海人酸致痫大鼠海马CA3区神经元线粒体损伤及妥泰的保护作用

目的：观察海人酸（KA）诱导的癫痫持续状态（SE）大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构的损伤及妥泰（TPM）的保护作用。方法：用TPM干预。用KA诱导大鼠SE 2?h，并评估大鼠的行为学表现。于SE终止后3?h制作脑切片，光镜观察神经元的大体损伤，电镜进一步观察线粒体的超微结构。结果：KA组出现痫性发作的时间为注入KA后(15.3±4.6)?min，而TPM组为(26.1±5.3)?min，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。KA组大鼠的线粒体损伤为（3.67±0.34）级，TPM组为（2.48±0.21）级，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：KA诱导的SE可导致海马神经元线粒体损伤，妥泰对此具有抑制作用。     

妥泰对戊四氮诱导慢性癫痫大鼠行为和脑电的影响

目的：探讨妥泰（TPM）的抗癫痫作用及作用时间点。方法：采用戊四氯（PTZ）制备大鼠慢性癫痫模型，利用妥泰加以干扰，选取不同的时间点，观察癫痫大鼠行为学及脑电的变化。结果：TPM＋PTZ组大鼠的行为变化与PTZ组在前10、20天差异无显性意义，在4周后差异具显性意义；两组脑电波形无差别。结论：妥泰对化学药品（PTZ）诱导的癫痫有抑制作用，但其作用在持续应用4周后才出现。     

动态观察红藻氨酸致痫大鼠海马神经细胞凋亡与wtp53表达的意义

目的：探讨红藻氨酸(KA)致痫大鼠海马神经细胞凋亡与野生型p53(wtp53)蛋白表达的关系。方法：采用KA诱导痛痫发作大鼠模型。以TUNEL方法标记DNA片段，原位检测凋亡细胞；免疫组化SP法检到wtp53蛋白。结果：注射KA72h后，癫痫发作大鼠海马CAl区凋亡神经细胞达高峰及wtp53蛋白表达在24h大量出现；wtp53蛋白表达与细胞凋亡呈正相关。结论：癫痫神经细胞凋亡与wtp53表达密切相关；痫性发作使wtp53表达上调，从而诱导神经细胞凋亡。     

托吡酯对红藻氨酸致癫痫状态大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 观察托吡酯(topiramate,TPM)对红藻氨酸(kainic acid,KA)致癫痫持续状态(status epilepticus,SE)大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 取大鼠120只,随机分为TPM组、KA组及生理盐水(NS)对照组,每组再分为四个小组,分别用于SE后3 、12 、24 和48 h四个时点.每小组10只大鼠.TPM组用TPM预处理.采用KA诱导大鼠SE.进行行为学评估、HE染色及TUNEL染色,并用免疫组化方法检测海马caspase-3的表达变化.结果 TPM组大鼠的癫痫发作迟于KA组.HE及TUNEL染色显示,TPM组大鼠海马的病理损伤轻于KA组.免疫组化结果显示,TPM组caspase-3的表达明显低于KA组.结论 TPM对KA诱导的SE发作具有抑制作用,并能显著降低海马caspase-3的表达,从而减轻癫痫所致的海马神经元损伤.     

红藻氨酸致痫大鼠海马区神经元凋亡的动态变化

目的探讨红藻氨酸(kainicacid,KA)诱导的大鼠癫痫状态海马神经元的形态学变化、凋亡情况及抗痫药物的神经保护作用。方法90只Wistar大鼠随机分为对照组、KA组和卡马西平(CBZ)组,后两组再按癫痫发作后1h、4h、12h、24h、48h和72h不同时点分为6个亚组。KA注射后,观察大鼠癫痫发作后的行为学变化;采用HE染色法观察大鼠癫痫状态海马CA1、CA3区神经元形态学改变;采用原位细胞凋亡检测法观察癫痫状态海马CA1、CA3区神经元凋亡情况。结果KA注射后,大鼠出现严重的惊厥;在癫痫发作后12h,海马CA1区、CA3区开始出现凋亡细胞[CA1区:KA组(6.53±1.36)个,CBZ组(5.85±1.68)个;CA3区:KA组(9.58±1.63)个,CBZ组(7.36±1.27)个],48h凋亡细胞达到峰值(P<0.01)[CA1区:KA组(42.263±3.28)个,CBZ组(35.39±2.36)个;CA3区:KA组(57.64±12.76)个,CBZ组(38.37±13.65)个]。经CBZ干预后凋亡细胞明显减少(P<0.05)。结论癫痫发作后的迟发性神经元死亡很可能是由凋亡引起的,CBZ可抑制癫痫状态海马神经元凋亡。     

