运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂联素受体的影响

目的观察运动对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠血清脂联素（APN）及骨骼肌APN受体（AdipoR）的影响。 方法将30只Wistar大鼠分为对照组及高脂组,分别给予基础饲料和高脂饲料喂养;经喂养18周后再将高脂组大鼠随机分为静息组和运动组,继续给予高脂饲料喂养,运动组同时进行游泳训练,共持续6周。于实验进行24周后测量各组大鼠体重,检测空腹胰岛素(FINS)及空腹血糖(FBG)水平,计算胰岛素敏感指数（ISI）;采用酶联免疫吸附法检测血清APN含量;选用实时荧光定量聚合酶链反应检测骨骼肌APN受体1（AdipoR1）及APN受体2（AdipoR2）mRNA的表达。 结果高脂组大鼠经高脂饲料喂养18周后,其ISI较对照组明显降低,提示胰岛素抵抗模型制作成功。实验进行24周后,与对照组比较,静息组大鼠ISI显著降低,血清APN含量及骨骼肌AdipoR1、AdipoR2 mRNA表达分别降低至对照组71.9%、59.9%及69.2%水平（均P<0.05）;与静息组比较,运动组大鼠ISI明显提高（P<0.05）;骨骼肌中AdipoR1 mRNA表达亦显示提高,约是静息组的1.33倍（P<0.01）,但血清APN含量及骨骼肌AdipoR2 mRNA表达组间差异均无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论运动干预可提高大鼠胰岛素敏感性,其机制可能与上调大鼠骨骼肌AdipoR1表达有关。     

慢性复合应激对大鼠血清脂联素及肝脏脂联素受体-2表达的影响

目的 研究慢性复合应激对大鼠血清脂联素水平及肝脏脂联素受体-2(AdipoR2)表达的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为应激组和对照组,每组20只.应激组实施8周的慢性复合应激刺激,对照组在此期间正常饲养.在实验的第8周将大鼠断头处死,取血检测脂联素、血糖、胰岛素抵抗(IR)、糖化血红蛋白(HbA1C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯、总胆固醇含量.结果①8周后,应激组与对照组旷场实验得分和24 h尿皮质醇差异有统计学意义[(32.0±8.6)、(52.0±12.7)分,(5.8±0.4)、(5.3±0.1)ng/L,P＜0.05或＜0.01].②8周后应激组与对照组脂联素、总胆固醇,甘油三酯、HDL-C、lnIR、HbA1C差异有统计学意义[(4.97±0.57)、(5.63±0.49)mg/L,(1.44 ±0.24)、(1.07±0.23)mmol/L,(0.47±0.09)、(0.39±0.05)mmol/L,(0.76±0.17)、(0.89±0.15)mmol/L,(1.89±0.46)、(1.41±0.32),(7.84±1.72)%、(6.08±1.56)%,t值分别为-3.927、4.978、3.475、-2.564、3.831、3.390,P＜0.05或＜0.01].③8周后应激组和对照组大鼠肝脏AdipoR2mRNA相对表达分别为0.67±0.04、1.00±0.11,蛋白相对表达分别为0.73±0.02、1.00±0.04,差异有统计学意义(t值分别为-12.609、-27.000,P均＜0.01).脂联素与HbA1C、LDL-C、IR显著负相关(r值分别为-0.26、-0.88、-0.37,P＜0.05或P＜0.01),与HDL-C显著正相关(r=0.78,P＜0.01).结论 慢性复合应激使大鼠血清脂联素水平和肝脏AdipoR2表达降低.     

脂氧素A4对小鼠巨噬细胞钙池操纵的钙通道及活性氧的影响

目的 研究脂氧素A4对LPS诱导的小鼠RAW 264.7巨噬细胞钙池操纵的钙通道活化及活性氧产生的影响,探讨脂氧素A4保护内毒素性肺损伤的具体机制.方法 小鼠RAW 264.7巨噬细胞,随机分为对照组、LPS组、Thapsigargin组、脂氧素A4+LPs组、脂氧素A4+Thaosigargin组、2-Aminoethoxydiphenylborate+Thapsigargin组.采用细胞内钙离子特异性荧光探针Fluo3/AM和活性氧特异性荧光探针DCFH-DA标记小鼠巨噬细胞.激光共聚焦显微镜动态观察巨噬细胞游离钙浓度变化,流式细胞仪测定活性氧产生变化.结果 脂多糖呈剂量依赖升高细胞内游离钙浓度和活性氧的产生.脂氧素A4抑制脂多糖引起的钙内流(抑制率为93%),脂氧素A4同时可抑制Thapsigargin激活钙池操纵的钙通道引起的钙内流(抑制率为75%).脂多糖诱导巨噬细胞产生大量活性氧(阳性细胞百分比为28.87%±4.5%),脂氧素A4抑制脂多糖诱导巨噬细胞产生活性氧(阳性细胞百分比11.16%±2.5%,P<0.05).结论 脂多糖通过促进内钙释放而开放钙池操纵的钙通道,大量细胞外钙内流引起钙超载,活性氧大量产生,组织细胞损伤.脂氧素A4可能通过抑制钙池操纵的钙通道,使外钙内流减少,保持细胞钙稳态,减少活性氧的生成而起到抗炎促炎症消退作用.     

