溶血卵磷脂开放胰腺炎大鼠血脑屏障的实验研究

目的:探讨胰腺炎时胰酶的作用产物之一溶血卵磷脂(LPC)对胰腺炎大鼠血脑屏障(BBB)通透性的影响。方法:首先将SD大鼠用Aho HJ法制成急性水肿型胰腺炎模型,随后实验组从大鼠的尾静脉注入LPC;对照组1在制成胰腺炎模型后从尾静脉注入生理盐水;对照组2为非手术组,单纯对其进行尾静脉注入LPC。其后7～10 d应用辣根过氧化物酶-二氨基联苯胺(HRP-DAB)显色法检测3组大鼠BBB的通透性,同时应用马根维显行磁共振造影检查其BBB的通透性。结果:HRP-DAB法显示实验组大鼠的BBB通透性明显升高,对照组BBB升高不明显,具有统计学差异;实验组大鼠表现为HRP局部血管外渗出;磁共振检查显示实验组及对照组大鼠BBB均无开放。结论:LPC能开放胰腺炎大鼠的BBB。     

溶血卵磷脂在胰性脑病发病机制中的作用

目的　探讨溶血卵磷脂(LPC)在胰性脑病(PE)发病机制中的作用环节和效应机制。方法　将SD大鼠随机分组,用AhoHJ法将实验组、对照组1制成急性水肿型胰腺炎模型,随后对实验组大鼠尾静脉应用LPC ;对照组1从尾静脉注入生理盐水;对照组2是假手术组,经尾静脉注入LPC。连用LPC 5d后的7～10d ,应用辣根过氧化物酶 二氨基联苯氨(HRP DAB)显色法检测其血脑屏障(BBB)是否开放,同时行脑组织切片丽春红、固蓝染色观察有无脱髓鞘改变。结果　实验组大鼠的BBB开放较明显,对照组的BBB几乎无开放。实验组脱髓鞘较明显,对照组脱髓鞘不明显,差异均有统计学意义(P <0 .0 5 )。结论　LPC对胰腺炎大鼠的BBB具有开放作用,对胰腺炎大鼠脑部有脱髓鞘作用;LPC是PE的致病因素之一,在PE发病机制中起一定作用     

溶血卵磷脂对胰腺炎大鼠脑损害作用的实验研究

目的:从溶血卵磷脂(LPC)开放胰腺炎大鼠血脑屏障(BBB)以及造成其脑部脱髓鞘两方面探讨LPC对胰腺炎大鼠的脑损害作用.进一步揭示胰性脑病(PE)的发病机制.方法:SD大鼠30只随机分3组,用Aho法将实验组、对照组1制成急性水肿型胰腺炎模型,随后对对实验组大鼠尾静脉应用LPC5d,对照组一从尾静脉注入生理盐水.对照组2是非手术组,对其进行尾静脉注入LPC.LPC注射结束后7～10d,应用辣根过氧化物酶--二氨基联苯胺显色法(HRP-DAB法)检测其BBB是否开放,同时行脑组织切片丽春红、固兰染色观察有无脱髓鞘改变.结果:实验组大鼠的BBB开放和脱髓鞘均较明显,对照组的BBB开放、脱髓鞘均不明显,均有具有统计学差异.结论:LPC能开放胰腺炎大鼠的BBB且能造成脱髓鞘损害,LPC是PE的致病因素之一.     