妥泰对成人癫痫患者智力的影响

[目的]探讨新型抗癫痫药妥泰对成人癫痫患者智力的影响.[方法]对39例成人癫痫患者采用妥泰单药治疗,分别于治疗前和治疗6个月以后进行智力测定,并与31例健康对照进行比较.[结果]39例患者治疗后的语言智商和总智商分别为(78±13)和(86±18),与其治疗前的语言智商(87±11)和总智商(94±16)比较,均有显著性下降(P＜0.05);与对照组最后的语言智商和总智商(89±11和94±12)比较,也有显著性下降(P＜0.05).而对照组最后的总智商(94±12)与6月前的总智商(94±13)比较,无显著性差异(P＞0.05).[结论]妥泰对部分成人癫痫患者的智力有影响,使患者的语言智商和总智商下降.     

红藻氨酸致痫大鼠海马区神经元凋亡的动态变化

目的探讨红藻氨酸(kainic acid,KA)诱导的大鼠癫痫状态海马神经元的形态学变化、凋亡情况及抗痫药物的神经保护作用.方法90只Wistar大鼠随机分为对照组、KA组和卡马西平(CBZ)组,后两组再按癫痫发作后1 h、4h、12h、24h、48h和72h不同时点分为6个亚组.KA注射后,观察大鼠癫痫发作后的行为学变化;采用HE染色法观察大鼠癫痫状态海马CA1、CA3区神经元形态学改变;采用原位细胞凋亡检测法观察癫痫状态海马CA1、CA3区神经元凋亡情况.结果KA注射后,大鼠出现严重的惊厥;在癫痫发作后12h,海马CA1区、CA3区开始出现凋亡细胞[CA1区:KA组(6.53±1.36)个,CBZ组(5.85±1.68)个;CA3区:KA组(9.58±1.63)个,CBZ组(7.36±1.27)个],48h凋亡细胞达到峰值(P＜0.01)[CA1区:KA组(42.263±3.28)个,CBZ组(35.39±2.36)个;CA3区:KA组(57.64±12.76)个,CBZ组(38.37±13.65)个].经CBZ干预后凋亡细胞明显减少(P＜0.05).结论癫痫发作后的迟发性神经元死亡很可能是由凋亡引起的,CBZ可抑制癫痫状态海马神经元凋亡.     

愈痫灵对红藻氨酸致痫大鼠行为的影响

为观察愈痫灵颗粒剂对致痫大鼠行为的影响,探讨该方的癫痫作用。采用红藻氨酸造模,随机将40只SD大鼠分为模型组、中药汤剂 、中药颗粒剂组、西药组,按Schultz-Krohn标准观察行为表现。结果显示愈痫灵汤剂组、颗粒剂组可延长癫痫发作潜伏时间（P＜0．05）,减少湿狗样抖动次数（P＜0．05）。提示愈痫灵颗粒剂有显著的抗痫作用。     

电针对大鼠侧脑室注入红藻氨酸所致海马痫样丛状放电的影响

大鼠侧脑室注入红藻氨酸(Kainic Acid,KA)所致癫痫,可被电针“督脉穴”缓解。表现为:海马痫波幅度和频率均减低,第1min内主要以痫波幅度的显著降低为主。电针前后海马脑电未出现去同步化。侧脑室注入KA后,海马痫样放电分为正性单位、负性单位和无关单位三种形式,电针后正性单位被抑制,负性单位被激活,且正性单位(21％)、无关单位(33％)转为负性单位。同时电针使海马癫痫神经元丛状放电的每一丛状放电中峰电位数目(简称NSEB值)及丛内峰电位频率(简称IBSF值)减小。提示:(1)电针制痫可能是通过抑制海马癫痫脑电的振幅起作用;(2)海马负性单位是电针制痫的因素之一;(3)电针能调整癫痫神经元的固有特性。     

妥泰对癫痫患儿脑电活动影响的观察

对单独应用妥泰治疗且临床上发作已被控制的患儿进行治疗前及发作控制后脑电图(EEG)和脑电地形图检查,探讨妥泰对脑电活动的影响。结果显示:妥泰治疗后可使痫样活动(IEA)消失或减少50%以上占67.5%,临床发作虽已被控制但可见IEA增多者占20%;妥泰治疗对脑电背景活动有一定影响,可引起α波活动减少,波、δ波活动增加,治疗前后具有极显著性差异(P<0.01);妥泰治疗组α频段的相对功率显著减低(P<0.01),及δ频段相对功率显著增加(P<0.01)。     

