食管癌组织芯片p53、p16和环氧合酶-2表达的研究

目的食管癌的发生发展是多步骤、多基因变化的演化过程，本研究利用高通量的组织芯片技术，对食管癌组织及癌旁组织的p53、p16和环氧合酶（COX）-2蛋白异常表达进行分析，探讨其相关性及临床意义。方法利用组织芯片技术结合免疫组化法检测86例食管癌组织、40例癌旁组织中p53、p16、COX-2蛋白的表达。结果食管癌组织中p53、COX-2的阳性表达率均显著高于癌旁组织（P〈0．05）。食管癌组织中p16阳性表达率为5．81％，癌旁组织中没有发现p16蛋白表达，差异无统计学意义。p53与p16、p53与COX-2、p16与COX-2蛋白表达均存在差异（P〈0.05）。p53或COX-2表达阳性时组织芯片病理类型为癌性的概率增加，但p16、p53和COX-2三者不存在交互作用。结论p53、COX-2对预测和早期诊断食管癌具有重要意义。     

CD44V3、CD44V6和Ki-67在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨乳腺癌组织中CD44V3、CD44V6和Ki-67的表达及其与乳腺癌生物学行为的关系.方法 采用组织芯片技术结合免疫组化法检测60例乳腺浸润性导管癌和20例正常乳腺组织中的CD44V3、CD44V6和Ki-67的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果 乳腺癌组织中CD44V3、CD44V6和Ki-67的阳性表达率分别为41.7%、58.3%和68.3%,明显高于正常乳腺组织(P均＜0.05).乳腺癌组织中CD44V6和Ki-67的表达与乳腺癌组织病理分级、淋巴结转移有关(P＜0.05),同时CD44V6的表达与肿瘤的远处转移与否也有关(P＜0.05).乳腺癌组织中CD44V6与Ki-67的表达成正相关(r=0.587,P＜0.01).结论 CD44V6和Ki-67与乳腺癌的恶性生物学行为密切相关,可作为预测乳腺癌转移潜能的指标.     

胃癌组织中COX-2、CD44v6和MMP-9蛋白表达及意义

目的探讨胃癌组织中环氧化酶-2（COX-2）、CD44v6和MMP-9蛋白表达在胃癌发生、发展过程中的作用。方法采用免疫组化Envision法检测104例胃癌患者癌组织中COX-2、CD44v6和MMP-9蛋白表达,并与28份健康胃黏膜组织比较。结果胃癌组织中COX-2、CD44v6、MMP-9蛋白阳性表达率分别为57．7％（60／104）、59．6％（62／104）和63．5％（66／104）,正常胃组织中均呈低表达或不表达,两者有显著性差异（P〈0．001）;三者表达均与肿瘤浸润深度、临床分期及淋巴结转移呈明显正相关（P〈0．05）,而与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无明显相关性;COX-2表达与CD44v6和MMP-9表达呈明显正相关。结论COX-2、CD44v6和MMP-9的过表达可促进胃癌的浸润、转移,三者具有正协同作用;COX-2、CD44v6和MMP-9联合检测可用于判断胃癌生物学行为。     

子宫内膜腺癌组织中CD147、MMP-2的表达变化及意义

目的观察子宫内膜腺癌组织中CD147、基质金属蛋白酶2（MMP2）的表达变化，并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测53例子宫内膜腺癌（A组）、35例子宫内膜增殖症（B组）及19例增生期子宫内膜（C组）组织中的CD147、MMP-2蛋白。结果A组CD147、MMP2蛋白阳性表达44、49例，B组分别为16、20例，C组分别为7、9例；各组间比较，P均〈0．05。CD147蛋白表达与子宫内膜癌组织分级有关（P〈0．05）。子宫内膜腺癌组织中CD147和MMP2蛋白表达呈正相关（r=0．441，P〈0．01）。结论子宫内膜腺癌组织中CD147、MMP2的表达增高，二者在子宫内膜腺癌的发展恶化、侵袭和转移中发挥重要作用。     

