槲皮素通过调控p21/cip1和p27/kip1蛋白的稳定性抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖

目的:探究槲皮素通过调控p21/cip1和p27/kip1蛋白的稳定性对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的影响.方法:CCK-8试剂盒检测口腔鳞状细胞癌细胞(SCC-15)增殖情况;流式细胞术检测SCC-15细胞周期分布;Western blot检测CyclinD1/CDK复合体、p21/cip1、p27/kip1、p-GSK3...     

p27/kip1与泌尿系肿瘤的关系

不同生命体细胞及同一系统中不同细胞的细胞周期时间不同 ,一般Ｓ1 +Ｇ2 +Ｍ的时间变化较小 ,而Ｇ1 期时间变化较大 ,Ｇ1 期后期存在一限制点 ,Ｇ1 期的调节蛋白合成积累到能使细胞越过限制点时 ,细胞就不依赖于胞外生长刺激因子的存在而顺延 ,完成整个周期。因此Ｇ1 期是控制细胞生长 ,决定细胞命运的阶段 ,也即是细胞周期的关键和限速阶段。细胞周期由正负调节蛋白控制 ,目前认为细胞周期的正负调节蛋白包括 :周期素 (ｃｙｃｌｉｎｓ)、周期素依赖性激酶 (ｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ ,ＣＤＫｓ)、成视网膜细胞瘤蛋白 (ｒ…     

子宫内膜癌组织中基因p16和p27kip1的表达及其临床意义

 目的 研究p16、p27kip1在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组化技术对65例子宫内膜癌组织进行表达检测，结合临床病理学指标进行分析。结果 p16、p27kip1在65例子宫内膜癌组织的阳性表达率分别是47.7 ％和41.5 ％。p16、p27kip1在65例子宫内膜癌组织的阳性表达率均与组织学分级密切相关，在组织分化好的阳性表达率显著高于组织分化差的阳性表达率（P＜0.05，P＜0.05）。结论 p16、p27kip1在子宫内膜癌的发生发展中起着重要的调控作用。p16和p27kip1的缺失表达与子宫内膜癌的生物学行为密切相关，对分析子宫内膜癌的预后和指导临床治疗均有重要意义。     

Skp2和p27kip1与肿瘤关系的研究进展

肿瘤的重要特征之一是细胞周期调控机制紊乱,细胞分化受阻,细胞表现为无限制、自主的增殖和分裂。细胞周期主要有两个调定点：C1／S和G2／M期调定点。p27kip1是一种新发现的CDKI（周期蛋白依赖性激酶抑制因子）,属于G1／S期负调控因子,可抑制细胞进入S期,而Skp2（S期激酶相关蛋白2）可通过泛素蛋白酶体途径起到特异性识别底物的作用,降解磷酸化的p27kip1,从而促使细胞进入s期,导致肿瘤的发生。本文就Skp2、p27kip1在肿瘤方面的最新研究进展作一综述。     

p27kip1亚细胞定位与肿瘤

p27kip1是一种广谱的细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)抑制剂,主要通过抑制CDK的活性,来阻断细胞周期中G1/S期的转换,从而实现对细胞周期的负调控.p27 kip1基因除了作为抑癌基因还有致瘤的潜能.这种双向性又在其亚细胞定位中体现,p27 kip1多个位点的磷酸化参与p27 kip1亚细胞定位的调控.这些研究可能对肿瘤的预后提示和治疗方面具有重要意义.本文就p27kip1亚细胞定位在肿瘤研究中的作用、磷酸化对p27kip1亚细胞定位的影响及p27kip1的研究对肿瘤治疗及预后方面的影响进行综述.     

