鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中上调L-plastin表达的转录因子

【目的】鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的转录因子，进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机制。【方法】在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上，利用TFSEARCH软件分析该片段的序列，寻找可能调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子，并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子，利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子，并检测切除该片段序列后荧光素酶活性，研究该转录因子在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的作用。【结果】TFSEARCH软件分析表明在距转录起始点-199-194bp处含有AP-4转录因子结合位点CAGCTG，凝胶滞后实验和超滞后实验表明AP-4是结合于L-plastin启动子3’端序列CAGCTG的转录因子，删除AP-4结合位点后荧光素酶活性下降。【结论】AP-4是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子。     

MicroRNA基因递送系统抗激素非依赖型前列腺癌增殖作用研究

目的：采用分枝状聚乙烯亚胺（BPEI）、线型的聚乙烯亚胺（LPEI）和树枝状聚合物聚酰胺-胺（PAMAM）与具有抑制激素非依赖型前列腺癌细胞PC3增殖的miRNA-15a和miRNA-16-1质粒结合,构建了MicroRNA基因递送系统。考察形成的三种纳米复合物的粒径、zeta电位、细胞内摄取,以及对PC3细胞的抑制作用。方法：利用粒径分析仪测定形成的三种纳米复合物的粒径和电位,凝胶电泳实验测定三种材料对miRNA的结合能力; 利用FAM标记的NC-miRNA考察PC3细胞对三种复合的摄取情况;通过CCK8 法测定三种材料与miRNA-15a和miRNA-16-1形成的复合物对PC3细胞的抑制作用;PCR法测定三种材料与miRNA-15a和miRNA-16-1结合后对PC3细胞中Bcl-2,Cylin D1和Wnt3a表达的阻滞作用。结果：BPEI,LPEI和PAMAM三种材料与miRNA可结合形成稳定的纳米级复合物,在N/P=5时,PC3细胞对BPEI/miRNA-FAM的摄取高于LPEI/miRNA-FAM和PAMAM/miRNA-FAM,具有统计学意义（P<0.01）。BPEI、LPEI和PAMAM都可以携带miRNA-15a和miRNA-16-1进入PC3细胞,并且阻滞PC3细胞中Bcl-2,Cylin D1和Wnt3a蛋白的表达。结论：BPEI,LPEI和PAMAM三种材料包裹miRNA-15a和miRNA-16-1可对激素非依赖型前列腺癌细胞PC3细胞产生抑制作用。并可以有效阻滞PC3细胞中Bcl-2,Cylin D1和Wnt3a蛋白的表达。     

人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2和人类线粒体转录因子A在前列腺癌中的表达和意义

 目的 检测前列腺癌组织标本中人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2（Nrf2）、人类线粒体转录因子A (TFAM)的表达, 并分析其表达与Gleason评分的关系。方法 用免疫组织化学S-P法检测40例前列腺癌组织标本中Nrf2与TFAM的表达,应用Spearman correlation coefficients统计方法分析Gleason评分与Nrf2、TFAM表达强度的关系。结果 Nrf2和TFAM的表达均与Gleason评分正相关（P值为0.0052,0.0003）; Nrf2与TFAM的表达也有相关性（P=0.0006）。结论 Nrf2与TFAM是前列腺癌恶性程度的相关因素之一,Nrf2与TFAM很可能通过同一机制参与前列腺癌的发生发展过程。     

激素非依赖性前列腺癌治疗近况

激素非依赖性前列腺癌的治疗目前仍然是前列腺癌治疗中的一大难点。随着科技信息技术的发展和人们对激素非依赖性前列腺癌机理的进一步认识,以及新的治疗方案的出现和对中医药的深入研究,现在对激素非依赖性前列腺癌的治疗已经有了新的进展,现本文对这方面的研究进展作一综述。     

转录因子GATA-4在人胎心发育中的表达

目的:了解转录因子GATA-4在人类胚胎心脏发育过程中的表达情况。方法:选取人类6~23孕周正常胚胎或胎儿心脏45例,采用免疫组化方法检测GATA-4的表达。结果:早期胚胎心脏,GATA-4在心室中无明显表达,心房中弱表达,小梁网中表达相对较高。随着心脏的进一步发育,心室开始有表达,而且表达水平大幅度上升,胚胎18周始心室表达水平超过心房。GATA-4在室间隔肌部和膜部均有表达,并随着心脏的发育表达水平逐渐升高,在心脏各部室间隔内表达最强。结论:GATA-4在人类胚胎心脏发育过程中发挥着重要作用,是心肌增殖的一个调节因子。     

