三株抗人肺鳞癌单克隆抗体免疫组化分析

目的对三株抗云南个旧肺鳞癌YTMLC-90杂交瘤细胞S2D1、N2D1、N3C5所分泌的单克隆抗体进行不同组织细胞的免疫组化分析,探讨其特异性.方法用收集的原倍杂交瘤细胞上清常规ABC免疫组化法进行组织细胞学交叉检测,分析三个抗体与临床病理确诊的肺鳞癌组织、肺腺癌组织、肠癌组织、食道癌组织、肾癌组织、肺正常组织石腊切片和肺鳞癌YTMLC-90细胞系、肺腺癌GLC-82细胞系、舌鳞癌Tca-8113细胞系、鼻咽癌KB细胞系、胶质瘤U-251细胞系、膀胱癌T-24、B1u-87细胞系的交叉反应.结果杂交瘤细胞上清液与肺癌组织及肺鳞癌、肺腺癌细胞系YTMLC-90、GLC-82反应呈阳性,阳性率分别为82%、100%;与正常肺组织及肠癌组织、肾癌组织、食道癌组织及体外培养的其它各肿瘤细胞系均呈阴性反应.结论经免疫组化研究,三株单克隆抗体具有肺癌特异性,属于肺癌相关抗原的单克隆抗体.     

204例大肠息肉的免疫组织化学研究

本文采用4种抗结肠癌单克隆抗体CL-2、CL-4、MC_3和MC_5检测了204例大肠息肉。结果显示,4种抗体的相应抗原在正常大肠粘膜为阴性表达,在炎性与幼年性息肉以及单纯性腺瘤阳性表达低,而在腺瘤不典型增生和腺癌癌变阳性表达较高,提示其阳性率与不典型增生有关(P<0.01),4种抗体的相应抗原在大肠癌组织中占优势,且对判定癌前病变的抗原表达有一定的价值,可作为早期判断腺瘤癌变的参考。     

经典Wnt信号途径相关基因异常甲基化与肺癌发生关系的探讨＊

[摘要] 目的 检测肺癌中经典Wnt信号途径相关基因(WIF-1,sFRP-1,DKK-3)启动子的甲基化状态及β-连环蛋白(β-catenin)的表达情况,探讨其在肺癌发病中的作用。方法 应用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nMSP),检测66例肺癌组织、25例相应的癌旁组织和10例正常肺组织以及肺腺癌A549细胞株中WIF-1,sFRP-1和DKK-3基因启动子区域的甲基化;免疫组化SP法检测β-catenin的表达情况。结果 正常肺组织均未检测到所选基因的甲基化,肿瘤组织和癌旁组织中WIF-1、sFRP-1、DKK-3基因启动子甲基化的发生率分别为：50.0% vs 24.0% (P＜0.05)、36.4% vs 12.0% (P＜0.05)和36.4% vs 8.0% (P＜0.01);重度吸烟患者肿瘤组织3个基因的甲基化发生率明显增高(P＜0.05)。肺腺癌A549细胞株中WIF-1和DKK-3基因呈甲基化状态,而sFRP-1基因呈未甲基化状态。免疫组织化学显示肺癌组织中β-catenin的阳性表达率为81.2%,异常表达率为64.4%,且与组织学类型无关(P＞0.05)。结论 经典Wnt信号途径相关基因启动子甲基化可能与吸烟引起的肺癌有关,甲基化的WIF-1、sFRP-1和DKK-3基因可能成为肺癌表观遗传干预治疗的新靶点。 [关键词] 肺肿瘤 经典Wnt信号途径相关基因 β-连环蛋白     

血清NSE表达水平对肺癌的诊断及治疗价值

目的：探讨血清肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶（NSE）对肺癌的诊断、评估化疗敏感性及病情监测的临床价值。 方法：采用酶联免疫分析方法检测96例肺癌患者、60例肺部良性疾病患者和60例健康对照组血清NSE水平。 结果：肺癌患者血清NSE水平显著高于肺部良性疾病患者及健康人（P<0.001）,其中小细胞肺癌（SCLC）患者NSE水平显著高于肺腺癌及肺鳞癌（P<0.001）。SCLC中扩展性病变血清NSE水平明显高于局限性病变,而非小细胞肺癌（NSCLC）组血清NSE水平同NSCLC临床分期无关联性（P>0.05）。NSCLC组和SCLC组NSE阳性者肺癌近期化疗有效率(66.67% 和87.10%)高于NSE阴性者(33.33%和40.00%)(P<0.05)。 结论：血清NSE是一种有效的肺癌肿瘤标志物。     

