双歧杆菌的完整肽聚糖对小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位的影响

为探讨双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位的影响,首先分离培养昆明小鼠腹腔巨噬细胞,然后以WPG刺激巨噬细胞,用四甲基罗丹明乙酯(TMRE)标记线粒体膜电位,最后用激光共聚焦显微镜检测巨噬细胞内荧光强度的变化。和对照组相比,WPG刺激巨噬细胞后,巨噬细胞内反映线粒体膜电位的荧光强度明显增强。双歧杆菌的WPG在激活巨噬细胞的过程中可提高其线粒体膜电位。     

ROS对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响

目的 探讨ＲＯＳ影响巨噬细胞凋亡的机制。方法 激光扫描共聚集显微术,流式细胞术和荧光标记技术等,结果（１）凋亡巨噬细胞内ＤＡＤＰＨ氧化酶活性急剧降低使得胞内ＲＯＳ水平快速上降;（２）ＲＯＳ清除剂促进地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡;（３）ＰＫＣ促进巨细胞凋亡和ＲＯＳ急剧减少;ｃＡＭＰ抑制巨噬细胞凋亡和ＲＯＳ急剧减少。结论 （１）ＲＯＳ抑制地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡;（２）ＰＫＣ,ｃＡＭＰ等因素通过影响地     

线粒体与细胞凋亡

细胞凋亡过程中许多重要事件的发生都与线粒体密切相关,包括Caspases激活因子的释放,如细胞色素C(cytochromeC,CytC)、电子传递链的改变、线粒体膜电位(ΔΨm)的丧失、细胞内氧化还原状的改变、Bcl-2家族促进和抑制凋亡蛋白的参与等。不同信号的传导最终集中到线粒体上来启动或抑制这些事件及其效应的产生[1]。尽管凋亡的发生不依赖于氧化磷酸化,甚至不需要线粒体DNA(mtDNA)的参与,但是线粒体作为凋亡的中心环节已在许多凋亡系统中被证实。线粒体在细胞凋亡中作用的发现源于无核细胞凋亡的研究。1994年,Jacobson等把有核细胞去核制成…     

线粒体和细胞凋亡

细胞凋亡引起线粒体的一系列变化，主要表现为，线粒体膜电位降低、膜结构改变、生成的活性氧增多、转译及转录活动减少等。反之，线粒体主动参与凋亡过程，主要通过活性氧的直接作用、发生透性变化、释放可溶性因子等方式影响细胞凋亡     

心力衰竭与线粒体凋亡调控通路的研究进展

线粒体释放细胞色素C触发内源性凋亡途径即线粒体凋亡途径,可引起心肌细胞凋亡而导致心衰。Cyt-c的释放与通透性转变孔道(PTpore,PTP)的生成和线粒体内膜跨膜电位(Δψm)的下降有关;ATP敏感性K+通道)、非耦联蛋白可防止Δψm的下降,蛋白激酶C能抑制PTP的开放;蛋白酪氨酸激酶途径可直接激活线粒体途径;Bcl-2家族蛋白通过影响PTP而促进或抑制凋亡;凋亡抑制子ARC能在线粒体凋亡途径的不同水平抑制心肌细胞凋亡。对线粒体凋亡通路进行药物干预治疗,可为心力衰竭的防治开辟新的途径。     

地塞米松诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡过程中[Ca~(2 )]i的变化

目的　研究地塞米松诱导凋亡小鼠腹腔巨噬细胞 [Ca2 ]i的变化及其对凋亡的影响以及信使分子对凋亡和 [Ca2 ]i变化的影响。方法　激光扫描共聚焦显微术、流式细胞术和荧光标记术。结果　 1 凋亡巨噬细胞内fluo 3荧光强度逐渐增强。胞内钙库受体抑制剂 ,尤其是Ca2 内流阻断剂抑制细胞内fluo 3荧光强度变化 ,同时使细胞凋亡率降低 ;2 .staurosporine和DcAMP显著降低巨噬细胞凋亡率并明显抑制fluo 3荧光强度改变。genistein和亚甲蓝稍降低巨噬细胞凋亡率 ,并降低fluo 3荧光强度升高幅度。结论　 1 胞外Ca2 内流和内源性Ca2 释放 ,主要是胞外Ca2 内流使[Ca2 ]i逐渐升高并促进巨噬细胞凋亡 ;2 .PKC促进 [Ca2 ]i升高和巨噬细胞凋亡。cAMP抑制[Ca2 ]i升高和巨噬细胞凋亡。cGMP、TPK降低 [Ca2 ]i升高幅度并稍抑制巨噬细胞凋亡。结果提示 ,[Ca2 ]i是信使分子调控巨噬细胞凋亡的主要靶点。     

