谷氨酸脱羧酶预防NOD小鼠胰岛炎的机制

谷氨酸脱羧酶 (ＧＡＤ)预防ＮＯＤ小鼠胰岛炎和糖尿病(ＤＭ) 〔1,2〕的机制尚未阐明。本研究探讨ＧＡＤ在预防ＮＯＤ鼠胰岛炎过程中 ,对胰岛 β细胞凋亡和Ｆａｓ及其配体ＦａｓＬ及ｂｃｌ ｘ表达的影响。一、材料和方法ＮＯＤ小鼠 ,ＧＡＤ ,动物实验及胰岛炎的检测方法均同先前报道〔1〕。细胞凋亡染色试剂盒、抗Ｆａｓ、抗ＦａｓＬ、抗ｂｃｌ ｘ抗体、生物素标记羊抗鼠ＩｇＧ(1/30 0 )和ＡＢＣ试剂 (1/5 0 0 )均由武汉博士德公司提供 ,二氨基联苯胺由瑞士进口分装。1.β细胞凋亡计数 :用ＴＵＮＥＬ原位末端标记法染色凋亡细胞 ;用ＡＢＣ免…     

细胞间粘附分子—1与脑缺血再灌注损伤

细胞间粘附分子－１是在血管内皮细胞表达的免疫球蛋白超家族成员之一。它可以作为配基与白细胞表面表达的ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）和Ｍａｃ－１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）分子相结合,介导白细胞与血管壁内细胞的粘附及白细胞穿出血管壁,从而在脑缺血及脑缺血再灌注损伤中起到重要作用。     

CD86对抗原引起气道嗜酸细胞浸润和气道高反应性作用？…

目的 探讨ＣＤ８６分子对抗原引起气道炎症和气道高反应性的影响,加深认识ＣＤ８６在支气管哮喘发病机制中的作用。方法 应用鸡卵清蛋白致敏和刺激ＢＡＬＢ／ｃ小鼠以诱导嗜酸细胞（ＥＯＳ）聚集到气道,收集支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ０细胞并以流式细胞仪检测ＣＤ８６分子的表达水平;观察静脉注射抗ＣＤ８６单克隆抗体后ＢＡＬＦ中ＥＯＳ数和气道反应性的变化。     

共刺激信号与支气管哮喘大鼠γδT细胞活化关系的研究

我们以前的研究表明[1,2 ] ,γδＴ细胞在支气管哮喘 (简称哮喘 )患者支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中明显活化 ;γδＴ细胞可能存在Ｔｈ1/Ｔｈ2模式 ,并表现为Ｔｈ2优势应答。为进一步阐明γδＴ细胞活化的细胞和分子机制 ,我们探讨了单核 /巨噬细胞 (Ｍｏｎ/Ｍ)与γδＴ细胞间共刺激分子Ｂ7∶ＣＤ2 8/ＣＴＬＡ 4的改变。材料与方法　 2～ 3月龄雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 0只 ,体重(2 0 0± 5 0 )ｇ。随机分为正常组和哮喘组 ,每组各 10只。哮喘模型的建立、鉴定及标本的收集和处理按文献 [1]方法。用补体攻击结合洗淘法进行γδＴ细胞选择…     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞中FasL的表达

Ｆａｓ(ＣＤ95 )和ＦａｓＬ(ＣＤ95Ｌ)是近年来发现的一对介导细胞凋亡的细胞表面分子 ,在慢性乙型肝炎 (ＣＨＢ)患者的肝脏浸润淋巴细胞中可以检出ＦａｓＬ。一般认为 ,ＦａｓＬ的表达与肝脏炎症活动程度呈正相关 ,即肝脏的炎症活动性越强 ,ＦａｓＬ表达亦越强[1] 。我们采用流式细胞仪检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞中ＦａｓＬ表达阳性细胞的百分率 ,以期为肝病的预后判断及指导治疗提供一个客观而简便快速的检测方法。材料及方法一、研究对象慢性乙型肝炎病例均选自第二军医大学长征医院1998年 5月至 1999年 4月的住院患者 ,共 5 2…     

