儿童急性淋细胞性白血病MRL与mdr1基因表达动态监测

目的 探讨儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）中，微小残留白血病（MRL）与mdr1基因表达动态监测的临床意义。方法 对35例ALL患儿不同病期骨髓标本进行PCR或巢式PCR检测IgH和TCR Vδ2Dδ3基因重排，同时应用半定量RT－PCR检测mdr1基因表达。结果 随着完全缓解期延续，IgH或／和Vδ2Dδ3基因重排检出率逐渐下降，而mdr1基因阳性表达检出率增加，IgH或／和Vδ2Dδ3基因重排持续检测阳性或mdr1表达水平增高者易复发。结论 动态监测MRL和mdr1基因表达可判断疗效和预知复发，且较一次单独检测更为重要。当IgH或／和Vδ2Dδ3转阴后检测mdr基因表达可作为预知复发的一个辅助指标。     

儿童急性淋巴细胞性白血病MRL与mdr 1基因表达动态监测

目的　探讨儿童急性淋巴细胞性白血病 (ALL)中 ,微小残留白血病 (MRL)与mdr 1基因表达动态监测的临床意义。方法　对 35例ALL患儿不同病期骨髓标本进行PCR或巢式PCR检测IgH和TCRVδ2 Dδ3 基因重排 ,同时应用半定量RT PCR检测mdr 1基因表达。结果　随着完全缓解期延续 ,IgH或 /和Vδ2 Dδ3 基因重排检出率逐渐下降 ,而mdr 1基因阳性表达检出率增加 ,IgH或 /和Vδ2 Dδ3 基因重排持续检测阳性或mdr 1表达水平增高者易复发。结论　动态监测MRL和mdr 1基因表达可判断疗效和预知复发 ,且较一次单独检测更为重要。当IgH或 /和Vδ2 Dδ3 转阴后检测mdr 1基因表达可作为预知复发的一个辅助指标     

免疫球蛋白重链T细胞受体γ基因重排在急性淋巴细胞白血病中的表达

目的：探讨初诊急性淋巴细胞白血病（ALL）患者免疫球蛋白重链（IgH）、T细胞受体γ（TCRγ）基因重排情况。方法：应用多聚酶链反应（PCR）检测19例初发ALL患者骨髓IgH、TCRγ基因重排。结果：19例标本中10例发生单一IgH基因重排，5例发生单-TCRγ基因重排，2例同时出现IgH/TCRγ基因重排。结论：ALL患者IgH基因重排几率高于TCRγ基因重排，且存在着交叉重排现象。     

急性白血病复发时克隆演化的研究

为研究克隆演化在急性白血病复发发病机制中作用，应用聚合酶链反应（PCR）联合Southern杂交检测75例及其中36例复发急性非淋巴细胞白血病（ANLL）IgH重排基因，PCR检测81例及其中35例复发急性淋巴细胞白血病（ALL）IgH、TCRVγ2－Jγ、TCRVδ－Dδ3重排基因及bcr／ablmRNA，配合形态学和免疫学检查发现8例ALL（22．9％）和4例（11．1％）ANLL复发时形态学，免疫学或／和重排基因类型发生改变（克隆演化）。克隆演化是某些急性白血病复发的主要原因，克隆演化发现对于白血病治疗改进有重要意义，其选择机制尚需进一步研究。     

多聚酶链反应检测淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链基因重排及其临床意义

用多聚酶链反应技术扩增42例急、慢性白血病患骨髓白血病球蛋白重链（IgH)基因重排产生的第三互补决定区（CDR-Ⅲ）DNA序列。结果显示：35例淋巴细胞白血病中25例出现IgH基因单克隆性重排（71.4%)，其中急、慢性B淋巴细胞白血病各为80%（16/20）和87.5%(7/8)及2例T、B淋巴细胞双表型白血病，另外有1例急性未分化白敌国病也出现这种重排，而5例，急性T淋巴细胞白血病和6例急性髓细胞白血病均无重排，对3例CDR-Ⅲ阳性克隆的B-ALL病例在完全缓解期进行微小残留病变检测，其中2例PCR阳性病人先后复发，1例PCR阴性病人缓解持续时间明显长于阳性病人。     