203例肺癌癌基因与抗癌基因癌蛋白的研究

２０３例肺癌中（鳞癌１１０例，腺癌６３例，小细胞癌１１例，鳞腺癌７例，肺泡腺癌６例，类癌３例，粘液细胞癌３例）上皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）阳性占５０．２５％，Ｐａｎ－ｒａｓ阳性占４１．８７％，Ｐ５３阳性为３５．４７％。ＥＧＦＲ和Ｐ５３同时表达占的２４．６３％。ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性者在１１０例鳞癌中为２２．７３％，而在６３例腺癌中为５２．３８％，两者有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１）。Ｐ５３的表达与患者的生存率和无远处转移率有关，Ｐ５３阴性的发生远处转移危险性为Ｐ５３阳性的２．３５倍（Ｐ＝０．００７）。     

抗食管癌单克隆抗体的免疫组织化学研究

以人食管癌109细胞株免疫BALB/c小鼠获得两株抗食管癌杂交瘤,分别分泌单克隆抗体(McAb)2GF_3和2GF_4。以上述两种McAb的一种或将该二者混合,用ABC染色法检测食管癌和正常组织的石蜡切片,发现该两种McAb对不同组织类型或分化程度不同的食管癌细胞有不同的反应性;而且,应用两种McAb混合液的,可增高在食管癌总体标本中的检测阳性率。     

SARS冠状病毒单克隆抗体制备及在肺尸检标本染色中的应用

目的制备抗SARS冠状病毒的单克隆抗体,用于SARS的实验室诊断。方法灭活SARS冠状病毒(PUMC01)全病毒免疫BALB／C小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(NS-1)融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光法(IFA)及免疫印迹法对所获得的细胞克隆进行筛选和鉴定,并用其中一株(M2)杂交瘤诱生的腹水单克隆抗体对SARS患者尸检肺组织切片进行免疫组织化学染色。结果共筛选出6株杂交瘤细胞,ELISA及IFA法证实其分泌的单克隆抗体与SARS冠状病毒有特异性反应,与其他常见呼吸道病原体均无交叉反应。免疫双扩散方法鉴定1株杂交瘤细胞(M2)为免疫球蛋白IgG3型,其余5株均为IgG1型。免疫印迹试验显示1株杂交瘤细胞(M2)分泌的抗体与相对分子质量68000的蛋白有特异性反应;4株杂交瘤细胞分泌的抗体与相对分子质量27000的蛋白有特异性反应,1株在免疫印迹上未见到结果。SARS患者尸检肺组织病理切片免疫组织化学染色阳性,在肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞及巨噬细胞的胞浆均可见阳性颗粒。结论我们制备的6株单克隆抗体是抗SARS冠状病毒的特异性单克隆抗体,用于SARS尸检肺组织免疫组化染色,结果阳性。     

肺癌组织中ST-4-39抗原表达的研究

目的 观察粘蛋白糖链抗原ＳＴ－４－３９在肺癌组织中的表达情况,探讨ＳＴ－４－３９抗原与肺癌组织学类型及分化程度的关系。方法 应用单克隆抗体ＳＴ－４－３９及Ｓ－Ｐ免疫组化染色方法,对５８例肺癌标本,进行糖链抗原ＳＴ－４－３９的检测。结果 癌周正常肺组织中,ＳＴ－４－３９抗原表达阴性。肺癌组织中ＳＴ－４－３９抗原的表达阳性率为７４％。在不同组织学类型肺癌组织中,ＳＴ－４－３９抗原阳性表达率分别为鳞癌５     

p53基因蛋白在原发性肺癌的表达及意义

目的 检测原发性肺癌中ｐ５３基因蛋白表达与组织类型、分化程度以及淋巴结转移的关系。方法 应用免疫组化ＩＤＰ法，用鼠抗人ｐ５３单克隆抗体检测ｐ５３蛋白的表达。结果４４例原发性肺癌中ｐ５３基因蛋白表达阳性率５６．８％。其中鳞癌１４例、腺癌３０例、阳性率分别５７．１％、４６．７％。高分化１０例，中分化２０例，低分化１４例，阳性率分别为４０％、５０％、５７．１％。肺癌有淋巴结转移的ｐ５３阳性率为６５．５％     

