老年大鼠脑M受体亚型的变化及知母的调整作用

用M_1受体选择性拮抗剂PZ对~3H—QNB与青年大鼠脑受体结合的竞争抑制实验,通过双位点数学模型求出M_1、M_2两种亚型受体的RT及K1值,均与文献值相近。对老年大鼠的平行实验表明,老年组脑内高亲和力受体(M_1)数明显降低,但亲和力不变;低亲和力受体(主要为M_2)数量及亲和力均无明显变化。连续口服知母水提物3～4个月的老年大鼠与配对的对照老年大鼠相比,表明知母能明显提高高亲和力受体的数量,但不影响其亲和力;知母对低亲和力受体数量及亲和力均无明显影响。     

补肝温胆方对老年痴呆模型小鼠学习记忆及海马M受体亚型的影响

本文旨在寻找改善老年痴呆的有效药物,对中药补肝温胆方对铝中毒老年痴呆小鼠学习记忆及海马M受体亚型的影响进行实验观察。结果表明补肝温胆方可显著提高模型小鼠的学习记忆能力。造模小鼠海马M_1和M_2受体含量显著降低,补肝温胆方可明显增加模型小鼠海马M_1受体亚型含量,且呈现明显量效关系。对M_2受体无明显影响。由此提示选择性地激活海马M_1受体亚型可能是补肝温胆方对老年痴呆模型小鼠学习记忆改善作用的机理之一。     

脑尔康对老年痴呆小鼠学习记忆障碍及脑M受体的影响

目的:通过慢性铝中毒造成老年痴呆小鼠模型。观察复方中药脑尔康对小鼠学习记忆障碍的保护作用,探讨其对M受体含量的影响。方法:以跳台法进行学习训练,并记录潜伏期时间及错误次数。24小时后再测记忆成绩,行为测试结束后,动物迅速断头取脑,冰台分离海马及皮层,用ELISA法检测各自的M受体亚型含量。结果:模型组记忆潜伏期明显缩短(p<0.01),学习潜伏期明显延长(p<0.01),学习和记忆的错误次数明显增多(p<0.01),用药组记忆潜伏期均明显延长(p<0.01),学习潜伏期明显缩短(p<0.05或p<0.01),学习和记忆错误次数脑尔康三个剂量组亦明显减少(p<0.05),脑复康组记忆错误次数无明显差异(p>0.05);用药各组除小剂量组外均有提高模型小鼠皮层与海马M_1受体亚型含量的作用(p<0.05或p<0.01),但对M_2受体亚型含量皮层、海马均无显著性差异。结论:1.脑尔康对氯化铝所致小鼠学习记忆障碍具有保护作用。2.脑尔康能明显提高老年痴呆模型小鼠皮层及海马M_1受体含量。     

大明胶囊对高脂血症大鼠心肌M受体各亚型mRNA表达的影响

目的通过检测M受体各亚型在心肌上的mRNA表达量,研究大明胶囊对高脂血症大鼠降血脂作用的分子机制。方法制备高脂血症大鼠模型,尾静脉取血测血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)等血脂指标;Trizol法提取心肌总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定M2、M3、M4、M54种M受体亚型mRNA的表达,观察其在高脂、正常和给药3种条件下的差异。结果高脂血症时血清中的TC、TG、LDL、FFA及MDA水平升高(P<0.05),HDL与SOD降低(P<0.05),经大明胶囊治疗后TC、TG、LDL、FFA及MDA水平降低(P<0.05),HDL与SOD水平上调(P<0.05)至近正常水平;比较高脂模型组与正常组M受体各亚型mRNA表达,结果M2、M4、M5受体亚型表达减弱,M3受体亚型表达增强,差别有统计学意义(P<0.05)。给大明胶囊后与高脂模型组比较M3受体亚型mRNA表达增强,M2受体亚型表达减弱,且具有显著差异(P<0.05),M4、M5受体亚型mRNA表达无显著差异(P>0.05)。结论高脂血症大鼠模型建立成功,大明胶囊具有降血脂作用,并且M3受体的水平上调是大明胶囊降血脂作用的分子机制之一。     

天泰Ⅰ号对老年痴呆模型的益智作用及机理探讨

对老年小鼠以AlCl_3复制老年痴呆模型,以特异性M_1和M_2受体亚型抗体检测模型小鼠海马M_1和M_2受体含量,观察天泰Ⅰ号对模型小鼠的作用效果。结果表明,模型小鼠海马M_1和M_2含量显著降低,天泰Ⅰ号可显著提高模型小鼠的学习记忆能力,并显著增加其海马M_1受体亚型的含量,但对M_2无明显影响。     