克隆性基因重排检测用于诊断B细胞淋巴瘤微小病灶

目的探讨B细胞淋巴瘤（B-NHL）外周血及骨髓克隆性基因重排检测对微小病灶（MD）的诊断价值。方法应用PCR技术，扩增IgH、bcl-2／IgH（包括MBR及MCR）基因重排，对42例治疗前B-NHL患者外周血及骨髓同时进行MD检测，对照组为25例非B-NHL。用IgH基因重排阳性的淋巴瘤CA46细胞株作系列稀释法实验，判断以IgH为分子标志检测外周血及骨髓MD实验的灵敏度。结果淋巴瘤CA46细胞株系列稀释法实验显示：以IgH基因重排为分子标志检测MD敏感性为10^-2 。42例B-NHL外周血中IgH检出率19％（8／42），bcl-2／IgH检出率为33．3％（14／42）。对42例B-NHL同时进行的骨髓MD检测中，IgH检出率为28．6％（12／42），bcl-2／IgH MBR检出率为45．2％（19／42）。外周血及骨髓中T细胞淋巴瘤及其他淋巴瘤3种指标检测均为阴性。IgH、bcl-2／IgH MBR、bcl-2／IgH MCR3个指标各自在骨髓中检出率与外周血中检出率差别无统计学意义（P〉O．05），虽然bcl-2／IgH MBR检出率在外周血与骨髓中滤泡性淋巴瘤（FCL）组均较弥漫性大B细胞淋巴瘤组高，但差别无统计学意义（P〉0．05）。在同时进行的外周血及骨髓检测中，12例骨髓IgH阳性中有8例外周血检测亦为阳性，19例骨髓bcl-2／IgH MBR阳性中有13例外周血检测为阳性，但1例FCL骨髓检测阴性外周血检测为阳性。结论检测外周血bcl-2／IgH MBR可作为诊断B-NHL MD辅助手段。     

急性髓性白血病免疫球蛋白重链重因和T细胞受体γ基因重排的检测及意义

为检测急性髓性白血病（AML）患者免疫球蛋白重链基因（IgH)和T细胞受体γ基因（TCRγ）克隆性重排情况，并初步探讨其意义，采用聚合酶链反应（PCR）检测51例AML患者IgH及TCRγ基因重排。结果表明，51例患者中9例（17．65％）发生IgH基因重排，11例（21．57％）出现TCRγ基因重排。由此可见，AML中确实存在系列失真现象，可有IgH及TCRγ重排发生。     

聚合酶链反应检测老年人急性白血病IgH基因重排的意义

目的为进一步了解老年人急性白血病的分子生物学特征。方法应用聚合酶链反应（PCR）检测28例老年人急性白血病免疫球蛋白重链（IgH）则基因重排结果66.7％（4／6）老年人急性淋巴细胞白血病（ALL）和40．9％（9／22）急性非淋巴细胞白血病（ANLL）存在IgH基因重排：IgH基因重排阳性老年人ANLL治疗缓解率（22．2％）显著低于IgH基因重排阴性老年人ANLL（66.7％）（P＜0.05）。结论应用PCR技术检测老年人急性白血病基因重排可帮助了解老年人白血病的分子生物学特征和预后,此方面尚需进一步研究。     

急性淋巴细胞白血病恶性克隆的免疫球蛋白基因特征分析

目的 比较人类胚胎发育期的淋巴细胞克隆,儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）和多发性骨髓瘤（MM）的免疫球蛋白重链（IgH)基因,确定与白血病恶性克隆有关的基因特征。方法 利用IgH可变区各个基因家族（VH1－VH6）和结合区（J）的特异序列做引物,RT－PCR扩增IgH重排的CDR3区基因,然后用变性胶长电脉的方法,获得不同发育期胚胎的肝,脾,胸腺和骨髓B细胞克隆的基因指纹图谱,同样也获得15例ALL和1例MMB细胞基因指纹图谱,测序对比分析ALL及MM病人恶性细胞IgH基因的序列特征。结果 以IgH VH1-VH6基因家族为标志的各个B细胞克隆出现有一定规律。肝脏VH6基因是占优势的家族,而脾脏中VH3为优势家族,骨髓更多利用的也是VH3。ALL9／15例表现为B淋巴细胞单克隆的增生,3例属VH1族,3例属VH6家族,2例同时有VH3和VH4家族基因。患者其他基因家族表现为正常的均匀分布的梯度状的多克隆谱系或者受到抑制。1例ALL的VH1、VH3和VH6家族呈寡克隆现象。6例ALL呈正常的多克隆分布。克隆并测序分析1例ALL单克隆VH3序列,发现与胚胎13周的序列相似并具胚胎期特点。1例成人MM的IgH序列特点则完全不同,出现体细胞基因的高突变。结论 ALL的IgH基因重排可以有不同的VH1,VH3,VH4,VH6重排的克隆类型;儿童白血病发病可能与外来抗原刺激无明显关系。     