Bcl-2表达与小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的关系

利用免疫荧光技术和激光扫描共聚焦显微镜（共焦镜）技术检测了地塞米松介导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡时调亡抑制基因Ｂｃｌ－２表达的时空变化。结果显示,免疫荧光技术和共焦镜技术可对细胞内的蛋白表达作定量和定位检测,凋巨噬细胞内Ｂｃｌ－２逐渐减少,核中Ｂｃｌ－２相对量逐渐减少,胞浆中Ｂｃｌ－２相对量逐渐增多,Ｂｃｌ－２表达和地塞米松介导的巨噬细胞凋亡呈极显著负相关。结果表明,地塞米松介导巨噬细胞凋亡时,凋亡抑制     

脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞parkin表达及线粒体自噬形成

目的:探讨巨噬细胞在脂多糖(LPS)处理后parkin表达及对线粒体自噬的影响。方法:无菌分离并原代培养小鼠腹腔巨噬细胞;200 ng/ml LPS作用巨噬细胞,JC-1标记线粒体,流式细胞仪检测线粒体膜电位变化;RT-PCR检测巨噬细胞parkin mRNA水平;Western blot检测parkin及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达水平;激光共聚焦显微镜分别检测巨噬细胞在LPS处理前后parkin在细胞内的分布及与LC3和线粒体三者的共定位情况。结果:JC-1染色流式细胞仪检测结果显示,LPS处理后,巨噬细胞线粒体膜电位降低,并随LPS作用时间延长呈持续下降趋势;parkin mRNA在LPS处理6 h内仅有少量的增加,但parkin蛋白水平在LPS刺激6 h后增加明显;parkin在巨噬细胞定位结果表明,未受LPS处理时parkin呈弥散均匀分布,而LPS刺激后parkin呈明显的点状聚集;Western blot检测结果显示巨噬细胞在LPS刺激后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例增大,表明巨噬细胞发生明显的自噬;激光共聚焦显微镜结果显示,巨噬细胞在LPS刺激后,parkin、LC3和线粒体三者存在共定位关系。结论:巨噬细胞在LPS刺激后,parkin表达增加并介导线粒体自噬形成,参与对损伤线粒体的清除,可能在巨噬细胞参与的炎症反应中发挥一定的调控作用。     

雌酮诱导小鼠胸腺细胞和腹腔巨噬细胞凋亡

研究雌酮对培养的小鼠胸腺细胞和腹腔巨噬细胞的影响，发现雌酮能够诱导胸腺细胞和巨噬细胞产生典型凋亡的形态学改变和特征性ＤＮＡ“梯形”结构。用２０μｍｏｌ／Ｌ，６０μｍｏｌ／Ｌ和８０μｍｏｌ／Ｌ的雌酮处理胸腺细胞２小时，或用２０μｍｏｌ／Ｌ和４０μｍｏｌ／Ｌ雌酮处理巨噬细胞２４小时，均可出现典型的ＤＮＡ“梯形”结构。２０μｍｏｌ／Ｌ雌酮介导巨噬细胞出现ＤＮＡ“梯形”结构的效应呈时间依赖性。１０μｍｏｌ／Ｌ的它莫西芬能够有效抑制由２０μｍｏｌ／Ｌ雌酮诱导胸腺细胞和巨噬细胞产生凋亡的特征性ＤＮＡ片段；这种抑制效应具有剂量依赖性。Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ和放线菌酮亦能够抑制雌酮诱导胸腺细胞和巨噬细胞产生ＤＮＡ“梯形”结构的作用。     

抑制Mcl-1表达调控结核感染的小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的机制初探

目的:应用Mcl-1-shRNA质粒抑制不同毒力结核分枝杆菌(MTB)菌株感染的小鼠腹腔巨噬细胞中Mcl-1的表达,通过观察Bcl-2和Bax表达的变化探讨其调控机制。方法:制备不同毒力MTB菌株悬液,分别感染BALB/c小鼠,再用Mcl-1-shRNA质粒处理感染小鼠模型,并同时设立对应的对照组,于处理后1 d、3 d、5 d和7d处死小鼠并收集腹腔巨噬细胞。应用流式细胞术检测不同处理时间、不同毒力菌株感染时小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡率,real-time PCR和Western blot检测Bcl-2和Bax的表达。结果:Mcl-1-shRNA质粒处理后,不同毒力MTB菌株感染的小鼠巨噬细胞凋亡率均比对照组有不同程度的增高,其中以BCG和H37Ra组最明显(P 0. 05); Bcl-2的mRNA和蛋白水平显著减少,而Bax的mRNA和蛋白的表达均显著增加,以BCG感染组较为显著,且二者mRNA的比值与菌株毒力呈负相关(P 0. 05)。结论:抑制Mcl-1的表达可显著促进不同毒力MTB菌株感染的小鼠腹腔巨噬细胞凋亡,其调控机制可能与Bcl-2和Bax蛋白的表达及MTB菌株毒力密切相关。     