人p27kip1重组腺病毒载体的构建及其介导的p27kip1表达

目的　研究外源性p2 7kip1基因对细胞周期及细胞增殖的影响。方法　构建CMV启动子转录调控的含人p2 7kip1cDNA的E1区替代的腺病毒载体pAxlcw .CIhp2 7kip1,与经EcoT2 2 1酶切的Ad5腺病毒DNA -末端肽复合物共转染 2 93细胞 ,制备p2 7kip1重组腺病毒 ,在体外转染HeLa细胞 ,Westernblot、FACS及MTT检测分析外源性p2 7kip1蛋白在细胞内的表达 ,以及对细胞周期及细胞增殖的影响。结果　获得含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 ,滴度为 1.7× 10 9pfu/ml。体外转染HeLa细胞2 4h后 ,p2 7kip1蛋白在p2 7kip1转染后的HeLa细胞中高表达 ;FACS检测表明 ,p2 7kip1和LacZ重组腺病毒转染后的HeLa细胞 ,经 10 %血清刺激后处于G1期的细胞分别为 89.93%和 5 9.84% ;MTT法检测表明 ,人p2 7kip1重组腺病毒转染后的HeLa细胞经 2 0 %血清刺激后 ,48及 72h的A值均低于LacZ重组腺病毒转染后的HeLa细胞 (P <0 .0 1)。结论　本研究中所制备的p2 7kip1重组腺病毒能有效介导外源性p2 7kip1基因在体外转染HeLa细胞并高表达p2 7kip1,抑制细胞由G1期向S期过渡 ,从而抑制细胞增殖 ,为进一步研究p2 7kip1基因治疗奠定了基础。     

乳腺癌组织中PTEN和p27kip1蛋白的表达及其相互关系

目的:探讨PTEN和p27kip1在乳腺癌组织中的表达规律及其相互关系。方法:采用免疫组化SP法检测64例乳腺癌组织中PTEN和p27kip1蛋白的表达。结果:乳腺癌组织PTEN(34/64)和p27kip1(33/64)蛋白表达显著低于正常乳腺组织(15/15),P值分别为0·0082和0·0078。有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组PTEN表达分别为13/33、3/11和16/38,明显低于无腋淋巴结转移(21/31)、无远处转移(31/53)和ER阳性组(18/26),P值分别为0·0240、0·0063和0·03475。p27kip1在乳腺癌有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组的表达分别为7/33、2/11和8/38,明显低于无腋淋巴结转移(15/31)、无远处转移(20/53)和ER阳性组(14/26),P值分别为0·0230、0·0440和0·0071。两者表达均与肿瘤大小无关。两种蛋白表达水平具有显著的相关性,P=0·0041。结论:PTEN、p27kip1表达异常与乳腺癌转移及恶性程度密切相关,两种基因蛋白表达强度一致,显示其在乳腺癌演进中具有协同作用。     

p27kip1:细胞周期的正/负双向调控因子?

细胞周期是细胞生命活动的基本过程,机体中存在着精密的机制参与这一过程的调控,目前最令人瞩目的是cyclin-CDK-CKI组成的复杂分子网络.p27kip1是CIP/KIP家族的主要成员,传统的观点认为p27kip1仅作为CDK的抑制因子参与细胞周期的负向调控,但有证据表明在特定的条件下p27kip1对于细胞周期也存在着正向调控作用.p27kip1在细胞周期中究竟扮演着怎样的"角色"?它是否具有"双重身份"?这种矛盾是如何得到统一的?     

丝氨酸羟甲基转移酶基因C1420T多态性与食管鳞癌、贲门腺癌易感性的关系

背景与目的：丝氨酸羟甲基转移酶（serine hydroxymethyrltransferase,SHMT）是叶酸代谢过程中的关键酶,它通过为嘌呤、胸苷酸、蛋氨酸等重要物质的合成提供一碳单位来影响基因的甲基化和DNA的合成过程,与肿瘤的发生、发展关系密切。本研究旨在探讨河北省食管癌高发人群SHMT1 C1420T单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）与食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）和贲门腺癌（gastric cardiac adenocarcinoma,GCA）易感性的关系。方法：采用双相引物-聚合酶链反应（polymerase chain reaction-with confronting two-pair primers．PCR-CTPP）方法,检测584例ESCC患者、467例GCA患者和540名健康对照者的SHMT1 C1420TSNP的基因型．并用非条件Logistic回归模型分析多态性与食管鳞癌和贲门腺癌发病风险的关系。结果：上消化道肿瘤（upper gastrointestinal cancers,UGIC）家族史可显著增加高发区人群食管鳞癌和贲门癌的发病风险,经性别、年龄、吸烟校正后的OR值分别为2．89（95％CI=2．23～3．73）和1．68（95％CI=I．28～2．23）。ESCC组和GCA组C／T基因型频率（分别为12．0％和10．9％）明显低于健康对照组（16．5％）（P值分别〈0．05和0．01）。与C／C基因型相比,携带C／T基因型的个体ESCC、GCA的发病风险显著降低,经性别、年龄、吸烟、家族史校正后的OR值分别为0．70（95％CI=0．50～0．98）0．55（95％CI=0．38～0．81）。分层分析显示,与C／C基因型相比,C／T基因型可以显著降低非吸烟个体ESCC和GCA的发病风险,经性别、年龄、家族史校正后的OR值分别为0．54（95％CI=0．33～0．90）,0．56（95％CI=0．33～0．95）。另外,虽然C／T基因型可显著降低UGIC家族史阳性和阴性个体贲门腺癌的发病风险[校正OR值分别为0．46（95％CI=0．24～0．90）和0．62（95％CI=0．38～0．99）],该基因型仅可降低UGIC家族史阳性个体ESCC的发病风险（校正OR值为0．51,95％CI=0．29-0．89）。结论：SHMT1 C／T基因型可以显著降低中国河北省高发区ESCC、GCA的发病风险。     

