妊娠期肝内胆汁淤积症产妇外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达分析

目的：分析妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）产妇外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平。方法：连续选择近期入院分娩的23例ICP产妇,入选对象均接受了外周血调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg和CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg）和辅助性T细胞（CD＋3、CD＋4、CD＋8、CD＋4/CD＋8）检测,并与同期住院正常怀孕产妇（对照组,20例）相同测试结果比较。结果：调节性T细胞检测数据比较中,ICP组血清CD4＋CD25＋Treg和CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg水平明显低于对照组（P均〈0.05～0.01）。辅助性T细胞检测数据比较中,ICP组血清CD＋4/CD＋8表达水平明显高于对照组,而CD＋8表达水平则显著低于后者（P均〈0.05～0.01）。结论：ICP产妇存在着外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞表达及意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞表达及意义。方法选取2018年1—9月遵义医学院附属医院收治的120例慢性阻塞性肺疾病患者为研究对象。根据病情严重程度,将患者分入慢性阻塞性肺疾病稳定期组(SCOPD组,n=52)和慢性阻塞性肺疾病急性加重期组(AECOPD组,n=68);另将同期于我院体检中心接受体检的50例健康者纳入健康组。比较3组研究对象的第1秒用力呼出量/用力肺活量、第1秒用力呼出量/预计值、辅助性T细胞-17/调节性T细胞,以及辅助性T细胞-17、调节性T细胞、白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-1β水平。结果健康组、SCOPD组、AECOPD组的第1秒用力呼出量/用力肺活量分别为(85.10%±5.09%)、(57.44%±7.23%)、(48.31%±5.35%),第1秒用力呼出量/预计值分别为(99.15%±7.12%)、(66.10%±9.41%)、(56.37%±5.59%),均呈下降趋势,两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。健康组、SCOPD组、AECOPD组的辅助性T细胞-17分别为(2.45±0.66)×10~9个/L、(5.23±1.30)×10~9个/L、(6.48±0.82)×10~9个/L,呈上升趋势;调节性T细胞分别为(5.87±0.42)×10~9个/L、(4.12±0.31)×10~9个/L、(2.41±1.02)×10~9个/L,呈下降趋势;辅助性T细胞-17/调节性T细胞分别为(0.50±0.16)、(1.44±1.02)、(2.78±0.81),呈上升趋势。3组的辅助性T细胞-17、调节性T细胞、辅助性T细胞-17/调节性T细胞两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。健康组、SCOPD组、AECOPD组的白细胞介素-6分别为(10.58±5.11)pg/ml、(31.05±10.22)pg/ml、(70.33±14.75)pg/ml,呈上升趋势;白细胞介素-10分别为(8.15±1.12)pg/ml、(4.39±2.51)pg/ml、(3.61±0.64)pg/ml,呈下降趋势;白细胞介素-1β分别为(1.24±0.52)pg/ml、(5.56±0.41)pg/ml、(10.44±0.59)pg/ml,呈上升趋势。3组的白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-1β两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞动态平衡被打破可能在慢性阻塞性肺疾病的发生和进展过程中起着至关重要的作用。在临床工作中,可将外周血辅助性T细胞-17/调节性T细胞作为慢性阻塞性肺疾病的监测指标,为慢性阻塞性肺疾病的早期诊断和防治提供指导。     

慢性阻塞性肺疾病合并牙周炎患者血清辅助性T细胞及调节性T细胞表达对照分析

目的对照分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并牙周炎(PD)患者血清辅助性T细胞及调节性T细胞的表达现况。方法选择2013年1月至2014年6月于中国医科大学附属第四医院呼吸内科门诊就诊和住院治疗的COPD合并PD患者27例,同期COPD(不合并PD)患者24例,并选择同期于我院体检的健康人25例作为对照组。入选对象均在同一期间接受了血清辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及调节性T细胞(CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg)检测。结果 COPD合并PD患者血清CD3+、CD4+表达浓度、CD4+/CD8+比值以及CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg表达比例均显著低于COPD组及对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。COPD合并重度PD患者血清血清CD3+、CD4+表达浓度、CD4+/CD8+比值以及CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg表达比例均显著低于COPD合并中、轻度PD患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 COPD合并PD患者存在明确的血清调节性T细胞和辅助性T细胞低水平表达,且随着PD症状加重,上述趋势更加明显。     

