血管内皮生长因子在血管瘤及血管畸形中的表达

血管瘤是一种良性血管增生性疾病 ,是婴儿中最常见的肿瘤。血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)是一种多肽类血管形成因子 ,有促进内皮细胞增殖的作用。本文采用免疫组织化学方法 ,测定ＶＥＧＦ在血管瘤和血管畸形中的表达 ,探讨ＶＥＧＦ与血管瘤及血管畸形的关系。材料和方法一、标本的选择及分组92例标本选自我科近 6年经手术切除的先天性皮肤血管病变患儿。女5 2例 ,男 4 0例 ,年龄 4 0ｄ～ 13岁。组织标本常规石蜡包埋 ,5 μｍ切片 ,ＨＥ染色。同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作对照。按照Ｍｕｌｌｉｋｅｎ标准[1] ,将标本分为血管瘤 72例…     

血管内皮细胞生长因子在血管瘤中的表达

近年来随着肿瘤血管形成研究的深人,生长因子在血管形成中的作用受到重视。本研究旨在通过免疫组织化学方法测定血管内皮细胞生长因子（VEGF）在血管瘤中的表达情况,探讨其与血管瘤增生及退化的关系。材料与方法一、标本选择我院1995年9月～1998年5月经手术切除的先天性皮肤血管病变134例,男44例,女90例,手术年龄22d～12a,组织标本常规10％福尔马林固定,石蜡包埋,spin连续切片。光镜下Mulliken标准「‘’进行分类,其中血管瘤101例,血管畸形33例,并采用“0～皿”4级法［’j将其中的血管瘤进行增生级别的判定。同时采用含正常血…     

表皮生长因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的 了解表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与血管瘤及血管畸形的关系.方法 标本选自1998年3月至2005年10月经手术切除的先天性皮肤血管病变92例患儿,女52例,男40例,年龄为40 d至13岁,平均年龄为1.6岁.组织标本取出后立即浸入10%的中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作为对照.采用免疫组织化学方法,对72例血管瘤和20例血管畸形组织切片进行EGF表达的测定.结果 EGF在血管瘤组织中高表达,而在血管畸形组织中低表达(P<0.01).在血管瘤增殖期、退化早期和退化完成期三者之间,EGF的表达存在着差异.在血管瘤中EGF的表达与其内皮细胞的增生程度有关.内皮细胞增生越强,EGF的表达越高(P<0.05).结论 提示EGF与血管瘤的增生及退化有关,而与血管畸形无明显关系.     

表皮生长因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的 了解表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与血管瘤及血管畸形的关系.方法 标本选自1998年3月至2005年10月经手术切除的先天性皮肤血管病变92例患儿,女52例,男40例,年龄为40 d至13岁,平均年龄为1.6岁.组织标本取出后立即浸入10%的中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作为对照.采用免疫组织化学方法,对72例血管瘤和20例血管畸形组织切片进行EGF表达的测定.结果 EGF在血管瘤组织中高表达,而在血管畸形组织中低表达(P<0.01).在血管瘤增殖期、退化早期和退化完成期三者之间,EGF的表达存在着差异.在血管瘤中EGF的表达与其内皮细胞的增生程度有关.内皮细胞增生越强,EGF的表达越高(P<0.05).结论 提示EGF与血管瘤的增生及退化有关,而与血管畸形无明显关系.     

表皮生长因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的 了解表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与血管瘤及血管畸形的关系.方法 标本选自1998年3月至2005年10月经手术切除的先天性皮肤血管病变92例患儿,女52例,男40例,年龄为40 d至13岁,平均年龄为1.6岁.组织标本取出后立即浸入10%的中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作为对照.采用免疫组织化学方法,对72例血管瘤和20例血管畸形组织切片进行EGF表达的测定.结果 EGF在血管瘤组织中高表达,而在血管畸形组织中低表达(P<0.01).在血管瘤增殖期、退化早期和退化完成期三者之间,EGF的表达存在着差异.在血管瘤中EGF的表达与其内皮细胞的增生程度有关.内皮细胞增生越强,EGF的表达越高(P<0.05).结论 提示EGF与血管瘤的增生及退化有关,而与血管畸形无明显关系.     

