TTP减轻大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤

 目的：分析tristetraprolin （TTP）在大鼠蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）后的相对表达水平,以及TTP对SAH后早期脑损伤（early brain injury,EBI）的作用及其可能机制。方法：将56只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组（sham组）和SAH组,采用血管内穿刺法建立SAH模型,SAH组分别于出血后0、12、24、48、72 h和1周取脑组织,Western blot法检测TTP在不同组别中的表达;另取60只成年雄性SD大鼠,随机分成sham组、SAH组、SAH+对照质粒（vector）组和SAH+TTP组,SAH造模48 h后检测神经功能损伤和脑组织含水率;检测脑组织内伊文思蓝（Evans blue,EB）含量以评估血脑屏障通透性;TUNEL法检测大脑皮层细胞凋亡;ELISA法检测脑组织中白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达;Western blot法检测脑组织中TTP、Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3的水平。结果：与sham组比较,TTP在SAH后12 h开始表达下调,在48 h时表达最低,随后呈上升趋势;SAH组大鼠Garcia神经功能评分较sham组明显降低,脑组织含水率和EB含量较sham组均明显升高（P<0.01）,脑组织中IL-6和TNF-α的表达上调（P<0.05）;SAH组大鼠脑出血后细胞凋亡率显著上升（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3的表达升高（P<0.01）,而Bcl-2的表达下调（P<0.01）;与SAH+vector组比较,SAH+TTP组大鼠Garcia神经功能评分明显升高,脑组织含水率和EB含量均明显降低（P<0.05）,IL-6和TNF-α在脑组织中的表达下调（P<0.05）,细胞凋亡率显著下调（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3的表达下调（P<0.01）,而Bcl-2的表达上调（P<0.01）。结论：大鼠SAH后早期TTP表达下调,并通过其促凋亡机制参与EBI发生;上调TTP可显著减轻大鼠SAH后EBI。     

姜黄素通过抑制JNK/c-Jun信号通路减轻大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤北大核心CSCD

目的探讨姜黄素抑制大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤中的海马神经元损伤的作用,以及其与c-Jun N末端激酶(JNK)/c-Jun信号通路之间的关系。方法成年雄性SD大鼠60只随机分为4组,分别为:假手术组、蛛网膜下腔出血组、100 mg/(kg·d)姜黄素组和200 mg/(kg·d)姜黄素组,每组15只。用拴线法建立蛛网膜下腔出血模型。采用Nissl染色观察神经元破坏情况。TUNEL染色测定凋亡细胞。免疫组织化学染色法测定caspase-3表达,Western blot法检测海马组织c-Jun、磷酸化的c-Jun(p-c-Jun)、JNK、磷酸化的JNK(p-JNK)和活性的胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白水平。结果 Nissl染色检测到SAH组中Nissl小体减少,而姜黄素干预后可抑制此改变;TUNEL染色检测发现SAH组凋亡细胞增多,而姜黄素干预后凋亡细胞明显减少,其中以高剂量组更加明显。SAH组caspase-3、p-c-Jun和p-JNK蛋白表达上调,而姜黄素干预后p-c-Jun、p-JNK和caspase-3蛋白表达较SAH组中的表达降低,其中以高剂量组更加明显。结论姜黄素可能通过抑制JNK/c-Jun信号通路和细胞凋亡减轻大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。     

亚低温对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的保护作用

目的:探讨亚低温(MHT)处理对蛛网膜下腔出血(SAH)后的早期脑保护作用。方法:SD雄性大鼠分为常温处理组(NT)和亚低温处理组(MHT),利用自身动脉血注射法制备大鼠SAH模型,激光多普勒血流仪检测大鼠脑血流,高压液相色谱方法(HPLC)检测大鼠脑脊液中谷氨酸的浓度,商品化试剂盒检测大鼠脑脊液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,湿/干比方法检测大鼠脑含水量。结果:与NT处理的SAH大鼠相比,MHT处理可以增加SAH早期大鼠脑血流,降低脑脊液中谷氨酸的浓度和LDH的活性。此外,MHT处理可以显著减轻大鼠脑水肿。结论:早期MHT处理可增SAH大鼠脑血流量、抑制谷氨酸过度释放,减少神经细胞损伤和减轻脑水肿。     

褪黑素通过抑制NLRP3活化减轻蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤

目的:研究外源性褪黑素对蛛网膜下腔出血大鼠(SAH)早期脑损伤(EBI)的影响及分子机制.方法:60只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、SAH组和褪黑素治疗组(SAH+ Melatonin),用注射自体血液的方法制备SAH大鼠模型,腹腔注射方法给予褪黑素进行治疗.通过检测大鼠脑的含水量评估脑水肿程度,利用r...     