43例青年人支气管肺癌临床分析

本文报告43例青年人支气管肺癌。院外误诊率达81.4%,误诊为肺结核和肺炎最为常见。组织学类型以小细胞型未分化癌最多(60.5%),大部分病例确诊时已属晚期,Ⅲ期以上占86%。随访16例,中位生存期仅13.5个月。提示青年人肺癌发展快、预后差。     

系统性红斑狼疮108例患者抗中性粒细胞胞浆抗体的检测及意义

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）的阳性检出率及其与病情的相关性。方法应用间接免疫荧光技术（IIF）检测。结果108例SLE患者中，ANCA阳性35例（32．5％），皆为核周型ANCA（P-ANCA），而且滴度越高临床病情越重。35例ANCA阳性组中，狼疮活动为28例（80％），73例ANCA阴性组中活动35例（47．9％），两组阳性率相比，差异有显著性（P〈0．05）。ANCA阳性组伴肺间质病变、肾脏病变明显高于阴性组，均有统计学意义（P〈0．05）。正常对照20例均为阴性。结论ANCA在SLE患者中有一定的阳性检出率，且与疾病的活动及肾脏受损、肺间质病变具有相关性。     

环氧化物酶-2与缺氧诱导因子-1α在肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨环氧化物酶—2（cyclooxygenase2,COX—2）与缺氧诱导因子-1αhypoxia-inducible factor1,HIF—1α）在肺癌组织中的表达及临床意义。方法随机选取2011年5月—2013年5月在该院治疗的56例肺癌患者的肺癌组织标本,进行病理学检查,其中小细胞癌18例,腺癌9例,鳞癌29例;早期（Ib期,IIIa期）26例,晚期（IIIb期,IV期）30例。应用免疫组化法对56例肺癌组织中的COX-2、HIF-1α的表达进行检测;用原位核酸分子杂交方法检测H IF~1在非小细胞肺癌癌组织中的表达;同时用CD34单克隆抗体对血管内皮细胞进行标记并计数微血管密度（MVD）,对COX-2、HIF-1α与肺癌组织及其血管生成的关系进行统计学分析。结果 156例肺癌组织内COX-2的阳性表达为14例（78.57%）,其中在小细胞癌中阳性表达为14例（77.78%）,腺癌阳性表达为8例（88.89%）,鳞癌阳性表达率22例（75.86%）,COX-2阳性表达率不受病理分型影响,差异无统计学意义（P〉0.05）;在早期（Ib-IIIa期）肺癌组中COX-2阳性表达率为61.54%,晚期（IHb-IV期）表达率为90.00%,COX-2阳性表达率有病理分期有关,差异有统计学意义（P〈0.05）。256例肺癌组织内HIF-1α阳性表达为45例（89.49%）,其中在小细胞癌中阳性表达为17例（94.44%）,腺癌阳性表达为7例（77.78%）,鳞癌阳性表达为25例（86.21%）,HIF-1α阳性表达率不受病理分型影响,差异无统计学意义（P〉0.05）;在早期（Ib-IIIa期）的肺癌组中HIF-1α阳性表达率为80.77%,晚期（IIIb-IV期）为93.33%,HIF-1α有病理分期有关,差异有统计学意义（P〈0.05）。3COX-2弱阳性的MVD值为13.32±8.91,较强阳性为19.20±9.98,强阳性为23.04±5.69,在病灶部位MVD随着COX-2表达强度增加而增加,差异有统计学意义（P〈0.05）;HIF-1α弱阳性MVD值为13.78±4.59,较强阳性为21.59±8.25,强阳性为28.58±2.59,在病灶部位MVD随着HIF-1α表达强度增加而增加,差异有统计学意义（P〈     

增殖细胞核抗原在口腔鳞状细胞癌中的表达

采用鼠抗ＰＣＮＡ单克隆抗体，ＡＢＣ法，对１１例正常口腔粘膜及２９例口腔鳞癌进行了染色。结果表明：正常粘膜仅在基底层中有少量的ＰＣＮＡ阳性细胞，其阳性分级为１级。而鳞癌阳性分级主要是３～４级，随着组织学分级的升高，ＰＣＮＡ阳性表达率也相应增高。经统计学分析，正常组织与鳞癌之间及鳞癌各级均有非常显著差异（Ｐ＜００１）。提示：ＰＣＮＡ的表达与口腔鳞癌组织学分级有关。     