钙离子信号与肥大细胞RBL～2H3活化

细胞内钙离子浓度 ([Ｃａ2 ]ｉ)的改变是细胞激活非常重要的第二信使途径 ,肥大细胞在受到抗原刺激后 ,可迅速释放组胺等介质。但在其活化过程中 ,钙离子信号是如何改变的 ?我们通过流式细胞仪 (ＦＡＣＳ)和激光共聚焦荧光显微镜分析 ,观察了大鼠肥大细胞系ＲＢＬ 2Ｈ3受抗原活化时钙离子信号的变化。一、材料与方法1 培养板购自Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｓｔａｒ公司 ,抗二硝基苯酚 (ＤＮＰ)ＩｇＥ和乙二胺四乙酸 (ＥＤＴＡ)购自Ｓｉｇｍａ公司 ,ＤＮＰ 牛血清白蛋白 (ＢＳＡ )、Ａ2 3187、Ｆｌｕｏ 3/ＡＭ和抗磷酸酪氨酸单抗(Ｍａｂ ＰＴｙｒ…     

CD86对抗原引起气道嗜酸细胞浸润和气道高反应性作用的研究

目的　探讨ＣＤ８６ 分子对抗原引起气道炎症和气道高反应性的影响,加深认识ＣＤ８６ 在支气管哮喘发病机制中的作用。方法　应用鸡卵清蛋白致敏和刺激ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠（ 每组８ 只） 以诱导嗜酸细胞（ＥＯＳ）聚集到气道,收集支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ） 细胞并以流式细胞仪检测ＣＤ８６ 分子的表达水平;观察静脉注射抗ＣＤ８６ 单克隆抗体后ＢＡＬＦ中ＥＯＳ数和气道反应性的变化。结果　小鼠经抗原致敏和刺激后ＢＡＬＦ中可以见到大量的ＥＯＳ,气道反应性亦明显升高,ＢＡＬＦ细胞所表达的ＣＤ８６ 水平也随之增高。经抗ＣＤ８６ 单克隆抗体处理后,ＢＡＬＦ中ＥＯＳ数降低了６７％ （ Ｐ＜０－０１）;同时,气道反应性也下降６９％ （ Ｐ＜ ０－０１）。此外,抗ＣＤ８６ 单克隆抗体还可以抑制肺组织局部白细胞介素４ 和白细胞介素５ 的产生。结论　抗ＣＤ８６ 单克隆抗体能够抑制气道ＥＯＳ浸润和降低气道反应性,其作用机制可能是通过抑制局部白细胞介素４ 和白细胞介素５ 产生而实现。提示抑制气道抗原呈递细胞的活性应有益于哮喘的治疗。     

哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与白细胞介素—1β转换酶,Fas表达的关联 …

支气管哮喘是由嗜酸粒细胞等多种炎性细胞参与的慢性气道炎症性疾病。哮喘患者肺内嗜酸粒细胞浸润是其显著的病理特征。这种嗜酸粒细胞增多,除了与哮喘体内嗜酸粒细胞生成增多外,还与嗜酸粒细胞在肺内生存时间延长,即正常的细胞凋亡受到抑制有关。本实验通过观察哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(ＢＡＬＦ)中嗜酸粒细胞的凋亡和白细胞介素1β转换酶(ＩＣＥ)及Ｆａｓ的表达,探讨哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与ＩＣＥ和Ｆａｓ表达的关系。一、材料与方法1.健康雄性豚鼠30只,体重400～500ｇ,随机分为2组,每组15只。哮喘组:采用卵白蛋白致敏和激发建立哮喘模…     