褪黑素抑制早期蛛网膜下腔出血大鼠皮层小胶质细胞活化

目的:研究褪黑素对蛛网膜下腔出血大鼠(SAH)早期皮层小胶质细胞活化的影响及分子机制.方法:45只成年雄性SD大鼠分为假手术组(sham)、SAH组(SAH)和褪黑素治疗组(SAH+Melatonin).利用注射自体血液的方法制备SAH大鼠模型,利用Western Blot检测大鼠皮层中小胶质细胞标记物CD11b的表达...     

褪黑素抑制早期蛛网膜下腔出血大鼠皮层神经细胞铁死亡

目的:研究褪黑素(Mel)对蛛网膜下腔出血大鼠(SAH)早期皮层神经细胞铁死亡的影响及分子机制.方法:利用注射自体血液的方法制备SAH大鼠模型,通过腹腔注射法给予褪黑素治疗.利用商品化试剂盒检测脑脊液中铁离子含量和脑组中铁含量,利用Western Blot检测大鼠皮层中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达,利用2',...     

铁死亡在蛛网膜下腔出血早期脑损伤发病机制中作用的研究进展

蛛网膜下腔出血(SAH)导致铁死亡，表现为铁代谢失调、脂质过氧化增加和谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧化物酶4(GSH/GPX4)的抑制。铁死亡介导SAH后72小时内早期脑损伤(EBI-SAH)进而导致SAH预后不良。通过药物靶向抑制铁死亡能够减轻EBI-SAH,为未来治疗EBI-SAH提供了新的靶点。     

绿茶多酚通过抑制TLR4通路减轻蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤

目的 探讨绿茶多酚通过抑制TLR4通路对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的影响.方法 建立大鼠蛛网膜下腔出血模型,随机分为模型组、绿茶多酚组、TAK-242(TLR4抑制剂)组、绿茶多酚+TAK-242组,每组12只;另取12只大鼠设为假手术组.药物处理后,对所有大鼠进行神经功能缺损评分,检测各组大鼠脑组织含水量,采用Ev...     

小胶质细胞在蛛网膜下腔出血后脑损伤中作用机制的研究进展

小胶质细胞是位于中枢的单核巨噬细胞系统成员,对维持中枢神经系统的稳态有重要意义。蛛网膜下腔出血（SAH）是脑卒中的一种亚型,其发生后会造成72 h内早期脑损伤,以及SAH后3～15 d迟发性脑损伤。以往认为,血管痉挛在SAH后脑损伤中发挥重要作用,但脑损伤中的炎症反应近年逐渐受到重视,其中小胶质细胞可在SAH后早期和延迟相脑损伤的炎症反应中向不同方向极化,既可发挥促炎作用,也可产生神经保护作用。我们综述近几年小胶质细胞在SAH后脑损伤中发挥的作用及相关治疗靶点的研究进展及相关热点,为临床处理该类疾病提供潜在治疗靶点。     

免疫球蛋白对蛛网膜下腔出血大鼠海马神经元损伤修复的作用

目的:探究蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠经免疫球蛋白(Ig)干预后的神经元损伤修复情况,为SAH治疗提供新靶点.方法:成年雄性SD大鼠50只,常规适应性饲养7 d后,随机选择10只作为空白对照组,剩余40只建立SAH模型,建模成功后随机分为4组,每组10只,分别设为模型组、Ig低剂量[0.2g/(kg·d)]组、Ig中剂...     

