NS398通过环氧化酶-2依赖途径诱导肾癌细胞786-O凋亡

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂NS398对肾癌细胞786-O增殖和凋亡的影响及其机制。方法同浓度NS398作用体外培养786-O细胞后,采用噻唑蓝(MTT)法检测24、48、72、96h后肾癌细胞786-O的增殖活性。30、180μmol/L的NS398作用786-O细胞72h后,RT-PCR法检测COX-2 mRNA表达;免疫细胞化学检测COX-2蛋白表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测前列腺素E2(PGE2)释放水平;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果NS398可以抑制786-O细胞的增殖,呈时间和剂量依赖型。RT-PCR法和免疫细胞化学检测显示NS398作用后能降低COX-2 mRNA和蛋白表达。ELISA检测显示NS398作用后PGE2释放水平呈下调趋势;流式细胞仪检测表明,30、180μmol/L NS398处理组凋亡率分别为(14.3±1.4)%、(31.5±2.1)%,与对照组凋亡率(2.1±0.4)%比较,凋亡率显著上升(P<0.05)。结论NS398可能通过COX-2依赖性途径抑制肾癌细胞增殖和诱导其凋亡。     

COX-2抑制剂NS398通过抑制前列腺素E2诱导肾癌细胞的凋亡

目的:揭示环氧合酶2(COX-2)在肾癌细胞中的表达情况,通过COX-2抑制剂NS398作用肾癌细胞探讨非甾体抗炎药(NSAID)对肾癌细胞增殖作用的影响及其可能的作用机制。方法:采用标准的细胞培养方法对人肾癌786-0细胞进行培养,将NS398分别以25,50,100,150及200μmol/L的剂量加入细胞中作用24及48h后,MTT法检测NS398对肾癌细胞增殖的影响;作用24h后,流式细胞仪测定细胞凋亡的情况,EIA法测定细胞中前列腺素E(2PGE2)含量的变化,Western blotting测定COX-2蛋白表达的情况。结果:NS398对肾癌786-0细胞具有较强的抑制作用,且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增大,呈浓度依赖关系(P<0.05);NS398作用肾癌786-0细胞24h后,在细胞周期G0/G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,随着浓度升高,凋亡峰亦越来越增高(P<0.05);NS398可抑制PGE2释放,并且这种抑制作用呈剂量效应,与对照组相比有统计学意义(P<0.05);不同浓度NS398作用下的肾癌786-0细胞中,COX-2的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降。结论:NS398通过诱导凋亡来抑制肾癌786-0细胞的增殖;NS398诱导肾癌786-0细胞的凋亡作用机制可能是通过抑制COX-2的表达,降低肾癌786-0细胞PGE2的合成,减少前列腺素对肿瘤细胞增殖的刺激作用来抑制增殖和促进凋亡的。     

姜黄素和环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞时效的双向调节体外实验研究

【目的】观察抗氧化剂姜黄素（Cur）与选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398两种药物同时联用或分时联用对大鼠肝星状细胞（HSC）生长的影响。【方法】体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6，接种96孔板，分为5组。I：单独姜黄素系列浓度组（0、20、30、40μmol／L）；单独NS-398系列浓度组（0，20,40，80μmol／L）；Ⅱ：单独NS-398系列浓度组（ABS1）和NS-398系列浓度组＋姜黄素20μmol／L（,4BS2）对大鼠HSC增殖的影响。Ⅲ：两种药物同时加药组；Ⅳ：两种药物先后6h加药组：先加姜黄素20μmol／L作用HSC6h后加NS-398系列浓度组（0、20、40、80wmol／L）；先加NS-398系碉浓度（0、20、40、80Vunol／L）作用HSC6h后加姜黄素20μmol／L组，V：析因分析组。各组设不加药物的细胞对照组，与HSC共同培养，以MTT法检测姜黄素、NS-398单用或同时、分时联用对HSC生长的影响。LDH法检测各组对HSC的细胞毒性舴用。[结果]单独NS-398系列浓度组和单独姜黄素系列浓度组有抑制HSC的作用，但姜黄素的作用比NS-398强；同时加两药组比分时加药组有明显不同，先加NS-398作用HSC6h组比先加姜黄素作用HSC6h组的抑制率明显降低。【结论】时间因素导致两药联用是双向调节，同时加药或先加姜黄素作用HSC6h组后加NS一-98时呈正调节作用，抑制率升高，而先加黼98作用ItSC6h后加姜黄素呈负调节作用，抑制率降低。NS-398对HSC作用一定时间后有抑制姜黄素对HSC起生物效应的作用。     

