原发性卵巢癌患者CD_3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为探讨CD3AK细胞和LAK细胞杀瘤作用的特异性及靶细胞选择性，对比观察了3例原发性卵巢癌患者CD3AK细胞和LAK细胞对卵巢癌细胞系（3AO）和人早幼粒细胞白血病细胞系（HL60）的杀伤活性。结果表明：LAK细胞在培养第1～3周，各效靶比（10：1，20：1，40：1）对HL60的杀伤活性略高于对3AO的杀伤活性，但差异无显著性（P＞0．05）；CD3AK细胞在培养第1周，各效靶比（10：1，20：1，40：1）对HL60的杀伤活性均显著高于对3AO的杀伤活性（P＜0．05），而培养第2、3、4周时，对HL60和3AO的杀伤活性无显著区别（P＞0．05）。提示：LAK细胞和CD3AK细胞均缺乏杀瘤特异性，而CD3AK细胞具有一定的靶细胞选择性。     

原发性卵巢癌患者CD3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为探讨ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞杀瘤作用的特异性及靶细胞选择性，对比观察了３例原发性卵巢癌患者ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞对卵巢癌细胞系和人早幼粒细胞白血病细胞系的杀伤活性。结果表明；ＬＡＫ细胞在培养第１－３周，各效靶比对ＨＬ６０的杀伤活性略高于对３ＡＯ的杀伤活性，但差异无显著性；ＣＤ３ＡＫ细胞在培养第１周，各效靶比对ＨＬ６０的钉伤活性均显著高于对３ＡＯ的杀伤活性，而培养第２，３，４周时，对ＨＬ６０     

妇科恶性肿瘤患者CD_3AK细胞和LAK细胞表型特征动态比较

CD3AK细胞和LAK细胞均为异质细胞群，为了比较妇科恶性肿瘤患者LAK细胞和CD3AK细胞在体外培养过程中的表型特征，采用间接免疫荧光法动态观察CD3AK细胞和LAK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率。结果表明：①培养第1周，CD3AK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率分别为61．36％，54．23％和52．96％，显著高于LAK细胞组（P＜0．01）；③培养第2，3周，CD3AK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋和CD_8~＋细胞率高于LAK细胞，但无统计学差异（P＞0．05）；③随着培养时间延长，CD3AK细胞CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率均不同程度下降，尤以CD_3~＋细胞率下降最快，而LAK细胞在培养第2周，CD_3~＋，CD_4~＋，CD_8~＋细胞率均有所升高，但第3周时又开始下降；④CD3AK细胞的CD_3~＋，CD_4~＋和CD_8~＋细胞率在培养第1周最高，而LAK细胞在培养第2周最高。提示：CD3MAb和IL－2激活CD3AK细胞和LAK细胞的途径不同，致使CD3AK细胞和LAK细胞向不同的表型特征分化。     

妇科肿瘤患者CD3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为比较ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞的杀瘤特性，观察发妇科肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞对卵巢癌细胞系的杀伤活性。结果表明；良性肿瘤组ＬＡＫ细胞杀瘤活性高峰在培养第１，２周，显著高于同期培养的ＣＤ３ＡＫ细胞，第３周则较低，而ＣＤ３ＡＫ细胞的杀瘤活性高峰在培养第３，４周，显著高于ＬＡＫ细胞；恶性肿瘤组，ＬＡＫ细胞杀瘤高峰在培养第１周，显著高于同期培养的ＣＤ３ＡＫ细胞，而ＣＤ３ＡＫ细胞杀瘤高峰在培养第     