XRCC5基因多态性与高发区食管癌、贲门癌遗传易感性的相关性

背景与目的:XRCC5为DNA双链断裂修复基因,其表达异常、活性紊乱与肿瘤的发生和发展密切相关.本研究旨在探讨XRCC5基因多态性与河北省食管癌高发区一磁、涉县人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)和贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)遗传易感性的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测329例ESCC患者、255名GCA患者和631例健康对照人群XRCC5 C74468A、G74582A单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)的基因型分布.结果:XRCC5基因C74468A C和A的等位基因频率及C/C、A/C、A/A基因型频率在ESCC、GCA及对照组之间差异无显著性(P＞0.05).根据吸烟状况和上消化道肿瘤(UGIC)家族史分层分析发现,携带A等位基因(A/C A/A基因型)可能降低上消化道肿瘤阳性家族史人群的ESCC、GCA发病风险(经性别、年龄和吸烟校正后的OR分别为0.58和0.61,95%CI分别为0.38～0.90和0.38～0.97).XRCC5 G74582A基因G、A等位基因频率及鞍A/A、A/G、G/G基因型频率在ESCC、GCA及对照组之间亦差异无显著性(P＞0.05).分层分析发现,携带G等位基因(A/G G/G基因型)可能降低上消化道肿瘤阳性家族史人群的GCA发病风险(经性别、年龄和吸烟校正后的OR为0.63,95%CI为0.40～0.98).两多态性位点联合分析显示,ESCC、GCA患者与健康对照组的单体型分布差异也无显著性(P＞0.05).结论:XRCC5 C74468A A等位基因(A/C A/A基因型)可能降低磁县和涉县上消化道肿瘤阳性家族史人群的ESCC、GCA发病风险.而G74582A G等位基因(A/G G/G基因型)可能仅降低该地区上消化道肿瘤阳性家族史人群的GCA发病风险.     

p73基因多态性与食管癌、贲门癌遗传易感性的关系

背景与目的:p73作为一种抑癌基因,其第二外显子非编码区存在两个单核苷酸多态性(G4C14-A4T14),可以形成茎环结构而影响基因表达。本研究旨在探讨河北省食管癌高发区人群中这两个连锁多态性与食管癌、贲门癌易感性的关系。方法:采用病例-对照研究,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,分析348例食管癌患者、259例贲门癌患者和630例健康对照者的p73基因多态性。结果:具有上消化道肿瘤家族史可明显增加食管癌和贲门癌的发病风险,经性别、年龄和吸烟状况校正的OR值分别1.68(95%CI=1.28～2.20)和1.68(95%CI=1.24～2.26)。p73G4C14-A4T14基因型及等位基因型在食管癌患者、贲门癌患者和健康对照中总体分布差异无显著性。在根据吸烟状况和上消化道肿瘤家族史进行分层分析,发现在无上消化道肿瘤家族史亚组中,携带GC/AT基因型明显增加贲门癌的发病风险(OR=1.71,95%CI=1.14～2.57),而其他亚组中未见p73G4C14-A4T14多态性增加食管癌、贲门癌的发病风险。结论:p73G4C14-A4T14多态性中,携带GC/AT基因型明显增加河北省食管癌高发区无上消化道肿瘤家族史人群贲门癌的发病风险。     