NS398对白血病细胞K562凋亡的时间和剂量效应机制

目的 探讨非甾体药物选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的效应关系和机制.方法 采用噻唑蓝还原法(MTT法)检测NS398对K562细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)和单细胞凝胶电泳技术(comet assay)测定K562细胞的凋亡,免疫印迹实验检测相关蛋白的表达.结果 NS398抑制K562细胞增殖存在时间和剂量效应关系,各浓度间差异有显著性(P<0.05).NS398激活caspase-3和caspase-9,促进P53蛋白的积聚、Bax蛋白表达的上调和Bcl-xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使K562细胞凋亡.结论 NS398可抑制K562细胞增殖,其诱导细胞凋亡的途径可能经过P53介导Bax的Caspase-3、Caspase-9的激活,揭示COX-2抑制剂可能存在着一个影响细胞翻译的新机制.     

环氧化酶-2与胰腺癌

本文综述了环氧化酶-2与胰腺癌生物学行为、胰腺癌的发生、细胞增殖、细胞凋亡、血管生成,侵袭和转移之间关系的研究进展,及环氧化酶-2抑制剂在胰腺癌治疗的应用前景,旨在为相关研究提供参考。     

NS-398对胰腺癌细胞PCNA-1的增殖及凋亡的影响

目的 探讨环氧合酶-α抑制剂NS-398对人胰腺癌细胞株PCNA-1的增殖抑制作用.方法 采用MTT法、流式细胞术检测NS-398对胰腺癌细胞株PCNA-1细胞增殖抑制、细胞周期及对Bcl-2蛋白表达的影响.结果 NS-398抑制胰腺癌细胞株PCNA-1的增殖活性,呈剂量依赖效应关系; NS-398可影响PCNA-1细...     

环氧合酶-2在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

膀胱移行细胞癌是泌尿系统疾病的常见恶性肿瘤,其发病基因可能与癌基因、抑癌基因失调有关。近年研究发现多种恶性肿瘤环氧合酶-2（COX-2）的表达上调,表明COX-2与恶性肿瘤的发病关系密切。本试验通过免疫组化检测COX-2在膀胱移行细胞癌的表达,以探讨COX-2与膀胱移行细胞癌发病的关系。     

环氧合酶-2：治疗心肌缺血性损伤的新靶点

环氧合酶(COX)是催化花生四烯酸合成前列腺素(PGs)的关键酶.目前认为,COX存在3种亚型,即COX-1、COX-2、COX-3[1].其中,COX-2是一种诱导型酶,在正常状态下几乎不表达,而在炎症等病理状态下表达增多.     

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用

目的:探讨NS-398对人食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用。方法:采用3H-TdR掺入法检测不同浓度(0、10、20、50、100μmol/L)和作用24、48、72、96h的NS-398对细胞的增殖抑制效应;采用流式细胞术(FCM)及DNA片段分析法检测NS-398诱导的细胞凋亡情况。结果:EC9706经不同浓度的NS-398处理后,实验组3H-TdR掺入量明显减少,具有时间和剂量依赖关系,与对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.001)。FCM检测发现实验组在G1期前出现亚倍体凋亡峰,细胞凋亡率达(45.23±1.08)%,并出现典型的细胞凋亡梯带;而对照组无凋亡峰出现,细胞凋亡率为(2.14±0.28)%,两组比较有显著性差异(P<0.001)。结论:NS398对食管癌细胞株EC9706细胞具有增殖抑制作用和诱导细胞凋亡作用。     

