国产牛腱角膜胶原膜缓释妥布霉素的实验研究

目的探讨应用牛腱胶原研制的国产牛腱角膜胶原膜制作缓释妥布霉素及其效果.设计随机对照实验研究.研究对象新西兰家兔36只.方法将36只新西兰家兔(72眼)随机分为3组局部频繁点眼组、角膜胶原膜载药组、结膜下注射组,对3组兔眼分别用0.3%妥布霉素眼液频繁点眼、载药的角膜胶原膜贴覆于角膜表面和结膜下注射20mg硫酸妥布霉素,用免疫比浊法分别测定每组中3只兔(6眼)用药后0.5、1、3及6小时房水中妥布霉素的药物浓度.主要指标兔眼房水中妥布霉素的药物浓度.结果0.5、1、3和6小时频繁点眼组兔眼房水中妥布霉素的药物浓度分别为(0.23±0.18)μg/ml、(0.30±0.13)μg/ml、(0.21±0.04)μg/ml、(0.23±0.12)μg/ml;角膜胶原膜组房水中妥布霉素浓度分别为(4.15±0.85)μg/ml、(12.31±2.75)μg/ml、(9.03±1.47)μg/ml、(1.40±0.72)μg/ml;结膜下注射组分别为(3.55±2.82)μg/ml、(17.65±2.67)μg/ml、(7.64±4.39)μg/ml、(2.44±1.74)μg/ml.房水中妥布霉素的浓度在四个时点角膜胶原膜组和结膜下注射组都显著高于局部频繁点眼组,结膜下注射组除在1小时显著高于角膜胶原膜组外,其余时点与角膜胶原膜组无显著性差异.结论自制国产牛腱角膜胶原膜能够提高妥布霉素的角膜穿透力和其滴眼液的生物利用度,是良好的药物载体.     

角质细胞生长因子2促进兔角膜碱烧伤上皮愈合机制的研究

目的　探讨角质细胞生长因子2 (KGF- 2 )对实验性兔角膜中央碱烧伤后角膜上皮愈合的作用及其机制。方法　24只新西兰白兔的24只角膜碱烧伤眼按随机数字法分成4组,每组6只眼,其中A、B、C组为治疗组,分别以3种不同浓度: 1μg/ml、50μg/ml、100μg/mlKGF 2滴眼液治疗;D组为对照组,用磷酸盐缓冲液(PBS)滴眼液治疗;观察角膜上皮愈合情况,并做形态学检查及P63、角质蛋白单克隆抗体(AE5)、表皮细胞生长因子单克隆抗体(EGFR)免疫组化研究。结果　1 ~100μg/mlKGF 2能够促进兔角膜上皮愈合。角膜碱烧伤24h后100μg/mlKGF- 2组和对照组角膜上皮愈合率分别为40%和74% (P<0 .05);第4天时4组均出现一定反复;第10天时各治疗组近完全愈合。碱烧伤后第7天即可观察到P63阳性细胞不仅存在于角膜缘区的部分基底细胞中,同时也向角膜内迁移。如角膜碱烧伤后第7天角膜缘区P63阳性细胞数: 100μg/mlKGF 2组为( 53 .8±2. 6)个,对照组为(29. 5±2. 2)个,正常角膜为(17. 0±2. 1)个(P=0. 000);同时非角膜缘区P63阳性细胞数分别为: 100μg/mlKGF 2组为(69. 5±2. 8)个,对照组为(19 5±2 8)个,正常角膜为0个(P=0 .000)。结论　KGF- 2可激活角膜上皮干细胞,使其不断增殖分化,从而促进角膜上皮损伤的愈合。     

染料木黄酮对翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用

目的 观察染料木黄酮对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞（HPF）的抗增殖作用。方法取HPF的第3或4代进行实验；采用免疫组织化学技术检测HPF增殖细胞核抗原的表达；MTT法检测染料木黄酮对HPF增殖的抑制影响。结果当染料木黄酮的质量浓度≥3．125μg／ml时能有效地抑制细胞表达增殖细胞核抗原。MTT试验证实，作用24h，染料木黄酮质量浓度〈12．5μg／ml，抑制率与对照组比较差异无显著统计学意义（P〉0．05），作用48h之后所有用药组抑制率与对照组比较差异均有显著统计学意义（P〈0．05），且与对照组比较生长曲线显著下移。结论染料木黄酮在质量浓度≥6．25μg／ml时可显著抑制体外培养的人HPF的增殖，且与质量浓度呈一定的量效关系。     