转录因子AP-2α对HeLa细胞内14-3-3σ表达的影响

目的探讨转录因子AP-2α对HeLa细胞内14-3-3σ表达的影响。方法在HeLa细胞内过表达AP-2α或干扰AP-2α的表达,用荧光定量RT-PCR和Western blot检测Hela细胞AP-2α和14-3-3σ的表达量;采用计算机软件预测14-3-3σ的启动子区域的转录因子结合位点;采用双荧光素酶报告基因分析试验验证AP-2α对14-3-3σ启动子转录活性的影响。结果在HeLa细胞内过表达AP-2α后,14-3-3σ的mRNA和蛋白表达水平增高,而用siRNA干扰AP-2α后,14-3-3σ的mRNA和蛋白表达水平降低;软件分析结果显示在14-3-3σ启动子区域存在多个潜在的AP-2α结合位点;双荧光素酶报告基因分析试验证明在HeLa细胞内,AP-2α增强14-3-3σ启动子的转录活性。结论 AP-2α正调控HeLa细胞内14-3-3σ的表达,这种调控作用可能是通过AP-2α增强14-3-3σ启动子的转录活性来完成的。     

激素非依赖性前列腺癌生物学机制的研究进展

2002年，美国前列腺癌(prostate cancer，PC)的新发病人数高达189000例。同年美国因PC死亡30200人，居该国男性癌症死亡率的第二位，近年来在中国的发病率也呈不断上升趋势。1941年，美国人Huggins和Hodges证实了施行睾丸切除术的雄激素剥夺疗法(androgen ablation theraphy，AAT)对PC有显著疗效，并因此而获得诺贝尔奖。从此，PC在治     

水飞蓟宾可减量调节前列腺癌细胞LNCaP中Ets转录因子的表达

作者研究了水飞蓟宾抑制人前列腺癌细胞株LNCaP的增殖是否通过减量调节前列腺上皮衍生的Ets(E26转录因子)因子(PDEF)的表达以及随后产生的前列腺特异抗原信使核糖核酸(PSA mRNA)的表达和PSA分泌而产生的。     

肝癌发生过程中转录因子AP-1活化的研究

目的：检测肝癌及其癌周组织中AP-1活化状态，探索该转录因子在肝癌发生过程中可能的作用。方法：用电泳迁移率转移试验、免疫印迹和RNA酶保护性分析等方法，测定15例原发性肝癌及其癌周组织中AP-1与DNA的结合活性、AP-1复合物的蛋白组成以及细胞增殖状况。结果：与正常肝组织相比，AP-1与DNA结合活性在。73％的癌周组织中增高；60％的肝癌组织中AP-1结合活性比癌周组织进一步增高；其AP-1二聚体主要由JunD、c-Jun和c-Fos蛋白参与组成，AP-1结合活性与JunD和c-Jun蛋白表达水平呈正相关。结论：AP-1的激活是肝癌发生过程中的早期频发事件，可能有助于肝细胞恶性转化表型的获得，在肝癌的形成中具有重要作用。     

人线粒体转录因子A的表达与前列腺癌细胞顺铂耐药性的机制研究

  目的 探讨人线粒体转录因子A(TFAM)的表达在前列腺癌非激素依赖型细胞系PC3中对顺铂耐药性的影响。方法 应用蛋白免疫印迹法（Western Blot法）,检测PC3细胞与顺铂高耐受性细胞PCDP6中TFAM的表达。并应用小干扰RNA降低PC3细胞中TFAM表达水平,检测细胞对顺铂的耐受性变化,绘制耐药曲线,计算IC50。结果 相比其母细胞PC3,顺铂高耐受性PCDP6细胞高表达TFAM。当用小干扰RNA降低TFAM表达后,PC3细胞对顺铂的敏感性增强。并且TFAM的低表达可引起survivin的低表达。结论 TFAM的表达促进PC3细胞对顺铂的耐受,TFAM能提高细胞耐药性很可能与TFAM调控survivin的表达有关。     

脊髓损伤后DEX治疗上调腹角运动神经元N-4的表达

为探讨在实验性脊髓挤压伤早期，大剂量DEX对内源性NT-4在脊髓腹角运动神经元表达的影响，采用免疫组化ABC法观察了成年大鼠脊髓挤压伤DEX治疗后NT-4在L3节段腹角运动神经元的表达变化。结果：大剂量DEX促进内源性NT-4在脊髓损伤后不同时间的表达。推测DEX在治疗脊髓损伤时除了已知的抗炎作用外，还可能通过促进NT-4的表达，从而产生神经保护作用。     

S100A4敲除对胰腺癌细胞E-钙黏素的表达及黏附和侵袭的影响

目的:探讨S100A4在胰腺癌侵袭和转移中的作用机制作用机制.方法:利用RNA干扰技术将S100A4-siRNA转染至人胰腺癌Bxpc-3细胞,用荧光实时定量PCR和Western免疫印迹方法检测转染前后S100A4和E-钙黏素的mRNA和蛋白表达;以平板黏附模型检测转染前后癌细胞黏附能力变化;以Transwe11小室模型检测转染前后癌细胞迁移和侵袭能力变化.结果:转染后S100A4表达下凋,E-钙黏素的表达则升高;细胞黏附能力增强(P<0.05);体外侵袭能力显著降低(P<0.05).结论:S100A4基因下调E-钙黏素的表达是肿瘤细胞具有高侵袭性的机制之一.S100A4基因可以作为胰腺癌基因治疗的一个靶点.     

