脐血造血干祖细胞体外扩增的研究进展

脐带血富含造血干细胞，并具有免疫原性低，无肿瘤细胞污染，来源广泛，获取容易等优点，使得脐血成为骨髓及外周血造血干细胞的极佳替代来源。但是单份脐带血所含有的造血干粗细胞（HSPC）数不足以满足成人移植的需要，在体外对脐血造血干祖细胞进行体外扩增有望解决这一难题，并成为近年来研究的热点。本文就脐血造血干祖细胞的生物学特点及扩增研究的进展进行综述。     

体外扩增脐带血造血干/祖细胞和诱导生成红细胞的研究进展

近年来,造血干细胞的体外扩增和诱导向特定细胞系分化已成为研究热点,本文对脐带血造血干/祖细胞的体外扩增和诱导造血干细胞向红细胞分化的研究进展及存在问题进行概述。     

体外扩增人脐带血造血细胞的研究现状

人脐带血中含有的造血干/祖细胞数量等于甚至超过成人骨髓,且含有更原始的造血干/祖细胞。应用各种体外培养方法进行扩增的脐血中,造血干/祖细胞明显增多,其中以低氧培养扩增效果较佳,有望解决成人脐血移植中存在的造血干/祖细胞数量不足的问题。     

体外扩增人脐带血造血细胞的研究现状

人脐带血中含有的造血干／祖细胞数量等于甚至超过成人骨髓，且含有更原始的造血干／祖细胞。应用各种体外培养方法进行扩增的脐血中，造血干／祖细胞明显增多，其中以低氧培养扩增效果较佳，有望解决人脐血移植中存在的造血干／祖细胞数量不足的问题。     

人脐血干、祖细胞研究现状及其应用前景

人脐带血是造血干/祖细胞的丰富来源,脐血移植具有早期祖细胞含量高、干/祖细胞体外增殖能力强和GVHD发生率低等优点。本文就脐血干/祖细胞的含量、免疫学特点、分离浓集方法、体外扩增潜力、再植能力及其在脐血移植和基因治疗中的临床应用等 方面的最新进展做一综述。     

FL与SCF、IL-3、GM-CSF及EPO协同调控脐血造血干/祖细胞的体外扩增

目的　探讨造血细胞因子的不同组合对脐血造血干 /祖细胞的扩增作用。方法　应用免疫磁珠法分离纯化脐血CD3 4+ 造血干 /祖细胞 ,在体外液体培养体系中经各种不同细胞因子组合扩增 1周 ,用流式细胞仪检测CD3 4+ 造血干 /祖细胞并进行甲基纤维素法半固体培养 2周 ,在倒置显微镜下计数集落产率。结果　在FL、SCF、IL 3、GM CSF、EPO造血细胞因子的不同组合下脐血造血干 /祖细胞得以扩增 ,以IL 3+SCF +FL +EPO组的扩增效率最高 ,其有核细胞数、CD3 4+ 细胞及CFU GM、BFU E集落分别扩增 46 2± 175、3.47± 1.6 4、2 6 4± 10 5和 12 8± 6 7倍。结论　FL对扩增CD+ 3 4细胞具有较强的协同作用 ,合理的细胞因子组合扩增的脐血造血干 /祖细胞可成为异基因造血干细胞移植的主要来源。     

人脐血干,祖细胞研究现状及其应用前景

人脐带血是造血干／祖细胞的丰富来源，脐血移植具有早期祖细胞含量高，干／祖细胞体外增殖能力强和ＧＶＨＤ发生率低等优点。本文就脐血干／祖细胞的含量，免疫学特点，分离浓集方法，体外扩增潜力，再植能力及其在脐血移植和基因治疗中的临床应用等方面的最新进展做一综述。     

脐血干细胞的实验与临床应用

大量实验已证实脐带血造血干细胞比骨髓和动员的外周血来源的造血干细胞更原始、更具有自我更新、增殖分化和体外扩增潜能.脐带血干细胞的保存及脐带血移植等临床应用均取得了显著的进展,但也面临许多问题.文章对脐带血中存在的多种干,祖细胞的生物学特性、干细胞的增殖、分化,脐带血库建设及在神经科的临床应用进行探讨,从而寻找解决造血重建迟缓和排斥率高等问题的有效途径.     