PCNA和bcl-2在翼状胬肉成纤维细胞中的表达及蝮蛇抗栓酶的影响

目的研究增殖细胞核杭原(PCNA)和bcl-2在人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)中的表达以及蝮蛇抗栓酶(AF)对二者表达的影响。方法应用免疫组织化学方法检测体外培养的第3~6代人翼状胬肉成纤维细胞的PCNA和bcl-2表达情况以及用AF处理HPF后PCNA和bcl-1的表达情况。结果未经任何处理的HPF的PCNA阳性表达率为(60·28±0·37)%;bcl-2阳性表达率为(83·33±1·56)%。用不同含量AF(0·016、0·04和0·1U/ml)处理HPF48h后,HPF的PCNA和bcl-2均有不同程度下降,以PCNA阳性表达率下降为明显,经统计学分析,均有显著统计学意义(P<0·01)。结论体外培养的HPF有较高的PCNA阳性表达及bcl-2阳性表达。AF能抑制PCNA和bcl-2在HPF上的表达。     

增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体白细胞介素6(IL-6)表达的研究

目的 :研究白细胞介素 6(IL 6)在增殖性玻璃体视网膜病变 (PVR)玻璃体中的表达水平 ,分析IL 6在PVR中的作用。方法 :对 3 7例增殖性玻璃体视网膜病变及 1 2例正常对照玻璃体IL 6进行定量测定 ,其中视网膜脱离PVR 2 2例 ,外伤性PVR 1 5例。IL 6的测定采用双抗夹心法 (ELISA)。结果 :3 7例PVR玻璃体IL 6水平为 2 64 87± 1 3 6 4 1 pg/ml,其中 2 2例视网膜脱离并发PVR者玻璃体IL 6水平为 2 61 4 2± 1 3 1 2 7pg/ml,外伤性PVR者玻璃体IL 6水平为 2 97 97± 1 4 1 53 pg/ml。正常对照玻璃体IL 6水平为 3 5 69± 2 0 64 pg/ml。PVR玻璃体IL 6水平显著高于正常对照组 (P <0 0 1 )。IL 6水平在PVRC、D级最高。结论 :白细胞介素 6(IL 6)在PVR中呈上行性表达 ,参与PVR的发生发展。IL 6主要在PVR中晚期发挥作用。     

增殖细胞核抗原反义寡核苷酸对牛晶状体上皮细胞增殖的影响

目的　探讨增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)反义寡核苷酸对牛晶状体上皮细胞增殖的影响。方法　取体外培养的第 2代牛晶状体上皮细胞用于实验。A～F组分别加入PBS、30 μmol/LPCNA反义寡核苷酸、30 μmol/LPCNA正义寡核苷酸、10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、10 μg/LbFGF及 30 μmol/L反义寡核苷酸、10 μg/LbFGF及30 μmol/L正义寡核苷酸 ;常规培养 2 4h后 ,使用流式细胞仪检测细胞周期的变化和PCNA蛋白的含量。提取细胞mRNA ,采用地高辛标记PCNA探针和Northen酶联吸附免疫杂交法 ,在酶标仪上测定吸光度 (A值 )以表达PCNAmRNA含量。结果　牛晶状体上皮细胞S期的细胞数量占细胞总数的百分比A组为 ( 15 7± 1 8) % ,B组为 ( 7 9± 0 4) % ,两组比较差异有非常显著意义 (P <0 0 1) ;PCNAmRNA含量A组A值为 0 2 0 6± 0 0 0 4,B组A值为 0 173± 0 0 14,两组比较差异有显著意义 (P<0 0 5 ) ;PCNA蛋白表达率A组为 ( 5 5 2 7± 2 6 4) % ,B组为 ( 12 32± 1 82 ) % ,两组比较差异有非常显著意义 (P <0 0 1)。牛晶状体上皮细胞S期的细胞数量占细胞总数的百分比D组为 ( 2 3 4± 2 8) % ,E组为( 19 9± 2 3) % ,两组比较差异有显著意     

常见泪腺上皮性肿瘤中EGFL7的表达及其与血管生成和细胞增殖活性的相关性研究

目的：检测常见泪腺上皮性肿瘤中类表皮生长因子结构域 7(EGFL7)、微血管密度(MVD)、Ki67的表达,探究EGFL7与MVD、Ki67之间的相互关系。

方法：应用免疫组化法,对10例正常泪腺组织(取自因炎性假瘤、Mikulicz病等良性泪腺肿瘤切除后,标本中的部分正常泪腺组织)、20例泪腺多形性腺瘤、12例多形性腺癌、14例腺样囊性癌组织中的EGFL7蛋白、Ki67进行检测,并应用CD34标记计数MVD。