哮喘气道炎症粘附机制的实验研究

目的评价细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）、Ｐ选择素在哮喘气道炎症粘附机制中的作用,进一步阐明哮喘的发病机理。方法用酶联免疫吸附试验、肺组织免疫组化检查和呼吸生理学方法系统观察正常组和哮喘组豚鼠各项指标。结果（１）哮喘组豚鼠肺潮气量、动态肺顺应性（Ｃｄｙｎ）和肺气道阻力与对照组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１及Ｐ＜０．０５）。（２）哮喘组豚鼠血浆和肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）可溶性ＩＣＡＭ１（ｓＩＣＡＭ１）、可溶性Ｐ选择素、血清和ＢＡＬＦ嗜酸粒细胞阳离子蛋白（ＥＣＰ）与对照组比较,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）;ＢＡＬＦ中白细胞介素８（ＩＬ８）与对照组比较差异也有显著性（Ｐ＜０．０１）。（３）哮喘组豚鼠肺组织（气道上皮和血管内皮）ＩＣＡＭ１和ＩＬ８表达与对照组比较,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ＩＣＡＭ１、Ｐ选择素、ＩＬ８、ＥＣＰ参与介导了哮喘气道炎症的粘附过程     

三种效应细胞体外杀伤实验研究

淋巴因子激活的杀伤细胞 (ＬＡＫ)疗法是常用的肿瘤生物疗法。目前寻找高效、低毒、价廉的新型抗瘤免疫活性细胞是生物治疗的新方向。粘附ＬＡＫ细胞 (ａｄｈｅｒｅｎｔＬＡＫｃｅｌｌｓ ,Ａ ＬＡＫ)是指在培养过程中能粘附塑料培养容器表面的一种以大颗粒淋巴细胞为主的一组ＬＡＫ细胞 ,占ＬＡＫ细胞总数的 4%左右 ,其抗瘤能力和体外扩增能力很强 ;抗ＣＤ3 抗体激活的杀伤细胞—ＣＤ3 ＡＫ ,具有高效激活与扩增、长期存活、体内外抗瘤活性显著高于ＬＡＫ细胞及低毒副反应等特征。此两种细胞被寄希望成为应用于临床的新一代高效抗瘤效应细胞…     

结核性淋巴结炎组织中Fas/FasL的检测

资料表明,Ｆａｓ／ＦａｓＬ介导的细胞凋亡在肺结核病的发生过程中具有很重要的作用［１,２］。我们采用免疫组化方法检测了３５例结核性淋巴结炎组织Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达情况,并对其意义进行探讨。材料和方法３５例石蜡包埋的结核性淋巴结炎病理组织和２０例淋巴结正常组织来自深圳市东湖医院和深圳市红十字会医院病理科。免疫组化检测石蜡组织中Ｆａｓ和ＦａｓＬ参照二抗试剂盒（ＥｎＶｉｓｉｏｎｍＴＭＴｗｏ－ＳｔｅｐＫｉｔ,丹麦Ｄａｋｏ公司产品）说明操作,一抗（Ａｎｔｉ－Ｆａｓ及Ａｎｔｉ－Ｆａｓ－Ｌ）为美国ＳａｎｔａＣ…     

系统性红斑狼疮患者红细胞I型补体受体与淋巴细胞细胞间粘附分子—1／淋巴细胞功能相关抗原—1表达的研究

系统性红斑狼疮 (ｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ ,ＳＬＥ)是一种自身免疫性疾病 ,在免疫学上最突出特点是Ｂ细胞功能亢进 ,自发产生大量多克隆免疫球蛋白和自身抗体。其主要病理改变是由于大量的自身抗体与抗原结合形成免疫复合物并激活补体引起血管炎症。随着人们对ＳＬＥ发病机制探讨的进一步深入 ,粘附分子 (ＣＡＭｓ)在ＳＬＥ中的异常改变已引起了人们的高度重视。已知淋巴细胞功能相关抗原 1(ＬＦＡ 1,ＣＤ11ａ/ＣＤ18)和细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1,ＣＤ5 4 )是一对存在配受体关系的重要粘附分子 ,与ＳＬＥ…     