脂氧素对机械通气所致肺损伤的实验研究

目的 研究脂氧素对机械通气致肺损伤的保护作用及相关保护机制.方法 36只健康雄性SD大鼠按随机数字表分组.采用大潮气量通气制作大鼠VILI模型.麻醉和气管切开及气管内插管后,对照组(Control组)保留自主呼吸;大潮气量组(HV组)采用大潮气量通气[潮气量(VT)30 mL/kg,呼吸频率(RR)40次/min];大潮气量组+脂氧素处理组(HV+LX组)于机械通气前5 min静脉注射脂氧素10 μg/kg,其余两组注射等量生理盐水.通气时间均为2 h.每组大鼠实验过程中监测血流动力学和动脉血气;通气2 h后处死大鼠取肺组织,测定肺湿/干质量(W/D)比值和髓过氧化物酶(MPO)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺泡灌洗液(BALF)中核转录因子(NF-κB)和白细胞介素-8(IL-8)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变并进行肺泡损伤评分(DAD损伤评分).结果 与Control组相比,HV组和HV+LX组的动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、平均动脉压(MAP)均呈下降趋势;动脉血pH值呈上升趋势.HV+LX组MAP显著高于HV组(P<0.05).与Control组相比,HV组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分、NF-κB、IL-8显著升高(P<0.05或P<0.01);与HV组相比,HV+LX组肺组织W/D比值、MPO活性、DAD评分及NF-κB和IL-8显著降低(P<0.05或P<0.01).结论 脂氧素在大鼠机械通气模型中可减少肺泡蛋白质的渗出,可抑制肺组织中NF-κB、IL-8的产生,减少中性粒细胞在肺泡内的浸润和黏附,从而减轻大容量机械通气造成的肺组织损伤.     

脂氧素A4对内毒素性肺损伤小鼠的保护作用

目的探讨脂氧素A4对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响。方法36只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、脂氧素A4组、ZnPP组、内毒素组、脂氧素A4治疗组(LXA4 LPS)和ZnPP 脂氧素A4治疗组(ZnPP LXA4 LPS),每组6只。雾化吸入脂多糖8h后,测定肺泡灌洗液白细胞计数、中性粒细胞计数和TNF-α含量。测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、HO-1的蛋白表达和活性。结果与LPS组比较,脂氧素A4治疗组肺组织中性粒细胞浸润减少,MPO活性、TNF-α浓度均降低(P<0·01),肺组织损伤减轻,而HO-1的蛋白表达和活性明显升高,HO-1抑制剂ZnPP减弱脂氧素A4的保护作用。结论脂氧素A4能减轻内毒素诱导的急性肺损伤。     

盐酸小檗碱和辛伐他汀对非酒精性脂肪肝大鼠血清脂联素和肝脏脂联素受体表达的影响

目的:研究盐酸小檗碱和辛伐他汀对非酒精性脂肪肝大鼠血清脂联紊和肝脏脂联素受体表达的影响.方法:32只大鼠随机分为对照组(8只,普通饲料喂养)和模型组(24只,高脂饲料喂养).高脂饲料喂养建立非酒精性脂肪肝大鼠模型,用盐酸小檗碱和辛伐他汀干预治疗,以辛伐他汀组作阳性对照组,8周后,分别检测大鼠血清肝肾功能、血脂、血清脂联素及大鼠肝脏HE染色和脂联素受体的表达.结果:(1)高脂组血清脂联素水平明显低于对照组(P<0.05);高脂组脂联素受体1(adipoR1)mRNA的表达与正常组比较无明显改变(P>0.05),而脂联素受体2(adipoR2)mRNA的表达与正常组比较显著降低(P<0.01).(2)盐酸小檗碱和辛伐他汀干预治疗8周后血清脂联素水平较高脂组明显升高(P<0.01),肝脏组织adipoR1-mRNA表达与高脂组相比差异无统计学意义(P>0.05),adipoR2-mRNA表达与高脂组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论:盐酸小檗碱和辛伐他汀都可升高血清脂联素和adipoR2-mRNA的表达,但不影响肝脏adipoR1-mRNA的表达.盐酸小檗碱能有效改善胰岛素抵抗,降低血脂,改善肝功.     