糖皮质激素受体在血管瘤和血管畸形中的表达及意义

目的：检测血管瘤和血管畸形组织中是否存在糖皮质激素受体，并探讨其在血管瘤和血管畸形中的意义。方法：手术切除25例血管瘤、18例血管畸形标本及12例正常皮下组织标本，用免疫组织化学方法检测其组织中糖皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67的表达，做图像分析测定，并对3项指标作相关性分析。结果：在血管瘤增生期，皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67均有较高表达；在血管瘤退化期、血管畸形和正常皮肤中，糖皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67表达极弱或无表达。并且糖皮质激素受体与血管内皮生长因子、Ki-67在血管瘤中的表达呈正相关。结论：糖皮质激素受体、血管内皮生长因子可能在血管瘤的病理发生过程发挥作用，外源性糖皮质激素与糖皮质激素受体结合，可能使血管内皮生长因子分泌减少，而促进血管瘤消退。而糖皮质激素受体、血管内皮生长因子在血管畸形的发生中则无明显作用。     

碱性纤维母细胞生长因子在血管瘤及血管畸形中的表达

目的：为了解碱性纤维母细胞生长因子（ｂＦＧＦ）与血管瘤及血管畸形的关系，方法：采用免疫组织化学方法，对８６例血管瘤和２８例血管畸形组织切片进行ｂＦＧＦ表达的测定，结果；ｂＦＧＦ在血管瘤中高表达，而在血管畸形中低表达（Ｐ〈０．０１）。在血管瘤中ｂＦＧＦ的表达与其内皮细胞的增生程度有关。内皮细胞增生愈强，其ｂＦＧＦ的表达愈高（Ｐ〈０．０１）。结论：提示ｂＦＧＦ与血管瘤的增生及退化有关，而与血管畸形无明     

血管内皮生长因子mRNA在血管瘤中的表达

目的 检测不同时期血管瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,探讨VEGF对血管瘤生长的影响,研究血管瘤增生退化的机制.方法 取不同时期手术切除血管瘤组织及其临近组织标本.其中增生期20例,退化期12例,正常皮肤组织8例作为对照.根据美国国立生物技术信息中心(NCBI)基因库中VEGF的cDNA序列设计引物,以β-actin作为内参照,应用半定量RT-PCR方法 测定血管瘤组织中VEGF mRNA表达水平.应用SPSS 12.0软件进行统计学分析.结果 琼脂糖凝胶电泳显示增生期血管瘤、退化期血管瘤、正常组织中VEGF mRNA电泳条带亮度依次降低;组织中表达的相对量分别为增生期血管瘤1.442 8±0.084 6、退化期血管瘤0.956 9±0.061 7、正常对照组皮肤组织0.487 2±0.035 6,两两比较均有显著性差异(Pa<0.05).结论 VEGF在增生期血管瘤组织中高水平表达,在退化期中表达减弱,在正常组织中几乎无表达,提示VEGF参与调控血管瘤的发展过程,可作为区分增生期与退化期的标志之一.     

体表血管瘤与血管畸形的彩色多普勒超声及组织学特征

目的探讨血管瘤与血管畸形(VM)的彩色多普勒超声(CDU)和免疫组织学特征。方法应用CDU对22例血管瘤患儿和18例VM患儿声像图特征、血管密度、动脉收缩期峰值流速(PSV)、阻力指数(RI)等进行分析,并与免疫组织化学结果对比分析。结果血管瘤与VM在高频灰阶超声图像上均表现为一团块状结构,但血管瘤内血管密度较VM明显增高[(5.3±2.0)vs(2.3±1.0)]条/cm2,P<0.01)]、PSV增大[(61.1±29.9)vs(27.4±15.0)cm/s,P<0.01)],两组RI无明显差异[(0.6±0.1)vs(0.7±0.17),P>0.05)]。免疫组织化学显示碱性纤维母细胞生成因子(bFGF)、碱性纤维母细胞生成因子受体(bFGFR)、血管内皮细胞生成因子(VEGF)在血管瘤中呈明显高表达,与VM比较均有显著差异(P均<0.01)。结论血管瘤与VM的CDU表现及免疫组织化学均有明显不同,CDU可对其进行正确诊断及鉴别诊断。     