受体介导内吞过程中巨噬细胞线粒体质子动力势的变化

ＳＮＡＦＬ－ｃａｌｃｅｉｎ－ＡＭ、ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３分别标记培养的小鼠腹腔巨噬细胞胞浆ｐＨ、线粒体ｐＨ和线粒体跨膜电位；用激光共聚焦显微镜，观察了巨噬细胞内线粒体的分布，ＣｏｎＡ刺激后胞浆ｐＨ、线粒体ｐＨ及线粒体跨膜电位随时间变化曲线。结果显示ＣｏｎＡ刺激可引起线粒体内外ｐＨ差增加，线粒体跨膜电位在刺激开始时上升，而后逐渐下降；线粒体质子动力势绝对值在刺激开始一段时间增加，随后逐渐降低到比刺激前更低的水平。     

妊娠小鼠末梢血白细胞和腹腔巨噬细胞的数量变化

妊娠小鼠末梢血中性粒细胞和腹腔巨噬细胞的数量随妊娠持续增加,于妊娠晚期和分娩前后增加最为显著。这种现象可能是体内激素,或免疫物质调节的结果。注射β-17雌二醇后,小鼠末梢血白细胞总数明显增加,其中,单核细胞比例增加尤为显著,腹腔巨噬细胞数亦增多。该结果表明β-17雌二醇具有促进单核巨噬细胞增殖的作用。     

小鼠第一次卵裂周期中线粒体分布的变化

用线粒体专一性活体荧光染色剂罗丹明１２３显示小鼠受精卵在第一次卵裂周期中Ｍ的分布变化，雌原核和雄原核在汇合之前，Ｍ在细胞质中呈弥散状随机分布，两原核汇合后，Ｍ在核周围略显聚集，第一次卵裂后期，Ｍ沿纺锤体微管和２个子核周围集中，但在赤道区域内明显稀少，预示出细胞分裂面的定位，这说明细胞质分裂是收综环收缩和细胞结构调整共同作用的结果。２－细胞阶段，Ｍ在细胞核周围明显聚集。２－细胞胚受秋水仙素作用后，Ｍ     

Chinese herb medicine matrine induce apoptosis in human esophageal squamous cancer KYSE-150 cells through increasing reactive oxygen species and inhibiting mitochondrial function

Matrine, as a natural alkaloid isolated from the traditional herb medicine sophora flavescens, has been proved to possess excellent biological activities, including anticancer effects. Now, this research aims to assess the anticancer activities and the mechanism of matrine against esophageal cancer cells, we investigated the proliferative inhibition, apoptosis induction, as well as the underlying mechanism of matrine on esophageal cancer KYSE-150 cells. It was found that matrine could suppress KYSE-150 cell proliferation and significantly mediate cell apoptosis in a dose-dependent relation by increasing intracellular reactive oxygen species level and triggering mitochondrial membrane potential disruption. More precise mechanism studies demonstrated that matrine could up-regulate the expression of Bax proteins and down-regulate the expression of Bcl-2 proteins, as well as the activation about caspase-3, 8 and 9 in KYSE-150 cells. The morphological analysis of KYSE-150 cells exhibited that matrine could destroy the F-actin and nuclei structures and induce morphological damage with increased surface height distribution and roughness of cell membrane. These results not only demonstrated the potential anticancer activity mechanism of matrine at nanoscale, but also provide preliminary guidance for the treatment of esophageal cancer using matrine.     

猪苓多糖和氢化考的松对小鼠腹腔巨噬细胞的作用——细胞化学研究

小鼠注射猪苓多糖和氢化考的松7天后,取其腹腔巨噬细胞,进行细胞化学的定性及定位;并用 MPV-2型显微分光光度计进行定量研究。发现应用氢化考的松后,细胞内的 AcPase、ATPase 和 ANAE 活性下降,多糖含量减少。注射猪苓多糖以后,ATPase、AcPase 和 ANAE 活性增强,多糖含量显著增多。猪苓多糖和氢化考的松同时注射,酶活性及多糖含量与对照组无明显区别。     

DIGITAL VASOMOTOR CONDITIONING AND BODY HEAT REGULATION

Human subjects were conditioned to a tone-shock sequence during heat or cold exposure and then given 10 trials of experimental extinction in the heat. In the heat, while exhibiting a general peripheral as well as a digital vasodilatation, vasoconstriction developed as a conditioned response; the response did not extinguish. In the cold, with general peripheral and digital vasoconstriction, vasodilatation developed as the conditioned response. Since the cold-conditioned Ss did not recover completely from their cold exposure during the following heat equilibritun period, the extinction data of this group could not be accepted. A comparison was also made of the differences in thermoregulation and in conditioned responses of preselected Ss varying in latency of cold-induced digital vasodilatation. Although these Ss did differ in their thermophysiological reactions, they did not differ in regard to the nature of the conditioned response developed.     

