清肠化湿方对TNBS诱导大鼠UC模型紧密连接蛋白的影响

目的:观察三硝基苯磺酸(TNBS)法诱导大鼠溃疡性结肠炎模型结肠黏膜occludin、claudin-1蛋白的变化特点及清肠化湿方对occludin、claudin-1蛋白表达的影响。方法:采用TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型,并随机分为正常对照组、模型对照组、清肠化湿方组、SASP组,治疗10天后处死大鼠取新鲜结肠标本,观察黏膜大体形态及组织学改变,并采用Western blot法检测occludin、claudin-1蛋白表达水平。结果:模型对照组occludin、claudin-1蛋白表达均明显低于正常对照组,清肠化湿方组occludin、claudin-1的表达高于模型对照组,同时,清肠化湿方组大鼠结肠形态及组织学损伤评分均有降低。结论:清肠化湿方对UC模型大鼠具有治疗作用,增强occludin、claudin-1的表达,恢复正常的肠粘膜屏障功能可能是其作用机制之一。     

雷公藤内酯醇对Caco-2细胞紧密连接蛋白ZO-1表达的影响

目的 研究雷公藤内酯醇(Triptolide,TL)对人结直肠腺癌细胞Caco-2紧密连接蛋白(Zonula Oc-cludens 1,Z0-1)表达的影响.方法 在Caco-2细胞建立肠黏膜屏障体外模型的基础上,通过荧光定量PCR、Western Blot和免疫荧光分析紧密连接蛋白ZO-1的表达变化.结果 与对照组相...     

穴位埋线对实验性结肠炎大鼠肠黏膜上皮屏障的影响

目的:观察穴位埋线对"虚、瘀"状态下溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠肠黏膜上皮屏障的影响,探讨其改善U C的作用机制.方法:雄性SD大鼠随机分为正常组12只与造模组48只.造模组采用腺嘌呤、番泻叶分阶段灌胃制造大鼠"虚、瘀"状态,接着用5％2,4,6-三硝基苯磺酸(T NBS,100 mg/kg)加0.25 mL 50％ ...     

中医药对肠道紧密连接蛋白调节作用的研究进展

肠道机械屏障是防止肠腔中有毒物质入侵机体的重要屏障结构,而紧密连接蛋白是其主要结构基础,主要包括claudin-1、occludin及ZO-1蛋白等。多种消化系统疾病,包括溃疡性结肠炎、急性胰腺炎、肠易激综合症、功能性消化不良等疾病的发生发展均有肠道紧密连接蛋白及机械屏障相关。就近年来研究发现中医药对肠道紧密连接蛋白具有一定调控作用进行综述。     

加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织Occludin，ZO-1，Claudin-1蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨加味四君子汤对脑缺血大鼠脑组织闭合蛋白(Occludin),密封蛋白-1(Claudin-1),闭锁连接蛋白-1(ZO-1)表达的影响,并探讨相关的作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉组(3.2×10~(-3)g·kg~(-1)),加味四君子汤加减低、中、高剂量组(4.77,9.54,19.08 g·kg~(-1))。采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,治疗7 d后处死,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠缺血侧脑皮质区Occludin,ZO-1,Claudin-1蛋白的表达,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠缺血侧脑皮质区Occludin,ZO-1,Claudin-1 mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组Occludin,Claudin-1,ZO-1蛋白显著减少(P0.01);与模型组比较,依达拉奉组、加味四君子汤各剂量组Occludin,Claudin-1,ZO-1蛋白均显著增高(P0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠Occludin,Claudin-1,ZO-1 mRNA表达下调(P0.01);与模型组比较,依达拉奉组、加味四君子汤各剂量组大鼠Occludin,Claudin-1,ZO-1 mRNA表达上升(P0.01)。结论:加味四君子汤可能通过增加紧密连接蛋白Occludin,ZO-1,Claudin-1的表达,保护血脑屏障,减轻缺血性脑卒中大鼠脑水肿。     