血清血管内皮细胞生长因子在血管瘤诊断与治疗中的应用

目的 通过检测血清内皮细胞生长因子(VEGF)浓度来鉴别血管瘤和血管畸形，判断血管瘤是处于增生期还是消退期，并评价血管瘤治疗的有效性以及动态监测血管瘤病程的价值。方法 本组115例血管瘤患儿，其中59例增生期血管瘤，38例消退期血管瘤，18例血管畸形；阴性对照组12例，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)浓度。结果 对测得的VEGF浓度通过SAS软件统计分析，发现血管瘤增生期的VEGF浓度显著高于消退期血管瘤、血管畸形和阴性对照，而消退期血管瘤、血管畸形和阴性对照之间的差别没有显著性意义；另外，6例血管瘤患儿(自身对照)激素治疗后的血清VEGF浓度显著性降低。结论 血清VEGF测定对血管性疾病的诊断及病程监测是无创、简单而有效的方法，可推荐为血管瘤诊断和治疗的临床检测手段。     

血管内皮生长因子及其受体在儿童急性白血病中的表达以及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(vas-cular endothelial growth factor,VEGF)在儿童急性白血病骨髓中的表达,以及化疗前后的变化。方法53例儿童急性白血病患儿,其中急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukem ia,ALL)33例,急性髓系细胞白血病(acute myeloid leukem ia,AML)20例,对照组21例为骨髓象正常的非恶性血液病患儿。采用免疫组化方法检测53例急性白血病患儿治疗前后以及对照组骨髓中VEGF/VEGFR(包括Flt-1和KDR两种)的表达。结果VEGR、Flt-1、KDR在急性白血病患儿骨髓中表达水平高于对照组,在AML组中的表达高于ALL组。化疗后获得完全缓解(CR)的40例患儿,其VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗前后差异有显著性(P<0.05);化疗后未获得CR患儿VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗前后无显著性(P>0.05)。同时VEGF、KDR在儿童ALL中化疗后有明显的降低,但Flt-1无明显改变;VEGF、Flt-1、KDR在儿童AML中化疗后均有明显的降低。结论①VEGF、Flt-1、KDR在儿童急性白血病中表达增高。提示VEGF、Flt-1、KDR在儿童急性白血病的发生过程中起着重要作用。②VEGF、Flt-1、KDR在儿童AML中表达比ALL高。VEGF可以作为评价儿童急性白血病化疗反应的指标,同时说明ALL与AML可能具有不同的血管新生机制。     

血管内皮细胞定量测定在小儿血管畸形和血管瘤细胞增殖凋亡中的意义

目的探讨小儿血管畸形和血管瘤增殖凋亡及血管内皮细胞数的区别。方法共收集真性血管瘤标本37例,根据Mulliken标准分成血管瘤增生组和退化组;血管畸形14例,将标本分成血管瘤增生组和退化组。14例血管畸形标本制成单细胞悬液,加入DNA-PREPTMMLPR液和PI液后,流式细胞仪分析细胞周期,得各期细胞数S%,G2/M%及增殖指数(PI);单细胞悬液标记CD34-FITC/CD31-PE/7-AAD试剂,测定血管内皮细胞数;用AnnxinV和7-AAD双染测定早期凋亡细胞数。结果血管瘤增生组和退化组S%的细胞分别是5.99±1.85、1.92±0.65;G2/M%的细胞分别是7.46±1.82、5.94±1.63;PI分别是13.49±2.08、7.85±1.78,增生期的PI明显高于退化期(P<0.01);AV %分别是9.84±3.05、16.18±4.89。血管畸形的PI、S%分别是8.39±0.89、2.17±1.18,均比增生组低(P<0.05),与退化组比较,差异无统计学意义,G2/M%为6.23±1.64,与血管瘤的增生退化组比较均无明显差异,血管畸形AV %为12.91±4.1,高于血管瘤增生组(P<0.05),与退化组比较差异无统计学意义,细胞增生组和退化组的CD34 %各是0.915±0.33、0.36±0.12,血管畸形CD34 %为0.52±0.14,增生组较其他两组高(P<0.05),而血管畸形与退化组间差异无统计学意义。CD31 %增生组、退化组、血管畸形各是7.77±2.48、5.29±1.72、5.775±1.52,三者间差异无明显统计学意义(P>0.05)。结论流式细胞术测定PI,S%,AV %及CD34 %可以区别增生期血管瘤和血管畸形,对指导临床治疗有一定意义。     