结果：EGFL7主要在泪腺多形性腺癌、腺样囊性癌的肿瘤细胞的细胞浆中表达,免疫组化染色结果显示,在正常泪腺组织中EGFL7无阳性表达,泪腺多形性腺瘤组织中EGFL7的阳性率为5%(1/20),泪腺多形性腺癌中EGFL7的阳性表达率83%(10/12),泪腺腺样囊性癌中EGFL7的阳性表达率为86%(12/14),两种恶性肿瘤中的表达率明显高于多形性腺瘤和正常泪腺组织(P<0.001)。CD34可使肿瘤微血管染色呈棕黄色的单个或成簇细胞群。在泪腺多形性腺癌(32.58±14.46)及腺样囊性癌(43.43±4.60)中CD34的表达明显高于多形性腺瘤(4.20±1.19)(P<0.001); Ki67在具有增殖活性的细胞核呈棕褐色着色,在泪腺多形性腺癌(44.83±13.68)及腺样囊性癌(26.29±8.44)中Ki67的表达明显高于多形性腺瘤(2.80±3.14)及正常组织(0.40±0.70)(P<0.001)。在两种恶性肿瘤中EGFL7的表达分别与MVD、Ki67呈明显正相关(r_s=0.897,P<0.001; r_s=0.837,P<0.001)。

结论：EGFL7在泪腺上皮性肿瘤中的表达与MVD、Ki67呈正相关性,提示EGFL7不仅在泪腺上皮性肿瘤血管生成中起重要作用,而且参与泪腺上皮性肿瘤的增殖。     

实验性兔青光眼前房水肝细胞生长因子的含量

目的 :探讨实验性兔青光眼不同时期前房水肝细胞生长因子 (HGF)含量的变化。方法 :用 1%的甲基纤维素每周一次注入 2 0只白兔的前房内 ,使眼压稳定升高达 30～ 4 0mmHg ,在 0、1、2、4、8周时抽出前房水 0 2ml,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测量前房水HGF的含量。结果 :实验眼和对照眼术前前房水HGF浓度分别是 (32 1 3± 75 7) pg/ml和 (319 2±85 2 ) pg/ml,在眼压升高 1、2、4、8周后前房水HGF的浓度分别是 (5 4 0 3± 83 2 )pg/ml、(5 4 9 8± 10 2 4 ) pg/ml、(5 6 2 0±98 6 ) pg/ml和 (6 0 4 0± 92 6 )pg/ml ,比对照眼明显升高 (P <0 0 1)。在青光眼第 8周时房水HGF浓度最高 ,但与 1、2、4周时无统计学上的差异 (P >0 0 5 )。结论 :青光眼眼压升高后前房水HGF浓度升高并且维持一较高浓度 ,是一反应性升高而不是发病原因 ,HGF含量增高可能增加房水的外引流和修复损伤的小梁细胞。     

葛根素腹腔注射在家兔房水中的药代动力学研究

目的　测定腹腔注射葛根素后不同时间家兔房水中的质量浓度 ,计算其药代动力学参数 ,研究药代动力学特点。方法　 44只健康新西兰成年家兔随机分为 11组 ,各组每只家兔腹腔注射葛根素 80mg/kg加等量 5 %葡萄糖液 ,在用药后 0、0 5、1、2、3、4、6、8、12、16、2 4h取房水 ,采用反向高效液相色谱法 (RP HPLC)进行测定。 3P87软件拟合药代动力学参数。结果　注射后其质量浓度在正常家兔房水呈二室模型 ,3P87软件拟合药代动力学参数数值为 :达峰质量浓度(Cmax)为 1 613 μg/ml,达峰时间tmax为 1 680h ,半衰期t1/ 2α为 1 3 5 8h、半衰期t1/ 2 β为 19 72 2h ,表观分布面积 (V/F)为 4 888L ,曲线下面积 (AUC)为 8 5 0 1μg/(ml·h) ,清除率 (CL)为 2 165L/h。实测值 :3 0min为 ( 0 778± 0 2 89) μg/ml,2h达峰值为( 2 3 18± 0 14 7) μg/ml ,随后逐渐下降 ,2 4h几乎测不到。 结论　本方法灵敏、特异、准确 ,可用于房水中葛根素质量浓度测定 ;葛根素通过腹腔注射能透过血房水屏障进入房水 ,半衰期长。此结果为葛根素全身用药治疗眼部疾病提供了实验依据。     