黄芪对老年大鼠脑M受体,心肌β受体等的调节作用

为探讨温阳益气药的抗衰老机制,本文主要观察了老年大鼠脑M受体、心肌β受体、血浆环核苷酸、LPO、SOD、T_3、T_4皮质醇的改变以及黄芪的调节作用,分别用放射自显影方法、放射配基结合分析法、放射免疫分析法测定脑M胆碱受体、心肌β受体、血浆环核苷酸。结果表明:M受体包括M_1亚型受体主要分布在大脑皮质、海马、纹状体部位,老年大鼠这三个部位的密度显著低于青年大鼠,老年服黄芪组三个部位的受体密度显著高于老年对照组;老年大鼠心肌β受体最大结合容量Bmax显著低于青年大鼠,黄芪可以显著提高老年大鼠心肌β受体Bmax;老年大鼠cAMP,cGMP含量均显著升高,但cAMP/cGMP比值降低,黄芪可以纠正这种失衡。另外,老年大鼠血浆SOD活力降低,LPO含量升高,甲状腺激素T_3,T_4和皮质醇含量均显著降低,黄芪对这些改变均具有调节作用。说明:黄芪抗衰老的作用是多方面的,是针对多个系统的综合性调节。     

老年大鼠脑M受体的变化及不同类型补益中药的影响

本文报道以Wistar雄性衰老早期(21—26月龄)及晚期(30—32月龄)大鼠为对象,用~3H—QNB为配基的受体放射配基结合分析法配对实验观察了衰老时脑M受体的变化。结果表明,衰老早期脑M受体已明显减少(早期减少7.5％,n=45对,晚期减少10.7％,n=14对)。哀老模型长期(6个月以上)小量饮服几种不同类型的补益中药(生地知母合剂,首乌,黄芪,附子肉桂合剂,仙灵脾肉苁蓉合剂),结果发现衰老早期生知显效,晚期黄芪显效。     

首乌制剂对老年大鼠脑胆碱能M受体的作用研究

本实验观察了中药首乌制剂对老年大鼠脑皮层和海马内胆碱能M受体结合容量（Rt）的影响，结果表明，老年大鼠脑皮层和海马内胆碱能M受体Rt值随增龄而明显下降，首乌醇提浸膏和水提浸膏（2g/kg天）可明显增强老年大鼠脑皮层和海马内胆碱能M受体Rt值，由此推测：首乌制剂具有延缓脑内胆碱能神经系统老化作用。     

王贝母生物碱ebeinone与两种毒蕈碱类乙酰胆碱受体亚型的相互作用

ebeinone系从王贝母(Fritillaria imperialis)中分离的生物碱,具甾体样结构。已知ebeinone为一种毒蕈碱类受体拮抗剂,为筛选对受体亚型有特异拮抗作用的有效药物。作者研究了该化合物对不同动物、不同器官受体的作用。结果:①在功能性研究中,ebeinone能拮抗氯化氨甲酰胆碱反应,其对豚鼠左心房心肌M_2受体的作用强度比回肠和气管平滑肌M-3受体高10倍,离散常数K_B分别为77.3、931.1和547.0nM。②ebeinone非选择性地拮抗~3H-N—甲基东莨菪碱与大鼠动脉匀浆的结合,K_1为80.9nM。另一甾体样结构物质双哌雄双酯对毒蕈碱类M_2受体的K_B值与ebeinone相似,经比较发现,两种物质均能延迟~3H-N-甲基东莨菪碱在主动脉的离散率,表明对M_2受体存在变构样相互作     

补肾中药对老年大鼠脑和脾脏中乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰化转移酶活性及胆碱能M-受体功能的影响

目的:通过测定脑和脾脏中乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰化转移酶(ChAT)活性和 M-受体结合容量(Rt)等指标,探讨补肾中药延缓脑功能衰老的机理。方法:用微量酶底物比色法测定 AchE 活性,放射酶分析法测定 ChAT 活性以及用放射性标记配基受体结合方法测定 M 受体结合容量。结果:老年大鼠脑和脾脏中 AchE 活性比青年对照组显著升高,ChAT 活性明显降低,M-受体 Rt值也显著降低。SRBC 免疫后,脑和脾脏中 AchE 活性较未免疫的老年大鼠更高,ChAT 活性降低,表明外来抗原产生的免疫应答可通过增加 AchE 活性及降低 ChAT 活性而降低 Ach 含量。补肾中药可抑制未免疫和 SRBC 免疫后老年大鼠脑和脾脏中 AchE 活性,增加 ChAT 活性,增加 M-受体 Rt 值,改善脑的记忆功能。结论:补肾中药可以通过调节 Ach 的合成和分解酶活性以增加脑和脾脏组织中 Ach 含量,提高 M 受体 Rt 值,从而提高老年大鼠脑记忆功能。     