环氧合酶-2与脑缺血

研究表明缺血性脑损伤病理进展经历一段较长的时间 ,数小时到数日不等 ,在缺血中心区 ,血流减少最严重 ,能量衰竭 ,随后迅速发生细胞坏死 ,然而 ,在缺血周围区域 ,神经元细胞存活时间相对较长 ,有的可达数日。迄今为止 ,大多数研究集中在脑缺血的急性期 ,对于梗塞周围区域 (也称为缺血半暗带 )的病理进展及影响因子的研究较少 ,这些因子很重要 ,可能为缺血性脑损伤后期的治疗提供新的思路。在缺血性脑损伤迟发性进展过程中 ,有多种因素起重要作用 ,其中之一是缺血后炎症反应。脑缺血后 ,局部细胞因子、化学因子和粘附因子的表达增加 ,诱导中…     

下调CD147通过Bcl-2途径诱导宫颈癌细胞SiHa细胞凋亡的研究

目的 研究下调CD147表达后宫颈癌SiHa细胞凋亡变化.方法 设计、合成两对CD147编码基因的反向重复序列,运用瞬间转染方法抑制SiHa中CD147表达,运用RT-PCR、Western blotting方法检测干扰后CD147、Bcl-2、Bim及caspase-3表达改变,流式细胞术检测干扰后肿瘤细胞的凋亡情况.结果 SiRNA sequence 1、2均有效抑制CD147基因表达(P<0.05),伴随着Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),干扰后caspase-3 mRNA、Bim水平升高(P<0.05),活性caspase-3蛋白及Bim水平增高(P<0.05),肿瘤细胞凋亡增加,以细胞早期凋亡改变最为明显(P<0.05).结论 沉默CD147基因表达可部分通过Bcl-2途径诱导SiHa细胞凋亡.     

肺癌组织Caspase-3基因表达与细胞凋亡的关系

目的 研究caspase-3在肺癌中的表达并观察其与细胞凋亡的关系。方法 免疫组织化学法检测caspase-3在肺癌组织中的表达,原位未端标记法9terminal deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labelling,TUNEL）检测细胞凋亡。结果 肺癌细胞caspase-3表达呈现胞质染色,62例肺癌中的32例（51.6%）不同程度的表达caspase-3,检测肺癌中的细胞凋亡发现,38例肺癌表达高TUNEL阳性率（61.2%）,24例表达低TUNEL阳性率,高TUNEL阳性率与肺癌的淋巴结转移有关（P＝0.007）,并联系着较差的预后,caspase-3的表达与肿瘤的分化（P＝0.012）和淋巴结转移（P＝0.005）有关,与患的年龄、性别、分期及组织学类型无关,肺癌组织中caspase-3的表达与肿瘤细胞的凋亡无明显关系,Kaplan-meier生存曲线显示caspase-3阳性表达联系较好的预后（P＜0.01）。结论 caspase-3表达有重要的预后意义,但与肺癌细胞凋亡的关系不很密切。     

塞来昔布对喉癌Hep-2细胞COX-2和Caspase-3表达的影响

目的:探讨塞来昔布对喉癌细胞株Hep-2生长抑制及对环氧化酶-2(COX-2)和Caspase-3变化的影响。方法:将不同浓度塞来昔布作用于体外培养的人喉癌细胞株Hep-2,MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测COX-2表达,分光光度法检测Caspase-3活性。结果:塞来昔布呈剂量依赖性显著抑制Hep-2细胞生长,阻滞细胞G0/G1期转化,且可明显降低COX-2蛋白水平,增加Caspase-3活性。结论:塞来昔布能抑制喉癌细胞的生长,其机制可能与下调COX-2表达、增强Caspase-3活性有关。     

芸香苷诱导Caspase-3在白血病细胞凋亡时的表达

【目的】研究芸香苷诱导白血病K562细胞凋亡过程中Caspase-3基因的表达。【方法】体外培养白血病K562细胞,锥虫蓝拒染法观察芸香苷对K562细胞的生长抑制作用。Hoechst33342/PI双荧光染色后,观察细胞核变化。TRIzol试剂提取芸香苷组及对照组细胞RNA,核酸定量仪检测纯度,RT-PCR扩增,紫外透射检测扩增产物,扩增产物测序,观察Caspase-3 mRNA的表达。【结果】芸香苷浓度为2×10-5、4×10-5、8×10-5mol/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;RT-PCR产物经过序列测定证实经浓度为2×10-5mol/L、4×10-5mol/L的芸香苷处理后细胞诱导Caspase-3基因表达升高。【结论】芸香苷诱导白血病细胞发生凋亡,Caspase-3基因表达是其作用机制之一。     

