癌转移抑制基因nm23在人肺癌中的转录表达研究

目的 探讨ｎｍ基因在人肺癌发生、发展中的作用。方法 采用狭缝印迹杂交技术和非放射性地７高辛标记检测系统,检测了１４３份不同部位、不同性质人肺组织中的ｎｍ２３－Ｈ、和ｎｍ２３－Ｈ２基因的ｍＲＮＡ表达。结果 ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的ｍＲＮＡ表达均有从正常肺组织、肺良性病变组织、非肺组织、癌灶组织到癌转移淋巴结组织逐渐降低的趋势。其中,肺癌组织的ｎｍ２３－Ｈ２基因ｍＲＮＡ表达较正常肺组织显著     

转移抑制基因nm23与肿瘤转移

转移抑制基因ｎｍ２３与肿瘤转移李桂芳综述郭葆玉陆德如审校第二军医大学遗传研究所（上海市２００４３３）ｎｍ２３基因是近几年最令人注目的候选转移抑制基因。此基因定位于人１７号染色体长臂远端（１７ｑ２１．３－２２），与果蝇ａｗｄ基因高度同源，ｎｍ２３蛋白具...     

肿瘤转移抑制基因nm23的研究概况

肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３的研究概况魏泓肿瘤转移基因及转移抑制基因，是当今肿瘤转移研究者致力寻找的一类对肿瘤转移起关键性正、负调控作用的基因。目前这方面的研究刚刚开始，取得的成果不多，且多数划入该类的基因如整合蛋白基因、金属蛋白酶及其抑制因子的基因、尿...     

nm23基因与肺癌转移关系的研究进展

肿瘤转移是其恶性标志和特征之一,也是肿瘤患者治疗失败和死亡的主要原因。肿瘤转移是一个复杂的过程,可能涉及原发部位的肿瘤穿过组织基底膜,避开机体免疫反应,穿过血管和淋巴管进入新组织实质,肿瘤血管形成,而后形成转移灶等一系列表型的改变。阐明肿瘤转移过程可为肿瘤的防治提供新的策略。1987年ＳＥＥＲ(ｓｕｒｖｅｂｕａｎｃｅｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙａｎｄｅｎｄｒｅｓｕｌｔｓｉｎＵＳＡ)调查表明:在临床诊断和治疗的乳腺癌患者中,仅7%发现远处转移,38%有局部淋巴结转移,52%未见转移,3%资料不全。这在理论上提示如果能阻止肿瘤转…     

nm23基因抑制肿瘤转移机制研究进展

肿瘤转移抑制基因nm23是一个多功能基因,参与了包括细胞运动与黏附、生长与分化以及细胞周期调控在内的多个生理过程。nm23基因表达情况的变化与多种肿瘤的转移及预后相关。现综述nm23与肿瘤的临床病理和转移抑制功能的分子机制研究进展。     

nm23基因肿瘤转移抑制作用探讨

ｎｍ２３是人们研究比较多的一个肿瘤转移抑制基因。现已证实ｎｍ２３基因的低表达与包括乳腺癌、肝癌、恶性黑色素瘤和胃癌在内的许多肿瘤转移和预后有关。研究发现人类基因组中有两个ｎｍ２３基因,为ｎｍ２３Ｈ１和ｎｍ２３Ｈ２。普遍认为ｎｍ２３Ｈ１具有抑制癌转移作用。我们观察了ｎｍ２３基因在３组８种不同转移潜能人癌细胞系中的表达,进一步探讨ｎｍ２３在这些肿瘤细胞中的表达与转移的关系。材料与方法　（１）细胞培养：ＰＣ３、ＰＣ３Ｍ（人前列腺癌细胞系）;ＰＡａ、ＰＧ（人肺癌细胞系）;ＷＭ３５、ＷＭ１３４１ｂ、…     

nm23肿瘤抑制基因在胃癌组织的表达及临床意义

ｎｍ２３是候选肿瘤转移抑制基因中最令人注目的基因,近年来在人乳腺癌、肝癌、肾癌和非小细胞肺癌中已证实其蛋白表达水平与其转移呈明显负相关［１,２］。本文分析了６４例胃癌患者１９２份标本的ｎｍ２３－Ｈ１在胃癌组织和相关转移淋巴节中的表达及临床意义。１材料与方法１．１材料 １９９１至１９９５年我院手术切除的６４例胃癌患者的胃癌组织、相应淋巴结和癌旁正常组织１９２份标本。男４５例,女１９例,平均年龄５１岁。其中肿瘤位于贲门２６例、胃体１６例、胃窦２２例。病理：腺癌４２例、印戒细胞癌１１例、粘液腺癌１１例…     