应用组织芯片研究凋亡抑制基因Survivin在胃癌中的表达

目的　检测Survivin和CD44v6在胃癌中的表达,以探讨二者在胃癌中表达的相关性及其与预后的关系。方法　利用组织芯片技术构建胃癌组织芯片,应用免疫组织化学S P法检测Survivin和CD44v6蛋白在胃癌中的表达。结果　胃癌中Survivin及CD44v6的总表达率分别为 58 6% (58 /99)和 35 4% (35 /99)。Survivin在早期胃癌中的表达显著高于进展期胃癌 (P<0 05 ),与胃癌的其它临床病理特征无相关性。CD44v6阳性表达与胃癌生长方式(P<0 001)、浸润深度 (P<0 05 )及淋巴结转移 (P<0 001 )密切相关。Sur vivin和CD44v6在胃癌中的表达无相关性(r=-0 065,P>0 05)。Survivin与胃癌患者的生存率无显著相关,而CD44v6表达阳性组 5年生存率(16 13% )显著低于CD44v6表达阴性组 5年生存率(60 67% ) (P<0 001 )。结论　Survivin和CD44v6在胃癌中均有过量表达。Survivin可能参与胃癌发生、发展的早期过程;而CD44v6阳性表达与胃癌的浸润和转移密切相关,同时可以提示胃癌的不良预后。     

CD44在直肠癌、癌近旁组织的表达及临床意义

应用流式细胞技术对52例直肠癌组织、肿瘤近旁组织和正常组织进行CD“检测分析。结果：CDu在肿瘤组织中阳性率92．3％．在肿瘤组织近旁组织中阳性率为53．85%；CD44在肿瘤近旁组织中的检出率明显低于肿瘤组织(P＜O．01)，CD44在肿瘤近旁组织中的不同区段内的检出阳性结果不同，在距肿瘤0．5cm区间内为59．62％，在0．6-1．5cm区间内为21．16%，在1．6-3．0cm区间为9．62%．各组间比较差异显(P＜0．01)．提示：CD44可作为大肠肿瘤诊断和鉴别诊断的客观指标以及诊断癌前病变的参考指标。且CD44可作为低位直肠癌远端切除范围的参考指标。     

CD44s和CD44v6在肺癌组织中的表达及意义

采用免疫组化法检测107例肺癌组织中标准型CD44（CD44s）和变异型CD44（CD44v）6的表达,结果，17例小细胞肺癌（SCLC）中，CD44v6和CD44s均无表达;非小细胞肺癌（NSCLC）中，CD44v6和CD44s在鳞癌中的阳性表达率（81．0％和83．3％）均高于腺癌（39．6％和54．2％），P均〈0．05;无淋巴结转移的NSCLC中，CD44v6阳性表达率（34．0％）低于CD44s（78．0％）。P〈0．05；有淋巴结转移的NSCLC中．CD44v6阳性表达率（90．0％）高于CD44s（55．0％），P〈0．05。NSCLC的CD44v6和CD44s表达与其病理类型、临床分期、肿瘤分级及淋巴结转移均有关（P均〈0．05）。认为CD44v6和CD44s可以作为鉴别SCLC与NSCLC及判断肺癌病理类型、临床分期、肿瘤分级及淋巴结转移的参考指标。     

泛素、Skp2、p27在大肠癌组织中的表达及意义

采用组织芯片技术制作80例大肠癌癌组织芯片。S-P免疫组织化学方法检测芯片中泛素、S期激酶相关蛋白2（Skp2）和p27表达。结果泛素表达阳性率为45．0％，Skp2阳性率为47．5％，p27阳性率为38．8％，不同组织学类型大肠癌中泛素、skp2、p27的表达未见明显差异（P〉0．05）；有淋巴结转移者Skp2阳性率显著高于无淋巴结转移者（P〈0．01），p27阳性率显著低于无淋巴结转移者（P〈0．01）。提示Skp2高表达和p27低表达与大肠癌的进展相关，Skp2和p27的表达可以作为评估大肠癌预后的参考指标；泛素和Skp2在p27的表达调控中起重要作用；应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的，具有快速、方便、经济、准确的特点。     

应用组织芯片检测原发性肝细胞癌中Hedgehog信号通路的表达

目的：了解Hh通路在HCC的表达情况。方法：将44例原发性肝细胞癌组织及其相应的癌旁肝组织制成含88个微组织的组织芯片，采用免疫组织化学方法分别检测了Hh信号通路中Shh、Ihh、Ptch-1和Gli-2在两种组织中的表达情况，并分析其与HCC临床病理组织学的相关性。结果：在HCC组织中Shh、Ptch-1和Gli-2表达阳性率分别为63．6％、45．5％和68．2％，高于癌旁肝组织（P〈0．05）。在不同分化组和转移组中，Gli-2的阳性表达率差异具有显著性（P〈0．05）。结论：组织芯片技术可高效、平行地进行肿瘤分子病理研究；Hh信号通路的过度激活参与了HCC的发生，可能成为HCC治疗的潜在新靶标。     