IL-10区域动脉灌注对急性胰腺炎大鼠血浆IL-6和TNF-α的影响

目的探讨IL-10区域动脉灌注(LAI)对急性胰腺炎(AP)大鼠血浆IL-6和TNF-α的影响。方法以5%牛磺胆酸钠胰胆管注射(1 ml/kg)制成大鼠急性胰腺炎模型,IL-10(40 000 UI/kg)LAI,以生理盐水为对照,检测大鼠血浆IL-10I、L-6、TNF-α和淀粉酶。结果假手术组大鼠血浆IL-10测不出,IL-6、TNF-α和淀粉酶分别为(17.5±1.3)pg/ml、(71.25±5.75)pg/ml和(885.4±136.3)U/L,AP大鼠血浆IL-6、TNF-α明显升高,与假手术组对比有显著差异(P<0.05);IL-10 LAI则使AP大鼠血浆3 h和6h的IL-6、TNF-α明显降低,与生理盐水组及AP组对比均有显著差异(P<0.05),但12 h时二者明显升高,与生理盐水组及AP组对比均有显著差异(P<0.05),IL-10LAI使大鼠淀粉酶明显下降。结论IL-10 LAI能降低AP大鼠3 h和6 h时的IL-6、TNF-α,但后期(12 h)则使二者升高,同时能降低AP大鼠淀粉酶,IL-10有望成为AP综合治疗的药物之一。     

乌司他丁联合甘油果糖对大鼠脑出血后水通道蛋白4的影响

目的观察联合应用乌司他丁（UTI）和甘油果糖对大鼠脑出血后水通道蛋白4（AQP4）的影响。方法 100只SD大鼠随机均分为对照组（A组）、脑出血组（B组）、乌司他丁组（C组）、甘油果糖联合乌司他丁组（D组）。采用自体动脉血注入尾状核法制成大鼠脑出血模型。A组不注药,C组尾静脉注入乌司他丁1.5 U·g^-1·h^-1,D组尾静脉注入甘油果糖0.6 ml·kg^-1·h^-1和乌司他丁1.5 U·g^-1·h^-1,B组在相同时间内给予等量生理盐水,各组分别在造模后6 h、1、3、5、7 d免疫组化法观察AQP4表达,伊文思蓝法测血脑屏障（BBB）的通透性,干湿重法计算脑含水量。结果与A组相比,B、C、D组AQP4于造模后6 h开始升高,3 d达到高峰,7 d仍高于正常,D组明显低于B组（P<0.05）;脑出血后BBB通透性均在出血后6 h开始增高,1～3 d最高,随后逐渐降低,D组最低（P<0.05）;B组脑含水量6 h开始增加,3 d达高峰后缓慢下降,7 d仍高于正常（P<0.05）,D组各时点含水量均低于C组（P<0.05）。结论脑出血后可能通过上调APQ4表达,增加BBB通透性,参与脑水肿形成,而早期联合给予甘油果糖与乌司他丁可明显抑制此进展。     

血清甘油三酯升高对大鼠急性胰腺炎的影响

目的 探讨血清甘油三酯(TG)升高对雨蛙素诱导的大鼠急性胰腺炎(AP)模型的影响。方法 雄性Wistar大鼠以高脂饲料喂养14 d诱导血清TG升高,继10只大鼠腹腔注射雨蛙素制成AP模型,11只大鼠注射NS作对照。另正常饲料喂养5只为AP模型对照,6只为空白对照。检测血清TG和游离脂肪酸,以及胰腺病理学检查。结果 高脂饲料AP组大鼠血清游离脂肪酸与TG的比值较其他各组明显升高(P<0.05),胰腺炎性浸润和腺泡细胞形成空泡的评分均高于单纯AP组(P<0.05)。结论 血清TG升高加重雨蛙索诱导大鼠急性胰腺炎的病理改变,并使大鼠体内脂肪分解反应加重。     