体外长期培养对脐血造血干/祖细胞细胞周期及凋亡的影响

目前造血干细胞移植 (ＨＳＣＴ)已成为难治性血液病、免疫缺陷病及恶性肿瘤等的主要治疗手段。脐血是造血干 /祖细胞 (ＨＳＰＣ)的一种重要来源 ,由于单份脐血中细胞数量有限而限制了其临床应用 ,故脐血造血干 /祖细胞的体外扩增越来越引起人们的关注。我们观察了体外长期培养对脐血ＨＳＰＣ细胞周期及凋亡的影响 ,以了解脐血ＨＳＰＣ在体外扩增过程中某些生物学特性的变化。材料和方法1　脐血来源　 6份肝素抗凝脐血均来自我院妇产科健康产妇 ,采集量为 5 0～ 10 0ｍｌ,于采集后 4ｈ内分离单个核细胞(ＭＮＣ) ,洗涤 ,备用。2　ＣＤ3 4+细胞…     

siRNA干扰p27基因表达对脐血CD34+细胞体外扩增影响的初步研究

造血干/祖细胞是一类被定义为具有自我更新和潜在重建造血能力的细胞.脐血是造血干/祖细胞的重要来源.通常人们应用高浓度的细胞因子刺激扩增脐血造血干/祖细胞,但导致其多向分化潜能及移植后造血重建能力下降.近来,Cheng等研究造血干/祖细胞的增殖周期特性发现,两种不同的Cip/Kip家族成员p21和p27可分别特异性地负向调控造血干/祖细胞增殖池的大小,p21可阻滞干细胞进入增殖周期,而p27可限制祖细胞的增殖周期.这为体外操纵造血干/祖细胞的增殖提供了良好途径.我们以pSilencer1.0-U6构建p27 siRNA表达载体转染脐血CD34＋细胞,以去除p27对造血祖细胞的增殖抑制作用,以一种不同于既往细胞因子刺激的方式,试图为体外扩增脐血CD34^＋细胞提供一种新的策略.     

脐带血中造血干/祖细胞的体外扩增研究与临床应用进展

脐带血因具有来源广泛、采集方便、免疫配型要求低、移植后移植物抗宿主病(GVHD)发生率低等优点,为造血干细胞(HSC)的重要来源之一,为需要接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的患者提供1种可靠的HSC来源.然而,脐带血干细胞移植(UCBT)亦存在一定的缺陷,由于脐带血的体积小、细胞数量极有限,其所含的造血干/祖细胞(HS/PC)数量有限,往往不能满足高体重儿童及成年患者allo-HSCT的需要,从而限制了UCBT在临床上的广泛应用.HS/PC体外扩增方法为解决上述难题的关键,笔者拟就HS/PC体外扩增方法的相关研究与临床应用进展进行综述.     

脐带间充质干细胞对脐血CD34＋细胞体外扩增的影响

背景:体外扩增是目前解决脐带血干细胞移植所面临的单份脐血造血干祖细胞数不足问题的丰要手段.已有许多关于不同来源的间充质干细胞联合不同细胞因子支持脐血造血干祖细胞体外扩增的报道,而单独应用间充质干细胞对人脐血CD34+细胞体外扩增的报道仍很少.目的:观察应用脐带源间充质干细胞作基质层的体外培养体系对脐血CD34+细胞体外扩增的支持作用.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-03/2007-05在中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所、实验血液学国家重点实验室完成.材料:经产妇知情同意,采集健康足月分娩胎儿脐带9份.方法:应用贴壁培养的方法从正常足月出生儿脐带中分离培养间充质干细胞,通过细胞形态学、免疫表型、分化实验进行鉴定.利用免疫磁珠分离法从正常足月出生儿脐带血中分离CD34+细胞.应用3种不同培养体系进行脐血CD34+细胞的体外扩增:单独应用脐带源间充质干细胞作基质层、细胞因子培养体系和间充质干细胞联合细胞因子培养体系.主要观察指标:应用细胞计数法、集落培养计数法和流式细胞学检测法对扩增后细胞数量、集落形成能力和免疫表型进行分析比较.RT-PCR检测间充质干细胞中细胞因子的表达情况.结果:培养第14天后,间充质干细胞组的CD34+细胞比例明显高于细胞因子联合间充质干细胞组;CD34+细胞总数为培养前的(4.19±1.37)倍,明显高于细胞因子组.培养第7天和第14天,间充质干细胞组的CD34+CD38-细胞亚群比例均高于另两组.RT-PCR结果显示,脐带源间充质干细胞体外可表达干细胞因子和血小板生成素早期干细胞效应因子.结论:单独应用脐带源间危质干细胞可有效地对脐血CD34+细胞进行体外扩增,更有利于保持较早期干、祖细胞的扩增.     