Role of low and high spatial frequencies in the face-selective responses of neurons in the cortex in the superior temporal sulcus in the monkey

There are neurons in the cortex in the anterior part of the superior temporal sulcus of the macaque monkey with visual responses selective for faces. One aim of the present study was to analyze further the information which leads them to respond, by measuring their responses to parametrically filtered stimuli. The responses of 32 such single neurons were measured to faces which were digitized, lowpass filtered at spatial frequencies of 2, 4, 8,...128 cycles/face, highpass filtered at frequencies of 4, 8,...64 cycles/face, and presented in random sequence using a video framestore. It was found that many of the neurons could respond to blurred images of faces, with a mean frequency at half-maximum amplitude of the neuronal response to the series of lowpass filtered images of faces of 3.3 cycles/face. Almost all the neurons had lowpass cutoff frequencies defined in this way below 8 cycles/face. Many of the neurons could also respond to images of faces in which the only information remaining was a limited amount of high spatial frequency edge information. The mean frequency at half-maximum amplitude of the neuronal response to the series of highpass filtered images of faces was 29.7 cycles/face. Almost all the neurons had highpass cutoff frequencies above 8 cycles/face. Thus, many of the neurons could respond to a lowpass and a highpass filtered image of a face even when these had no spatial frequencies in common. The mean separation between the lowpass and highpass cutoff frequencies was 3.2 octaves. For comparison, face recognition in man can be performed with images which contain only information up to 8 cycles/face, or with highpass filtered images which contain only information down to 8 cycles/face. The response of the neurons was not always a smooth function of frequency, but could decrease as higher frequencies were included in the lowpass filtered images of faces, or as low frequencies were included in the highpass filtered images of faces. This indicates that information in certain frequency bands was able to inhibit these neurons. This was particularly likely to occur for the non-optimal face stimulus for a given neuron, indicating that the selectivity of these neurons to different faces was a combination of the excitation produced by some information in faces and inhibition produced by other.     

白血病抑制因子在眼科神经相关病变发病机制中的作用

白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)是一种广泛存在于生物体的多功能细胞因子,属于白介素-6家族的一员.在神经系统,LIF参与了众多的生理和病理过程.在眼部,LIF对视神经、神经视网膜及角膜神经等的保护作用逐渐受到重视.在青光眼中,LIF通过激活JAK/STAT3通路发挥对视神经的保护作用,并能在一定程度上刺激轴突再生.在年龄相关性黄斑变性和视网膜色素变性等疾病中,LIF也能通过诱导相关信号通路阻止光感受器细胞死亡,从而有效维持光感受器的功能.另外LIF也能在一定程度上修复角膜神经受损,加速角膜神经再生.LIF在神经保护以及神经损伤后再生过程中的作用日渐突出,可能成为治疗眼科神经病变的新手段.     

Errors in determining the direction of the visual axis in the presence of defocus

The visual axis is the ray path from the fixation point to the fovea by way of the nodal points. Such a ray path does not exist in unaccommodated vision when the fixation point does not coincide with the far point of the eye because of induced or natural defocus. Nevertheless an approximation to the visual axis can be obtained by the position of a small pupil close to the cornea for which a bichromatic vernier target appears correctly aligned. When the visual axis is determined, an eye rotation from the visual fixation position must occur, which is reversed upon removing the small pupil. Upon engaging in any experiments for which the visual axis is then used as a reference, there is an error in this reference position. We develop simple paraxial equations to estimate this error. We show that these equations have good accuracy. The error associated with locating the visual axis at the cornea is 0.002 mm per dioptre of defocus, which is small enough to be ignored.     

Voriconazole in the treatment of fungal osteomyelitis of the orbit in the immunocompromised host

Scedosporium apiospermum is an uncommon cause of fungal infection in the orbit and sinus. Morbidity and mortality rates in immunocompromised patients are high. We review the first case of Scedosporium apiospermum orbito-sinus infection that was successfully treated with the new antifungal agent voriconazole. We highlight the efficacy of this drug, particularly in the treatment of osteomyelitis of the orbit and sinus, which may lead to an improvement in survival rates after Scedosporium infection.