糖皮质激素对淋巴细胞受体表达的影响

目的 观察糖皮质激素(GH)对淋巴细胞受体(GR)及亚型表达的影响.方法 将10-5 mol/L 地塞米松(Dx)在淋巴细胞株Raji和Jurkat上作用3 d,采用Western blot方法检测GR在蛋白质水平上的变化,采用Real time方法检测GR及其亚型在mRNA水平上的变化.结果 应用Dx 24 h,总蛋白中GR表达明显减少,但在核蛋白中GR表达明显增多;在mRNA水平上hGRα亚型在用药前后无显著变化(P＞0.05),hGRβ亚型量极微,几乎不能检测.结论 GH影响GR的表达,GR活化后由细胞浆转入细胞核;hGRβ亚型的作用有待进一步研究.     

糖皮质激素对兔淋巴细胞β受体的影响

作者用自行标记的~(125Ⅰ)-(±)心得静作特异配基测定家兔外周血淋巴细胞β-肾上腺素能受体(β-AR)在糖皮质激素作用前后的变化情况。实验测得正常情况下家兔血淋巴细胞β-AR最大结合容量Bmax=1.36±0.36 fmol/10~6cells,KD=0.16±0.04nM,n=5。注射氢化泼尼松后Bmax=2.11±0.36fmol/10~6cells,KD=0.17±0.02nM,T检验表明两组Bmax值有显著差异,而KD无显著差异;停药三周复测,Bmax=1.22±0.22fmol/10~6cells,KD=0.18±0.07nM,表明已恢复到用药前的水平。     

大鼠脾淋巴细胞糖皮质激素受体的测定

建立了测定大鼠脾淋巴细胞糖皮质激素受体(GR)的方法。实验结果表明大鼠脾淋巴细胞具有和地塞米松结合的高亲和力、低容量的特异结合部位,最大结合量为6773±585特异结合部位/细胞,平衡解离常数(Kd)为5.05±1.70 nmol/L,受体-配体复合物具有温度依赖性核转位现象。本文为进一步研究糖皮质激素作用的分子机理以及GR的病理变化和生理调节提供了简便的方法。     

乙型肝炎患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体及血浆皮质醇…

应用放射配体结合测定法、放射免疫测定法测定１１０例乙型病毒性肝炎（乙肝）患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）与血浆皮质醇（Ｆ）的变化。其中急性重症肝炎２０例、慢性重症肝炎２０例，慢性迁延性肝炎２０例，慢性活动性肝炎５０例以及对照组４０例。结果表明：各类乙肝患者ＧＲ水平明显低于对照组，而血浆Ｆ高于对照组。同时测定２０例慢性活动性肝炎稳定期ＧＲ、Ｆ的变化，发现随病情的改善ＧＲ水平也升高，而血浆Ｆ无     

溃疡性结肠炎肠粘膜细胞中糖皮质激素受体α和β的表达

目的　研究溃疡性结肠炎患者肠粘膜细胞中糖皮质激素受体 α、β(GRα、GRβ)表达与糖皮质激素治疗反应以及炎症程度之间的关系。方法　采用免疫组织化学法检测肠粘膜细胞中 GRα、GRβ表达强度。比较激素抵抗、激素敏感及正常对照 3组间以及炎症程度各组间 GRα、GRβ表达差异。结果　肠粘膜组织切片中 GRα、GRβ的表达强度在抵抗与敏感组之间有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ,在激素敏感组与正常对照组间无显著差异 ,且与炎症程度无关。结论　糖皮质激素受体 GRα、GRβ在决定患者对激素治疗的反应中起着重要的作用 ,其中 GRβ可能对 GRα起优势负性抑制作用 ,检测患者肠粘膜细胞中 GRα、GRβ的表达可预测患者对激素治疗的反应 ,但不能判断其炎症程度     