血浆氧化型低密度脂蛋白水平与缺血性脑卒中患者辅助性T细胞/调节性T细胞轴功能平衡相关性分析

目的探讨血浆氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)与缺血性脑卒中患者辅助性T细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)轴功能平衡的相关性。方法选取自2015年1月至2017年1月扬州大学医学院收治的87例缺血性脑卒中患者为研究对象。其中,49例患者初次发作(初发组)、38例患者为脑卒中复发(复发组),并随机选取50例同期健康体检者为对照组。检测各组研究对象的Th17、Treg细胞百分率,血清维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA、抗人叉头状转录因子(Foxp3)mRNA、血浆ox-LDL水平,以及外周血中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、转化生长因子(TGF-β)等Th17/Treg轴相关效应分子水平。结果初发组、复发组外周血中Th17细胞百分率、Th17/Treg比值、RORγt mRNA、血浆ox-LDL、IL-6、IL-17、IL-23水平高于对照组,Treg细胞百分率、Foxp3 mRNA、IL-10、TGF-β水平低于对照组,组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。且复发组外周血中Th17细胞百分率、Th17/Treg比值、RORγt mRNA、血浆ox-LDL、IL-6、IL-17、IL-23水平高于初发组,Treg细胞百分率、Foxp3 mRNA、IL-10、TGF-β水平低于初发组,组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,缺血性脑卒中患者血浆ox-LDL与Th17细胞百分率、Th17/Treg比值、RORγt mRNA、IL-6、IL-17、IL-23呈正相关(P<0.05),与Treg细胞百分率、Foxp3 mRNA、IL-10、TGF-β呈负相关(P<0.05)。结论 ox-LDL水平在缺血性脑卒中患者血浆中显著升高,且预后越差的患者,ox-LDL水平越高,其可能通过诱导Th17/Treg的轴功能失衡而参与缺血性脑卒中的发病过程。     

多发性硬化患者外周血调节性T细胞功能受损

目的:探讨多发性硬化患者外周血调节性T细胞(Treg)的变化及其转录因子Foxp3的表达。方法:收集58例多发性硬化(MS)患者及24例正常人外周血,通过流式细胞术检测CD4+CD25+T细胞,RT-PCR检测Foxp3的表达。结果:MS患者外周血中Treg细胞数量较正常人无差异(P>0.05),而Foxp3表达明显减低(P<0.05)。结论:MS患者外周血中Treg细胞数量较正常人无明显变化,但其功能明显受损,是导致自身免疫性疾病发生的原因之一。     

肝细胞癌患者TACE后外周血调节性T细胞水平对预后的影响

目的 探讨肝细胞癌(HCC)患者TACE治疗后外周血调节性T细胞(Treg)水平与预后的关系.方法 回顾性分析天津医科大学附属肿瘤医院收治的122例HCC患者经TACE治疗后外周血中Treg占CD4+T细胞比例与生存时间(OS)的关联.结果 HCC患者TACE后Treg细胞占CD4+T细胞的比率显著升高(分别为6.109和6.834,P=0.000);低Treg组(＜6.7)HCC患者中位生存期19.3个月,高Treg组(≥6.7)中位生存期12个月,两组间OS存在显著差异.结论 HCC患者TACE治疗后外周血Treg水平是判断预后的独立预测指标.     

重症肌无力患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达

目的：观察免疫治疗对重症肌无力（MG）患者外周血CD4＋CD25^＋T淋巴细胞表达的影响。方法：应用四色流式细胞术对MG30例（观察组）治疗前后和30例健康者（对照组）外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋、CD25^＋ T淋巴细胞亚群等表达进行检测，以CD2。抗原荧光强度10的细胞定义为CD25^high细胞，分析其百分率和荧光强度，并结合临床资料进行相关分析。结果：观察组治疗前外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^high、CD25^＋占总淋巴细胞的比例与正常对照组无显著差异（P〉O．05），但CD4^＋＋细胞数较正常增高（P〈0．05）；经类固醇激素或经胸腺切除治疗后，外周血CD4^＋CD25^＋、CD／CD25^high与治疗前及对照组比较，差异显著（P〈0．05）。结论：经免疫治疗后的MG患者外周血中存在高比例的CD4^＋CD25^＋表达，可能与病情缓解有关。     

高压氧治疗对重症颅脑损伤患者外周血调节性T细胞的影响

目的 通过观察高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)治疗对创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)患者外周血调节性T细胞(regulatoryT cell,Treg)比例、血清神经元烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)及超敏C反应蛋白(hyper...     