多发性肌炎/皮肌炎患者粘附分子检测的临床意义

多发性肌炎 (ｐｏｌｙｍｙｏｓｉｔｉｓ,ＰＭ )是以骨骼肌为主要损害部位的自身免疫性疾病 ,同时伴有皮肤损害者称为皮肌炎(ｄｅｒｍａｔｏｍｙｏｓｉｔｉｓ,ＤＭ) ,其病因和发病机制不十分清楚 ,白细胞通过与内皮细胞的相互作用浸润到肌肉是发病的关键步骤 ,在这个过程中涉及到粘附分子的表达。本研究的目的是观察ＰＭ/ＤＭ患者外周血淋巴细胞功能抗原 1(ＬＦＡ 1β)亚单位 (ＣＤ18)、细胞间粘附分子 3(ＣＤ5 0 )、细胞间粘附分子 1(ＣＤ5 4 )、非常晚抗原 4 (ＶＬＡ 4 )α、β亚单位 (ＣＤ4 9ｄ、ＣＤ2 9)及Ｌ 选择素 (ＣＤ6 2Ｌ)的表达…     

调节转录因子AML/CBF与白血病

调节转录因子 (ＲＴＦ)是特异性识别和结合在启动子上游的顺式作用元件的核蛋白分子 ,其作用是调控靶基因的转录。核心结合因子 (ＣＢＦ)也称急性髓性白血病 (ＡＭＬ)是 2 0世纪 90年代初发现的一个ＲＴＦ。本文就其与白血病的关系的研究作一综述。1 　ＡＭＬ/ＣＢＦ的结构ＡＭＬ/ＣＢＦ是一个异二聚体转录因子家族 ,它包括α亚单位和 β亚单位。迄今发现哺乳动物细胞有 3种不同的α亚单位 (ＡＭＬ1 /ＣＢＦα2、ＡＭＬ2 /ＣＢＦα3和ＡＭＬ3 /ＣＢＦα1 )和一种 β亚单位 (ＣＢＦβ) 〔1〕。ＡＭＬ1是Ｒｕｎｔ样转录因子 (Ｒｕｎｘ 1、Ｒｕ…     

β2受体激动剂对哮喘豚鼠糖皮质激素受体功能影响的研究

糖皮质激素 (ＧＣ)和支气管舒张药 β2 受体激动剂 (β2ＡＡ) ,临床上常被联合用于治疗支气管哮喘。近年来 ,有人认为长期规则使用 β2 ＡＡ可使哮喘病情恶化和增加病死率[1] 。我们的研究旨在从分子水平探索 β2 ＡＡ沙丁胺醇对哮喘豚鼠血淋巴细胞糖皮质激素受体 (ＧＲ)功能的影响 ,为临床合理应用β2 ＡＡ和ＧＣ提供重要的实验依据。材料与方法　哮喘动物模型的复制及分组 :5 0只豚鼠 ,雄性 ,体重 45 0～ 5 5 0ｇ ,参照国内、外常用的方法复制哮喘模型。哮喘豚鼠随机分为对照组 (Ａ组 ,10只 ) ;沙丁胺醇组 (Ｂ组 ,10只 ) :每次予沙丁胺醇 …     

辛伐他汀对大鼠肝贮脂细胞血小板衍生生长因子效应的影响

血小板衍生生长因子 (ＰＤＧＦ)在肝贮脂细胞 (ＦＳＣ)激活和增殖中起重要作用[1] 。研究显示 ,3 羟基 3 甲基戊二烯辅酶Ａ(ＨＭＧ ＣｏＡ)还原酶抑制剂能抑制多种细胞增殖 ,阻断生长因子对细胞的促进作用[2 ] 。因此 ,我们选用一种脂溶性ＨＭＧ ＣｏＡ还原酶抑制剂辛伐他汀 ,观察其对ＰＤＧＦ诱导培养大鼠肝ＦＳＣ增殖、胶原合成和细胞内Ｃａ2 + 变化的影响。一、材料和方法1.药物和试剂 :辛伐他汀 (默沙东公司 ) ;链酶蛋白酶Ｎｙｃｏｄｅｎｚ、甲羟戊酸 (ＭＶＡ)、碘化丙啶 (ＰＩ)、ＰＤＧＦ ＢＢ和Ｆｕ ｒａ 2 /ＡＭ (Ｓｉｇｍａ公司 ) …     

