内皮抑素及其对血管生成抑制作用的研究进展

目的 对内皮抑素的来源、表达、结构、作用机制以及其对血管生成的抑制作用研究进展作一综述.方法 对近几年的相关资料进行总结、归纳.结果与结论 国内外对于内皮抑素对各种肿瘤的抑制作用已有了大量的研究,经证实内皮抑素作为一类内源性血管生成抑制剂,对于各类肿瘤有较好的治疗作用,具有良好的应用前景.     

血管抑素抑制鼠视网膜微血管内皮细胞增生及视网膜新生血管形成的研究

目的　探讨血管抑素蛋白对体外培养的鼠视网膜微血管内皮细胞 (REC)生长的抑制作用及其抑制视网膜新生血管形成的效果。方法　从血浆中分离血管抑素。原代培养鼠视网膜微血管内皮细胞 ,四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法检测不同浓度的血管抑素对其生长的抑制作用。高浓度氧诱导C57BL/ 6J小鼠建立视网膜缺血性病变动物模型。将 30只小鼠分为 5组 :正常组 ;高氧对照组 ;实验Ⅰ组 (血管抑素浓度 15 0 μg/ μl) ;实验Ⅱ组 (血管抑素浓度 2 0 0 μg/ μl) ;实验Ⅲ组 (血管抑素浓度 30 0μg/ μl) ,计数各组小鼠视网膜新生血管内皮细胞核数 ,并加以比较。 结果　血管抑素在体外能显著抑制视网膜微血管内皮细胞增殖 ,其半数有效剂量 (ED50 )约为 130 μg/ml。吸入高氧的鼠不论是对照组还是血管抑素治疗组每只眼均可见突出内界膜的新生血管内皮细胞 ,发生率为 10 0 %。实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与高氧对照组相比小鼠视网膜新生血管细胞核数分别减少了 4 2 %、5 7%、82 %。结论　血管抑素在体外能有效地抑制视网膜微血管内皮细胞增殖。血管抑素能有效抑制高氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成     

内皮抑素在小鼠氧致血管增生性视网膜病变中的表达及意义

目的观察新生血管抑制因子内皮抑素(Endostatin,ES)在氧致血管增生性视网膜病变小鼠模型的视网膜中的表达,探讨内皮抑素在视网膜新生血管发生发展中的作用。方法建立氧致血管增生性视网膜病变小鼠模型,用正常同龄小鼠的视网膜作为对照,F ITC-dex tran视网膜造影整装铺片了解视网膜新生血管改变,计数突破内界膜的内皮细胞数反映视网膜血管增生情况,行内皮抑素和血管内皮生长因子(vascu lar endothe lia l grow thfactor,VEGF)免疫组织化学染色,比较内皮抑素和VEGF在氧致血管增生性视网膜病变和正常视网膜中的表达。结果F ITC-dex tran血管造影视网膜铺片发现高氧组12 d小鼠视网膜血管普遍变细、小血管闭塞,在后极部形成大片无灌注区,17 d小鼠视网膜迂曲、扩张,部分闭塞小血管开放,高氧组小鼠视网膜切片突破内界膜的血管内皮细胞平均数(22.13±5.44)个与正常对照组(1.11±1.43)个比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。视网膜免疫组织化学染色显示,ES和VEGF在正常小鼠的内核层细胞和神经节细胞中的细胞浆表达,高氧组视网膜组中二者的表达均有升高,VEGF升高较ES显著。结论内源性内皮抑素在氧致血管增生性视网膜病变中表达虽有增高,但不足以抑制VEGF刺激的视网膜新生血管发生,这可能为病理性视网膜新生血管产生的作用机理,增加内源性内皮抑素的表达有可能成为视网膜新生血管化的一种潜在的治疗措施。     