七氟醚减轻蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤

目的 探讨七氟醚(Sev)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠早期脑损伤(EBI)的保护机制。方法 将大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(model组)(用血管内穿刺法建立SAH模型)、Sev低(Sev-L,1.5%)、高剂量组(Sev-H,3%)、Sev+Wnt/β-catenin信号通路的特异性抑制剂DKK1(Sev 3%+DKK1 5μg/kg)组(在模型制备前30 min,侧脑室注射DKK1),每组18只。24 h后使用改良的Garcia量表对大鼠神经功能进行评分;伊文思蓝(EB)检测血脑屏障通透性,并通过SAH分级系统评估SAH的严重程度;计算脑组织含水量(BWC);TUNEL免疫荧光染色检测神经元凋亡;Western blot检测脑组织Wnt3a、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、ZO-1、occludin、claudin-5、MMP-9、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 与sham组相比,model组大鼠神经功能评分、脑组织Bcl-2、occludin、ZO-1、claudin-5、Wnt3a、β-catenin表达显著降低(P<0.05);SA...     

蛛网膜下腔出血后大鼠脑组织中SOCS3的表达研究

目的：细胞因子信号转导负调控因子3(SOCS3)在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑组织中的分布和表达变化。方法成年雄性SD大鼠56只,分为对照组、SAH后3h、6h、12h、24h、48h、72h共7组(每组8只)。通过建立大鼠SAH模型,于SAH后不同时间点,应用免疫印迹技术和免疫组化检测SAH后脑组织中SOCS3的分布和表达变化。结果大鼠SAH后3h脑组织中SOCS3蛋白水平开始升高,24h达到高峰,其后逐渐下降,72h仍高于对照组。同时,SOCS3在脑组织中广泛存在,对照组中SOCS3主要定位于胞核,SAH后SOCS3胞浆阳性增加。结论大鼠SAH后早期伴有SOCS3信号通路的激活,提示SOCS 3信号通路可能参与SAH后早期脑损伤中的病理生理改变     

黄芪多糖对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的治疗作用

目的 探讨黄芪多糖（APS）对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后引起的早期脑损伤是否具有治疗作用。方法 成年雄性SD大鼠120只,采用颈内动脉刺破法建立SAH模型,随机分为假手术(sham)组、SAH模型(SAH+NS)组、APS给药（SAH+APS）组。SAH模型建立后,各组立即腹腔注射相应溶液,24 h后通过T2加权成像（T2WI）来评估脑内损伤情况;应用Nissl染色法观察神经元特有结构尼氏体的形态学改变;应用免疫组织化学和Western blotting方法检测凋亡因子cleaved-Caspase-3和Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。 结果 组织学染色及T2W1结果表明,SAH大鼠应用APS（40mg/kg）可以提高Bcl-2的表达水平（P<0.05）,下调cleaved-Caspase-3和Bax的表达水平（P<0.05）;T2WI结果显示,SAH大鼠应用APS（40mg/kg）可以降低脑内损伤程度（P<0.05）。 结论 黄芪多糖可以抑制SAH大鼠海马区神经元的凋亡,对早期脑损伤具有一定的治疗作用。     

银杏叶制剂对蛛网膜下腔出血 早期大鼠脑缺血的影响

目的:探讨银杏叶制剂(GBE)对蛛网膜下腔出血(SAH)早期缺血性脑损伤的防治作用。方法:对假手术组(SO组)、SAH组和SAH+GBE组大鼠检测24h内局部脑血流量(rCBF)、脑组织内皮素-1(ET-1)含量和Ca含量改变,并对海马CA1区组织作光镜检查。结果:SAH组于术后rCBF迅速而持续降低,脑组织ET-1含量和Ca含量在诱导SAH 1 h后均显著高于SO组,3 d后海马CA1区神经元明显受损。 SAH+GBE组的上述改变均较轻。结论:GBE可减轻SAH后缺血性脑损伤。     

TLR4-NLRP3介导蛛网膜下腔出血早期大鼠神经细胞焦亡

目的:研究蛛网膜下腔出血大鼠(SAH)早期神经细胞焦亡的分子机制.方法:雄性SD大鼠分为假手术组和SAH组.利用注射自体血液的方法制备SAH大鼠模型,利用Western Blot检测大鼠皮层toll样受体4(TLR4)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)和活化型gasdermin D(GSDMD-p30)的表达,利用商品...     