nm23基因抑制肿瘤转移机制研究进展

肿瘤转移抑制基因nm23是一个多功能基因,参与了包括细胞运动与黏附、生长与分化以及细胞周期调控在内的多个生理过程。nm23基因表达情况的变化与多种肿瘤的转移及预后相关。现综述nm23与肿瘤的临床病理和转移抑制功能的分子机制研究进展。     

Northern印迹杂交分析nm23基因在人肺癌中的表达研究

目的探讨ｎｍ２３基因表达在人肺癌中的作用。方法通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交,检测４０例人肺癌组织和１９例非癌肺组织的ｎｍ２３Ｈ１和ｎｍ２３Ｈ２ｍＲＮＡ表达,采用地高辛标记和检测系统显示杂交信号,并分析ｍＲＮＡ表达与肺癌临床特征的关系。结果低分化鳞癌的ｎｍ２３Ｈ２ｍＲＮＡ表达较中高分化鳞癌显著降低（Ｐ＜０．０１）,小细胞肺癌的ｎｍ２３Ｈ１和ｎｍ２３Ｈ２ｍＲＮＡ表达较肺鳞癌明显降低。但在有或无淋巴结转移的原发癌灶组织间,以及肺癌的临床分期间,ｎｍ２３基因ｍＲＮＡ表达差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论ｎｍ２３基因ｍＲＮＡ表达与肺癌的组织分化有关,未发现其在肺癌中的癌转移抑制作用。     

肿瘤转移抑制基因nm23—H1在肾癌中的表达

我们应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ）方法检测ｎｍ２３Ｈ１基因在肾癌中的表达情况,以探讨其在肾癌发生发展中的作用。１　材料和方法收集１９８０年至１９９１年肾癌存档标本５６例,男性３６例,女性２０例,平均年龄５７．２岁。标本经１０％福尔马林固定,石蜡包埋。按ＴＮＭ分期：Ⅰ期３例,Ⅱ期１９例,Ⅲ１４例,Ⅳ期２０例。Ｆｕｈｒｍａｎ核分级：Ｇ１级２３例,Ｇ２级２４例,Ｇ３级９例。另选１０例癌旁组织作为对照。石蜡切片脱蜡、水化,０．３％Ｈ２Ｏ２室温１０ｍｉｎ阻断内源性过氧化物酶,１０％硫酸铝钾液微波内辐射２ｍ…     

人肺癌组织中nm23-H_1基因突变研究

目的　探讨癌转移抑制基因nm2 3 H1 在人肺癌中的突变情况 ,及其与肺癌发生、发展及转移的关系。方法　采用聚合酶链反应—单链构象多态性技术 (PCR SSCP) ,对手术切除的 45例肺癌组织和 7例正常肺组织的nm2 3 H1 基因的 5个外显子进行突变分析。结果　在所检测的肺组织中 ,未发现nm2 3 H1 基因纯合缺失。SSCP分析发现一例肺癌组织nm2 3 H1 基因外显子 1单链DNA迁移率发生改变。此例患者为晚期肺鳞癌 ,伴有纵隔淋巴结转移和恶性胸水。结论　本实验所检测的nm2 3 H1 基因外显子部分的基因突变在肺癌中发生率低 ,nm2 3 H1 基因突变可能与肺癌进展及转移有关     