支气管哮喘患者CD23表达与体外调控的研究

为了探讨ＣＤ２３在支气管哮喘（简称哮喘）发病中的作用，本研究对２８例支气管哮喘患者外周血采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）法检测单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＣＤ２３阳性百分率（ＣＤ＋２３％），发现中、重度和轻度哮喘患者ＣＤ＋２３％均显著高于健康对照组（Ｐ＜０．０５），且与血清ＩｇＥ水平呈正相关（ｒ＝０．９８，Ｐ＜０．０１）。ＣＤ２３表达的体外调控发现干扰素（ＩＦＮ）－γ可抑制哮喘患者的ＰＢＭＣ自发及重组白细胞介素（ｒＩＬ）－４诱导表达ＣＤ２３。结果提示ＣＤ２３异常表达与哮喘发病机制有关，ＣＤ＋２３％检测对支气管哮喘的诊断、严重度分级有一定的参考价值。     

粒/巨噬细胞集落刺激因子及白介素-4增强肝癌患者树突状细胞免疫功能

树突状细胞 (ＤＣ)因其独特的免疫学特性 ,在诱导特异性抗肿瘤细胞免疫中起关键作用 ,细胞因子对ＤＣ免疫功能具调节作用[1] 。我们以粒 /巨噬细胞集落刺激因子(ＧＭ ＣＳＦ)及白介素 4(ＩＬ 4)联合刺激肝癌患者外周血ＤＣ ,研究探讨 ,ＧＭ ＣＳＦ和ＩＬ 4对ＤＣ表面免疫分子ＨＬＡ ＤＲ和Ｂ7 2表达水平及ＤＣ免疫功能的影响。材料和方法本院 1995～ 1996年临床确诊ＣｈｉｌｄＣ级原发性肝癌患者共 10例 ,男 9例 ,女 1例 ,年龄为 2 8～ 5 6岁 ,平均 48岁 ,均未接受任何抗肿瘤治疗。ＧＭ ＣＳＦ、ＩＬ 4、抗ＣＤ3 单克隆抗体(ＭｃＡｂ)及抗…     

血小板源生长因子和脂多糖对吸烟大鼠小气道平滑肌细胞凋亡的影响

采用免疫组织化学和末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法 (ＴＵＮＥＬ)来观察血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)和脂多糖 (ＬＰＳ)对体外培养的吸烟大鼠小气道平滑肌细胞Ｂｃｌ 2、Ｂａｘ和凋亡的影响 ,以探讨其对小气道平滑肌细胞凋亡的调节作用。材料与方法　 (1)主要试剂 :小鼠抗大鼠Ｂｃｌ 2单克隆抗体 ,小鼠抗大鼠Ｂａｘ单克隆抗体 (美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司 ) ,ＴＵＮＥＬ试剂盒 (德国宝灵曼公司 ) ,ＰＤＧＦ(Ｄｒ ＭａｒｓｈａＡ惠赠 ) ,ＬＰＳ(美国Ｓｉｇｍａ公司 ) ,免疫组织化学染色试剂盒和ＤＡＢ显色试剂盒…     

Fas系统与缺血性脑卒中

Ｆａｓ与配体ＦａｓＬ是一对细胞膜表面分子 ,二者结合可引起Ｆａｓ 细胞出现程序化细胞死亡 (ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ) 〔1〕。ＰＣＤ又称凋亡 ,凋亡细胞有一系列形态学变化 ,最终被邻近细胞吞噬清除 ,不引起炎症反应。Ｆａｓ是细胞凋亡的信号分子 ,又称为“死亡基因” ,ＦａｓＬ为其天然配体 ,又称细胞凋亡因子。细胞凋亡是维持神经系统生长发育动态平衡的主要手段 ,脊椎动物神经系统在正常发育过程中 ,5 0 %以上的各种神经细胞与靶细胞形成突触后死亡〔2〕。同时某些病理情况下 ,如缺血再灌注和兴奋性氨基酸的…