三苯氧胺诱导血小板凋亡的研究

目的 探讨三苯氧胺(TAM)诱导血小板凋亡作用及其分子机制.方法 取健康志愿者静脉血,分离得到富含血小板血浆(PRP)和洗涤血小板,血小板与不同浓度TAM孵育后,流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸(PS)暴露、线粒体跨膜电位(ΔΨm)去极化、胞质Ca2+浓度;Western blot检测活化的caspase-3和gelsoli...     

三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡与Caspase3及Bcl-2蛋白家族的关系

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法：以Namalwa,SGC7901和Bcap37细胞为体外模型，通过流式细胞仪检测亚G1期（sub－G1）细胞含量和细胞膜磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine,PS)外翻量鉴定细胞凋亡；流式细胞仪检测Bcl-2和Bax蛋白表达及细胞线粒体跨膜电位（△φm）；比色法8测定半胱氨酸酶3（Caspase3）活性。结果：As2O3诱导肿瘤细胞凋亡与Bax和Bcl-2蛋白表达及Caspase3活性有密切关系。结论：As2O3可能通过调节Bax和Bcl－2蛋白的表达引起△φm下降从而激活Caspase3最终导致肿瘤细胞凋亡。     

The Effect of Sarsasapogenin in vitro on the Apoptosis of Human Colon Cell LoVo

目的 探讨菝葜皂苷元对人结肠癌细胞LoVo凋亡的影响.方法 采用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测LoVo细胞的凋亡率;采用流式细胞仪检测细胞周期进程;采用流式细胞仪JC-1染色法检测线粒体膜电位(△ψm)水平.结果 菝葜皂苷元作用细胞48 h后可以诱导细胞凋亡,菝葜皂苷元可阻滞细胞于G2/M期,菝葜皂苷元诱导细胞凋亡时伴随着线粒体膜电位的降低.结论 菝葜皂苷元能诱导细胞凋亡,其诱导凋亡的途径可能与线粒体通路有关.     

刺参酸性黏多糖对人肝癌HepG2细胞线粒体膜电位及钙离子浓度的影响

目的观察刺参酸性黏多糖(SJAMP)体外诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的情况,探讨SJAMP对HepG2细胞线粒体凋亡途径相关膜电位作用机制。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,用不同浓度的SJAMP(0.25、1.00、4.00mg/L)对其进行干预,应用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位改变,Fura-2荧光显微镜检测细胞钙离子浓度改变。在相同条件下干预人正常肝细胞(张氏细胞)以观察其对正常细胞的影响。结果随着SJAMP剂量的增加,HepG2细胞内钙离子浓度及线粒体膜电位均降低,各干预组与空白对照组比较、各干预组间比较差异均有显著性(F=183.36、264.24,q=3.26～35.67,P<0.05);而张氏细胞各干预组钙离子浓度及线粒体膜电位(除0.25mg/L SJAMP作用组线粒体膜电位高于其他组外)差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SJAMP可能通过降低细胞内钙离子浓度和细胞线粒体膜电位,诱导线粒体通透性的改变,启动细胞凋亡途径。     

过氧化氢诱导人唾液腺导管细胞凋亡的体外研究

目的 探讨氧化剂对SV-40转染的人类唾液腺导管细胞(NS-SV-DC) 的诱导凋亡作用及其可能机制.方法 应用流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸的外露,蛋白印迹检测半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的表达及细胞色素C从线粒体内的释放.结果 NS-SV-DC经0.4 mmol/L 过氧化氢(H 2O2)孵育后, 磷脂酰丝氨酸由细胞膜内释放到膜外,细胞色素C在细胞浆中显著增加;caspase-3和PARP被剪切.结论 H2O2可在0.2 ～ 0.8 mmol/L浓度范围内诱导唾液腺导管细胞的凋亡,其凋亡的发生机制与线粒体介导的信号转导路径相关.     