纤维支气管镜术后痰细胞学检查在肺癌诊断中的意义

目的观察纤维支气管镜术后痰细胞学检查对肺癌的诊断价值。方法对120例行纤维支气管镜患者术前送2～3次痰细胞学,术后第1～4天送2～3次痰细胞学检查。结果 120例有79例确诊为肺癌,其中75例通过术前痰检,纤支镜刷检、活检、冲洗液及术后痰检联合检查确诊肺癌,术前痰细胞学检出癌23例,阳性率29.1%,其细胞学分类与组织学活检分类符合率鳞癌63.6%、腺癌60.0%、小细胞癌66.7%。术后痰细胞学检出癌42例,阳性率53.20%,术后痰检与组织活检符合率鳞癌87.5%、腺癌88.2%、小细胞癌83.3%%。结论纤维支气管镜检结合术后痰细胞学检查可提高肺癌的检出率,术后痰细胞学阳性率及准确性均较术前痰高。术后痰细胞学检查无创、安全可重复,值得临床应用。     

肿瘤标志物联合检测对肺癌的诊断价值

目的:探讨血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和细胞角质蛋白19片段(CYFRA21-1)在肺癌诊断中的意义。方法:分别应用化学发光和电化学发光技术检测肺癌患者(50例)、肺良性疾病患者(38例)及健康对照组(42例)的血清CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1的表达水平,并进行比较。结果:肺癌组血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1表达水平明显高于肺良性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);肺癌组血清4种标志物阳性率高于良性疾病组和健康对照组,在肺腺癌中CEA和CA125阳性率均为55.6%,小细胞肺癌NSE阳性率为87.5%,肺鳞癌CYFRA21-1阳性率为80.0%;4种肿瘤标志物联合检测与单个项目比较,敏感度和准确度都有显著提高。结论:联合检测血清肿瘤标志物CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1可提高对肺癌诊断的敏感度和准确度,且可鉴别肺癌的病理类型。     

血管内皮生长因子在非小细胞肺癌患者诊断中的应用价值

目的：评价检测血管内皮生长因子在非小细胞肺癌诊断中临床意义。方法本组针对41例非小细胞肺癌患者及25例健康体检者,进行血清血管内皮生长因子A、B、C、D检测。结果非小细胞肺癌患者的血清血管内皮生长因子A（97.6%）、B（70.7%）、C（60.9%）、D（63.4%）的阳性率与健康体检者（16%、12%、4%、4%）相比均有显著差异（χ2=19.112、14.546、13.762、14.001,P〈0.05）。结论血清血管内皮生长因子检测有助于非小细胞肺癌的诊断,值得临床上推广应用。     

抗类瓜氨酸化抗体在系统性红斑狼疮中的意义

目的 探讨抗类瓜氨酸化抗体(anti-carbamylated fibrinogen antibodies, 抗CarP抗体)在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中的意义,SLE是否与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)一样,存在大量针对类瓜氨酸的自身抗体,抗CarP抗体与关节损伤及疾病活动度高度相关。方法 利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测105例确诊的SLE患者和73例健康对照者血清中抗CarP抗体水平,收集其他SLE相关临床和实验室数据,采用SPSS 24.0软件进行相应统计学分析。结果 SLE中存在抗CarP抗体,且明显高于健康对照组(P<0.05)。抗CarP抗体阳性组与阴性组SLE患者相比,在以下临床及实验室指标方面差异有统计学意义:病程、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、抗心磷脂抗体、抗dsDNA抗体、D-二聚体、IgA、IgG、补体C3、补体C4、外周血红细胞计数和血红蛋白水平(P<0.05)。与SLE其他自身抗体相比,抗CarP抗体的阳性率(21.9%)高于抗Sm抗体(15.24%),与抗核糖体P蛋白抗体(22.86%)阳性率相似;在SLE特异性抗体阴性的患者中可检测到抗CarP抗体,其阳性率分别为: 抗Sm(-)组20.2%(18/89),抗dsDNA(-)组9.3%(4/43),抗核小体抗体(-)组12.5%(6/48)和抗核糖体P蛋白抗体(-)组20.9%(17/81)。而且,抗CarP抗体水平与病程、补体C3、补体C4、红细胞及血红蛋白呈明显负相关(P<0.05),与ESR、CRP、IgA、IgG、RF、抗心磷脂抗体、抗dsDNA抗体及D-二聚体呈明显正相关(P<0.05)。结论 SLE患者血清中抗CarP抗体水平升高,抗CarP抗体与SLE患者临床及实验室指标具有相关性。     