基于“逆流挽舟”法探索人参败毒散对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的干预作用＊

目的 观察人参败毒散对TNBS诱导的溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的影响及其可能机制。方法 将60只雄性SD大鼠随机分组，采用TNBS诱导法造模，人参败毒散各剂量（31.2、15.6、8 g·kg^-1）连续7天灌胃。检测各组血清白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、干扰素-γ（Interferon-γ，IFN-γ）含量；结肠组织咬合蛋白（Occludin）、闭合蛋白（Claudin-5）与闭锁蛋白（ZO-1）mRNA和蛋白水平。结果 与空白（Control）组比较，模型（Model）组的血清IL-1β、IL-6、TNF-α、以及IFN-γ含量明显增高（P < 0.05），结肠组织Occludin、Claudin-5与ZO-1 mRNA和蛋白水平明显下调（P < 0.05）。经治疗后，人参败毒散高、中、低剂量（RH、RM、RL）组血清中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量均有降低，RH组干预结果存在统计学意义（P < 0.05）；结肠组织Occludin、Claudin-5以及ZO-1 mRNA表达和蛋白表达均有上调，且RH组干预效应明显优于其他给药组，具有统计学意义（P < 0.05）。结论 “逆流挽舟法”代表方人参败毒散能有效改善UC大鼠症状，其作用机制可能与抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ释放，上调结肠黏膜Occludin、Claudin-5与ZO-1 mRNA和蛋白表达，促进肠上皮紧密连接修复，改善肠黏膜通透性有关。     

四君子汤介导肠道黏膜屏障防治溃疡性结肠炎的研究进展

检索并分析近几年相关文献,对四君子汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制作一综述。四君子汤可通过修复肠道黏膜机械屏障、化学屏障、免疫屏障及生物屏障,从而发挥防治溃疡性结肠炎的效用。     

肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭模型大鼠肠道紧密连接蛋白的影响

目的 探讨肾衰Ⅱ号方治疗慢性肾功能衰竭的可能作用机制.方法 SD大鼠采用5/6肾切除方法制备慢性肾功能衰竭大鼠模型,将造模成功的30只大鼠随机分为模型组、肾衰Ⅱ号方组及双歧三联活菌组各10只,另设空白组大鼠10只.肾衰Ⅱ号方组给予浓度为6.09g/ml肾衰Ⅱ号方药液10ml/kg灌胃,双歧三联活菌组大鼠给予双歧三联活菌...     

清肠栓对UC模型大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞Fas、FasL蛋白表达的影响

目的:现察溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控蛋白Fas、FasL的表达以及清肠栓对相关表达的影响.探讨清肠栓治疗溃疡性结肠炎的作用机制.方法:用5%2,4,6一三硝基苯磺酸100m/kg灌肠建立大晟UC模型,运用电镜、原位末端标记细胞凋亡检测法(TUNEL法)和Fas、FasL蛋白免疫组化染色法,分别检测正常大鼠、UC模型大鼠以及经柳氮磺胺吡啶或清肠栓治疗后的大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞Fas、FasL蛋白的表达情况.结果:与正常组相比,模型组大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡减慢,结肠黏膜固有层淋巴细胞上FasL的表达率增加,Fas的表达率下降.经清肠栓治疗后UC模型大鼠淋巴细胞凋亡增加,结肠黏膜固有层淋巴细胞上FasL的表达率下降,Fas的表达率增加.结论:溃疡性结肠炎的发病可能是由于结肠黏膜固有层FasL高表达与Fas表达不同步,降低了Fas/FasL介导的淋巴细胞凋亡率,导致淋巴细胞凋亡减慢.清肠栓可能因为诱导结肠黏膜固有层FasL与Fas同步表达,诱导结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡,从而达到缓解溃疡性结肠炎的目的.     

四君子汤合白头翁汤治疗溃疡性结肠炎的临床分析

目的：分析四君子汤合白头翁汤治疗溃疡性结肠炎的临床效果,对溃疡性结肠炎的临床治疗提供一些参考数据。方法：选取从2010年9月-2013年9月期间在我院接受诊治的溃疡性结肠炎病人148例为对象进行研究,这些患者均有腹泻、里急后重等溃疡性结肠炎症状,各74例;对照组选用白头翁汤,试验组在对照组的基础上联合四君子汤进行治疗。结果：患者治疗后试验组总有效率为94．5％,对照组患者总有效率为85．1％;试验组的显效人数和总有效率均高于对照组患者的治疗效果,比较得P〈0．05,即比较差异有意义。结论：四君子汤治标治本,促进患者增强免疫力,增强自身的外界抵抗能力。患者治疗后试验组显效,比较得P〈0．05,说明四君子汤可以达到扶正祛邪、帮助机体尽快启动自我恢复和修复标本兼治之效果,值得推广。     

