用。结论：高同型半胱氨酸血症诱导SD大鼠主动脉死亡受体途径凋亡,桃红四物汤可降低血清TNF-α,并在基因和蛋白水平下调主动脉TNF-α表达。