柚皮苷体外抗肿瘤活性及其机制研究

目的 研究柚皮苷的体外抗肿瘤活性.方法 采用MTT法测定柚皮苷对5种不同肿瘤细胞的增殖抑制作用.采用流式细胞术检测柚皮苷对细胞凋亡、细胞活性氧水平及细胞线粒体膜电位水平的变化.采用单细胞凝胶电泳(SCGE)实验检测柚皮苷对细胞DNA的损伤.结果 MTT实验得出柚皮苷对不同的肿瘤细胞产生不同的增殖抑制现象,并且对肿瘤细胞的抑制作用呈浓度依赖性.其对PC-12细胞作用24 h后,流式细胞术检测得到柚皮苷能有效诱导PC-12细胞的凋亡,并且细胞内活性氧水平升高,线粒体膜电位下降.SCGE实验发现柚皮苷使细胞DNA断裂,形成拖尾.结论 柚皮苷通过活性氧调控的线粒体途径诱导肿瘤细胞PC-12的凋亡.     

羟基喜树碱通过线粒体途径诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的观察

目的:研究羟基喜树碱是否可通过线粒体途径诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡. 方法: 将不同浓度的羟基喜树碱作用于肝癌细胞SMMC-7721,用MTT法检测细胞增殖,光镜观察细胞形态;用荧光染料MitocaptureTM检测线粒体跨膜电位、用Western blot法检测细胞色素C从线粒体的释放;用Annexin Ⅴ-FITC,hoechst法及电镜检测细胞的凋亡状况. 结果:羟基喜树碱对肝癌细胞SMMC-7721的增殖有明显的抑制作用,IC50约是80 mg/L. 当用80 mg/L羟基喜树碱作用不同时间后:线粒体膜跨电位下降并伴随有细胞色素C从线粒体至细胞质的释放;细胞膜的磷脂酰丝氨酸外翻;细胞核染色质固缩,呈致密浓染的凋亡状态. 结论:羟基喜树碱通过线粒体途径引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一.     

过氧化氢诱导人唾液腺导管细胞凋亡的体外研究

目的探讨氧化剂对SV-40转染的人类唾液腺导管细胞(NS-SV-DC)的诱导凋亡作用及其可能机制。方法应用流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸的外露,蛋白印迹检测半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的表达及细胞色素C从线粒体内的释放。结果NS-SV-DC经0.4 mmol/L过氧化氢(H2O2)孵育后,磷脂酰丝氨酸由细胞膜内释放到膜外,细胞色素C在细胞浆中显著增加;caspase-3和PARP被剪切。结论H2O2可在0.20~.8 mmol/L浓度范围内诱导唾液腺导管细胞的凋亡,其凋亡的发生机制与线粒体介导的信号转导路径相关。     

鸡血藤黄酮类有效部位对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡与线粒体膜电位的影响

目的探讨鸡血藤黄酮类有效部位(spatholobus suberectus column extract,SSCE)对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡及线粒体膜电位的影响。方法采用细胞增生试剂盒cell counting kit-8,观察SSCE对A549细胞增生的影响;通过Annexin V-PI双染法结合Hoechst33324染色检测SSCE对A549细胞凋亡的影响;应用Mitotracker Red及JC-1染色,检测SSCE对细胞线粒体及线粒体膜电位的影响。结果浓度高于40 mg/L的SSCE对A549细胞生长有抑制作用,且具有浓度时间依赖性。SSCE作用24 h后,A549细胞呈现典型的凋亡现象:膜磷脂酰丝氨酸外翻;细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光;线粒体由棒状变成颗粒状,并向细胞核聚集;线粒体膜电位下降。结论 SSCE可以诱导人非小细胞肺癌A549细胞发生凋亡,改变线粒体形态且降低其线粒体膜电位。     

低氧培养对RL95-2细胞线粒体损伤及凋亡的影响

目的 探讨低氧培养对于人子宫内膜上皮腺癌细胞株（RL95-2）线粒体损伤及细胞凋亡的影响.方法 用含有不同浓度（0、10、30、62.5、125 μmol/L）氯化钴的培养液培养RL95-2细胞株.采用CCK-8法测定细胞增殖活性;JC-1荧光染色,流式细胞仪分析细胞线粒体膜电位变化;Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 随着氯化钴浓度升高或作用时间延长（62.5 μmol/L作用下）, RL95-2细胞增殖活性逐渐下降,线粒体膜电位去极化增加,细胞凋亡率升高.结论 缺氧造成子宫内膜上皮细胞增殖活性下降,线粒体损伤,凋亡率升高.