TOLERABILITY OF NIMESULIDE AND PARACETAMOL IN PATIENTS WITH NSAID-INDUCED URTICARIA/ANGIOEDEMA

Previous studies evaluated the tolerance of nimesulide and paracetamol in subjects with cutaneous, respiratory and anaphylactoid reactions induced by nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs).

In this study we investigated tolerability and reliability of nimesulide and paracetamol in a very large number of patients with an exclusive well-documented history of NSAID-induced urticaria/angioedema. Furthermore, we evaluated whether some factors have the potential to increase the risk of reaction to paracetamol and nimesulide.

A single-placebo-controlled oral challenge procedure with nimesulide or paracetamol was applied to 829 patients with a history of NSAID-induced urticaria/angioedema.

A total of 75/829 (9.4%) patients experienced reactions to nimesulide or paracetamol. Of the 715 patients tested with nimesulide 62 (8.6%) showed a positive test, while of 114 subjects submitted to the challenge with paracetamol, 13 (9.6%) did not tolerate this drug. Furthermore, 18.28% of patients with a history of chronic urticaria and 11.8% of subjects with an history of NSAID-induced urticaria/angioedema or angioedema alone (with or without chronic urticaria) resulted to be intolerant to alternative drugs.

Taken together, our results confirm the good tolerability of nimesulide and paracetamol in patients who experienced urticaria/angioedema caused by NSAIDs. However, the risk of reaction to these alternative study drugs is statistically increased by a history of chronic urticaria and, above all, by a history of NSAID-induced angioedema.     

缺血缺氧时新生大鼠脑微血管基膜细胞外基质与脑细胞线粒体钙的变化

本文用６０ 只新生大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、缺血缺氧组、复氧２４ ｈ 组和复氧４８ ｈ 组。对每组中的４ 例大脑用抗Ⅳ型胶原抗体和抗层粘连蛋白抗体进行免疫组织化学反应;每组中的８ 例测定脑细胞线粒体钙浓度。用方差分析Ｓｔｕ ｄｅｎ Ｎｅｗ ｍ ｅｎ Ｋｅｕｌｓ 法检验所得数值的差异显著性,Ｐ＜ ０．０５。缺血缺氧组、复氧２４ ｈ 组和复氧４８ ｈ 组Ⅳ型胶原和层粘连蛋白阳性反应平均单位面积分别比两对照组者小;三个实验组阳性反应呈不连续线状的微血管数比两对照组者多;同时三个实验组阳性反应呈连续线状的微血管数比两对照组者少。三个实验组之间的阳性反应呈不连续线状的微血管数或呈连续线状的微血管数也都存在着显著性差异。缺血缺氧组脑细胞线粒体钙含量比两对照组者高,缺血缺氧后复氧２４ ｈ 组继续升高,复氧４８ ｈ 组的脑细胞线粒体钙含量却下降。缺血缺氧可导致新生脑细胞线粒体的钙离子增多,并可能激活细胞外的蛋白酶,溶解微血管的基膜成分－ Ⅳ型胶原和层粘连蛋白等,损伤血脑屏障,渗透性增高,发生脑水肿。如果能够及时给予合理的治疗和处理,则应该可以得到一定程度的恢复。     

IL－10和锂对肿瘤细胞及正常细胞的生物调节作用

观察了ＩＬ－１０及锂对瘤细胞系的数种生物调节作用，包括瘤细胞系的增殖、细胞表面标志改变、瘤细胞分化的诱导，并观察了ＩＬ－１０及锂对肿瘤及正常小鼠巨噬细胞ＮＯ释放的影响。ＩＬ－１０　对小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）、膀胱癌（ＢＩＵ８７）、胃癌（７９０１）及单核细胞淋巴瘤（Ｕ９３７）均有增殖抑制作用。ＩＬ－１０　增强小细胞肺癌肿瘤相关抗原的表达及Ｕ９３７的ＭＣＨⅡ类抗原表达。ＴＰＡ诱导Ｕ９３７的分化可被ＩＬ－１０抑制。ＩＬ－１０对小鼠巨噬细胞瘤细胞系释放ＮＧ无影响，但对正常小鼠巨噬细胞ＮＯ　产生有抑制。锂和ＩＬ－１０共同作用能增强ＩＬ－１０对瘤细胞的增殖抑制效应，且增强ＩＬ－１０抑制ＴＰＡ诱导Ｕ９３７的分化，但锂能对抗ＩＬ－１０对正常小鼠巨噬细胞ＮＯ产生的抑制作用。结果表明两种免疫调变剂对瘤细胞系及正常小鼠细胞均有生物调节作用，两者有协同，也有拮抗。