重组人血管内皮抑素对多发性骨髓瘤血管新生的影响

目的观察重组人血管内皮抑素注射液对人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）和多发性骨髓瘤细胞株KM3增殖、凋亡及共培养体系中血管生成的影响。方法观察不同浓度的内皮抑素对HUVEC和KM3细胞株的增殖抑制作用;检测有效浓度的内皮抑素对HUVEC和KM3细胞株的凋亡作用;建立HUVEC和KM3的隔离共培养和混合共培养体系,检测共培养体系中不同浓度的内皮抑素作用后对于HUVEC血管生成的影响;检测经内皮抑素作用后对混合共培养、隔离共培养上清中VEGF浓度的影响。结果不同浓度的内皮抑素持续作用72 h,对HUVEC具有抑制增殖作用,且在50-200 ng/ml的剂量范围内呈现浓度依赖关系,而对KM3细胞未见明显作用;有效浓度的内皮抑素（100、200 ng/ml）可诱导HUVEC凋亡,而对KM3未见明显作用;共培养体系中,内皮抑素可抑制HUVEC的管状结构形成;经不同浓度内皮抑素作用后,细胞培养上清中VEGF的分泌量减少。结论内皮抑素能抑制HU-VEC的增殖;诱导HUVEC的凋亡;通过血管内皮抑制骨髓瘤细胞的促血管新生作用;抑制VEGF的分泌可能是其作用机制之一。     

重组内皮抑素对碱烧伤诱导角膜新生血管抑制作用

目的 探讨重组内皮抑素对碱烧伤诱导兔角膜新生血管(CNV)的抑制作用.方法 新西兰大白兔20 只,随机分为两组,每组10只.采用碱烧伤法制备兔CNV 模型后,实验组球结膜下注射重组人内皮抑素0.05 mL,对照组球结膜下注射生理盐水0.05 mL,均隔日1 次,共注射19 d.每日裂隙灯显微镜下观察并测量自角膜缘长出的CNV长度和数量,并摄影,输入计算机经图像分析系统计算CNV面积.术后19 d处死动物,取角膜, CD34染色,显微镜下检测微血管密度(MVD).结果 实验组第7、14、19天CNV面积及MVD明显少于对照组,差异有显著性(t=4.191～8.003,P<0.01).结论 重组内皮抑素可有效抑制CNV生长,为临床防治CNV 提供了一种新的方法.     

重组内皮抑素对碱烧伤诱导角膜新生血管的抑制作用

目的:研究重组内皮抑素对碱烧伤诱导角膜新生血管(CNV)的抑制作用。方法:采用碱烧伤法诱导兔CNV形成。在碱烧伤后的第1天,分别在球结膜下注射50μg/ml重组内皮抑素和生理盐水各0.2ml,隔日1次,共8次,动态观察CNV的生长状况。利用免疫组化的方法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并在显微镜下进行微血管计数。结果:重组内皮抑素治疗组CNV的长度和面积、VEGF的表达及微血管数量均明显少于生理盐水对照组(P<0.05)。结论:重组内皮抑素可有效抑制CNV的生长,为临床上碱烧伤引起CNV的预防和治疗提供了新的方法。     

视网膜新生血管模型中CD105的表达

目的:通过高氧诱导C57BL/6J小鼠视网膜新生血管动物模型,观察CD105在视网膜新生血管中的表达.方法:取出生后7 d的C57BL/6J小鼠40只,随机分为正常对照组和高氧组,每组20只.采用高氧诱导视网膜新生血管建立动物模型,H-E染色观察小鼠视网膜新生血管的情况,免疫组化方法观察CD105在小鼠视网膜中的表达.结果:H-E染色结果表明,小鼠视网膜新生血管模型建立成功.高氧组小鼠CD105显著表达,积分光密度为(9 985.63±1 016.28)/鼠,阳性染色面积为(14 246.61±6 052.29) μm2/鼠,而正常对照组仅有微弱表达[积分光密度为(1 625.36±638.44)/鼠,阳性染色面积为(3 619.31±1 760.03) μm2/鼠],两组相比差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:CD105在视网膜新生血管形成中可能有一定作用,其检测对于视网膜新生血管的定性、定量评估及治疗具有一定临床意义.     