分子双标记鉴别急性淋巴细胞白血病细胞克隆起源

采用多聚酶链反应（PCR）技术，检测30例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者IgH和TcRγ重排。结果显示：有23例至少可发现一种基因重排，其中，IgH重排11例，TcRγ重排4例，二者均重排8例。IgH重排多见于B－ALL，T－ALL则常见TcRγ重排，坦存在着系列交叉现象。结合免疫表型研究，有助于确定细胞克隆来源。采用PCR扩增、标记、制备的克隆探针进行分子杂交试验，可用于白血病缓解和复发或残留细胞克隆的检测。     

杂志信息

浙江医科大学附属儿童医院潘秋炉等为探讨小儿急性白血病(AL)的基因诊断方法,应用聚合酶链反应(PCR)技术结合DNA印迹和DNA序列分析,对小儿AL初诊的骨髓标本进行了免疫球蛋白重链(IgH)基因、T细胞受体δ(TCRδ基因重排和T细胞AL-1(Tal-1)基因丢失的分析。 结果显示:1.102例AL患儿IgH基因重排的     

应用特异性基因标志早期诊断中枢神经系统白血病的研究

目的探讨特异性基因标志对急性淋巴细胞白血病(ALL)患中枢神经系统白血病(CNSL)早期诊断的价值。方法 用聚合酶链反应(PCR)技术扩增ALL患不同期脑脊液免疫球蛋白重链(IgH)基因重排和T细胞受体T(TCR7)基因重排。结果①12例ALL脑脊液标本两种PCR基因扩增6例(9份)获阳性结果,与临床结果相符。②有2例患临床不符CNSL,但PCR阳性,经观察治疗后得到确诊。结论本法特异性强．且有较高的灵敏度,可为ALL患CNSL早期诊断的有效方法之一。     

淋巴瘤T细胞受体δ基因重排的研究

本文应用多聚酶链反应(PCR)方法对17例淋巴瘤患者骨髓细胞T细胞受体(TCR)Vδ_1-Jδ_1基因重排进行了检测.11例T细胞淋巴瘤中5例发生TCRVδ_1-Jδ_1基因重排,6例B细胞淋巴瘤和10例正常骨髓细胞无TCRVδ_1-Jδ_1基因重排.研究表明:TCRVδ_1-Jδ_1基因重排显示细胞系列的特异性,是T细胞恶性肿瘤的克隆标志.     

免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排检测在急性非淋巴细胞白血病患者中的意义

目的 探讨免疫球蛋白重链（IgH）和T细胞受体γ（TCRγ）基因重排在急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者中的临床意义。方法 用聚合酶链反应（PCR）检测50例ANLL患者骨髓、外周血单个核细胞（MNCs）中克隆性IgH、TCRγ基因重排。结果 克隆性IgH和／或TCRγ基因重排在50例ANLL中检出率为32.0%（16／50），其中IgH为28.0%（14／50），TCRγ为16.0%（8／50）。1例反应性淋巴结炎和20例正常人均未检测到IgH和TCRγ基因重排。27例非M3初发ANLL患者经DA或HA标准方案化疗，10例基因重排阳性的患者1疗程后获完全缓解3例（30.0%），而17例基因重排阴性患者1疗程后完全缓解13例（76.5%），两者判别具有显著性意义（P＜0.05）。结论 （1）IgH、TCRγ基因重排不仅出现于淋巴细胞来源的的肿瘤，也可见于部分ANLL患者；（2）出现IgH和／或TCRγ基因重排可能是ANLL患者预后不佳的指标之一。     

B细胞淋巴瘤石蜡包埋组织克隆性重链基因重排检测

目的 探讨克隆性重链基因重排检测在B细胞淋巴瘤(B—NHL)诊断中的价值。方法 用半巢式聚合酶链反应(semi—nested PCR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及银染技术，检测经形态学及免疫组织化学确诊的23例B—NHL石蜡包埋组织标本的克隆性免疫球蛋白第三互补决定区(IgHCDR3)重排基因，对照组为7例T细胞淋巴瘤(T—NHL)及6例反应性增生或肉芽肿性淋巴结炎。结果 B—NHL IgHCDR3检出的阳性率87．0％(20／23)，假阳性率7．7％(1／13)，假阴性率13．0％(3／23)。结论 检测克隆性IgHCDR3重排为B—NHL的诊断及鉴别诊断提供有效的辅助手段。     