组织芯片技术及其在肺癌研究中的应用进展

随着人类基因组计划（human genome project，HGP）的完成，人类基因组研究的重心逐渐进入后基因组时代（postgenome Era），即向基因的功能及基因多样性倾斜。基因芯片（gene microarray）、蛋白质芯片（protein microarray）的广泛应用，发现了大量新的功能基因和蛋白质，但对其功能的进一步确定，须回到组织学的水平，与形态学结构联系起来，需要经过组织形态的研究予以确认和支持，在这样的背景下一种新的生物芯片-组织芯片（tissue microarray，TMA）应运而生。TMA又称组织微阵列，是将数十个、数百个乃至上千个小的组织标本按研究需要整齐地排列在某一载体上（通常是载玻片）所形成的微缩组织切片。组织芯片与基因芯片、蛋白质芯片一起构成了生物芯片系列，被誉为医学、生物学领域的一次革命。     

采用组织芯片技术检测胃癌组织中泛素、S相激酶相关蛋白2、p27的表达

组织芯片应用范围涵括了整个生命科学中各个基础研究、临床研究、应用研究以及药物开发的相关领域，具有广阔的发展前景。我们采用组织芯片技术制作了60例胃癌的组织芯片，并用免疫组织化学技术进行泛素(Ubiquitin)、S期激酶相关蛋白2(Skp2)、p27的检测，探讨胃癌组织中泛素、Skp2和p27表达的意义。     

CD44v17在胃癌组织中的表达及其与临床生物学特性之间的关系

目的 探讨一种新的CD44变异体（CD44v17）在胃癌组织中的表达及其与临床生物学特性之间的关系.方法根据本实验室在MCF-7／Adr中新发现的1种CD44剪切拼接变异体CD44v17设计特异性引物,应用SYBR Green I荧光染料,采用实时PCR法检测87例胃癌组织及相应癌旁组织CD44v17 Mrna的表达,根据标准曲线计算CD44v17mRNA的表达量,分析CD44v17mRNA表达与胃癌临床生物学特性之间的关系.结果胃癌组织CD44v17 Mrna表达明显高于相应癌旁正常组织（P〈0.05）;肿瘤〉5 cm组CD44v17 Mrna表达与肿瘤≤5 cm组表达比较差异无显著性（P〉0.05）;未分化腺癌组表达明显高于乳头状腺癌及管状腺癌组（P〈0.05）,乳头状腺癌组CD44v17 Mrna表达与管状腺癌组比较差异无显著性（P〉0.05）;肿瘤累及浆膜及浆膜外组CD44v17 Mrna表达显著高于侵及黏膜、黏膜下层及肌层组（P〈0.05）,而肿瘤侵及黏膜及黏膜下层组的CD44v17 Mrna表达与侵犯肌层组表达比较差异无显著性（P〉0.05）.淋巴结转移组CD44v17 Mrna表达明显高于淋巴结无转移组（P〈0.05）;有肝脏转移组CD44v17 Mrna表达显著高于无肝脏转移组（P〈0.05）.结论CD44v17 Mrna在胃癌组织中高表达,可能与胃癌的侵袭、转移及预后有关.     

CD44在糖尿病肾病中的表达及意义

根据尿白蛋白排泄率（UAER），将60例2型糖尿病（T2DM）患者分为三组，即正常白蛋白尿组（A组）、微量白蛋白尿组（B组）、临床白蛋白尿组（C组）。应用流式细胞免疫学方法测定三组患者和健康对照者（对照组）外周血中CD44阳性细胞数，并将CD44表达与其空腹血糖，糖化血红蛋白、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、UAER、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）水平进行相关性分析。结果显示，T2DM患者的外周血CD44阳性细胞率均显著高于对照组（P〈0．01），B、C组高于A组（P〈0．01）。T2DM患者尿NAG均高于对照组．但A、B、C组间无统计学差异（P〉0．05）。CD44表达与尿NAG呈正相关（P〈0．01），与其他指标无相关性。提示外周血CD44可作为监测糖尿病肾病（DN）病情变化的指标之一，NAG与CD44在DN病变过程中可能有协同性。     

CD44v6在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨CD44v6蛋白表达与胰腺癌增殖及淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组织化学（S－P）法检测38例胰腺癌组织标本中CD44v6和PCNA的表达。结果：CD44v6在胰腺癌中的阳性率为65％（25／38），与淋巴结转移呈非常显相关（P＜0．01），与胰分化程度无关（P＞0．05）。CD44v6阳性染色胰腺组织中PCNA标记率较阴性高（P＜0．05）。结论：CD44v6在胰腺癌的增殖，转移过程中可能起重要作用，可作为胰腺癌预后预测的生物学指标之一。     

