Aurora-A/TPX2复合体与肿瘤关系的研究进展

基因组不稳定是肿瘤的重要标志,细胞分裂过程中调节遗传稳定性的相关蛋白质与信号通路在肿瘤的发生发展中起着重要作用。极光激酶（Aurora kinase）是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,其包括极光激酶 A（Aurora-A）、极光激酶 B（Aurora-B）和极光激酶 C（Aurora-C）3 个亚型,在细胞周期中呈动态分布。通过调控细胞有丝分裂过程中中心体的成熟和分离、双极纺锤体的组装和稳定、染色体的精确分离等过程,以确保细胞周期的正常完成。爪蟾驱动蛋白样蛋白 2 靶蛋白（TPX2）是 Aurora-A 的关键调节剂之一,在有丝分裂纺锤体的组装和维持纺锤体极的完整性方面至关重要。最近有学者发现了 Aurora-A/TPX2 复合体在肿瘤发生发展中的新作用。因此,本文就 Aurora-A 和 TPX2 的生物学特性、与肿瘤发生发展的关系以及 Aurora-A/TPX2 复合体作为一个新的功能单位在肿瘤形成中的作用机制进行综述。     

一种新的中心体蛋白质TACP1与有丝分裂激酶Nek2A相互作用的研究

目的:研究一种新的中心体蛋白TACP1蛋白与有丝分裂激酶Nek2A在有丝分裂期的相互作用关系。方法:在大肠杆菌中表达和纯化的Nek2A305-446蛋白与293T细胞中表达的TACP1蛋白,进行体外pull-down实验;TACP1和Nek2A两种质粒共转染293T细胞,用TACP1多抗进行免疫共沉淀实验;Hela细胞共转TACP1和Nek2A,利用间接免疫荧光的方法在荧光显微镜下观察两种蛋白的亚细胞定位。结果:TACP1条带可以出现在大肠杆菌中表达和纯化的Nek2A305-446泳道中,而对照组中无TACP1条带。TACP1抗体可以将细胞裂解液中的Nek2A蛋白连同TACP1蛋白一起沉淀下来,而对照组免疫前的兔血清则不能将TACP1或Nek2A沉淀下来。在Hela细胞有丝分裂中期,TACP1和Nek2A都呈点状定位于中心体,两者信号叠加后也重合。结论:中心体蛋白TACP1在体内、体外能与有丝分裂激酶Nek2A相互作用,两者在细胞有丝分裂期都定位于中心体。     

Aurora激酶A调控卵母细胞减数分裂的分子机制

Aurora激酶A(AURKA)是Aurora激酶家族成员,其参与有丝分裂进入、中心体成熟和分离、双极纺锤体组装和稳定以及染色体的凝集和分离。AURKA在减数分裂过程中发挥的作用与有丝分裂类似,但其具体作用机制以及其与有丝分裂的异同尚不清楚。因此本文从AURKA在卵母细胞减数分裂中的定位与活化,及其在调控纺锤体形成、纺锤体组装检查点活化以及动粒-微管附着纠错等方面进行综述,对比AURKA在有丝分裂和卵母细胞减数分裂中的异同,为今后进一步揭示细胞分裂调控机制以及癌症和生殖等相关临床研究奠定理论基础。     

ASPM在恶性肿瘤中的研究进展

异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(ASPM)基因是最常见的常染色体隐性小头畸形突变基因.其主要功能包括正确引导有丝分裂中纺锤体向两极运动以及维持细胞质的均等分裂,在有丝分裂纺锤体调节和有丝分裂过程的协调中发挥作用,并调控细胞周期进展.ASPM在各种恶性肿瘤组织高表达,影响恶性肿瘤的发生、发展及预后.同时,ASPM还参与肿瘤...     

Nek2调节中心体异常及其与肿瘤关系的研究进展

Nek2作为中心体的一种调控因素并因其与肿瘤发生、发展的关系逐渐被人们所认识。目前已经发现,Nek2在很多恶性肿瘤中都存在高表达、异位表达或基因变异,其异常表达会导致细胞有丝分裂的异常进而引起肿瘤的发生。该文旨在阐明Nek2基因与肿瘤的发生、发展关系的研究进展。     

中心体异常与宫颈癌关系的研究进展

中心体作为哺乳动物细胞微管组织中心,在细胞分裂间期通过成核作用和微管的形成来维持细胞正常结构.双极纺锤体的形成是细胞有丝分裂中染色体均衡分离的必需条件,而中心体对双极纺锤体的形成起着关键作用.中心体的异常已经在越来越多的恶性肿瘤细胞中被发现.然而关于中心体异常和宫颈癌的关系,国内外研究较少.本文主要对中心体异常与宫颈癌的关系进行综述.     