转录因子Snail在乳腺癌中的表达及意义

目的检测转录因子Snail mRNA及蛋白在乳腺癌中的表达,探讨Snail在乳腺癌发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学、RT-PCR的方法检测乳腺癌、癌旁相对正常乳腺组织（〉5 cm）中转录因子Snail mRNA及蛋白的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果乳腺癌组织中Snail mRNA的阳性表达率高于癌旁相对正常乳腺组织（P〈0.05）;乳腺癌组织中Snail mRNA的阳性表达量高于癌旁相对正常乳腺组织（P〈0.05）。乳腺癌组织中Snail蛋白的阳性表达率高于癌旁相对正常乳腺组织（P〈0.05）,且癌组织中Snail蛋白阳性表达率与淋巴结转移有关（P〈0.05）,而与TNM分期、分化程度无关。结论乳腺癌的癌变、侵袭、转移可能与Snail蛋白、mRNA的高表达有关。     

新辅助化疗后PDCD4在大肠癌组织中的表达变化及其意义

目的 探讨程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)在新辅助化疗后大肠癌组织中的表达变化及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法,检测比较30例新辅助化疗后大肠癌组织中以及未行新辅助化疗的30例大肠癌组织中PDCD4的表达变化.结果 在新辅助化疗后的大肠癌组织中PDCD4高表达占63.33%,而在未行新辅助化疗的大肠癌组织中高表达占30.00%,2组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 新辅助化疗可提高PDCD4在大肠癌组织中的表达,PDCD4可能通过促进癌细胞凋亡而参与了新辅助化疗对大肠癌细胞的杀伤作用.     

体外人巨细胞病毒感染与核转录因子AP-1活化及原癌基因c-jun表达的研究

目的　研究人胚肺成纤维 (HEL)细胞感染人巨细胞病毒 (HCMV)后 ,转录激活蛋白 1(AP 1)活化和原癌基因c junmRNA表达的时序性变化 ,探讨其在HCMV感染中的作用。方法　采用原位杂交法检测c junmRNA的表达 ,凝胶电泳迁移率改变试验 (EMSA)检测AP 1活性。结果　HEL细胞感染HCMV后 15min ,c junmRNA即有阳性表达 ,30～ 6 0min达高峰 (P <0 0 1) ,以后逐渐下降 ,正常对照组HEL细胞无c junmRNA表达。HCMV感染后AP 1亦迅速被活化 ,至 2h达高峰 (P <0 0 1) ,其后有所下降 ,维持于一定水平。结论　HEL细胞感染HCMV后 ,c junmRNA表达迅速增加 ,AP 1活化。提示HCMV可能通过刺激原癌基因过度表达而参与细胞的信号传导 ,以干扰细胞增殖和分化的调控 ;AP 1活化为早期病毒基因有效表达所必需 ,并可启动一系列前炎性细胞因子的基因转录与蛋白合成。     

碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4在胃癌中的表达及其意义

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和成纤维细胞生长因子受体-4(fibroblast growth factor receptor-4，FGFR-4)在胃癌组织中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法，检测81例胃癌及其癌旁组织中碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4的表达。结果：11例癌旁正常胃粘膜上皮有1例碱性成纤维细胞生长因子(9．1％)，2例成纤维细胞生长因子受体-4(18．2％)染色阳性；5例癌旁不典型增生中碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4染色阳性各2例(40％)；4例癌旁肠化碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4染色阳性分别有2例(50．0％)和1例(25．0％)；81例癌组织碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4染色阳性分别为72例(88．89％)和74例(91．36％)；癌组织碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4染色阳性率明显高于癌旁肠化及不典型增生(P＜0．01)；胃癌组织中碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4表达的水平与患者肿瘤部位、组织学类型及分化程度无关(P＞0．05)；碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4染色呈明显相关(P＜0．01)。结论：碱性成纤维细胞生长因子和成纤维细胞生长因子受体-4在胃癌组织中表达明显增高可能与肿瘤的发生发展有关。     

Par4在去势大鼠腹叶前列腺中的表达

为探讨 Par4在去势大鼠腹叶前列腺中表达的规律及其与前列腺凋亡的相关性 ,将 90只大鼠随机分为 9组 ,分别于去势后 0、 1、 2、 3、 5、 7、 10、 14、 2 1d处死 ,取前列腺石蜡包埋切片后行免疫组化检测 Par4和增殖抗原(PCNA ) ,末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口末端标记术 (TUNEL )测定前列腺凋亡 ,并作连续切片 ,行计算机图像重建技术比较 Par4与凋亡及 PCNA表达的关系。结果表明 :正常大鼠前列腺 Par4表达较少 ,去势后则显著增加 ,与凋亡的变化及分布规律相似 ,其表达的阳性率与凋亡阳性率呈正相关 (r=0 .76 0 5 ,P<0 .0 1)。 Par4的表达和 PCNA无明显相关 (r=- 0 .4894,P>0 .0 5 )。 Par4在去势大鼠腹叶前列腺表达增高 ,与凋亡呈正相关 ,提示有促凋亡的作用。