外周血淋巴细胞糖皮质激素受体不同检测方法的比较

目的:比较在人外周血淋巴细胞GR检测中采用离心法及玻璃纤维滤膜法清洗游离甾体的效果,以选择更适合于临床的方法。方法:采用放射配体法。回收淋巴细胞,用PBS缓冲液调淋巴细胞浓度为(3～6)×106/ml,加[3H]Dex浓度为15 nmol/L,37℃孵育60 min,用冷(0～4℃)PBS中止反应。然后分别用离心法、玻璃纤维滤膜(进口)A法、玻璃纤维滤膜(1μm孔径,上海红光厂)B法清除游离甾体。后两法应用多头细胞样品收集器,迅速通过玻璃纤维滤膜负压抽吸,两次冲洗在15 s内完成。     

糖皮质激素受体基因在受体缺失型哺乳动物细胞中的表达

本文在证实小鼠成纤维细胞系Ｅ８２．Ａ３无糖皮质激素受体（ＧＲ）的基础上，采用磷酸钙共沉淀法，用含大鼠肝ＧＲｃＤＮＡ的质粒ｐＲＧＲ－Ｎｅｏ转染给Ｅ８２．Ａ３细胞，并用Ｇ４１８筛选稳定表达细胞，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析表明，转化细胞特异性结合［３Ｈ］曲安缩酮的结合参数及甾体特异性与经典ＧＲ相同，说明所筛选得的细胞确实表达了ＧＲ。     

急性淋巴母细胞白血病患儿糖皮质激素受体的表达

目的揭示急性淋巴母细胞白血病(ALL)患儿糖皮质激素(GC)抵抗的分子学机制。方法采用在体激素反应性(PR)检测38例ALL患儿并将其分为PR 及PR-组,健康对照儿童30例,分别用RT-PCR、放射免疫配基多点饱和结合法等进行研究。结果ALL患儿GR—αmRNA的表达水平、GR对3H-Dex的亲和性与健康对照组无显著性差异(P＞0．05);受体结合位点分析显示：ALL患儿较健康对照组明显减少(P＜0．05),但PR 和PR组间未见明显差异(P＞0．05)。结论ALL患儿临床表现的GC抵抗现象与其外周血单个核细胞上GR-αmRNA表达、受体亲和性间未发现明确联系,患儿所表现的GR结合位点减少似与临床GC反应性及病程中的复发情况无直接联系,其在ALL发病中的作用有待进一步探讨。     

儿童激素性高眼压与外周血淋巴细胞糖皮质激素受体表达相关性研究

目的 检测激素性高眼压患儿外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）,GRα和 GRβ的表达,研究其与儿童激素性高眼压的相关性。 方法 收集20例激素性高眼压患儿(高眼压组),10例使用激素后眼压正常患儿（对照组）,10例健康儿童(健康组)的外周血,提取淋巴细胞RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)法检测淋巴细胞内GRα、GRβmRNA表达水平。结果 儿童外周血淋巴细胞有GRα、GRβmRNA表达, 以GRα为主。高眼压组的 GRαmRNA 半定量比值为(1.35±0.08) , 与对照组（1.25±0.04）及健康组(1.33±0.09)相比,差异无显著性意义(均 P＞0. 05)。高眼压组的GRβmRNA半定量比值为(1.24±0.04),与对照组(1.28±0.03)及健康组(1.20±0.07)相比,3组之间的表达差异无显著性意义(均 P >0. 05)。结论 未发现儿童外周血淋巴细胞糖皮质激素受体GRα和 GRβ的表达水平与激素性高眼压之间相关性。     

左归丸对老龄大鼠海马糖皮质激素受体位点及其基因表达的影响

目的　观察左归丸 (ZGW)对老龄大鼠海马糖皮质激素受体 (GR)位点及其基因表达的影响。方法　以2 4月龄大鼠为自然老化模型 ,随机分为老龄组、左归丸组 ,并以 3月龄大鼠为青龄组 ,各组处理 3个月。采用放射配基饱和分析技术及RT PCR方法检测大鼠海马GR位点及GRmRNA表达。结果　老龄组、青龄组及左归丸组海马GR位点分别为 (439.6 4± 4 8.0 9)、(85 0 .32± 34.96 )和 (1171.5 7± 5 4 .85 )fmol/mg蛋白 ,老龄组明显低于青龄组 (P <0 .0 5 ) ,左归丸组较老龄组明显上调 (P <0 .0 1) ;3组GRmRNA表达量分别为 0 .2 74 9± 0 .0 6 5 9、0 .6 4 0 7± 0 .4 4 18、0 .96 0 3± 0 .32 4 9,表明老龄组GRmRNA表达量低于青龄组 (P <0 .0 5 ) ,左归丸组海马GRmRNA表达量明显高于老龄组 (P <0 .0 0 1)。结论　左归丸延缓衰老作用可能与上调海马GR位点及其基因表达有关     