Northern blot analysis of nm23 gene expression in human lung cancer

Thenm23genewas0riginallyidentifiedbySteegandc0lleagues"'attheNationalCancerInstitute(USA)inl988.Twois0typesofnm23geneinhuman,knownasnm23-H,andnm23-H,l']havebeendescribed,whicharebothlocatedonchrom0some17q2l.3andencodef0rnucleosidediph0sphatekinase(NDPK).l']Theearystudiesoncancercelllinesrevealedthatnm23genecouldsuppressthemotilityandmetastaticpotentialofcancercells,andwasproposedtobeametastasissuppressorgene.More0ver,theass0ciationofreducednm23expressionwithhighmetastahcpotentialhasalsobe…     

nm23在胚胎组织和肺癌组织中表达的意义

目的 探讨nm23-H1基因的表达与胚胎组织发育分化的关系和在肺癌组织中表达的意义。方法 对SD大鼠和人的胚胎组织,以及人肺癌组织进行nm23蛋白（NM23－H1）免疫组化检测。结果 NM23－H1的积聚与胚胎发育期间各种上皮组织的分化和器官形成相一致,正常胚胎组织要发育至一定阶段,具有一定空间构型（器官结构）时才有较稳定的NM23－H1积聚。在49例肺癌原发病灶中,NM23－H1阳性率34．7％,其中鳞癌的阳性率27．3％,腺癌的阳性率50．0％,5例未分化大细胞癌均阴性。27例肺门淋巴结转移癌灶的NM－23H1阳性率（22．2％）与原发瘤灶中的阳性率（34．7％）比较差异无显著性（P＞0．05）。在肺癌原发病灶中,NM23－H1阳性与阴性二组间淋巴结转移发生率的差异亦无显著性（P＞0．05）。结论 NM23－H1在胚胎组织和肺癌组织中的积聚与胚胎组织和肺癌组织器官样结构的分化有密切关系,NM23－H1可能对维持稳定的上皮组织结构起着重要的调节作用,NM23－H1似乎不能直接抑制肺癌细胞的转移。     

转移抑制基因nm23 mRNA表达水平与非小细胞肺癌临床病理特征及预后的关系

目的：研究非小细胞肺癌中nm23 mRNA表达水平与肺癌临床病理特征及预后之间的关系。方法：53例肺癌标本，44例（癌旁）正常肺组织，用RT—PCR方法检测标本中nm23 mRNA的表达水平，根据手术、病理和影像学结果判断有无转移并确定分期，就nm23 mRNA表达水平与临床变量之间进行分析。结果：nm23 mRNA在肺癌和（癌旁）正常肺组织中的表达阳性率分别为43．4％（23／53）和40．9％（18／44），P〉0．05；在低分化、晚期、肺门纵隔淋巴结转移的非小细胞肺癌中，其nm23 mRNA的表达量显著降低（P〈0．05），nm23 mRNA表达阳性和阴性的患者中位生存期分别为43个月和46个月，其表达量与患者的预后之间未发现显著相关性（P〉0．05）。结论：nm23 mRNA的表达与肺癌的分化、转移及病理分期有关，但尚无足够证据显示其与肺癌的预后有相关关系。     

转移抑制基因nm23—H1蛋白表达与结直肠癌的关系

目的：研究转移抑制基因nm23-H1蛋白表达与结直肠癌生物学行为的关系,探讨nm23-H1基因表达在结直肠癌发生发展中的作用。方法：采用免疫组化技术,对46例结直肠癌组织中nm23-H1基因的表达状态进行定位观察。结果：结直肠癌nm23-H1基因蛋白阳性表达率为43．5％;nm23-H1基因的表达与结直肠癌的分化程度及肿块大小无显著性差异（P＞0．05）,但与结直肠癌的淋巴结转移,临床分期以及侵犯深度有相关差异（P＜0．05）;随着转移的发生,侵犯深度的增加以及疾病向晚期发展,nm23-H1基因的阳性表达率逐渐下降,直至完全失活。结论：作为肿瘤转移抑制基因,nm23-H1基因在调控癌细胞增殖,抑制癌细胞转移方面起着重要的作用;nm23-H1蛋白可作为临床判断结直肠癌侵袭转移,临床分期和患者预后的指标之一。     

转移抑制基因nm23-H1参与肺癌Ras信号传导机理研究

背景与目的nm23-H1基因已被证实为一种肿瘤转移抑制基因,但其作用机理尚不明了,本研究探讨nm23-H1参与肺癌Ras信号传导的机理。方法应用脂质体法将pEGFP-nm23-H1野生型和突变型质粒(WT,H118F,S120G,P96S,S44A)转染人大细胞肺癌细胞株L9981,采用免疫共沉淀与Western blot方法检测野生型和突变型nm23-H1蛋白与Ras支架蛋白KSR的关系。结果在转染了野生型和突变型质粒的五个细胞株中,鼠抗nm23-H1免疫沉淀物在86KDa处可检测到KSR的阳性条带,而各组KSR的量应用单因素方差分析比较无显著性差异(F=0.190,P=0.938)。结论本研究结果表明nm23-H1与KSR存在相互作用,但这种相互作用与nm23-H1有无突变及突变位点无关,nm23-H1可能是通过KSR参与肺癌Ras信号传导的。     