胃癌中p16,p27kip1和CDK4表达的比较及其意义

目的 研究胃癌组织中p16、p27^kip1蛋白和细胞周期依赖性激酶4（cyclin—dependent kinase4，CDK4）的表达，探讨它们与胃癌临床病理特征的关系及其对预后的影响。方法 应用免疫组化S-P法，检测120例胃癌，20例胃粘膜非典型增生和30例正常胃粘膜组织切片中p16和p27^kip1和CDK4、PCNA的表达，分析它们与临床病理参数的关系。结果 120例胃癌中p16，p27^kip1和CDK4，PCNA蛋白的表达率分别为43．3％，52．5％和46．7％，70．0％，与正常胃粘膜和非典型增生相比有显著性差异（P〈0．01）。p16和p27^kip1的表达缺失与胃癌的分化程度、局部淋巴结转移和临床TNM分期有密切关系（P〈0．05，P〈0．01）。CDK4、PCNA的高表达和胃癌的淋巴结转移和临床TNM分期有密切关系（P〈0．01）。胃癌中p16、p27^kip1的表达和CDK4、PCNA的表达呈负相关（P〈0．01），而p16和p27^kip1的表达、CDK4和PCNA的表达呈正相关（P〈0．01）。结论 CDK4、PCNA的高表达和p16、p27^kip1的表达缺失与胃癌的发生以及侵袭和转移有关，可作为判断胃癌病情和预后的重要指标。     

p21基因多态性与华北地区食管癌的关联研究

目的:探讨p21基因外显子的3'非翻译区(UTR)第20碱基对的单核苷酸多态性对食管鳞状细胞癌(ESCC)发生及淋巴结转移的影响.方法:采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测202例ESCC患者和265例健康对照的p21基因外显子的3'UTR第20碱基对单核苷酸多态性基因型.结果:ESCC患者的p21基因3'UTR的多态性基因型和等位基因型分布与健康对照组差异无统计学意义,P>0.05.根据吸烟状况的分层分析发现,与C/C基因型相比,携带T/T基因型可显著增加吸烟者的ESCC发病风险,经性别和年龄校正的0R值为3.36,95%CI为1.45～7.75;而在非吸烟的患者和健康对照之闻差异无统计学意义,P>0.05.据淋巴结转移状况的分层分析,携带T/T基因型可明显增加ESCC患者淋巴结转移的风险,经性别和年龄校正的OR值为3.11,95%CI为1.28～7.52.结论:p21基因3'UTR的多态性基因型和等位基因型不单独影响ESCC的发生和发展.p21 3'UTR的T/T基因型可能增加中国北方吸烟人群ESCC易感性和ESCC患者淋巴结转移的风险性.中华肿瘤防治杂志,2009,16(1):10-12     

Jab1与p27kip1蛋白在食管鳞癌中的表达及相互关系

背景与目的:p27kip1作为细胞周期负性调节因子,主要抑制CyclinE-CDK2和CyclinD-CDK4等激酶复合物的活性,从而实现对细胞调控功能.Jab1和p27kip1的表达呈负相关,与细胞的增殖呈正相关,从而促进肿瘤发展.本研究旨在分析食管鳞癌中Jab1和p27kip1蛋白的表达水平及其与临床病理的关系,以探讨其在食管鳞癌发生、发展和预后中的作用.方法:采用免疫组化二步法及Western blot法测定60例食管鳞型细胞癌(ESCC)、20例癌旁正常食管组织(NET)(距癌旁安全切缘5.0 cm以上)中Jab1和p27kip1蛋白的表达.结果:Jab1蛋白阳性表达率在NET中为20%,与ESCC组织中的78.3%相比,差异有统计学意义(P<0.01).p27kip1蛋白阳性表达率在NET中为90%,与ESCC组织中的38%相比,差异有统计学意义(P<0.01).ESCC中Jab1的过表达与肿瘤分化程度及淋巴结转移显著相关(P<0.05),p27kip1的表达与肿瘤分化程度显著相关(P<0.05),Jab1的表达与p27kip1的表达呈负相关(r=-0.334,P<0.05).结论:Jab1作为p27kip1的负性调控分子,可能参与ESCC的发生、发展过程,联合检测Jab1及p27kip1的表达有助于综合评估ESCC的生物学行为.     