血管内皮生长因子在增生性血管瘤组织和血清中表达的意义

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在增生性血管瘤组织、邻近组织和外周血中的表达水平和分布规律 ,进一步了解血管瘤的发生机制。方法　取增生性血管瘤患儿外周血清和术中瘤组织及其邻近组织标本 ,以相同年龄非相关患儿作对照 ,用酶联免疫法测定血清VEGF水平 ;对肿瘤组织及其相邻组织行cDNA合成和PCR扩增 ,提取VEGFmRNA ,并进行定量分析。结果　血管瘤患儿血清VEGF水平明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;血管瘤组织的VEGFmRNA电泳阳性率为 10 0 % (9/ 9) ,邻近组织为 88.9% (8/ 9) ,对照组为 11.1% (1/9) ,经检验血管瘤及其邻近组织与对照组有显著性差异 (P均 <0 .0 1)。荧光定量测定mRNA在血管瘤及其邻近组织无显著差异 (P <0 .0 5 ) ,而两者与对照组均有显著差异 (P均 <0 .0 1)。结论　增生性血管瘤组织及患儿外周血VEGF明显增高 ,对血管内皮细胞增生和分化成血管瘤细胞有促进作用 ,检测血清VEGF水平有助于血管瘤分型和增生情况的监测     

雌激素和血管内皮细胞生长因子促进血管瘤增殖的体外实验研究

目的：研究雌二醇(E2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在促进血管瘤血管内皮细胞(HVEC)增殖中的作用和相互关系，以及4羟基他莫昔芬(4OH—TAM)对该促进作用的影响。方法：取2例雌激素受体阳性的皮肤增生期草莓状血管瘤标本，采用组织块培养法培养HVEC。HVEC原代及传代培养在M199培养液中进行，传至第三代时改用无雌激素培养液IMEM进行干预实验，实验分5组：组1(无干预，为对照组)、组2(加E2)、组3(加VEGF)、组4(加E2和VEGF)、组5(加E，、VEGF和4OH—TAM)。分别在0、3、6、9d进行细胞计数(CC)和流式细胞仪DNA增殖指数(PI)检测。结果例1在第9d时，组2示HVEC轻微增殖，CC和PI分别为组1的1．38倍和1．61倍；组3示CC及PI明显增加，分别为组2的2．10倍和1．61倍；组4示OC及PI的增加更加显著，分别是组3的1．62倍和1．40倍；组5的OC和PI与组1相仿。例2的实验结果与例1相似。结论：体外实验显示雌激素能够轻微促进HVEC增殖；VEGF可明显促进HVEC增殖；而雌激素和VEGF同时存在时，对HVEC的促增殖作用更加显著，二者存在协同作用；他莫昔芬能抑制这种协同促增殖作用。     

神经母细胞瘤的血管形成和内皮细胞生长因子及其受体的表达

目的：观察神经母细胞瘤的血管形成及影响因素，探讨化疗对神经母细胞瘤瘤血管形成的作用。方法：35例小儿实体肿瘤年龄7月－12岁，分神经母细胞瘤组、其他恶性肿瘤组和良性肿瘤组，分别用免疫组化法观察第Ⅷ因子相关抗原（VWF）、内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体FLT－1的表达情况，并行图象分析。结果：神经母细胞瘤血管密度较良性肿瘤组明显增高（P＜0．05）；VEGF和FLT－1在神经母细胞瘤中有高表达，二者均与临床分期和分类有关；并可受化疗的抑制（P＜0．05）。结论：神经母细胞瘤生长具有血管依赖性，化疗可抑制血管形成，控制肿瘤血管形成对抑制肿瘤的生长和转移有积极意义。     