癌症高表达蛋白Hec 1与染色体不稳定性

癌症高表达蛋白Hec1是纺锤体检验点信号途径中的一个蛋白,在有丝分裂期位于着丝粒。Hec1-Nuf2复合物是招募纺锤体检验点复合物Mad1/Mad2的重要结构基础。Hec1蛋白可以与26S蛋白酶体亚基相互作用抑制其降解细胞周期素功能。Hec1是用酵母双杂交方法寻找与Rb相互作用蛋白时发现的,Rb可通过与Hec1相互作用调节Smc1与DNA的结合能力,从而参与M期调控。Hec1主要在G2/M期表达,激酶Nek2磷酸化Hec1是其发挥功能的关键。Hec1在一些肿瘤细胞中高表达并且在部分肿瘤组织中表现扩增。Hec1基因的功能异常会引起严重的染色体分离障碍,从而导致染色体不稳定,而染色体不稳定性与肿瘤的发生、发展密切相关。所以Hec1可能成为肿瘤基因治疗的一个新的靶点。     

PLK与细胞分裂的协调

所有真核生物基因组的稳定依赖于有丝分裂和减数分裂过程中染色体的正确分离.M期毫无疑问是整个细胞周期中的关键环节,M期伴随着细胞结构的复杂重组,包括微管为基础的有丝分裂纺锤体的装配和肌动球蛋白为基础的收缩环的组装.M期事件的时间和空间协调需要精确的调节,染色体分离错误可以引起严重的后果.染色体失调(异倍体)能引起自然流产、出生缺陷和肿瘤.     

Synaptotagmin1影响小鼠卵母细胞纺锤体组装和稳定

目的:确定Synaptotagmin1(Syt1)对小鼠卵细胞纺锤体组装和稳定的影响。方法:免疫荧光法检测Syt1在小鼠卵母细胞发育不同时期的亚细胞定位。用紫杉醇处理小鼠MⅠ期卵母细胞,明确Syt1与微管动力的关系。注射Syt1特定的寡聚核苷酸降调卵母细胞中Syt1的表达,免疫荧光法检测Syt1降调后卵母细胞纺锤体的形态变化、染色体异常以及中心体蛋白γ-tubulin定位变化。结果:Syt1在卵母细胞减数分裂成熟的不同发育阶段都有表达,主要集中分布皮质区和MⅠ和MⅡ期纺锤体的两极。Syt1在MⅠ和MⅡ期与中心体相关蛋白γ-tubulin共定位。紫杉醇实验发现Syt1集中定位于星体和高度集中的微管两极。降调Syt1表达后,染色体排列紊乱,纺锤体组装异常比例升高,且大多数为无极、单极或者多级纺锤体,其次有拉长纺锤体和形态各异纺锤体。并影响微管组织中心相关蛋白γ-tubulin的正确定位。结论:Syt1可能作为一种微管组织中心相关蛋白调节纺锤体的组装稳定。     

驱动蛋白Eg5研究进展

驱动蛋白Eg5（kinesin-5），又名驱动蛋白超家簇成员11（kinesin fanmily member11，kif11），定位于纺锤体微管，参与中心体的分离和双极纺锤体的形成。在多种肿瘤细胞中Eg5高表达，并与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。检测Eg5对肿瘤的早诊早治、判断肿瘤转移及预后具有着重要意义。鉴于Eg5在有丝分裂中的特性，作为肿瘤治疗的靶点受到广泛关注，众多Eg5抑制剂正不断研发。     

抗肿瘤Polo样激酶1抑制剂的研究进展

Polo样激酶1(PLK1)是一种结构和功能高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在细胞有丝分裂阶段发挥重要的作用.在人类80%的肿瘤类型中,PLK1过度表达,而在正常组织中,该激酶很少表达.临床治疗中,该激酶的过度表达是多种肿瘤不良预后的标志之一.PLK1抑制剂可以对细胞有丝分裂的多个阶段产生作用,如阻碍中心体成熟、纺锤...     