连理汤对TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型结肠及外周血中炎症相关因子影响的拆方研究

目的：采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的大鼠溃疡性结肠炎（UC）模型,观察连理汤各拆方药组及其配伍对UC大鼠外周血及结肠组织中细胞因子等含量的影响。方法：将连理汤拆分成补脾益肠药（A因素）、清热燥湿药（B因素）、温中散寒药（C因素）,以含和不含该因素为1,2水平,采用正交设计表L₈（2⁷）设试验1~7组和UC组,增设柳氮磺吡啶组（SASP）与正常对照组。采用Sprague Dawley大鼠,前9组按TNBS乙醇灌肠法塑造UC模型,试验1~7组分别灌胃相应的拆方浸膏混悬液,剂量依次为1.02,1.47,0.98,1.24,0.29,0.145,0.087 g·kg^-1,SASP组灌服柳氮磺吡啶（0.4 g·kg^-1）,以UC大鼠外周血及结肠组织中细胞因子等含量作为考察指标,观察灌服连理汤拆方14 d后各组对其含量的影响。结果：UC组大鼠结肠炎症环氧合酶-2（Cox-2）、白介素-1α（IL-1α）含量较正常对照组有显著升高（P<0.01）,金属蛋白酶类组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP-1）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）表达也有明显增强。补脾益肠药（A）在抑制结肠Cox-2方面影响显著（P<0.05）;各因素对结肠中IL-1α含量的影响均不显著,但全方效果显著（P<0.01）;补脾益肠药和清热燥湿药配伍（即A×B交互作用）对降低结肠TNF-α含量影响显著（P<0.05）;温中散寒药（C）以及补脾益肠药和温中散寒药配伍（即A×C交互作用）对抑制UC大鼠结肠组织中TIMP-1 含量有极显著影响（P<0.01）,清热燥湿药（B）以及清热燥湿药和温中散寒药配伍（即B×C交互作用）对该指标也有显著影响（P<0.05）。UC大鼠血清中IL-1α,TNF-α明显下降,拆方各因素均无显著作用;UC大鼠血清TIMP-1明显升高,温中散寒药（C）对抑制UC模型大鼠外周血中TIMP 含量有显著性影响（P<0.05）。结论：补脾益肠药在连理汤的整体疗效中起主导作用,温中散寒药及其与温补药配伍也起重要作用。     

四君子汤和右归饮对衰老大鼠学习记忆能力及自由基水平的影响

目的观察比较四君子汤、右归饮对衰老模型大鼠学习记忆能力和脑组织中自由基的影响。方法以D-半乳糖腹腔注射致亚急性衰老动物模型,观察大鼠水迷宫游泳到达出口的时间及错误次数及脑组织中SOD、MDA、NO、NOS等有关自由基指标。结果四君子汤可缩短衰老模型大鼠水迷宫游泳到达出口的时间;右归饮可升高衰老模型大鼠脑组织SOD水平,降低MDA水平,四君子汤可降低衰老模型大鼠脑组织中NO、NOS水平。结论四君子汤可改善D-半乳糖致衰老模型大鼠空间学习记忆能力,具有增强记忆的功能;右归饮能减轻模型大鼠脑组织自由基对机体的损伤,具有良好的抗自由基作用。     

久泻宁颗粒对大鼠溃疡性结肠炎细胞凋亡及其调控蛋白影响的研究

目的：探讨久泻宁颗粒对大鼠溃疡性结肠炎（UC）细胞凋亡的影响。方法：采用异种异体结肠黏膜组织致敏法结合三硝基苯磺酸（TNBS）／无水乙醇局部灌肠方法建立UC模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、补脾益肠丸组和久泻宁颗粒组,TUNEL染色方法检测结肠组织细胞凋亡,免疫组化学法检测Fas／Fas—L蛋白。结果：与正常组比较,模型组结肠组织凋亡细胞明显增多（P〈0．01）,久泻宁颗粒治疗后,凋亡细胞数目明显减少（P〈0．01）,并明显降低了凋亡相关调控蛋白Fas／Fas—L的表达（P〈0．01）。结论：久泻宁通过改善相关细胞凋亡蛋白的表达对大鼠UC模型有一定的治疗作用。     

四君子汤加味对肺癌化疗骨髓抑制的作用机制

目的:探讨四君子汤加味对肺癌化疗骨髓抑制气阴两虚证的疗效及对血清中粒-巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平的影响。方法:将中晚期肺癌患者104例患者,参照数字表法随机分为对照组和观察组各52例。对照组采用化疗方案(TP)。观察组在对照组治疗的基础上给予四君子汤加味,化疗第1天开始内服,2次/d,化疗后继续服用1周。比较两组骨髓抑制程度、白细胞减少、中医症状积分及近期临床疗效。测定两组患者外周血T细胞亚群CD3+,CD4+及CD8+水平变化。记录两组患者重组人粒细胞刺激因子注射液(rh G-CSF)使用量;检测两组患者血清中GMCSF和G-CSF水平。结果:治疗后1周,观察组中性粒细胞、血红蛋白、血小板及白细胞数量均显著高于对照组(P0.01)。观察组的中性粒细胞和白细胞减少发生率均明显低于对照组(P0.05);治疗后1周,观察组白细胞减少、中医症状积分均明显低于对照组(P0.01);观察组的近期总有效率为86.27%,显著高于对照组66%(P0.05)。观察组患者治疗后1周CD3+,CD4+均显著高于对照组,CD8+低于对照组(P0.01)。观察组rh G-CSF使用量明显少于对照组。观察组治疗后1周血清中GM-CSF和G-CSF水平均明显高于对照组(P0.01)。结论:四君子汤加味辅助用于中晚期肺癌化疗气阴两虚证患者,能改善骨髓抑制程度,降低骨髓抑制发生率,提高临床疗效,提高免疫功能和血清中GM-CSF和G-CSF水平可能是其疗效途径之一。     