海人酸致痫大鼠海马CA3区神经元线粒体损伤及caspase 3的表达

目的：观察海人酸（kanic acid,KA）诱导的癫痫持续状态（status epilepticus,SE）大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构的损伤及caspase 3表达的变化。方法：用KA诱导大鼠SE 2?h,分别于SE终止后第3、6、24?h取脑,用电镜观察海马CA3区线粒体的超微结构,同时用免疫组化方法检测相同部位caspase 3表达的变化。结果：SE终止后3?h可见到海马线粒体超微结构损伤,从肿胀到膜的完整性破裂。caspase 3的表达在SE后6?h开始增加,于第24小时明显增高。结论：在实验性SE模型中,海马线粒体的超微结构在早期即有损伤,caspase 3在线粒体损伤后数小时才出现表达,并于SE后24?h明显增高。     

托吡酯对戊四氮点燃慢性癫(癎)大鼠脑海马胶质细胞增生的影响

目的:探讨脑海马胶质细胞增生在癫(癎)发生、发展中的作用及托吡酯对其的影响.方法:采用戊四氮制备慢性癫(癎)模型,利用托吡酯干扰,选取不同时间点,观察大鼠行为学变化及胶质纤维酸性蛋白在海马回中的表达(免疫组织化学染色).结果:托吡酯组点燃率在27 d明显低于模型组;模型组及托吡酯组胶质纤维酸性蛋白表达增加,并随时间延长更加明显;而不同时间点该表达的增加程度,托吡酯组均低于模型组.结论:胶质纤维酸性蛋白表达的增加,说明出现了胶质细胞活化及脑可塑性变化,而托吡酯明显地抑制了该表达的增加.     

小鼠卡英酸颞叶癫痫慢性发作期的磷酸化蛋白组学研究

目的: 探究小鼠颞叶癫痫慢性发作期蛋白质功能和信号通路的改变。方法: (1)制备小鼠卡英酸颞叶癫痫模型,行为学达到Racine分级4分判定为造模成功。28 d后,取对照组和实验组小鼠海马组织进行磷酸化蛋白组学实验;(2) 选取检出密度大于10 ⁶的数据进行统计分析;(3)利用GO(Gene Ontology)数据库、KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库和STRING数据库对磷酸化蛋白组学数据进行统计分析;(4)结合文献对组学结果进行分析。 结果: (1)质谱共检测出12 697个蛋白质磷酸化位点,其中159个位点变化差异具有统计学意义(P<0.05);(2)在蛋白质功能层面,磷酸化水平显著性变化的蛋白质的分子功能主要是结合(39.5%)和催化活性(35.7%), 这些蛋白质参与细胞交流(20.8%)、初级代谢和含磷酸盐化合物代谢等生化过程;(3)在信号通路层面,这些蛋白质参与10条信号转导通路,包括谷氨酸能突触信号通路、Ras信号通路、长时程增强信号通路等;(4)在蛋白质相互作用层面,这些蛋白质形成以Grin1和Dlg3为核心,以Arhgef 2、Arhgap33和Tiam1为核心与以Spnb1/3/4、Add3和Ank2为核心的蛋白质相互作用网;(5)磷酸化蛋白组学数据显示,Grin1、Arhgef2、Arhgap33、Tiam1、Sptbn1/2/4和Ank2等磷酸化水平在癫痫慢性发作期显著升高。结论: 磷酸化蛋白组学的结果从蛋白质功能、信号通路和蛋白质相互作用3个层面阐明了小鼠颞叶癫痫慢性发作期海马体蛋白质的变化,验证了磷酸化蛋白组学研究的可靠性,并提示多巴胺功能和Kir3.1钾通道功能可能与癫痫发生相关。     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR5 mRNA表达变化的动态观察

目的 探讨红藻氨酸（KA,10mg.kg^-1)诱导大鼠癫痫发作时海马代谢型谷氨酸受体5亚型（mGluR5)mRNA表达变化的病理特征。方法 采用同位素S^35 dATP标记寡核苷酸探针原位杂交法检测大鼠癫痫发作前后海马mGluR5mRNA的表达变化。通过图像分析系统进行定量处理。同时观察大鼠行为学及脑电变化。结果 KA注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为阵发性癫痫样放电,正常大鼠海马中有丰富的mGluR5 mRNA表达,以齿状回和CA1区表达较高,KA注射后海马各区mGLuR5 mRNA表达呈时间依赖性下调,CA1,CA3,CA4区表达在2h呈现出显著性差异（P＜0．05）,齿状回区表达在1h即有显著性差异（P＜0．01）,至72h各区表达均至最低。结论 mGluR5在癫痫发作后表达下降可能有助于限制神经元网络的异常兴奋性,使细胞发挥自身保护性作用。     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR1mRNA表达的动态变化