慢性低灌注性脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障通透性的改变

目的通过敏感的荧光方法,定量分析慢性低灌注性脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障(BBB)的通透性。方法雄性Wistar大鼠35只。大鼠分为模型再灌注组(n=25),模型不灌注组(n=5)和对照组(n=5)。模型再灌注组和模型不灌注组行右侧颈总动脉和颈外静脉端端吻合,同时结扎上矢状窦,建立大鼠脑动静脉瘘的动物模型;对照组单纯行右侧颈总动脉结扎。2周后,每组大鼠实验结束前2h尾静脉注射伊文思蓝(EB)。模型再灌注组阻断右侧颈总动脉和颈外静脉吻合部位形成缺血再灌注,采用EB荧光定量的方法分别观察再灌注2、3、9、24、48h时BBB的通透性。结果再灌注2h时,脑组织EB的含量为(0.935±0.166)μg/g,与对照组(0.489±0.132)μg/g相比显著增高(P<0.05),与模型不灌注组(0.713±1.217)μg/g相比显著增高(P<0.05)。再灌注24h达高峰,为(5.231±1.183)μg/g,再灌注48h趋于平稳,为(5.522±1.124)μg/g。结论慢性低灌注性脑缺血BBB通透性2周后增高;再灌注后2hBBB的通透性增高更具明显,再灌注24h达高峰,再灌注48h趋于稳定。     

外源性Tuftsin及其抑制物在急性胰腺炎中作用的实验研究

目的　探讨tuftsin及其抑制物在急性胰腺炎 (acutepancreatitis,AP)病情发展过程中的作用。方法　SD大鼠分为 5组 ,每组 2 4只 ,分为对照组、单纯tuftsin组、AP组、AP +tuftsin组、AP +tuftsin抑制物组。胰胆管逆行注射 4%牛磺胆酸钠建立AP模型 ,tuftsin及其抑制物组 ,自制模 2 0min后从股静脉注入tuftsin或其抑制物 75 μg kg。随机于 0、3、6、1 2h分批处死 ,留取胰腺 (体部 )组织甲醛固定 ,HE染色光镜观察胰腺病理改变程度并进行病理学评分。结果　对照组与单纯tuftsin组在不同时段病理学评分差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;制模后 0h各组胰腺病理学评分差异无显著性 ,制模后 3、6、1 2h各组胰腺病理学评分均比对照组和单纯tuftsin组明显升高 ;AP +tuftsin组各时间段均较单纯AP组病理改变明显加重 ,差异有显著性 (P <0 .0 1 ) ;AP +tuftsin抑制物组在制模后 6、1 2h明显减轻胰腺病理改变程度 ,与单纯AP组比较差异有显著性 ,在制模后 3h对病变程度无明显影响。结论　在胰腺炎病情发展过程中tuftsin加重胰腺病理改变 ,应用tuftsin抑制物可减轻胰腺病变程度 ,阻止急性胰腺炎病情发展     

缺血-再灌注损伤对大鼠急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

目的探讨缺血一再灌注(I／R)损伤对大鼠急性胰腺炎(AP)胰腺细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠54只按编号法随机分为对照组(n=6)、胰腺炎组(n=24)和I／R损伤组(n=24)。经胆胰管逆行加压注入3％牛磺胆酸钠建立大鼠AP模型，在此基础上，I／R损伤组通过暂时阻断脾下动脉造成局部胰腺I／R模型，对照组于术后lh，其余两组于术后1h、3h、6h和12h采取断颈方法分批处死动物，应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测缺血一再灌注区胰腺细胞凋亡。并观察其病理改变。结果胰腺炎组大鼠术后1h、3h胰腺组织仅为充血、水肿性改变，6h出现出血、坏死性改变；而1／R损伤组大鼠术后1h缺血一再灌注区胰腺呈现出血、坏死性改变，病变持续加重；AP后胰腺凋亡细胞明显增多，I／R损伤组和胰腺炎组的凋亡细胞高峰值分别在术后3h和6h；I／R损伤组术后1h、3h缺血一再灌注区胰腺凋亡细胞显著高于相应时相的胰腺炎组(P＜0．01，P＜0．05)．而6h、12h明显低于胰腺炎组(P＜O．05，P＜O．01)。结论I／R损伤在促发胰腺炎从水肿型向出血坏死型转化过程中，同时诱导胰腺细胞凋亡，细胞凋亡可能是阻止AP病变加重的一个有利反应。     