转移抑制基因nm23-H1在人肺癌中的表达

目的　探讨人肺癌中nm 2 3 H1基因的表达水平与肺癌发生、发展和转移的关系。方法　应用免疫组织化学法对 6 9例人肺癌组织中nm2 3 H1基因表达产物NDPK的表达水平及其与肺癌淋巴结转移的关系进行研究。结果　人肺癌组织中nm2 3 H1的表达水平与其性别、年龄、PTNM分期、组织类型无明显关系 ,而与肺癌细胞分化程度以及淋巴结转移有密切关系。肺癌组织中的nm2 3 H1表达低于癌旁正常肺组织 (P <0 .0 5 ) ,有淋巴结转移的肺癌原发灶中nm 2 3 H1的表达水平低于无淋巴结转移的肺癌原发灶 (P <0 .0 5 ) ,肺癌转移灶 (淋巴结 )中的nm2 3 H1的表达水平明显低于肺癌原发灶 (P <0 .0 1) ,分化差的肺癌中的nm 2 3 H1表达水平低于分化较好的肺癌 (P <0 .0 5P <0 .0 0 5 )。结论　nm 2 3 H1基因与肺癌淋巴结转移有关 ,并可能参与肺癌淋巴结转移过程中的调节并起转移抑制基因的作用 ,nm2 3 H1基因表达水平的降低预示肺癌的转移和预后不良。nm2 3 H1基因可能是监测肺癌患者病情发展及评估预后的有用指标。     

nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株生物学行为的影响及作用机理

背景与目的nm23-H1基因已被证明是一个肿瘤转移抑制基因,但其相关作用机理仍不明确。本研究通过比较nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981生物学行为的变化,探讨nm23-H1基因影响人高转移大细胞肺癌细胞株生物学行为的可能机理。方法应用细胞体外增殖活性检测(MTT法)和体外侵袭力检测(改良Boyden小室法)技术分别检测nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1肺癌细胞株体外增殖活性和侵袭力的变化;同时加入PKC特异抑制剂Calphostin C作用后,再次观察三株细胞株抑制剂作用前后细胞侵袭力、增殖力的变化。结果nm23-H1基因缺失的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-pLXSN体外侵袭力和增殖活性明显高于转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1肺癌细胞株(P<0.001);L9981和L9981-pLXSN细胞间体外侵袭力和增殖活性则无统计学差异(P>0.05)。用PKC抑制剂Calphostin C处理L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1肺癌细胞株后,细胞体外侵袭力和增殖活性下降(P<0.001),而转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1细胞体外侵袭力和增殖活性仍低于L9981和L9981-pLXSN(P<0.001),L9981和L9981-pLXSN细胞间则无统计学差异(P>0.05)。结论nm23-H1基因可明显抑制L9981肺癌细胞株的细胞增殖力和侵袭力。nm23-H1基因对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的生物学行为的影响可能与其抑制PKC信号传导有关。     

nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株抑制消减cDNA文库的构建

背景与目的 已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因.本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆与nm23-H1转移相关的基因奠定基础.方法利用抑制消减杂交(suppressive subtractive hybridization,SSH)技术构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)间差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库,经蓝白菌落筛选克隆,并PCR反应鉴定.结果 成功构建了该两株细胞株差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库.经蓝白菌落筛选,正向消减文库总共获得约300个白斑克隆,反向消减文库总共获得约400个白斑克隆,从正反向消减文库中各挑选96个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段,结果显示在挑选的正向文库中有84个克隆有插入片段,反向文库中有83个克隆有插入片段.其片段大小范围为(300-750)bp.结论 抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,我们应用SSH法和T/A克隆技术成功建立了nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库.nm23-H1基因在肺癌细胞中的表达可能影响某些转移相关基因的差异表达.