特发性血小板减少性紫癜患者激素敏感性与糖皮质激素受体亚型的关系研究

目的探究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者对糖皮质激素敏感性与其外周血单个核细胞内激素受体亚型表达的关系。方法采用实时定量RT—PCR和免疫组化技术检测不同激素敏感性ITP患者（包括糖皮质激素抵抗和敏感病人）外周血单个核细胞内α和β亚型糖皮质激素受体（GRα和GRβ）mRNA和蛋白表达，并将检测结果与正常对照组进行比较。结果糖皮质激素抵抗组患者外周血单个核细胞GRβmRNA表达量和GRβ蛋白表达阳性的单个核细胞比率明显高于激素敏感组及正常对照组（P〈0．01），而GRα mRNA和蛋白表达水平，各组之间无显著差异。结论ITP患者糖皮质激素敏感性与其GRβ表达水平密切相关。     

生长激素受体及其亚型与糖尿病及其并发症的关系

在糖尿病患者及糖尿病动物模型中均存在生长激素受体的异常。作为哺乳动物体内生长激素的主要受体,可活化信号转导、促前脂肪细胞分化等,生长激素受体活性和(或)数量的变化对生长激素的功能产生明显的影响。现对生长激素受体的分子结构、组织分布和功能,以及生长激素受体及其亚型与糖尿病及其并发症之间的相互影响进行综述。     

Determination of the Molecular Weight of Photoaffinity Labeled Glucocorticoid Receptor in Scalded Rat Liver Cytosol

Previous work in our laboratory showed that,after scalding,there wasnot only a decrease of rat liver cytosol [~3H]-Dexamethasone specific binding sitesbut also an increase of apparent dissociation constant of [~3H]-Dex and change ofsedimentation coefficient of glucocorticoid receptor.The present study was carriedout using photoaffinity labeling of glucocorticoid receptor in rat liver cytosol.Itwas found that there was no significant difference between molecular weights ofglucocorticoid receptor of normal and scalded rats determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis.Our result suggests that chnage ofsedimentation coefficient is not due to alteration of molecular weight ofglucocorticoid receptor binding subunit.     

支气管哮喘患者外周血白细胞糖皮质激素受体的改变

应用放射配体结合法和放射免疫法分别检测了１７例哮喘患发作期外周血白细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）和血浆皮质醇（Ｆ）。结果：外周血白细胞ＧＲ最大结合容量（Ｒ０）为１２９０８±２５０１位点／细胞，与健康对照组比较无显差异（Ｐ＞０．０５）。ＧＲ平衡解离常数（Ｋｄ）为１６．５４±５．３６ｎｍｏｌ／Ｌ，明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。血浆Ｆ为４３２±２７５ｎｍｏｌ／Ｌ，与对照组比较无显差异（Ｐ＞０．０５）     

甲状腺激素非经典核受体作用途径的研究进展

甲状腺激素是维持机体功能活动的基础性激素,在机体产热、新陈代谢、组织分化和器官发育等方面具有重要的调节作用,一般认为甲状腺激素结合靶细胞核内甲状腺激素受体,启动特异性甲状腺激素应答基因的转录表达,发挥生物学效应。近年来研究发现,某些甲状腺激素引起的生物反应迅速,而且不受基因转录与翻译相关抑制剂的影响,提示甲状腺激素存在非经典核受体作用途径,甲状腺激素介导的非经典核受体作用途径在心肌细胞、人神经胶质细胞、人成纤维细胞和成骨细胞等已被证实。