脑外伤合并不同程度获得性肺炎患者外周血T细胞亚群表达水平观察

 目的 观察脑外伤(traumatic brain injury,TBI)合并不同程度获得性肺炎(hospital acquired pneumonia ,HAP)患者外周血T细胞亚群表达水平。方法 连续选择2013-01至2015-06神经外科住院的合并HAP患者31例,另选择同期住院确诊TBI但无HAP患者19例(TBI组),另有同期参加我院体检结论健康者为对照组(23例)。3组对象接受了外周血T细胞亚群(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/ CD8⁺)指标检测。结果 TBI合并HAP患者外周血CD3⁺、CD4⁺表达水平[(52.71±5.24)%和(29.30±3.15)%]及CD4⁺/CD8⁺(0.89±0.17)比值明显低于TBI组及对照组(P均<0.05)。同时,TBI合并重度HAP患者外周血CD3⁺、CD4⁺表达水平[(49.64±4.81)%和(28.76±3.04)%]以及CD4⁺/CD8⁺(0.85±0.13)比值明显低于TBI合并轻度HAP患者(P均<0.05)。结论 TBI合并HAP患者存在明确的外周血T细胞亚群表达异常,且随病情加重趋于显著。     

γ射线照射后小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其意义

目的 观察γ射线照射对小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)亚群的影响,探讨辐射诱发的免疫损伤作用机制.方法 C57BL/6小鼠经6 Gy γ射线照射后1～28 d取胸腺、脾脏称重并计算脏器系数,测量外周血WBC总数,流式细胞仪检测外周血和脾脏CD4+T细胞、Tregs细胞亚群的变化.结果 照射后1 d,胸腺和脾脏系数即明显下降,7 d降至最低,至照后28 d仍未恢复到对照组水平.WBC于照后1～7 d持续降至最低,14 d开始恢复,至28 d仍显著低于对照组.外周血CD4+T细胞在照后1 d-过性降低后逐渐增高,照后28 d基本接近对照水平;脾脏CD4+T细胞在照后7 d虽略有降低,但在14和28 d基本维持在对照水平.外周血Tregs细胞在照后1 d即开始升高,7 d达峰值,14和28 d仍明显高于对照组;脾脏Tregs于照后1 d即显著增至最高,而后缓慢降低,至照后28 d出现有统计学意义的降低(t=2.731,P＜0.05).结论 小鼠经6 Gy γ射线全身照射后胸腺和脾脏免疫组织严重受损,免疫细胞数量减少;而具有免疫抑制作用的Tregs细胞比例照后明显增高,揭示该亚群与辐射所致的小鼠免疫功能受抑和免疫调节失衡密切相关.

Abstract：

Objective To observe the effect of γ-ray irradiation on CD4 + CD25 + regulatory T cells (Tregs),and to investigate the mechanism of immune injury induced by irradiation.Methods The thymus and spleen of C57BL/6 mice were taken and weighted 1-28 d after γ-ray irradiation,and the organ coefficients were calculated.The amount of mouse peripheral WBC measured,CD4 + T cells and Tregs in peripheral and splenic were analyzed by flow cytometry.Results Coefficients of mouse thymus and spleen decreased significantly 1 d post irradiation,and reached to the bottom at 7 d.Coefficients did not recover to control level 28 d after radiation.Peripheral WBC continuously decreased and reached the bottom at 7 d,and did not recover to control level up to 28 d postirradiation.Peripheral CD4 + T lymphocyte temporally reduced at 1 d,while it increased at 7 d,and it approached to control level at 28 d after radiation.Splenic CD4 + T cells slightly reduced at 7 d however,they basically maintained as the same level as control 14 d and 28 d after radiation.Peripheral Tregs ascended at 1 d and reached the peak at 7 d,and reduced at 14 d and 28 d postirradiation,although they still were significantly higher than those of control group.At the same time,splenic Tregs increased significantly and achieved peak value at 1 d,and then gradually decreased and reached the minimum at 28 d after irradiation,which were significantly lower than those of control group( t =2.731,P ＜ 0.05).Conclusions Mouse thymus and spleen were injured severely,and the number of immunocytes decreased after 6 Gy whole body γ-ray irradiation.However,Tregs with immunosuppressive action increased significantly postirradiation,revealing that Tregs were closely correlated with immune function depression and immunomodulation imbalance induced by ionizing radiation.     