肾癌细胞中环氧合酶-2的高表达及NS398对肾癌细胞生长抑制和凋亡作用机制的研究(英文)

目的揭示COX-2选择性抑制剂NS398对肾癌细胞的增殖和凋亡作用的影响，及其可能的作用机制。方法采用标准的细胞培养方法对人肾癌786—0细胞进行培养，将NS398分别以不同浓度剂量加入细胞中作用24及48h后，应用流式细胞仪检测凋亡，应用RT-PCK和Western blotting检测COX-2和Bcl-2表达的改变。结果NS398对肾癌786-0细胞具有较强的抑制作用，且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增大，呈浓度依赖关系（P〈0．05）；RT—PCR和Western Blot结果表明，不同浓度NS398作用下的肾癌786-0细胞中，COX-2和Bcl-2的表达明显减弱，且呈剂量梯度下降。NS398作用于肾癌786-0细胞24h后。在细胞周期G0／G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰，随着浓度的升高，凋亡峰亦越来越高（P〈0．05）。结论肾癌786—0细胞中存在着COX-2的过表达；选择性COX-2抑制剂NS398通过诱导凋亡来抑制肾癌786—0细胞的增殖，其机制可能是通过抑制COX-2的表达及下调Bcl-2来完成的。     

过氧化氢诱导血管内皮细胞凋亡与Caspase-3表达的实验研究

目的:探讨过氧化氢对血管内皮细胞促凋亡作用及发生机制。方法:用0.1mmol/L、0.5mmol/L与1.0mmol/L等不同浓度的过氧化氢分别作用于对数生长期的内皮细胞,采用PI染色与Annexin V/PI染色后,进行流式细胞术检测内皮细胞的死亡率与凋亡率,并一步检测采用流式细胞术Caspase-3的水平表达。结果:过氧化氢0.1mmol/L、0.5mmol/L与1.0mmol/L组内皮细胞,凋亡率分别为18.6%±5.8%、32.8%±6.2%与42.1%±10.1%,而PI阳性率则为10.9%±4.1%、26.6%±5.3%与28.3%±4.6%,而Caspase-3的阳性表达率则为10.2%±2.1%、16.3%±3.2%和16.9%±3.9%。结论:过氧化氢可引起细胞凋亡,其中0.5mmol/L是诱导适宜浓度,且凋亡发生机制与Caspase-3激活相关。     