125碘 - 辣根过氧化物酶追踪手术后神经

目的　研究12 5碘 辣根过氧化物酶 ( 12 5I HRP)追踪术后神经轴浆流的可行性 ;为临床应用放射性同位素研究神经再生提供实验依据。方法　 2 4只SD大鼠 ,按手术先后顺序分为两组。 ( 1)实验组 :于坐骨结节远端 0 .8cm处切断大鼠右侧坐骨神经后立即行端端缝合术。术后 4周 ,从右侧小腿三头肌内注射12 5I HRP。 ( 2 )对照组 :将12 5I HRP注射到大鼠右侧小腿三头肌内。于注射12 5I HRP 2 4h后 ,实验组取神经缝合口近段 0 .8cm神经干 ,对照组取右侧坐骨结节远端的坐骨神经 0 .8cm ;两组同时切取该段神经周围肌肉和左侧相应部位坐骨神经干 ,进行12 5碘放射性强度的г 计数。结果　对照组 ,注射侧坐骨神经干的12 5碘放射性强度是其它组织的 3 0倍以上。实验组 ,注射侧坐骨神经的12 5碘放射性强度是其周围肌肉和对侧坐骨神经的 6倍和 7倍。两组注射侧坐骨神经的12 5碘放射性强度和其它组织相比 ,差异均有显著性意义 (P <0 0 1)。　结论　12 5I HRP注入肌肉被神经末梢摄取后 ,经轴浆逆流可以通过神经缝合口到达神经近段 ;应用г 计数器可探测神经组织中的12 5碘放射性强度。     

Influence of respiratory stress and hypertension upon the blood-brain barrier

The effects of acute hypertension and respiratory stress induced by Aramine (metaraminol bitartrate) upon blood-brain barrier (BBB) permeability to horseradish peroxidase (HRP) were studied in adult inbred white rats. The BBB permeability was quantitated by slicing the brain of each animal into 500-mu thick sections, incubating the sections using the Reese-Karnovsky method, and counting all observed HRP perivascular exudates. No evidence of BBB compromise or significant elevation of blood pressure (BP) was observed in the following experimental groups: 1) control group of five animals; 2) hyperventilated group of five animals (final mean arterial blood gases; pO2, 104.2 mm Hg; pCO2, 24.8 mm Hg; pH, 7.53); 3) anoxic-stress group of five animals (final mean arterial blood gases; pO2, 31.4 mm Hg; pCO2, 58.2 mm Hg; pH 7.21). However, in a group of 15 animals subjected to anoxic stress followed by hyperventilation, in addition to extreme changes in the levels of arterial blood gases, a significant BP increase occurred (mean BP increase per second, 3.43 +/- 0.25 mm Hg; final mean BP, 163.3 +/- 3.18 mm Hg); as well as significant BBB opening (mean number of HRP exudates per animal, 12.2 +/- 0.85). Likewise, a final group of 10 animals given intravenous Aramine displayed a significant systemic BP elevation (mean BP increase per second, 6.9 +/- 0.38 mm Hg; final mean BP, 165.8 +/- 3.16 mm Hg), accompanied by BBB opening (mean number of exudates per animal, 51.5 +/- 5.95). The variable most strongly associated with the degree of barrier opening was the rate of BP rise (correlation coefficient = +0.84).     