肝移植后患者外周血Tfh细胞亚群的变化特征及意义

目的 探讨肝移植术前和术后患者外周血滤泡辅助性T细胞(Tfh)亚群的表达变化及其与预后的相关性.方法 对11例肝移植术后肝功能稳定的患者进行随访研究,采用流式细胞术检测移植前和移植后4周外周血中Tfh细胞亚群频率的变化.结果 与移植术前比较,移植术后4周患者外周血Tfh1 (CD4+CXCR5+CXCR3+CCR6)细胞频率较移植前有下降趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05),Tfh2(CD4+CXCR5+CXCR3-CCR6)细胞频率较移植前明显升高(P＜0.05),Tfh1 7(CD4+CXCR5+CXCR3-CCR6+)细胞频率较移植前有上升趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Tfh2和Tfh17细胞可能与肝移植后患者肝功能的恢复有关.     

子痫前期患者蜕膜中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的Foxp3表达

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在子痫前期患者胎盘附着处蜕膜中表达及其临床意义。方法选择子痫前期30例和正常晚期妊娠30例,采用免疫组化法检测蜕膜CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3的阳性表达率,分析比较两组检测结果。结果蜕膜中Foxp3在子痫病例组及正常对照组的阳性表达率分别为16．67％和66．67％,子痫病例组Foxp3阳性表达率明显低于正常对照组（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3在子痫前期患者蜕膜组织中阳性表达率减低,其免疫抑制功能减弱,从而使母胎免疫耐受失衡、受损,免疫排斥作用增强,导致子痫前期的发生。     

HLA-G~+调节性T细胞在肾移植受者外周血中的比例及其功能研究

目的 确定人类白细胞抗原-G(HLA-G)区别于CD4~+ CD25~+ FoxP3~+ 调节性T细胞的细胞表型特征,观察HLA-G~+ T细胞在混合淋巴细胞培养中的免疫调节作用及其在移植免疫调节中的活性和意义.方法采用流式细胞术检测肾移植受者外周血CD4~+ HLA-G~+ GD8~+ HLA-G~+ T淋巴细胞的含量,分选HLA-G~+ T淋巴细胞,分析细胞表型,采用RT-PCR检测调节性T细胞的特异性标志FoxP3在HLA-G~+ T淋巴细胞的表达情况,以淋巴细胞分离液分离的PBMC、CD4~+ CD25~(high)、CD4~+ CD25~-细胞作为对照.取5对活体肾移植供受者的淋巴细胞进行混合培养,分别加入流式细胞术分选纯化后的HLA-G~+ 、HLA-G~- T淋巴细胞,对照组只加入供、受者淋巴细胞,MTT法观察细胞增殖和抑制情况.结果 肾移植受者外周血CD4~+ HLA-G~+ 、CD8~+HLA-G~+ T淋巴细胞表达率分别为1.95%±0.34%、3.13%±0.56%.流式细胞术分选HLA-G~+ T淋巴细胞后纯度可达55.0%～75.1%.RT-PCR 结果证明上述细胞CD25、FoxP3均为阴性表达.与HLA-G~- 组、对照组比较,混合淋巴培养3d后HLA-G~+ 组细胞增殖率明显受到抑制(P<0.05).结论 在肾移植受者外周血中存在CD4~+ HLA-G~+ 、CD8~+HLA-G~+ T淋巴细胞,这类细胞不同于CD4~+ CD25~+ FoxP3~+调节性T细胞,它们不表达CD25和FoxP3而表达免疫耐受分子HLA-G,在混合淋巴培养体系中,能显著抑制反应性细胞增殖,具有免疫调节功能.     

滤泡辅助性T细胞（TFH）在炎性肠病中的表达研究

目的观察新型CD4＋T辅助细胞亚群-滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells,TFH）在炎性肠病（inflammatory bowel diseases,IBD）中的表达,探究其在IBD发病中的作用及机制。方法用饮用葡聚硫酸钠（dex-tran sulfate sodium,DSS）的方法建立IBD动物模型,密度梯度离心法分离小鼠脾淋巴细胞,采用不同荧光素标记的CD4I、COS、CD40L、CXCR5抗体进行流式细胞染色,分析上述TFH的表面标记在DSS诱导IBD（DSS-IBD）模型中的变化;同时提取淋巴细胞RNA,用实时定量PCR检测TFH的特异性转录因子Bcl-6和效应分子IL-21的表达变化。结果与结论与对照组相比,DSS-IBD模型动物CD4＋ICOS＋,CD4＋CD40L＋,CD4＋CXCR5＋T细胞的比例,以及Bcl-6和IL-21在mRNA表达水平均显著下降,显示TFH亚群的功能调节失常可能是该类IBD的重要发病机制之一。     