NLRP3通过下调claudin-1增加早期蛛网膜下腔出血大鼠血脑屏障通透性

目的:研究NLRP3炎性小体在大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)早期脑损伤(EBI)过程中对血脑屏障(BBB)的影响.方法:36雄性SD大鼠分为假手术组(sham)、SAH组(SAH)和NLRP3抑制剂MCC950处理组(SAH+MCC950),利用注射自体血液的方法制备SAH大鼠模型,利用尾静脉注射给予SAH大鼠MCC95...     

蛛网膜下腔出血后继发性脑血管痉挛的研究进展

蛛网膜下腔出血（SAH）约占所有脑卒中患者的5%,具有极高的致残率和致死率。SAH后继发性脑血管痉挛（CVS）导致流向大脑重要部位的血液中断,进而引起脑缺血,是导致SAH后高致残率和死亡率的主要并发症之一,通常发生在SAH之后的3～12 d,平均持续两周。SAH后CVS的发生机制十分复杂,是多因素、多环节共同参与的过程,主要包括溶血产物产生,血管舒张收缩因子失衡,炎症、信号级联反应的激活及细胞凋亡及相关基因的表达。SAH后CVS的治疗分为介入治疗和药物治疗。有效地预测、预防和治疗CVS将显著提高SAH后患者的生存率及生活质量。我们就SAH后脑血管痉挛的发生机制及治疗措施的研究进展进行简要综述。     

大鼠蛛网膜下腔出血内源性一氧化碳生成增加

目的探讨蛛网膜下腔出血 (SAH)后内源性一氧化碳生成的变化。方法采用Wistar大鼠雌雄各半 ,将动物随机分入非SAH组、SAH组和HO抑制剂锌原卟啉IX(ZnPPIX)组。非SAH组于股动脉抽血0.4ml后 ,枕大池注入0.3ml生理盐水 ;SAH组和ZnPPIX组于股动脉抽血0.4ml后 ,枕大池注入经冻 -溶方法制备的自体动脉血溶解物0.3ml。在枕大池注入自体动脉血溶解物开始前30min按50mg/kg腹腔注射ZnPPIX ,每天以上述半量重复2次。每组各取诱导SAH后24h和72h时间点 ,每组每时间点各6只动物。将动物处死后制备脑组织匀浆液 ,用Chalmers介绍的血红蛋白结合及联二亚硫酸盐法测定脑组织中一氧化碳 (carbonmonoxide)含量 ,用放射免疫分析法测定脑组织cGMP含量。结果颅脑解剖学观察证实SAH模型制备成功。非SAH组在脑池注入生理盐水后24h脑组织一氧化碳含量为(23.73±1.57)μg/g组织湿重。与非SAH组比较 ,SAH组在诱导SAH后24、72h脑组织一氧化碳含量分别增加了20.76 %和37.36 % (P<0.05或P<0.01) ,SAH后24h和72h,ZnPP组脑组织一氧化碳含量显著低于SAH组 (P<0.05或P<0.01)。在脑池注入生理盐水后24h ,非SAH对照组脑组织cGMP含量为(4.57±1.45)pmol/mg。在脑池注入动脉血溶解物后 ,SAH组大鼠脑组织cGMP有下降趋势 ,但与非SAH组比较均无统计学     

蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛平滑肌超微结构研究

采用盐酸和胶原酶消化动脉外膜的技术，对正常的脑动脉、蛛网膜下腔出血后痉挛的脑动脉及经前列腺素F2α(prostaglandin F2α，PGFZa)处理的脑动脉平滑肌细胞构筑进行研究。结果显示正常平滑肌细胞是梭形的，沿着血管长轴环行分布，细胞间通过突起相连，肌细胞外膜面通常是光滑的；痉挛的脑动脉和经PGF2α处理的脑动脉平滑肌外膜面均出现非常相似的膜皱折和卷曲，肌间隙增宽。透射电镜显示急性痉挛管壁病理变化轻微；迟发性痉挛出现明显病理性超微结构改变。实验结果提示急性脑血管痉挛是由平滑肌收缩引起，病理变化轻微；迟发性脑血管痉挛是血管持久收缩伴病理性超微结构改变。