卡托普利对急性胰腺炎大鼠肾素血管紧张素Ⅱ水平的影响

目的 观察急性胰腺炎大鼠血浆肾素、血管紧张素Ⅱ水平变化以及卡托普利的干预效应。方法 63只SD大鼠分对照组、急性胰腺炎组、卡托普利干预组三组,进行不同处理。急性胰腺炎组用十二指肠闭襻法制作急件胰腺炎模型,干预组在制模后立即腹腔注射卡托普利（5 mg/kg）,在病程不同时点测定血浆淀粉酶（AMY）、血浆肾素活性（PRA）、血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）水平,并观察胰腺组织病理学改变。结果（1）急性胰腺炎组随着病变的进展,胰腺炎病理由水肿向出血坏死发展,病程10h内,PRA、Ang Ⅱ水平升高,胰腺炎病理呈水肿性改变;10h后,Ang　Ⅱ继续升;苟,PRA却升高不显著,但仍保持高水平,病程24h胰腺炎病理呈出血坏死性改变,胰腺组织病理学评分的会高于10h（P<0.05）。（2）卡托普利干预组随着胰腺炎病变进展,血浆PRA、Ang Ⅱ水平低于急性胰腺炎组,胰腺组织病理学评分低于急性胰腺炎组（P<0.05）。结论 早期运用卡托普利可降低血浆肾素血管紧张素Ⅱ水平,对大鼠急性胰腺炎病变有保护作用。     

早期应用维生素E对急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡和胰腺组织病变的影响

目的:探讨早期应用维生素E(Vit.E)对急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺细胞凋亡和胰腺组织病变的影响.方法:将SD大鼠72只随机分为对照组、AP组和Vit.E治疗组,每组24只.经十二指肠行胆胰管逆行加压注射4%的牛磺胆酸钠,诱导大鼠AP模型.于术后3 h、6 h、12 h和24 h采取断颈方法分批处死动物,应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测胰腺细胞凋亡情况,观察各组胰腺组织的病理切片并进行组织病理学评分.结果:AP组和Vit.E治疗组术后胰腺凋亡细胞明显增多,两组在3 h和6 h的凋亡指数均无明显差异(P>0.05),而Vit.E治疗组在12 h和24 h的凋亡指数显著高于对应时相的AP组(12 h,P<0.05;24 h,P<0.01);与AP组比较,Vit.E治疗组胰腺组织病变较轻,12 h和24 h的胰腺组织病理学评分明显低于AP组(12 h,P<0.05;24 h,P<0.01).结论:早期应用抗氧化剂Vit.E能够有效地减轻AP胰腺病变的严重程度,而胰腺细胞凋亡可能是介导此过程的一个重要病理、生理改变.     

丹参多酚酸盐对大鼠急性坏死性胰腺炎心肌损伤的防治作用

目的:探讨丹参多酚酸盐静脉注射对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠并发心肌损伤的防治作用。方法:42只健康雄性SD大鼠随机均分为对照组、模型组、治疗组,用腹腔注射左旋精氨酸(L-Arg)溶液造模,治疗组大鼠于造模后10 min尾静脉注射丹参多酚酸盐注射液(100 mg/kg)。48 h后处死动物,检测各组血清淀粉酶、心肌组织磷脂酶A2(PLA2)、血清肌钙蛋白I(CTnI)水平,并行心肌组织病理学检查。结果:与对照组比较,模型组与治疗组血清淀粉酶活性、CTnI水平和心肌组织PLA2均明显升高(均P<0.05),但治疗组以上指标均低于模型组(均P<0.05);对照组心肌无病理改变,模型组心肌组织可见灶性炎性细胞浸润、心肌断裂、出血,治疗组心肌间质可见少量炎性浸润。结论:丹参多酚酸盐注射液对大鼠ANP及其并发心肌损伤具有防治作用。     