艾灸预处理“天枢”穴对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障保护的机制研究

目的：观察艾灸预处理“天枢”穴对UC大鼠的抗炎效应,探讨艾灸预处理“天枢”穴对UC大鼠肠黏膜屏障的保护机制。方法：SD雄性大鼠28只,随机分为正常组、模型组、隔药灸预处理组和温和灸预处理组,每组7只。造模前先予隔药灸、温和灸预处理干预7天;预处理后予模型组、隔药灸预处理组、温和灸预处理组4%葡聚糖硫酸钠水溶液连续饮用7天。采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理学变化;免疫组化法和western blot法检测大鼠结肠组织分子的蛋白表达。结果：与正常组比较,模型组结肠组织病理学评分显著升高,Occludin、JAM1、MUC2、ZO-1蛋白表达显著降低,NF-κBp65、IL-1β蛋白表达显著升高（P ＜ 0.05）;与模型组比较,隔药灸预处理组结肠组织病理学评分显著降低,Occludin、MUC2、JAM1、ZO-1蛋白表达显著升高,NF-κBp65、IL-1β蛋白表达显著降低（P ＜ 0.05）,温和灸预处理组结肠组织病理学评分显著降低,Occludin、MUC2、ZO-1蛋白表达显著升高,IL-1β蛋白表达显著降低（P ＜ 0.05）。结论：隔药灸预处理、温和灸预处理“天枢”穴均能升高UC大鼠肠黏膜屏障相关蛋白的表达,可能是艾灸有效预防减轻UC的机制之一。     

肠内营养合早期中药干预对胃大部切除大鼠肠道黏膜细胞更新状态的影响

目的探讨肠内营养合早期中药干预对胃大部切除大鼠肠道细胞更新状态指标(肠道黏膜细胞凋亡率)的影响及机制。方法将60只雄性SD大鼠建立胃大部切除模型,随机分成对照组(C),普通肠内营养组(EN组),肠内营养加四君子汤组(S-EN组)。从术后第1天起连续营养支持7 d,各组营养液的热量、含氮量均相同。观察术前1 d、术后1 d、3 d、7 d的肠道细胞更新状态指标(肠道黏膜细胞凋亡率)的变化。结果S-EN组术后3 d后肠道黏膜细胞凋亡率显著高于C组和EN组(P<0.05)。结论肠内营养合早期中药(四君子汤)干预可提高术后大鼠的营养状态和肠道细胞更新状态,明显改善肠黏膜屏障功能。     

黄芩汤对TNBS诱导的结肠炎大鼠IL-23/IL-17通路的影响

目的:观察黄芩汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎大鼠白细胞介素23(IL-23)/白细胞介素17(IL-17)通路的影响。方法:将32只大鼠随机分为正常对照组、TNBS结肠炎组、TNBS+黄芩汤治疗组(1.2 g·kg-1)、TNBS+美沙拉嗪治疗组(10 mL·kg-1,ig),每组8只。除正常对照组外,其余各组均应用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法建立结肠炎模型,造模完成后,各组分别按设计剂量连续给药1周。用酶联免疫吸附法(ELISA)分析大鼠血清中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素23(IL-23)的水平,用real-time PCR方法检测大鼠结肠组织中IL-17,IL-17R,IL-23,IL-23R,RORγt的mRNA水平。结果:黄芩汤治疗能有效降低TNBS诱导的结肠炎大鼠血清中IL-17(262.75±17.19 ng·L-1和IL-23(56.75±6.20)ng·L-1的蛋白水平,降低结肠组织中IL-17(2.606±0.8),IL-17R(5.33±1.10),IL-23(2.16±0.19),IL-23R(3.34±0.70),RORγt(0.74±0.17)的mRNA水平。结论:黄芩汤能有效的调节TNBS诱导的结肠炎大鼠IL-23/IL-17通路,这可能是其治疗结肠炎的免疫机制之一。     

四君子汤对两种脾虚模型大鼠肠道菌群紊乱的影响

目的 观察两种脾虚模型大鼠肠道菌群的变化,研究四君子汤对肠道菌群紊乱的影响。