CT引导下经皮肺穿刺活检在中央型肺癌诊断中的应用

目的探讨CT引导下经皮肺穿刺活检对中央型肺癌诊断中的应用及并发症的预防。方法对29例经纤维支气管镜检查未确诊或无法接受纤维支气管镜检查的中央型占位病变患者行CT引导下经皮肺穿刺活检。对其穿刺成功率、组织病理学阳性率及并发症的发生进行回顾性分析。结果29例中,穿刺成功率为100％,组织病理学阳性率为100％。其中鳞癌15例,小细胞癌4例,腺癌4例,腺鳞癌6例。并发症发生率：气胸13．8％,针道出血1013％,咳血3．4％。结论CT引导下经皮肺穿刺活检术对纤维支气管镜检查阴性或无法接受纤维支气管镜检查的中央型肺癌诊断,是一种高效、准确、微创的定性诊断方法。     

血清癌胚抗原与溶血磷脂酸联合检测在非小细胞肺癌病人中的应用

目的:探讨血清癌胚抗原（CEA）与溶血磷脂酸（LPA）在非小细胞肺癌病人中的应用价值。方法:选取84例非小细胞肺癌病人（非小细胞肺癌组）、84例肺炎病人（肺炎组）和84名健康体检者（对照组）,分别测定和比较3组人群的血清CEA和LPA水平。分析血清CEA和LPA联合检测对非小细胞肺癌的诊断价值。结果:非小细胞肺癌病人血清CEA和LPA水平显著高于肺炎病人和健康体检者（P<0.01）;腺癌组病人血清CEA阳性率（62.5%）显著高于鳞状细胞癌组和组织未分型组病人（P<0.05）,另外LPA在3组非小细胞肺癌病人血清中的阳性率相当（45.00%～54.55%）,3组间差异无统计学意义（P>0.05）;CEA与LPA在诊断非小细胞肺癌中的效能结果显示,血清CEA单独检测阳性率为31.35%,LPA单独检测阳性率为30.16%,两者联合检测阳性率为38.89%。血清CEA准确度为67.86%,特异度为74.60%,灵敏度为50.40%; LPA准确度为64.68%,特异度为72.62%,灵敏度为42.86%;两者联合检测准确度提高到69.44%,灵敏度提高到60.71%,特异度也达到了70.24%。结论:血清CEA和LPA联合检测有利于提高非小细胞肺癌诊断的灵敏度和准确度,值得临床推广。     

环氧化酶-2在肺癌组织中表达的研究

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)在肺癌组织中的表达水平及其与病理分型、分化、TNM分期及预后的关系.方法:选择125例肺癌组织石蜡切片,应用抗人COX-2抗体进行免疫组织化学染色,用COX-2阳性表达血管内皮细胞作阳性对照.结果:鳞癌COX-2表达阳性率59.18%,腺癌85.71%,大细胞癌41.18%,小细胞癌20.83%.肺腺癌COX-2阳性表达率明显高于其它三类肺癌;鳞癌COX-2阳性表达率明显高于小细胞癌.COX-2的表达与腺癌的分化程度、TNM分期有密切相关,与鳞癌分化程度无明显关系.与年龄、性别、是否吸烟无关.COX-2阳性患者5年生存率19.57%,中位生存期39个月,阴性患者5年生存率40.54%,中位生存期为55个月,两组差异有显著性意义.结论:COX-2在肺癌尤其是腺癌和鳞癌中具有较高的表达,在腺癌患者,COX-2表达与肿瘤分化程度密切相关,鳞癌患者与肿瘤的分化程度无关.肺癌患者的肺内COX-2表达与年龄、性别、是否吸烟无关.COX-2高表达的肺癌患者预后较差.