地塞米松抑制视网膜新生血管及血管内皮生长因子表达的实验研究

目的:研究地塞米松(Dexamethasone)在小鼠血管增生性视网膜病变中不同时期的给药效果,及其与血管内皮生长因子(VEGF)的相互作用。方法:将20只7 d龄C57BL/6J幼鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、早治疗组和晚治疗组。除对照组外,均建立高浓度氧气诱导的C57BL/6J幼鼠增殖性视网膜病变模型。后2组分别于出生后第7d和第12d起连续5d皮下注射地塞米松注射液(0.5mg/kg.d-1)。17d龄时取幼鼠双眼球作普通病理切片及免疫组化检测,分别检测视网膜新生血管芽内皮细胞核数目及VEGF的表达。结果:模型组视网膜新生血管芽内皮细胞核数目及VEGF的表达较正常对照组明显增加(P<0.01);早治疗组与晚治疗组的视网膜新生血管芽内皮细胞核数目和VEGF表达,较模型组均明显减少(P<0.01);早治疗组较晚治疗组也明显减少(P<0.01)。结论:在氧诱导的血管增生性视网膜病变模型中,地塞米松可以抑制视网膜新血管形成和VEGF的表达,而且病变早期应用地塞米松治疗效果明显优于晚期。     

重组分泌型内皮抑素抑制兔角膜新生血管形成的实验研究

目的:研究重组分泌型内皮抑素(endostatin)对兔角膜新生血管的抑制作用。方法:利用角膜缝线法诱导兔角膜新生血管形成。在缝线后第1天,将重组内皮抑素和生理盐水分别注射于兔球结膜下,观察角膜新生血管生长状况及组织病理学改变。结果:重组内皮抑素治疗组新生血管长度及生长面积明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);光镜下,治疗组与对照组比较,基质层新生血管少,管腔小,浆细胞及成纤维细胞少。结论:球结膜下注射重组内皮抑素可有效抑制兔角膜新生血管的形成,为临床上角膜新生血管的防治提供新的方法。     

血管内皮抑素研究进展

1971年Folkman提出了一个里程碑式的假说——血管生成假说,即实体肿瘤的生长和转移依赖新生血管的形成。阻断血管生成能够有效抑制肿瘤生长。这一假说后被多方验证并得到公认,使抗血管生成成为肿瘤治疗领域的一条新的途径和手段。血管内皮抑素（ES）的发现与血管抑素的发现基于同一个现象——“原位肿瘤可以抑制转移灶形成”现象,     

内皮抑素抑制脉络膜新生血管及VEGF和bFGF表达的研究

目的 研究内皮抑素对实验性脉络膜新生血管的抑制作用。方法 50只雄性BN大鼠，40只为实验组，10只为空白对照组。用半导体激光光凝实验组BN大鼠的视网膜，随机分为4组，内皮抑素Ⅱ组、内皮抑素Ⅰ组、生理盐水组和激光损伤组，每组10只；由光凝后当天开始，至光凝后13d，每天分别给予腹腔注射内皮抑素20mg／kg、10mg／kg和生理盐水1.2mL，激光损伤组光凝后不做任何处理。空白对照组为未行激光光凝和给药处理的BN大鼠。于光凝后第7天及第14天行眼底血管荧光素造影检查、组织病理学检查、VEGF免疫组化检测和bFGF mRNA的原住杂交检测。结果随着内皮抑素剂量增加，荧光素渗漏率和渗漏强度减弱；激光光凝后7d，内皮抑素Ⅱ组与其他组相比，渗漏强度的差异有显著性；光凝后14d，两个内皮抑素组与生理盐水组和激光损伤组比较，荧光素渗漏强度差异均有显著性；生理盐水组和激光损伤组差异无显著性。激光光凝后7dVEGF和bFGFmRNA表达达高峰，光凝后14d下降，内皮抑素组vEGF和bFGFmRNA表达较激光损伤组减弱，并呈剂量依赖性趋势。结论 内皮抑素可以有效地抑制实验性CNV的形成。下调VEGF和bFGF的表扶可能是肉皮抑素抑制CNV的作用机制之一．     