肝移植患者外周血中Treg细胞上CTLA-4及HLA-DR表达的特征及意义

目的 观测肝移植患者外周血中调节性T细胞（Treg）上CTLA-4、HLA-DR分子的表达特征,探讨CTLA-4、HLA-DR表达与术后急性排斥反应的关系.方法 入组38例行肝移植术患者,其中16例患者发生急性排斥反应（急排组）,22例未发生急性排斥反应（稳定组）.应用流式细胞仪检测两组肝移植术后患者外周血中Treg细胞上CTLA-4、HLA-DR分子的表达,并分析其与肝功指标的相关性.结果 急排组外周血中Treg细胞上CTLA-4及HLA-DR分子表达水平明显低于稳定组（P＜0.05）.此外,Treg细胞上CTLA-4及HLA-DR分子表达水平与肝功指标ALT、AST呈明显负性相关.结论 肝移植患者发生急性排斥反应时,外周血中Treg细胞上CTLA-4及HLA-DR分子表达水平降低,提示其可能与术后急性排斥反应的发生相关.     

热疗对食管癌放疗患者T辅助细胞亚型的影响

目的 探讨热疗对食管癌放疗患者T辅助细胞亚型(Th1/Th2)的影响。方法 22例患者随机分2组:单放组10例,常规放疗,总剂量 64~66 Gy,5次/周,共30~33次;综合组12例,除常规放疗外加内生场热疗,2次/周,4~5周。流式细胞仪检测治疗前、后患者外周血Th1/Th2。结果单放组治疗后Th1细胞显著下降(t=5.33,P<0.01);综合组治疗后Th1细胞没有明显变化(t=-1.41, P>0.05)。组间比较:单放组Th1细胞下降(t=4.28,P<0.05)。结论 内生场热疗促使机体由Th2细胞向Th1细胞逆转,调整Th1/Th2细胞平衡。     

多发性骨髓瘤外周血T细胞亚群和B细胞相关免疫表型分析

 目的分析不同临床期多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞免疫功能的变化和外周血肿瘤相关B淋巴细胞的免疫表型特点.方法采用直接或间接免疫荧光标记流式细胞术分析MM患者外周血T和B淋巴细胞的免疫表型.结果初治MM患者CD4、CD25及CD4/CD8比值显著降低(P＜0.05),CD8升高(P＜0.01);稳定期除了CD25降低外,T细胞亚群正常;进展期CD3,CD4及CD4/CD8比值均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),CD8细胞升高(P＜0.01).结论不同临床期细胞免疫功能不同,细胞免疫调节与MM发病和病情进展有关,MM患者外周血肿瘤相关B细胞表达CD10抗原.     

肝移植急性排异患者外周血Th17及调节性T细胞的特征及意义

目的 探讨肝移植术后急性排异患者外周血中Th17细胞、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的变化特征及临床意义.方法 2011年1-9月解放军302医院肝移植研究中心收治的肝移植术后患者25例,根据移植组织穿刺活检病理结果分为急性排异组(排异组,12例)和非排斥稳定组(稳定组,13例),另选取13名健康体检者作为对照.采用流式细胞分析法检测外周血中Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例,观察Th17/Treg比值变化及其与肝脏损伤的关系.结果移植术后排异组外周血中Th17占CD4+T细胞的比例(3.50％±0.86％)明显高于稳定组(2.10％±0.52％)和对照组(1.79％±0.42％,P＜0.01),稳定组和对照组比较无统计学差异(P＞0.05).排异组和稳定组患者外周血中Treg占CD4+T细胞的比例(分别为0.90％±0.25％、1.51％±0.23％)明显低于对照组(2.57％±0.79％,P＜0.01),且排异组明显低于稳定组(P＜0.05).排异组Th17/Treg比值(4.20±1.69)明显高于稳定组(1.43±0.47)及对照组(0.75±0.28,P＜0.01),且稳定组明显高于对照组(P＜0.01).Th17/Treg比值与丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酸转氨酶(GGT)水平呈正相关(分别为r=0.5023,P=0.0105; r=0.4561,P=0.0219;r=0.4393,P=0.0280; r=0.5516,P=0.0043).结论 肝移植术后急性排异反应患者外周血中存在Th17/Treg失衡,且与肝脏损伤有一定关系.Th17/Treg失衡可能参与了肝移植术后急性排异反应的发生发展过程.