凝血酶敏感蛋白-1对人肝癌细胞株HCCLM3凋亡的作用

目的 研究凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)对人肝癌细胞株HCCLM3凋亡的体外诱导作用及机制.方法 采用流式细胞术检测TSP-1及其受体CD36、CD47诱导HCCLM3的细胞凋亡率,应用电镜分析作用后的形态变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析作用后HCCLM3细胞Caspase-3 mRNA表达的变化.结果 TSP-1组凋亡率[(12.44±0.72)%]显著高于对照组[(4.31±0.29)%]和CD47阻断组[(4.99±0.12)%],P<0.01.CD36阻断组[(9.99±0.57)%]高于对照组或CD47阻断组,低于TSP-1组(P<0.01).电镜观察:对照组和C1D47阻断组细胞生长旺盛.TSP-1组和CD36阻断组细胞凋亡率增加,细胞呈现各种凋亡的表现.TSP-1组Caspase-3 mRNA的表达TSP-1组(0.652±0.024)和CD36阻断组(0.615±0.020)显著高于对照组(0.398±0.033)和CD47阻断组(0.432±0.019),P<0.01.结论 TSP-1可诱导人肝癌细胞株HCCLM3的凋亡,TSP-1与受体CD47结合后上调Caspase-3的表达可能是作用途径之一. Abstract： Objective To study the effect and mechanism of thrombospondin- 1 on the apoptosis of human hepatocarcinoma cell HCCLM3. Methods Detecting the role of TSP-1, CD36, CD47 on apoptosis rate of HCCLM3 by the flow cytometry and the change of cell ultractructure by transmission electron microscope,then detecting the influence of TSP-1, CD36, CD47 on the expression of Caspase-3 in HCCLM3. Results The apoptosis rate was respectively significantly higher in TSP-1 group [(12. 44 ±0. 72)%] than that in control group [(4. 31 ±0. 29)%] or CD47-blocked group[(4. 99 ±0. 12)%],P < 0. 01. The apoptosis rate was was respectively significantly higher in CD36 -blocked group [(9. 99 ±0. 57)%]than that in control group and CD47 -blocked group,was lower than in the TSP-1 group(P <0. 01). The morphological changes were: grow vigorously and many divided nuleus in control group and CD47- blocked group. Apoptosis cell increased in TSP- 1 group and CD36 -blocked group: less cellular module in cytoplasm, many nucleus pieces and concentrate. The expression of Caspase-3 were higher in TSP-1 group (0. 652 ± 0. 024) and CD36-blocked group (0. 615 ± 0. 020) than that in control group (0. 398 ±0. 033)and CD47-blocked group (0. 432 ± 0. 019) (P < 0. 01). Conclusions TSP-1 can induce apoptosis of HCCLM3 cell line through combined with CD47 which can increase the expression Caspase -3.     

大肠癌COX-2、bcl-2和caspase-3基因的表达意义

目的探讨COX．2、bcl-2和caspase-3基因在大肠癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化ABC法检测28例大肠癌和10例正常黏膜中COX-2、bcl-2和caspase-3表达,应用TUNEL法检测细胞凋亡。结果在大肠癌及正常粘膜中COX-2的阳性表达分别为82、1％和0．0％,bcl-2的阳性表达分别为75．0％和20．0％,两者在大肠癌组织中的表达率均显著高于正常黏膜（P〈0．01）。caspase-3的阳性表达分别为46．4％和90．0％,在大肠癌组织中的表达率显著低于正常黏膜（P〈0．01）。COX-2、bcl-2和caspase-3均与大肠癌的临床病理特征无相关性（P〉0．05）。COX-2及bcl-2表达与凋亡指数显著负相关（分别为r=-0、563,P〈0．05;r=-0．578,P〈0．01）。caspase-3与凋亡指数呈显著正相关（r=0、714,P〈0．01）。大肠癌高、中、低分化各组间及不同Dukes分期（A、B期和C、D期）各相间凋亡指数无统计学意义（P〉0．05）。结论在大肠癌中COX-2、bcl-2表达增强,细胞凋亡受抑制而caspase-3表达下降,其促凋亡作用减弱,它们参与了肿瘤发生发展的共同通道,在大肠癌的发生和发展过程中起到重要作用。     

氯化镧经Caspase-3途径诱导子宫颈癌细胞凋亡

目的探讨氯化镧体外诱导人子宫颈癌细胞凋亡的作用和分子机制,为探索稀土化合物的药用价值提供理论依据。方法采用形态学观察、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定氯化镧对HeLa细胞的抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率,蛋白质印迹技术分析Caspase-3蛋白表达的改变,并以分光光度法测定其活性。结果形态学分析和MTT法显示氯化镧能够抑制HeLa细胞生长并诱导其凋亡(P<0.05),其作用呈明显的量效关系。细胞周期实验结果说明,氯化镧可令细胞大多阻滞于G1期,并呈一定的浓度依赖性;氯化镧诱导细胞凋亡亦有剂量依赖性,在5μmol/L剂量下,细胞开始凋亡,随着药物浓度的增加,凋亡率不断增高,各浓度与对照组相比差异都具有统计学意义(P<0.01)。蛋白质印迹实验显示氯化镧亦可上调活化的Caspase-3蛋白表达水平及活性且呈浓度依赖性。结论一定浓度的氯化镧可抑制人子宫颈癌HeLa细胞的增殖并通过激活Caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。