VEGF和内皮抑素对血管生成作用的研究进展

脑组织缺血、缺氧是创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)最常见的继发性损害,直接影响患者的预后.血管再生是创伤及缺血组织的病理生理反应,由血管再生因子和血管再生抑制因子共同参与调控.     

氧诱导视网膜新生血管模型鼠视网膜水通道蛋白1的表达

目的 研究氧诱导视网膜新生血管模型鼠视网膜组织中水通道蛋白1(AQP1)表达的变化.方法 高浓度氧诱导7 d龄C57BL/6J幼鼠,建立视网膜缺血型病变动物模型.采用免疫组化法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法观察氧诱导模型组(12、15和17 d)和正常对照组小鼠视网膜组织中AQP1的变化.结果 部分12 d小鼠和所有15 d及17 d的小鼠视网膜均有AQP1表达,且氧诱导模型组视网膜血管内皮细胞有AQP1表达;此外,17 d氧诱导模型组小鼠视网膜的AQP1表达明显高于正常对照组(AQP1 mRNA转录1.81±1.02 vs 1.15±0.01;AQP1蛋白1.82±0.05 vs 1.57±0.04).结论 AQP1可能参与视网膜新生血管的形成.     

内皮抑素对小鼠脉络膜新生血管抑制作用的信号通路分析

目的探讨内皮抑素对C57BL/6J小鼠脉络膜新生血管抑制作用的基因表达及作用机制。方法应用532 nm固体激光机,制造C57BL/6J小鼠脉络膜新生血管模型,分为空白组、对照组和实验组。其中空白组不做任何处理,对照组玻璃体腔内注射生理盐水2μL;实验组玻璃体腔内注射内皮抑素2μL(0.01 mg)。将对照组和实验组小鼠组织选取4个样本进行杂交及基因芯片检测。比较实验组和对照组基因表达的差异,选取其中表达差异大于1.5倍且P≤0.05的基因。结果免疫组织化学染色可见实验组新生血管表达明显低于对照组。实验组与对照组相比上调的基因有116个,下调的基因有106个。通过KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库对上述差异基因经行分析后发现,实验组与对照组相比下调处于前10位的通道有:细胞骨架激动蛋白的校准、白细胞穿越内皮细胞层、金黄色葡萄球菌感染、Fc epsilon RI信号通路、Fc gamma R信号调理吞噬作用、Toll样受体信号通路、2型糖尿病、子宫内膜癌、吞噬体、非小细胞肺癌;处于上调前几位的通道有:细胞外基质受体相互作用、叶酸的一碳单位、肥厚性心肌病、扩张型心肌病、组氨酸新陈代谢、黏着斑、心肌细胞收缩。结论由通道功能分析可以推测,内皮抑素可能通过抑制内皮细胞的活性及移行并协同抑制免疫系统,进而抑制新生血管的生成。     

内皮抑素和血管内皮生长因子在原发性肝癌中的表达及意义

【目的】探讨内皮抑素（Endostatin）和血管内皮生成因子（VEGF）在晚期原发性肝癌组织和正常肝脏组织中的表达及其意义。【方法】采用免疫组织化学染色SP法检测65例晚期原发性肝癌（36例肿瘤直径〉5cm，16例肿瘤直径2～5cm，13例肿瘤直径〈2cm；28例发现肝内转移，37例未发现肝内转移）和30例正常肝脏组织（对照组）中Endostatin和VEGF抗体的表达水平，并采用秩和检验和Χ^2检验方法分析结果差异性。【结果】各肿瘤组随肿瘤直径的增大，Endostatin和VEGF表达水平均出现递增的趋势。肝内转移组Endostatin和VEGF表达水平强于无肝内转移（P〈0．05）。【结论】VEGF有促进肝癌生长和侵袭转移作用，VEGF／En—dostatin随着肿瘤生长和转移而逐渐增大。     