电针对吗啡成瘾大鼠中枢多巴胺受体的影响

目的观察吗啡成瘾大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)、前额皮层(PFC)内多巴胺(DA)受体变化及电针的调节作用。方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和电针组,每组10只。采用吗啡自身给药成瘾大鼠模型,电针组选取双侧T5、L2夹脊穴,电针连续治疗4 d。Western Blotting法观察各组大鼠脑VTA、NAc、PFC内D1、D2受体含量的变化。结果治疗后,相对于模型组,电针组大鼠的吗啡摄入量明显减少(P0.05)。模型组大鼠脑VTA内多巴胺D2受体减少(P0.05);NAc内多巴胺D1受体增加(P0.05),D2受体减少(P0.05);PFC内多巴胺D1受体减少(P0.05),D2受体增加(P0.05)。电针治疗能调节上述脑区发生变化的D1、D2受体含量,使之趋于正常。结论电针治疗可以在一定程度上抑制成瘾大鼠对吗啡的渴求;吗啡成瘾后多巴胺投射通路中的多巴胺受体发生了一定程度的适应性改变,电针治疗可以调节DA受体的异常表达,对吗啡成瘾大鼠的多巴胺受体起到保护作用。     

固真方对老年大鼠胸腺三碘甲状腺原氨酸(T_3)受体、Na~ -K~ -ATP酶等作用的研究

本研究观察了补肾益精方药固真方对老年大鼠胸腺重/体重比值,老年大鼠胸腺细胞三碘甲状腺原氨酸(T_3)受体数、Na~ -K~ -ATP酶活性以及下丘脑、血浆亮氨酸脑啡肽(L-EK)含量的影响。结果表明:老年大鼠胸腺重/体重比值,胸腺细胞T_3受体数、Na~ -K~ -ATP酶活性以及血浆亮氨酸脑啡肽(L-EK)含量均明显低于青年对照鼠,下丘脑L-EK含量则显著高于青年对照鼠,而固真方能明显改善老年大鼠胸腺三碘甲状腺原氨酸(T_3)受体、Na~ -K~ -ATP酶活性的改变,提示固真方可能通过增加老年大鼠降低的胸腺细胞T_3受体数和提高胸腺摄取T_3的功能,从而增强甲状腺激素(T_3)对胸腺的促进作用,提高老年机体胸腺依赖性免疫功能。     

益气助阳芪茸合剂及其单味药对老年小鼠腹腔巨噬细胞Fc、C_3b受体的作用

老年小鼠腹腔巨噬细胞Fc及C_3b受体活性降低,益气助阳药芪茸合剂及其单味药黄芪、鹿茸可显著提高这两种受体的活性并超过青年对照组水平。对青年小鼠除黄芪具有提高作用外,芪茸合剂及鹿茸均无显著作用。结果说明(1)老年小鼠可能气阳两虚,腹腔Mφ受体活性降低可能是衰老特征之一,益气助阳参茸合剂有利于恢复免疫衰老;(2)青年小鼠正气基本不虚,对益气助阳方药可无明显反应;(3)益气助阳方药对青年或老年小鼠腹腔Mφ受体(Fc、C_3b)无特异的选择作用。     

知母甙元ZMS对老龄大鼠学习、记忆的影响

雄性SD大鼠，10～20月龄时起在饲料中加一定量知母中提取的皂甙元ZMS．到23～24月龄时用三臂等长Y型迷宫作实验，发现其学习和记忆能力明显高于饲料中不加ZMS的平行对照老年大鼠。用放射配基结合法和免疫沉淀法测定两组动物脑M受体密度。ZMS组M1受体密度显著高于对照组．联系M胆碱系统在学习记忆等脑功能中的重要作用，对ZMS上述两方面作用的相互关系进行了讨论。还联系朱丹溪关于衰老时“阳有余而阴不足”的学说．对知母的滋阴作用和抗衰老作用进行了讨论。     