淋巴细胞白血病细胞分化与抗原受体基因重排研究

用McAbs免疫酶和PCR技术研究了35例淋巴细胞白血病细胞分化起源及IgH和TCRγ,δ基因重排。结果表明,20例表达B细胞表面标记者中,B-ALL15例分别起源于B祖、前前B、前B和成熟B细胞,B-CLL5例均起于成熟B细胞;17例检测到IgH基因重排,8例伴TCRγ基因重排,2例伴TCRδ基因缺失。8例T-ALL分别起源于幼稚、普通和成熟胸腺细胞,均检测到TCRγ基因重排和(或)TCRδ基因重排(缺失)。3例T,B-双标记ALL同时发生IgH和TCRγ基因双重重排。4例AUL中3例发生TCRγ基因重排。讨论了细胞分化与抗原受体基因重排间的相关性及临床意义。     

免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排在非霍奇金淋巴瘤中检测的临床意义

目的：探讨免疫球蛋白重链（IgH)和T细胞受体γ（TCRγ）基因重排在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的检测意义。方法:PCR方法检测25例NHL和1例反应性淋巴结炎患者,及20例正常人骨髓、周围血和／或淋巴结核细胞（MNCs0中克生性IgH、TCRγ基因重排。结果：克隆性IgH和／或TCRγ基因重排在25例NHL中检出为84.0%（21／25）;克隆性IgH基因重排在B－NHL和T－NHL中检出分别为86.7%(13/15)和20.0%(2/10),克隆性TCRγ基因重排分别为53.3%(8/15)和80.0％（8／10）。1例反应性淋巴结炎和20例正常人均未检测到IgH和TCRγ基因重。结论：IgH、TCRγ基因重排检测有助于NHL的诊断和鉴别诊断,及发现NHL早期骨髓浸润 和判断预后。     

B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链基因重排的检测

目的 探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排的检测在B细胞性淋巴瘤(B-NHL)中的诊断价值。方法 用聚合酶链式反应(PCR)方法检测B细胞淋巴瘤30例．淋巴结反应性增生(RH)10例及T细胞淋巴瘤(T-NHL)2例的IgH基因重排。结果 30例B-NHL中，22例(73．3％)出现IgH基因克隆性重排，而RH及T-NHL均未出现IgH基因重排。结论 B细胞淋巴瘤中存在B细胞单克隆增生，支持肿瘤单克隆起源学说；IgH基因克隆性重排检测对鉴别B细胞淋巴瘤和反应性增生以及T细胞和B细胞淋巴瘤有重要意义。     

淋巴系统肿瘤免疫球蛋白和T细胞受体重排基因的指纹图谱特征

目的确定淋巴系统肿瘤的免疫球蛋白（Ig）和T细胞受体（TCR）基因重排的特征。方法：用PCR和单链构象多态性等分析108例各类淋巴系统肿瘤。结果：不同患者各有特征性指纹图谱。54％的急性淋巴细胞白血病（ALL）和43％多发性骨髓瘤（MM）存在IgH或者TCRγ双等位基因重排，6例ALL和3例MM存在寡克隆性。结论：指纹图谱可判断恶性克隆之间的基因差异和寡克隆性。     

B细胞恶性肿瘤患者血浆游离DNA中IgH基因重排检测及临床意义

目的：探讨检测B细胞肿瘤患者血浆DNA 标本IgH基因重排对辅助诊断及判断预后的临床意义。方法：采集83例B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）、B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)及多发性骨髓瘤（MM）患者共110份血浆标本,提取血浆游离DNA,PCR检测IgH基因重排。结果：63例初发B细胞肿瘤患者IgH基因重排检测阳性率为77.8％,而缓解病例的阳性率为27.6％,初发患者检测阳性率显著高于缓解病例（P < 0.01）。结缔组织病、感染性疾病及健康人均呈阴性结果。IgH基因重排检测阳性率与B-NHL和MM的分期、血清β2-微球蛋白（β2-MG）和乳酸脱氢酶（LDH）水平无关（P > 0.05）。追踪检测16例患者显示12例初发检测阳性者治疗缓解后转为阴性,其中3例缓解后6～9月检测血浆IgH基因重排再次转为阳性,随后此3例患者均出现临床复发,检测转阳较临床复发提前1～4月。1例在初诊和完全缓解期间检测均为阳性ALL患者,经异基因干细胞移植后转为阴性;3例检测始终阳性的患者疗效不佳,始终未获缓解。结论：初治B细胞肿瘤患者血浆游离DNA中检测IgH基因重排阳性率高、特异性强、取材简便,有望用于B细胞肿瘤辅助诊断,追踪检测还有助于判断预后。 【关键词】 B细胞,肿瘤; 血浆,DNA; 免疫球蛋白, 重链;基因重排; PCR