替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠心肌细胞脂联素受体的作用

目的观察替米沙坦对心肌细胞脂联素(APN)受体的影响,从而探讨胰岛素抵抗中心肌脂联素受体表达可能的调控机制。方法应用高果糖饮食造模成功的胰岛素抵抗(IR)大鼠,采用酶解法分离出心室肌细胞,进行原代细胞培养,将心室肌细胞分为两组:对照组予二甲基亚砜(DMSO)刺激24 h,替米沙坦组予DMSO+替米沙坦10μM/L刺激24 h。培养心肌细胞24 h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组心室肌细胞培养液中APN的生成。采用Western Blot法测定不同处理后心肌细胞脂联素受体1(AdipoR1)、受体2(AdipoR2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达。结果与对照组相比,替米沙坦组心室肌细胞培养液中脂联素的浓度增高(P<0.05)。与对照组相比,替米沙坦组心肌细胞AdipoR1蛋白的表达增高(P<0.05),而心肌细胞AdipoR2蛋白的表达无明显变化(P>0.05);心肌细胞PPARγ蛋白的表达增高(P<0.05),心肌细胞TNF-α蛋白的表达降低(P<0.05)。结论替米沙坦可以通过激活PPARγ提高胰岛素抵抗大鼠心肌细胞脂联素受体表达,减轻炎症,改善心肌代谢。脂联素及AdipoR1可能是其发挥作用的目标蛋白之一。     

脂氧素A4对内毒素诱导小鼠肺内炎症反应的影响

目的 探讨脂氧素A4对脂多糖诱导小鼠急性肺内炎症反应的影响。方法 36只雄性C57BL／6小鼠，随机分为对照组、脂氧素A4组、ZnPP组、内毒素组、脂氧素A4治疗组和ZnPP＋脂氧素A4治疗组，每组6只。雾化吸入脂多糖8h后，测定肺泡灌洗液总蛋白浓度和TNF—α含量，测定肺组织湿干质量比值、丙二醛（MDA）活性和一氧化氮（NO）浓度，免疫组化测定肺组织HO-1的蛋白表达。结果 与LPS组比较，脂氧素A4治疗组肺水肿减轻，肺泡灌洗液总蛋白浓度、TNF—α含量、肺组织MDA活性、NO含量均降低（P〈0.01），而HO-1的蛋白表达明显升高，肺组织损伤减轻。HO-1抑制剂ZnPP减弱脂氧素A4保护作用。结论 脂氧素A4能减轻内毒素诱导的肺部急性炎症反应，HO-1介导其保护作用。     

脂氧素A4调节Smad7／3表达对糖尿病肾脏保护机制实验研究

目的观察脂氧素A4对链脲佐菌素诱导的实验性糖尿病大鼠肾脏Smad7／Smad3表达调节,探讨其对糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制。方法选择年龄3月左右、体质量212～245g清洁级健康雄性sD大鼠,以60mg／kg体质量链脲左菌素诱导糖尿病大鼠模型,选择制模成功的糖尿病模型大鼠20只,分为脂氧素A4给药组（E组,n=10）、生理盐水对照组（c组,n=10）。E组以1ms／kg体质麓脂氧素A4,c组则以相应剂量生理盐水尾静脉注射,隔日1次,连续4周,取大鼠肾脏标本,采用免疫组织化学法观察肾脏Smad7、Smad3以及转换生长因子8l表达。结果E组与C组Smad7、Smad3以及转换生长因子B1阳性表达面积百分率对数（In）分别为（3．15±0．04）％与（2．96±0．03）％、（2．58％±0．05）％与（2．88±0．05）％和（2．98±0．05）％与（3．16±0．04）％,E组Smad7阳性表达面积百分率明显高于c组,而Smad3以及转换生长因子8l则明显低于c组,差异均有统计学意义（P〈0．01、0．01、0．05）。结论脂氧素A4能上调糖尿病大鼠肾脏Smad7、下调Smad3及转换生长因子Bl表达,对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。     