C-反应蛋白及白细胞介素6早期预测急性胰腺炎合并感染的实验研究

目的研究C-反应蛋白(CRP)及白细胞介素6(IL-6)对急性胰腺炎并感染的诊断价值。方法60只SD大鼠随机分为急性胰腺炎组(AP组,n=40)及假手术组(S组,n=20),分别检测成模前(0h)及成模后12,24及48h时血浆CRP及IL-6水平和48h时腹水细菌培养。结果(1)AP组存活36例,均制模成功。16例发生腹水感染(AP1组),而20例未见腹水感染(AP2组)。(2)AP1及AP2组血浆CRP及IL-6水平在成模后均显著高于S组(P均<0.01)。AP1与AP2组比较,仅CRP在48h时有显著升高(P<0.01)。(3)AP1组在成模后IL-6及CRP逐渐上升,各时点均存在显著的差异(P均<0.05);而AP2组IL-6及CRP仅在成模后24h内显著升高(P均<0.05),而术后48h和24h时差异并无显著性(P>0.05)。结论血浆CRP对急性胰腺炎早期发生感染诊断具预测价值,而IL-6则对急性胰腺炎并继发的细菌感染并不敏感。     

西维来司钠对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的作用

目的 探讨西维来司钠(sivelestat sodium)对SD大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肺损伤的作用及其可能机制.方法 健康成年SD大鼠24只随机分成3组:对照组、模型组、药物组,每组8只.逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立SAP模型.药物组在模型基础上给予西维来司钠干预,对照组和模型组给予等量生理盐水.建模成功6h后处死大鼠,检测各组大鼠血清淀粉酶(AMS)、血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性以及肺脏组织湿干比重(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性、核因子-κB(NF-κB)活性,光镜下观察肺脏病理改变,并进行病理学评分.结果 与对照组比较,模型组肺组织MPO、NF-κB含量显著升高(P<0.05),W/D比值显著升高(P<0.05),血清AMS、NE显著升高(P<0.05),光镜下可见肺组织出现明显的病理损伤(P<0.05).与模型组相比,药物组的血清NE以及肺组织MPO、W/D、NF-κB含量显著降低(P<0.05),但是AMS却没有显著降低(P>0.05).光镜下肺组织病理损害显著减轻(P<0.05),其损伤程度介于对照组和模型组之间.结论 早期应用西维来司钠对减轻大鼠急性胰腺炎肺损伤程度具有一定的作用.其作用机制可能是:西维来司钠通过抑制NF-κB活性来抑制炎症反应,从而起到减轻重症急性胰腺炎肺损伤的作用.     

静脉输注维生素E对急性胰腺炎时肺脏脂质过氧化损害的保护作用

目的观察维生素E（VE）对急性胰腺炎（AP）时肺组织脂质过氧化的保护作用。方法采用3％牛磺胆酸钠按O1mg／kg体重注入胰管内制成AP动物模型后,经肠系膜静脉按100mg／kg体重注入VE乳剂或相同体积的生理盐水,术后6小时和24小时活杀动物检测血清淀粉酶、脂肪酸及磷脂酶A_2（PLA_2）活性;肺脏组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及三磷酸腺着（ATP）含量。结果VE组动物肺脏组织炎性病理改变较AP组明显减轻;血清淀粉酶、脂肪酶及PLA_2活性均较AP组显著降低（P＜0．05）。肺脏组织MDA含量较AP组巳著降低（P＜0．05）,SOD活性及ATP含量较AP组显著升高（P＜0.05）。结论氧自由基所引发的脂质过氧化作用是急性胰腺炎时肺脏损害发病过程中的重要因素之一,应用较大剂量VE可减轻肺脏组织损害。     

防治急性胰腺炎并发肝脏损害的实验研究

目的 探讨急性胰腺炎(AP)时大鼠肝脏损害及中药七叶皂苷钠对该损害的影响。方法 将大鼠分成3组．对照组、AP组和七叶皂苷钠治疗组(简称治疗组)。通过对AP大鼠静脉注射七叶皂苷钠,测定各组肝组织内能荷及ATP的含量、血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶和血清蛋白含量等各项指标．并观察胰腺和肝组织的病理变化。结果 治疗组较AP组肝组织内细胞能荷及ATP的含量高，肝功能损害轻。结论 AP时常伴肝脏功能受损，应用七叶皂苷钠静脉注射，可以减轻AP大鼠肝脏损害。