妇科良、恶性肿瘤患者CD_3AK细胞和LAK细胞体外扩增能力比较

为探讨妇科良、恶性肿瘤患者CD3AK细胞的体外增殖能力，对其外周血淋巴细胞用CD3MAb＋IL－2诱导CD3AK细胞，体外动态观察CD3AK细胞增殖倍数，并与同期培养的LAK细胞进行对比。结果：①良性肿瘤组CD3AK细胞在培养第1周，增殖倍数高于恶性肿瘤组，但无显著性差异（P＞0．05），第2、3、4周，良、恶性肿瘤组CD3AK的增殖倍数较接近；②LAK细胞增殖倍数，在良性肿瘤组培养第1周时显著高于恶性肿瘤组（P＜0．05），培养第2、3周也高于恶性肿瘤组，但无统计学意义（P＞0．05）。结果提示：CD3AK细胞和LAK细胞短期培养时，不宜取材于恶性肿瘤患者。     

妇科肿瘤患者CD_3AK细胞对卵巢癌细胞杀伤活性动态观察

为探讨妇科良、恶性肿瘤患者CD3AK细胞体外对肿瘤细胞的杀伤活性，将5例妇科良性肿瘤，12例妇科恶性肿瘤患者的外周血单个核细胞制备成CD3AK细胞，用MTT法测定CD3AK细胞对卵巢癌细胞系（3AO）的杀伤活性，同时观察不同效靶比的杀瘤情况，每周测定1次，共4周。结果：①良性肿瘤组CD3AK细胞对3AO的杀伤活性随着效靶比的增大而增强，在培养第1、4周，效靶比为20：1和40：1的杀瘤活性明显高于10：1；动态观察其杀瘤活性，培养第2周最低，第3、4周则较强；②恶性肿瘤组CD3AK细胞杀瘤活性当效靶比为10：1时低于20：1和40：1；动态观察其杀瘤活性，培养第2、3周高于第1、4周；③良、恶性肿瘤相比，CD3AK细胞杀瘤活性于培养第2周恶性肿瘤组显著高于良性肿瘤组（10：1，20：1）（P＜0．05），培养第4周（20：1）良性肿瘤组又显著高于恶性肿瘤组（P＜0．05）。结果提示：良、恶性妇科肿瘤患者CD3AK细胞对肿瘤的杀伤活性并不相同，临床上应针对良、恶性肿瘤患者CD3AK细胞的各自特点，选择适宜的治疗时间。     

妇科恶性肿瘤患者CD_3AK细胞与LAK细胞体外增殖能力动态观察

采用CD3MAb＋IL－2联合刺激法制备了妇科恶性肿瘤患者CD3AK细胞，体外动态观察CD3AK细胞的形态特征及增殖能力，井与LAK细胞进行比较。结果显示：①CD3AK细胞与LAK细胞在体外分别经CD3MAb（0．5mg／L）＋IL－2（105U／L）和IL－2（106U／L）刺激后，细胞体积增大，继之变为不规则形；②CD3AK细胞培养第1周增殖倍数为2．89，至第4周增殖倍数达109．37倍，均显著高于同期培养的LAK细胞的增殖倍数；③CD3AK细胞体外存活时间为4～5周，而LAK细胞仅为2～3周。结果提示：CD3AK细胞制备简便，体外存活时间长，增殖能力强，可以为临床提供充足的过继免疫效应细胞。     

妇科良、恶性肿瘤患者CD_3AK细胞的表型特征

为了解妇科肿瘤患者CD3AK细胞的表型特征，并探讨来源于妇科良、恶性肿瘤患者CD3AK细胞表型特征的异同，采用间接免疫荧光法测定良、恶性妇科肿瘤患者CD3AK细胞的CD3，CD4，CD8阳性细胞率。结果表明：①妇科恶性肿瘤患者CD3AK细胞于培养第1，2周，CD3，CD4和CD8阳性细胞率均较高（40．25％～61．36％），培养第3周，CD3，CD4和CD8阳性细胞率均有不同程度下降，尤以CD_8~＋细胞下降明显（第1周为52．96％，第2周为40．24％，第3周为25．72％）；②妇科良性肿瘤患者CD3AK细胞CD3，CD4和CD8阳性细胞率在培养第1周均较高（39．86％～59．84％），培养第2，3周均有降低，以CD_4~＋细胞下降更明显（第1周为50．52％，第2周为41．91％，第3周为29．97％）；③妇科良、恶性肿瘤CD3AK细胞CD3，CD4，CD8细胞阳性率除培养第1周恶性肿瘤组CD8细胞阳性率显著高于良性肿瘤组外（P＜0．05），余均无显著性差异（P＞0．05）。结果提示：CD3AK细胞是一异质细胞群，不同来源或相同来源不同功能状态的CD3AK细胞在体外受到刺激后，不同亚群细胞可呈选择性增殖，从而表现出不同的表型特征。     