内皮抑素及其抗血管生成作用

内皮抑素作为内源性抗血管生成物质,可特异性地作用于血管内皮细胞,特别是微血管的内皮细胞,抑制其迁移并诱导调亡,从而达到抑制血管生成[1-2].由于血管内皮细胞具有相对稳定性,不易产生耐药性,故内皮抑素在抗肿瘤新血管生成方面具有广阔的应用前景.本文就内皮抑素抗血管生成作用的相关问题进行综述.     

胃癌组织中血管内皮抑素及微血管密度测定

中图分类号R735.2摘要目的:探讨胃癌组织中血管内皮抑素(Endostatin)的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法:采用免疫组化法检测65例胃癌、20例癌旁正常组织Endostatin蛋白的表达,应用抗CD34单抗标记血管内皮细胞,测定肿瘤间质微血管密度(MVD)。结果:胃癌组织Endostatin阳性表达率(61.54%,40/65)高于癌旁正常组织的20.00%(4/20)(P<0.01);Endostatin阳性表达组的MVD值(22.80±10.82)低于Endostatin阴性表达组(29.84±9.28,P<0.01);随着Endostatin表达程度加强,MVD值减少。Endostatin表达与胃癌浸润深度、TNM分期及淋巴结有无转移有关。结论:Endostatin在抑制胃癌血管生成中可能起一定作用。     

重组内皮抑素抑制兔角膜新生血管的实验研究

目的:探讨重组内皮抑素(Endostatin)对碱烧伤诱导的兔角膜新生血管(corneal neovasculariza-tion,CNV)的抑制作用。方法:选取新西兰大白兔18只,采用碱烧伤法制备兔CNV模型,随机分为3组,每组6只12眼。2个实验组分别以10μg/ml和50μg/ml重组内皮抑素点眼,对照组用生理盐水点眼。定期摄相,采用计算机图像分析系统比较CNV生长面积。结果:与对照组相比,2个实验组自第7 d开始CNV平均生长面积明显减少(P<0.05),经角膜组织病理学检查,新生血管明显稀少,但炎性细胞成分及浸润程度与对照组相似。结论:10、50μg/ml重组内皮抑素具有明显抑制角膜新生血管生长的作用,无毒副作用,为临床防治CNV提供了一种新的途径。     

红景天的促血管生成活性及其对内皮抑素表达的影响

促血管生成过程中血管内皮生长因子(VEGF)被认为是最重要的正向调节因子,但Matsunaga等发现,冠状动脉的血管新生和侧枝循环形成与VEGF的表达水平并不完全一致,其他细胞因子特别是抑制因子也起重要作     

环氧合酶2和血管内皮生长因子在视网膜新生血管中的表达及意义

目的:探讨环氧合酶2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在视网膜新生血管中的表达和意义.方法:以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立视网膜新生血管模型.取对照组和给氧组幼鼠眼球作荧光素血管灌注,病理切片及免疫组织化学检测观察视网膜血管的改变、视网膜新生血管内皮细胞数及COX-2、VEGF蛋白的表达.结果:给氧组视网膜大量新生血管形成,新生血管内皮细胞核教为(23.38±1.07)个,与对照组相比差异极显著(P＜0.01).COX-2蛋白及VEGF蛋白在内核层、神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管中表达.两者表达明显相关(r=0.845,P＜0.01).结论:COX-2、VEGF共同促进视网膜新生血管的形成.