大肠癌淋巴结转移相关的基因蛋白产物及病理多因素分析研究

目的探讨大肠癌中MMP-9、TIMP-2、nm23、CD 44、E-Cadherin、Integrin的表达及病理因素与大肠癌淋巴结转移的关系。方法采用组织芯片技术及免疫组化方法检测有淋巴结转移的大肠癌与无淋巴结转移的大肠癌中的MMP-9、TIMP-2、nm23、CD 44、E-Cadherin、Integrin的表达。结果 TIMP-2和E-Cadhern的表达在两组间有差异（P〈0.05）,它们与淋巴结转移呈负相关,E-Cadherin与转移的关系更密切。大肠癌的淋巴结转移还与分化程度有关。结论检测大肠癌中TIMP-2和E-Cadherin的表达对预测其淋巴结转移及病人预后有重要意义。     

T-2毒素对软骨细胞CD44表达的影响

目的 研究T-2毒素对软骨细胞CD44表达的影响，为阐明T-2毒素损伤软骨组织的机制提供科学依据。方法 利用RT-PCR方法检测CD44 mRNA在软骨细胞中的转录情况；利用免疫组化方法检测软骨细胞表面CD44的表达情况。结果 在T-2毒素作用5d后，毒素组、毒素加硒组CD44 mRNA表达水平均低于对照和对照加硒组。同时免疫组化结果显示，毒素组体外再建软骨组织CD44表达最低，其次为毒素加硒组，对照加硒组最高。结论 T-2毒素对于软骨细胞的CD44表达具有明显的抑制作用。     

胃黏膜相关淋巴样组织瘤与幽门螺杆菌感染的相关性研究

目的 回顾分析胃黏膜相关淋巴组织（MALT）瘤与幽门螺杆菌（Hp)感染的相关性。方法 收集手术和病理理诊的消化道原发性非霍奇金淋巴瘤35例，行常规病理和免疫组化染色（CD3，CD5，CD10，CD20，CD23，CD45RO，Kappa,Lamda,Cyclinl,Ki67,TUNEL)重新作出病理学评价。同时观察Hp感染情况。结果 （1）MALT瘤共21例，其中胃MALT瘤16例，小肠1例，结肠4例。（2）胃MALT瘤中，除3例因切片均为癌组织无法判定有无Hp感染以外，余13例Hp均为阳性。（3）胃MALT瘤中，Ⅰ1期2例，Ⅱ1期5例，ⅡE期9例，（4）内镜误判为胃癌者3例，误判为巨大肥厚性胃炎者1例，误判为萎缩性胃炎者1例，诊断为慢性胃炎者5例，6例患者系胃镜活检确诊。（5）1例经3个疗程抗Hp治疗，病变完全消退，Hp转阴，经内镜及病理检查随访3年未见复发。结论 （1）胃MALT瘤与Hp感染关系密切，（2）抗Hp治疗可治愈早期MALT瘤。     

组织芯片技术及其应用进展

组织芯片技术，又叫组织微阵列（TMA）。应用该技术，可以对数个及至成百上千个样本同时进行免疫组化、原位杂交等组织原位的分子生物学研究。近年来，该技术在肿瘤研究中的应用日渐广泛，但也存在一些有待改善的地方。现综述如下。     

CD44s mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨CD44s mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用核酸原位杂交技术检测66例胃癌（胃癌组）、25例浅表性胃炎（胃炎组）和25例胃上皮不典型增生（增生组）中CD44s mRNA的水平。结果胃炎组无阳性表达;增生组中阳性率为20％;在胃癌组中阳性率为62．12％,胃癌组低分化组织中阳性率明显高于高分化组织（P〈0．05）,有淋巴结转移组阳性率明显高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。结论CD44s mRNA表达与胃癌组织分化程度和转移有相关性;CD44s mRNA基因水平可作为判断胃癌病情和预后的指标。     

肺癌组织中CD44V6、PCNA的表达变化及意义

目的观察CD44V6、增殖细胞核抗原（PCNA）在肺癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测60例肺癌组织及20例正常肺组织中的CD44V6、PCNA。结果 CD44V6在肺癌组织中的表达显著高于正常肺组织（P〈0.05）,且与肺癌临床分期、淋巴结转移有关（P均〈0.05）。PCNA在肺癌组织中的表达显著高于正常肺组织（P〈0.05）,且与肺癌病理分级、TNM分期、淋巴结转移有关（P均〈0.05）。肺癌组织中CD44V6与PCNA的表达呈正相关（r=0.427,P〈0.05）。结论肺癌组织中CD44V6、PCNA表达升高,两者的升高是同步的,可作为判断肺癌侵袭、转移及预后的重要生物学指标。