目的：探讨红藻氨酸（ＫＡ）诱导大鼠癫痫发作时海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达变化的时空特征．方法：采用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针原位杂交法检测海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达,通过图像分析系统进行定量处理．同时观察大鼠行为学及脑电变化．结果：ＫＡ注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为持续性癫痫样放电．海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达在注射ＫＡ后１ｈ开始增高,４ｈ￣８ｈ达高峰,之后逐渐回落,７２ｈ降至     

大鼠急性肺损伤过程中STAT-3的活化对caspase-3表达的影响

目的 探讨大鼠急性肺损伤（ALI）过程中信号转导和转录活化因子-3（STAT-3）的活化对caspase-3表达的影响.方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为4组：对照组（n=6）,脂多糖组（LPS组,n=24）,酪氨酸蛋白激酶（JAK）抑制剂 AG490组（n=6,AG490用0.4%二甲亚砜溶解）,AG490＋LPS组（n=24）;LPS、AG490＋LPS组在注射LPS后1、2、4、6 h又被分为4个亚组（每组n=6）.分别采用Western blotting检测各组大鼠肺组织中磷酸化STAT-3（pSTAT-3）的表达并采用免疫组织化学法测定caspase-3的表达情况.结果 注射LPS1、2、4、6 h后STAT-3被明显活化（P〈0.05）,而相对应的AG490＋LPS组中STAT-3活性较LPS组减弱（P〈0.05）.同时LPS组中caspase-3表达较相应的AG490＋LPS组明显减少（P〈0.01）.结论 大鼠ALI过程中STAT-3通路的激活可减低caspase-3的表达.     

施普善对慢性低氧高二氧化碳大鼠学习记忆及海马caspase-3表达的影响

目的：观察脑活素（施普善）对慢性低氧高二氧化碳大鼠学习记忆功能的影响及大鼠海马中caspase-3表达的变化,并探讨可能的作用机制。方法：筛选八臂迷宫训练后清洁级的雄性SD大鼠32只,随机均分为对照组、模型组、施普善1 mL/kg组和施普善2.5 mL/kg组。采用八臂迷宫观察干预前后大鼠空间学习记忆能力的变化,Western-blot法检测大鼠海马caspase-3蛋白的表达。结果：与对照组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力下降,海马中caspase-3明显增高。与模型组大鼠比较,2种剂量施普善干预组大鼠的学习记忆能力明显改善,且海马中caspase-3的表达减少。结论：施普善具有改善慢性低氧高二氧化碳大鼠空间学习记忆作用,可能与抑制海马中caspase-3表达有关。     

戊四氮致痫幼鼠颞叶和海马区Cx43的表达及天麻素干预

目的 在建立戊四氮点燃幼鼠癫痫模型的基础上,观察各组大鼠行为学改变、颞叶与海马区缝隙连接蛋白Cx43的表达变化及天麻素的干预研究.方法 将50只21日龄Wistar幼鼠(50～70 g)随机分为5组,分别为空白对照组、戊四氮组、天麻素大剂量组、天麻素小剂量组及丙戊酸钠组,每组10只.根据Racine分级法,观察大鼠行为学改变并记录大鼠痈性发作级别和次数,在点燃4周后常规方法心脏灌注、固定及取脑组织,采用免疫组织化学方法显示各组动物脑组织切片Cx43表达的情况.结果 在实验2周时,戊四氮组发作率为100%,天麻素小剂量组、大剂量组及丙戊酸钠组发作率均低于戊四氮组(P<0.05);4周后,天麻素小剂量组、大剂量组发作率与戊四氮组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但丙戊酸钠组发作率明显低于戊四氮组,其差异具有统计学意义(P<0.05);4周后,戊四氮组点燃率为100%,天麻素大、小剂量组及丙戊酸钠组点燃率均低于戊四氮组fP<0.01).戊四氮点燃4周后,实验各组发作级别比较,差异有统计学意义(X2=49.71,P<0.01),戊四氮组发作级别最高(秩次为700.12),其次是天麻素小剂量组(秩次为547.60)、天麻素大剂量组(秩次为522.60)、丙戊酸钠组(秩次为502.10)及空白对照组(秩次为273.50).戊四氮点燃4周后,在各组实验大鼠颞叶皮质及海马区,戊四氮组Cx43表达量较其他组多,差异具有显著性统计学意义(P<0.01),且天麻素大剂量组的表达量小于天麻素小剂量组(q=2.811,2.647,P<0.05),而大剂量组与丙戊酸钠组比较,其差异没有统计学意义(q=1.203,1.116,P>0.05).结论 Cx43表达的增加可能是癫痫发作产生的一个原因;天麻素能够降低致痫大鼠惊厥的易感性及抑制大鼠颞叶和海马区Cx43表达,抑制了异常缝隙连接的形成,达到抗癫痫形成.