缺氧诱导因子-1α在婴幼儿血管瘤及血管畸形中的表达与意义

目的 本研究拟通过检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、细胞增殖核抗原Ki-67、血管内皮标志抗原CD34在婴幼儿血管瘤不同时期、血管畸形和儿童正常皮肤中的表达,探讨缺氧在血管瘤血管生成、细胞增殖中的作用.方法 采用免疫组织化学S-P染色法,检测CD34、HIF-1α、VEGF和Ki-67在小儿血管瘤、血管畸形及正常皮肤组织中的表达,并计算微血管密度(MVD).结果 不同时期血管瘤之间,血管瘤与血管畸形、正常皮肤之间HIF-1α、VEGF、Ki-67、MVD均有显著性差异(P<0.05).血管瘤中HIF-1α表达分别与VEGF、Ki-67、MVD表达呈正相关;而血管畸形HIF-1α与VEGF表达不存在相关关系.结论 缺氧是不同时期血管瘤的普遍现象.HIF-1α能促进血管瘤血管生成.而在血管畸形中可能不存在缺氧的微环境,是"血管内皮细胞生长正常的血管形态异常",因此在血管畸形中不会发生内皮细胞的增殖,也不存在类似血管瘤那样出现增生期和消退期.     

婴幼儿血管瘤及血管畸形组织中p16及TRAIL的表达及其意义

目的　检测婴幼儿血管瘤组织中抑癌基因 p1 6及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的表达 ,并探讨它们在血管瘤增生、消退过程中的作用。方法　采用免疫组化SP法检测 32例增生期、2 0例消退期血管瘤及 1 4例血管畸形组织中p1 6和TRAIL的表达。结果　p1 6在增生期和消退期血管瘤组织中阳性表达率分别为 78.1 % (2 5/ 32 )、90 .0 % (1 8/ 2 0 ) ,血管畸形组织中全部为阴性。经秩和检验 :Hc=2 6 .6 ,三者之间差异存在显著性意义 (P <0 .0 1 ) ,两者之间差异有显著性意义(P <0 .0 5)。TRAIL在增生期和消退期血管瘤组织中阳性表达率分别为 2 1 .9% (7/ 32 )、80 .0 % (1 6/2 0 ) ,血管畸形中全部为阴性 ,卡方检验 :χ2 =2 7.8,三者之间差异存在显著性意义 (P <0 .0 1 ) ,两两之间比较经 χ2 分割 ,增生期与消退期之间有差异 (P <0 .0 5) ,消退期与血管畸形之间有差异 (P <0 .0 5) ,增生期与血管畸形之间无差异 (P >0 .0 5) ,血管瘤与血管畸形之间有差异。结论　p1 6和TRAIL的表达水平与血管瘤的增生、消退有关 ,p1 6可抑制内皮细胞的分裂增殖 ,TRAIL可通过诱导内皮细胞凋亡发挥作用 ,两者均可促进血管瘤消退     

血管瘤血管内皮生长因子受体KDR基因异常甲基化的研究

目的通过建立甲基化敏感性高分辨率溶解曲线法（MS-HRM）,检测血管内皮生长因子VEGF受体KDR基因启动子区域在不同时期血管瘤、血管畸形及正常皮肤组织中的甲基化状态,初步探讨基因甲基化在血管瘤形成、增生、退化过程中的作用。方法选取不同时期血管瘤石蜡标本48例、血管畸形石蜡标本15例、正常包皮皮肤组织标本8例,分别提取DNA,经亚硫酸氢盐甲基化修饰、纯化、回收DNA,然后用甲基化敏感性高分辨率溶解曲线法（MS-HRM）,定量检测不同标本中血管内皮生长因子受体KDR甲基化水平。结果48例血管瘤标本共检出32例不同程度KDR基因启动子区域甲基化（66．67％）,其中24例增殖期血管瘤标本中检出21例（87．50％）不同程度甲基化,24例消退期血管瘤标本中检出11例（45．83％）不同程度甲基化,增殖期血管瘤与消退期血管瘤标本中KDR的甲基化程度比较,差异有统计学意义（X^2=9．375,P〈0．05）;15例血管畸形标本中仅检出甲基化程度为0-25％者2例（13．33％）,8例正常包皮皮肤组织中检测到1例甲基化0-5％（12．50％）。与血管瘤相比,差异均有统计学意义（P〈0．05,Fisher’确切概率法）。结论血管瘤中血管内皮生长因子受体KDR基因启动子序列CpG岛存在异常甲基化,血管内皮生长因子受体KDR基因异常甲基化可能与血管瘤增生、退化等有关。