黄芪对老年大鼠脑M受体及血浆环核苷酸的调节作用

M胆碱受体和大脑高级神经活动有密切关系,研究发现,自然衰老动物脑内M胆碱受体数目降低,尤以M_1亚型受体下降较为突出,一些抗衰老的中药可以阻止和延缓这种变化的发生。 环核苷酸(cAMP、cGMP)作为第二信使参与一系列生理生化反应,机体的健康状态有赖于体内cAMP、cGMP保持一定比例关系和相对平衡。     

知母皂甙对衰老大鼠促智作用机制的研究

目的 :研究知母皂甙 (SAa B)对衰老大鼠脑乙酰胆碱受体的影响。方法 :采用放射受体配体结合实验测定大鼠脑皮层 M,N受体的密度及亲和力。结果 :与正常成年大鼠比较 ,衰老大鼠大脑皮层 M受体的密度和亲和力无明显变化 ,而脑 N受体无的密度显著减少 ;SAa B能剂量依赖性地增加衰老大鼠脑 N受体的数目 ,对 M受体无明显影响。结论 :SAa B对衰老大鼠脑 N受体有上调作用。     

四慧合剂对疲劳模型大鼠学习记忆及海马NMDA受体亚基NR2A、NR2B及EphB2受体表达的影响

目的 研究疲劳模型大鼠学习记忆及海马N-甲基-D-天冬氨酸 (N-methyl D-aspartate, NMDA)受体NR2A 、NR2B亚基及EphB2受体表达的变化,并观察四逆散、生慧汤、四慧合剂对其影响。     

莨菪烷衍生物的合成及其活性研究

目的 设计、合成并筛选具有胆碱能活性,且对M1受体有选择性的莨菪烷衍生物。方法以3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷为原料,通过酰化反应制备3α-烃氧基乙酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷类衍生物,通过核磁共振及质谱鉴定所合成的化合物。运用豚鼠离体回肠纵肌M受体动力学实验方法以及人源M1,M2受体亚型基因转染的CHO细胞系放射配基受体结合法,对合成的化合物进行活性筛选。结果制备了6个新的3α-烃氧基乙酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷a-f。化合物d,e对M受体有良好的亲和力及内在活性,并对M1受体具有亚型选择性。结论化合物d,e为具有M1受体亚型选择性的胆碱能活性化合物。     

茛菪烷衍生物的合成及其活性研究

目的 设计、合成并筛选具有胆碱能活性,且对M1受体有选择性的莨菪烷衍生物.方法 以3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷为原料,通过酰化反应制备3α-烃氧基乙酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷类衍生物,通过核磁共振及质谱鉴定所合成的化合物.运用豚鼠离体回肠纵肌M受体动力学实验方法以及人源M1,M2受体亚型基因转染的CHO细胞系放射配基受体结合法,对合成的化合物进行活性筛选.结果 制备了6个新的3α-烃氧基乙酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷a～f.化合物d,e对M受体有良好的亲和力及内在活性,并对M1受体具有亚型选择性.结论 化合物d,e为具有M1受体亚型选择性的胆碱能活性化合物.     

补肾益气方药对老年大鼠空间学习记忆能力及相关蛋白表达的影响

目的观察补肾方药(左归丸)、益气方药(益气聪明汤)及两方合用(合剂)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)、空间学习记忆能力及突触蛋白I(Synapsin-I)表达变化的影响。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年左归组、老年益气组、老年合剂组和老年皮质酮(GC)拮抗组,另设青年对照组(同品系5月龄SD雄性大鼠)。采用ELISA法检测大鼠血清皮质酮含量,Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,电生理方法记录各组大鼠在体LTP变化,Western blotting法检测各组大鼠海马组织Synapsin-I表达变化,同时观察左归丸、益气聪明汤及合剂对上述指标异常变化的改善作用。结果与青年对照组相比,老年对照组大鼠的血清皮质酮含量明显升高(P0.05),空间学习记忆能力显著下降,海马CA1区LTP明显受到抑制(P0.05),Synapsin-I表达明显降低(P0.05);左归丸、益气聪明汤及合剂均能不同程度改善上述指标的异常变化,但合剂对Synapsin-I表达量变化的影响无统计学意义。结论补肾方药左归丸、益气方药益气聪明汤可增加老年大鼠突触可塑性(LTP)和Synapsin-I蛋白表达,进而改善老年大鼠空间学习记忆能力,可能与拮抗高皮质酮对老年大鼠海马神经细胞结构与功能的损伤有关。