53BP1和p53基因多态性与食管鳞癌、贲门腺癌遗传易感性的关系

背景与目的:p53结合蛋白1(53BP1)可通过增强p53的转录活性,而在肿瘤抑制方面发挥重要作用.在53BP1的启动子区-885 bp处存在着T到G的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP).本实验探讨53BP1T885G基因多态性以及p53 Arg72Pro的多态性与中国河北高发区人群食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)和贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)遗传易感性的关系.方法:应用引物引入限制性内切酶分析-聚合酶链反应(primer-introduced restriction analysis-polymerase chain reaction,PIRA-PCR)方法.分析624例患者(其中ESCC 349例,GCA 275例)和635例健康对照者的53BP1 T885G和p53 Arg72Pro的基因型.结果:53BP1 T885G基因型分布在总体ESCC、GEA病例组与健康对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).根据吸烟状况和上消化道肿瘤(upper gastrointestinal cancer,UGIC)家族史分层分析显示,T885G基因型分布在病例组与健康对照组差异亦无统计学意义(P＞0.05).与Arg/Arg基因型相比,携带p53 Arg72Pro Pro/Pro基因型可降低总体GCA的发病风险,经性别、年龄、吸烟状况和UGIC家族史多因素校正后的OR值为0.79(95% CI=0.64～0.98);分层分析显示Pro/Pro基因型主要降低非吸烟组GCA的发病风险,校正后的OR值为0.72(95% CI=0.54～0.97).未发现p53Arg72Pro 对ESCC发病风险的影响.53BP1 T885G和p53 Arg72Pro 联合分析显示,在携带Pro等位基因(Arg/Pro Pro/Pro基因型)者中,同时携带T885G的G/G基因型可降低GCA的发病风险.校正后的OR值为0.74(95%CI=0.57～0.95).结论:53BP1 T885G位点可能与中国河北高发区ESCC、GCA的遗传易感性无关,p53 Arg72Pro的Pro/Pro 基因型可降低高发区GCA的发病风险.同时携带Pro等位基因(Arg/Pro Pro/Pro基因型)和53BP1 T885G的G/G基因型可降低高发区GCA的发病风险.     

乳腺癌组织p27^kip1的表达及其与细胞增殖的关系

目的：研究乳腺癌组织中细胞周期抑制剂 p27^kip1的表达及其意义,并探讨其与细胞增殖的关系。方法：应用免疫组化SP法检测80例乳腺癌和20例癌旁正常组织中 p27^kip1和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen,PCNA）的表达。结果：乳腺癌组织中 p27^kip1高表达率为53．75％（43／80）,明显低于癌旁正常组织（P〈0．01）。 p27^kip1表达与组织学分级、TNM分期及淋巴结转移均相关,P〈0．05。乳腺癌组织中 p27^kip1的表达与PCNALI呈负相关,r=0．372,P〈0．05。 p27^kip1高表达的乳腺癌术后5年无病生存率（DFS）明显高于 p27^kip1低表达者（P〈0．05）。结论： p27^kip1表达缺失可促进肿瘤细胞增殖,是判断乳腺癌发生、发展及预后的有效生物学指标。     

E-钙粘蛋白基因多态性与食管癌、贲门癌的关系

背景与目的:E-钙粘蛋白(E-cadherin,CDH1)是钙粘蛋白家族中的一个成员,与肿瘤侵袭转移密切相关。该基因启动子区存在的多态性位点可通过改变转录活性而影响该蛋白的表达。本研究旨在探讨该基因启动子区C-160A和G-347GA单核苷多态性(single nucleotide polym orphism,SNP)与中国北方人食管鳞状细胞癌(esophagealsquam ous cellcarcinom a,ESCC)、贲门腺癌(gastric cardiacadenocarcinom a,GCA)易感性和淋巴结转移的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polym erase chain reaction-restrictionfragm entlength polym orphism,PCR-RFLP)分析方法检测333名ESCC患者、239名GCA患者和343名健康对照的CDH1C-160A及G-347GA SNP的基因型。结果:CDH1C-160A及G-347GA SNP的基因型及等位基因型分布在总体ESCC患者、GCA患者和健康对照中无显著性差异(P=0.08)。根据吸烟状况及上消化道肿瘤家族史分层分析及淋巴结转移状况的分析也未发现CDH1SNPs对ESCC和GCA发病及淋巴结转移的影响。然而,与G-347GA G/G基因型相比,携带GA等位基因(G/GA GA/GA基因型)可显著增加GCA患病风险,经性别、年龄校正后的OR值为1.45(95%CI=1.03～2.04)。应用EH软件分析显示,CDH1单体型分布在ESCC患者组和健康对照组存在显著性差异