半永久双腔中心静脉导管维持性血液透析患者的微炎症状态

背景：半永久性双腔中心静脉导管作为自体动静脉内瘘的重要补充形式在维持性血液透析患者中应用日益广泛,但有研究发现,将半永久性双腔中心静脉导管作为血液透析血管通路患者的死亡率高于使用自体动静脉内瘘者,原因尚未完全明确。目前不同类型血管通路对微炎症状态的影响还鲜有报道。目的：比较半永久性双腔中心静脉导管与自体动静脉内瘘作为血管通路维持性血液透析患者体内炎性因子的差异,探讨不同类型的血管通路对维持性血液透析患者微炎症状态的影响。方法：选择维持性血液透析患者80例,根据血管通路不同分为自体动静脉内瘘组48例及颈静脉半永久双腔静脉导管组32例,以门诊健康体检者60例作为健康对照。检测2组维持性血液透析患者及健康对照者血清超敏C-反应蛋白、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平,并行对比分析。结果与结论：维持性血液透析患者血清超敏C-反应蛋白、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平明显高于健康对照组,差异有显著性意义（P〈0.01）;半永久插管组患者血清超敏C-反应蛋白、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平高于内瘘组,差异有显著性意义（P〈0.05）。结果提示维持性血液透析患者体内存在微炎症状态,使用半永久性双腔中心静脉导管作为血液透析血管通路较使用自体动-静脉内瘘可进一步加重微炎症状态。     

人工瓣膜置换体外循环过程中痰热清注射液的肺保护

背景：体外循环心内直视术不可避免会造成肺损伤,近年来临床上已有中医药应用于该领域减轻肺损伤的研究。目的：观察痰热清注射液对机械瓣置换患者体外循环肺损伤的保护效果。方法：心脏瓣膜置换患者40例随机分为2组,痰热清组患者于术前晚、体外循环前分别予以痰热清注射液20mL入250mL生理盐水静脉滴注,对照组予以生理盐水250mL静滴。于体外循环前、体外循环40min、体外循环停机、停机后2,6,24h共6个不同时间点抽取桡动脉血2mL,全血细胞分析仪测定中性粒细胞数量;双抗体夹心ELISA法测定可溶性细胞间黏附因子1、白细胞介素8血浆浓度。并于体外循环前、体外循环停机时取左右心房血测中性粒细胞并计算跨肺差值。于瓣膜置换切皮前、体外循环结束后10min、瓣膜置换结束时、瓣膜置换结束后4h4个时相计算两组患者的呼吸指数与肺动态顺应性。结果与结论：两组患者体外循环后各个时间点中性粒细胞值、可溶性细胞黏附因子1、白细胞介素8较体外循环前明显升高（P〈0.01）,痰热清组明显低于对照组（P〈0.01）。体外循环停机时中性粒细胞跨肺差值明显高于体外循环前（P〈0.01）,痰热清组明显低于对照组（P〈0.01）。两组呼吸指数较瓣膜置换切皮前明显升高（P〈0.01）,肺动态顺应性较体外循环前明显降低（P〈0.01）,瓣膜置换结束后4h恢复至切皮前水平（P〉0.05）,痰热清组呼吸指数较对照组降低（P〈0.05）,肺动态顺应性瓣膜置换结束时较对照组升高（P〈0.01）。提示痰热清注射液能减轻机械瓣置换后的肺损伤,有较好的肺保护效果。     

益赛普对脑外伤后核转录因子-κB、肿瘤坏死因子-α的表达及脑水肿的影响

目的 观察注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFB:Fc,益赛普)对创伤性脑损伤后脑组织核转录因子-κB(NF-KB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及对脑水肿的影响.方法 采用Feeney自由落体撞击法建立脑损伤模型,益赛普组大鼠于脑损伤模型建立后30 min腹腔注射益赛普3.0 mg/kg,对照组及创伤组大鼠注射生理盐水.采用放射免疫法检测大鼠脑组织匀浆TNF-α的蛋白表达,免疫组织化学法检测脑组织NF-κB的阳性细胞表达,用干湿重法测定大鼠脑组织含水量;并应用电镜技术进行脑组织病理形态学观察.结果 与对照组比较,大鼠脑损伤后脑组织NF-κB和TNF-α的表达及脑组织含水量均明显升高(P<0.05或P<0.01);与创伤组比较,益赛普治疗组大鼠NF-κB、TNF-α表达及脑组织含水量均显著降低(P<0.05,P<0.01).在电镜下观察,益赛普组大鼠脑组织损伤明显较创伤组大鼠轻.结论 大鼠急性脑损伤后脑组织NF-κB及TNF-α表达增加,并与脑水肿程度相平行;急性脑损伤后应用益赛普治疗可以抑制脑组织NF-κB和TNF-α的表达,减轻脑水肿.