Aurora A与妇科恶性肿瘤发病关系的研究现状

Aurora A是参与有丝分裂的丝氨酸／苏氨酸激酶新成员,与中心体功能相关,其高表达与中心体异常、非整倍体以及染色体不稳定性之间存在很大程度的相关性,是一种癌基因,在许多肿瘤中均发现有高表达。随着Aurora A过表达可以产生非整倍体以及与肿瘤形成有关,Aurora A已经成为药物设计的一个潜在靶点,Aurora A激酶抑制剂,如VX-680代表了一种新的治疗癌症的方法。该文着重综述Aurora A与妇科恶性肿瘤发病关系的研究现状。     

沉默Nek2基因对卵巢癌SKOV3细胞周期的影响

目的：研究RNA干扰NIMA相关激酶2（Nek2）表达对卵巢癌细胞SKOV3细胞周期的影响及其相关的分子机制。方法将针对Nek2基因的siRNA转染至SKOV3细胞中,采用流式细胞技术检测SKOV3细胞周期变化,并用Westernblot技术检测Nek2‐siRNA转染入卵巢癌SKOV3细胞48h后,与细胞周期相关的因子cyclinB1、CDK1及P27蛋白表达水平以及ERK1／2磷酸化水平的变化。结果空白对照组、阴性对照组和RNA干扰组中处于G2／M期的细胞比例分别为13．72％、12．27％和1．56％,与两对照组比较,处于G2／M期的干扰组细胞明显减少（P＜0．05）。Nek2基因沉默后,与两对照组比较,SK‐OV3细胞内cyclinB1和CDK1的蛋白表达水平明显下降,P27的蛋白表达水平明显上调,SKOV3细胞内ERK1／2磷酸化水平明显下降（P＜0．05）。结论沉默Nek2基因,可阻止卵巢癌SKOV3细胞启动有丝分裂,从而抑制其增殖。     

Effect of spindle checkpoint on Akt2-mediated paclitaxel-resistance in A2780 ovarian cancer cells

Recent evidence has suggested that Akt2 plays an important role in the protection of cells from paclitaxel （PTX）-induced apoptosis and control of the cell cycle. In addition, some scholars suggested that the PTX sensitivity depends on a functional spindle assembly checkpoint. In the present study, we investigated the role of the Akt2/Bubl cross-talking in apoptosis and cell cycle after exposure of the A2780 ovarian cancer cells to paclitaxel （PTX）. Recombinant expression plasmid WT-Akt2 was transfected into A2780 cells by lipofectamine2000, and then the expression level of Akt2 gene was detected by using RT-PCR and Western blotting. Cell apoptosis and cell cycle were detected by flow cytometry and Hoechst 33342 staining after treatment with PTX. Moreover, we compared the expression level of Bubl in different groups by Western blotting. Our study showed that up-regulation of Akt2 contributed to A2780 ovarian cancer cells overriding PTX-induced G2/M arrest, and inhibited Bubl expression. Our findings might shed light on the molecular mechanism of PTX-induced resistance in ovarian cancer and help develop novel anti-neoplastic strategies.     

WEE1，组蛋白与肿瘤

WEE1是组蛋白转录、染色体浓缩和细胞周期进程调节的一个重要的因子。WEE1激酶能磷酸化细胞分裂 周期基因(cell division cycle，Cdc2)，下调其活性，进而可以调控细胞G2到M期的转变并调节细胞有丝分裂。它在染色 体浓缩延迟和组蛋白合成中起到关键作用，WEE1在肿瘤发生、发展中具有重要功能。目前已发现很多种WEE1抑制 剂，各种WEE1抑制剂与DNA损伤(化疗或放射治疗)相结合的联合治疗方式已取得了很多进展，这些使WEE1成为肿 瘤治疗中的一个重要靶点。     

Nek2基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞侵袭能力的影响

目的研究RNA干扰Nek2表达对卵巢癌SKOV3细胞侵袭能力的影响以及相关的分子机制。方法设计合成3条针对Nek2基因的siRNA,转染至SKOV3细胞中,采用Real-time RT-PCR和Western blot技术筛选出抑制效率最高的Nek2-siRNA序列,用Transwell方法检测转染该序列的SKOV3细胞侵袭能力的改变,并用Western blot方法检测Nek2-siRNA转染后SKOV3细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达的变化。结果①RNA干扰序列2对SKOV3细胞中Nek2的抑制效果最明显;②与未转染组和阴性对照组相比,转染了Nek2-siRNA的SKOV3细胞侵袭能力明显下降(P<0.01);③Western blot检测表明,与未转染组和阴性对照组相比,Nek2-siRNA转染48 h后SKOV3细胞中MMP-2、MMP-9的表达明显下调,而TIMP-1的表达明显上调(P<0.01)。结论 Nek2-siRNA能有效得沉默SKOV3细胞中Nek2的表达,通过下调MMP-2、MMP-9的表达,上调TIMP-1的表达,从而抑制SKOV3细胞的侵袭转移。