妇科肿瘤患者CD3AK细胞对卵巢癌细胞杀伤活性动态观察

为探讨妇科良，恶性肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞体外肿瘤细胞的杀伤活性，将５例妇科良性肿瘤，１２例妇科恶性肿瘤患者的外周血单个核细胞制备成ＣＤ３ＡＫ细胞，用ＭＴＴ法测定ＣＤ３ＡＫ细胞对卵巢癌细胞的杀伤活性，同时观察不同效靶比的杀瘤情况，每周测定１次，共４周。     

妇科恶性肿瘤患者CD3AK细胞和LAK细胞表型特征动态比较

ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞均为异质细胞群，为了比较妇科恶性肿瘤患者ＬＡＫ细胞和ＣＤ３ＡＫ细胞在体外培养过程中的表型特征，采用间接免疫荧光法动态观察ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞的ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＝４，ＣＤ＾＋８细胞率。     

正常鼠和免疫鼠CD3AK细胞和LAK细胞杀伤活性的比较研究

实验取正常鼠和Ｐ８１５肿瘤细胞致敏的免疫鼠脾细胞，经抗ＣＤ３抗体与低剂量ＩＬ－２或高剂量ＩＬ－２分别诱生为ＣＤ３ＡＫ细胞和ＬＡＫ细胞，用改良的乳酸脱氢酶释放法以Ｐ８１５细胞和ＹＡＣ－１细胞为靶细胞，测定ＣＤ３ＡＫ和ＬＡＫ细胞的杀伤活性。结果表明：正常鼠ＣＤ３ＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性高于ＬＡＫ细胞，对ＹＡＣ－１细胞的杀伤活性低于ＬＡＫ细胞。免疫鼠ＬＡＫ细胞对Ｐ８１５细胞的杀伤活性明显增高，高     

抗CD_3单克隆抗体激活的杀伤细胞的细胞化学研究

采用抗ＣＤ_３单克隆抗体和重组白细胞介素２共刺激外周血单个核细胞并经重组白细胞介素２扩增制备抗ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）。细胞化学研究表明５６．５％的ＣＤ３ＡＫ为酸性非特异性酯酶阳性淋巴细胞，糖原过碘酸雪夫反应阳性细胞和酸性磷酸酶阳性细胞较对照增多。     

CD3AK细胞诱导肿瘤细胞凋亡的形态学研究

目的 :在光学显微镜和电子显微镜下观察 CD3AK诱导肿瘤细胞凋亡的形态学变化。方法 :将 CD3AK细胞与人卵巢癌细胞株 A2 780 共育 2 4h,然后分别涂片和制成超薄切片观察肿瘤细胞形态学变化特点。结果 :在光镜下 ,可见 CD3AK细胞聚积于靶细胞周围 ,并粘附于靶细胞膜上 ,可见肿瘤细胞核固缩 ,细胞体积变小 ,细胞质均质红染 ;电镜下 ,可见凋亡的肿瘤细胞表面微绒毛消失 ,染色质沿皱缩的核膜下聚积成新月状 ,细胞质起泡等典型的形态学改变。结论 :CD3AK细胞可诱导肿瘤细胞凋亡。     

小鼠CD3AK的诱生与抗瘤活性的实验研究

采用固相抗小鼠ＣＤ３单抗和重组白细胞介素２刺激小鼠脾细胞以诱生抗ＣＤ３单抗激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）。结果表明这种方法诱生的ＣＤ３ＡＫ能够增殖并介导体外抗瘤活性。