干扰素-γ对脐血造血干/祖细胞细胞周期蛋白D各亚型表达的影响

体外观察干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)对脐血造血干／祖细胞细胞周期蛋白D(cyclinD)不同亚型表达的影响，以探讨IFN-γ造血抑制的机制。用免疫磁珠阳性分选的方法分离脐带血CD34^ 细胞，并进行体外扩增；用甲基纤维素半固体培养方法，观察IFN-γ对脐血造血干／祖细胞CFU-GM形成的影响；用半定量RT-PCR检测IFN-γ对脐血造血干／祖细胞cyclinD不同亚型表达的影响。结果显示IFN-γ可以显著抑制脐血CFU-GM的形成，并可以从mRNA水平抑制cyclinD2和CyclinD3亚型的表达。由此得出结论，IFN-γ可以显著抑制cyclinD的表达，这可能是IFN-γ介导造血抑制的一种机制。     

脐血中造血刺激因子的研究进展

人脐带血是造血干/祖细胞的丰富来源,脐血移植在治疗许多血液系统疾病方面已经展现出良好的应用前景。然而脐血移植中仍存在单份脐血中造血干/祖细胞的绝对量少和脐血干/祖细胞再植率低等问题,了解脐血细胞在体内所处的微环境将会对这些问题的解决有所帮助。本文就脐血中造血刺激因子的分布及其来源做一综述。     

促进脐血造血干细胞应用于成人移植的研究进展

脐血造血干细胞移植(UCBT)因来源丰富、HLA相合程度要求低、移植物抗宿主病(GVHD)发生率及严重程度低等优点,已成为重要的造血干细胞来源,但由于单份脐带血(UCB)细胞有限,应用于成人移植还有一定的局限性.为促进脐血造血干细胞应用于成人移植需从通过改良收集和冷冻复苏、体外扩增、双份UCB移植的方法,从而增加UCB造血干细胞数,弥补干细胞自身缺陷,添加辅助细胞提高干细胞植入效率.     

脐带血造血干细胞研究与应用展望

自 1 98 8年Gluckman报道用人白细胞抗原 (HLA)匹配同胞脐带血移植治疗范可尼 (Fanconi)贫血获得成功以来 ,脐带血作为一种重要的造血干细胞来源日益受到重视 ,并在脐带血干细胞生物学、脐带血干细胞库和脐带血干细胞移植临床应用方面取得了长足的进展。一、脐带血干细胞生物学研究实验研究和临床移植已证实 ,脐带血造血干细胞比骨髓和动员的外周血来源的造血干细胞更原始、更具有自我更新、增殖分化和体外扩增潜能 ;脐带血中的淋巴细胞未接受外界抗原刺激 ,其免疫原性较弱。脐带血干细胞的高增殖和体外扩增潜能 ,为通过体外扩增来解决单…     

脐带血来源的间充质干细胞对CD34~+细胞增殖的支持作用及其机制（英文）

目的:探讨脐带血来源的间充质干细胞体外支持造血干细胞扩增的能力及所涉及的可能机制。方法:将来源于脐血的造血干细胞与间充质干细胞共培养14 d,然后计数造血干细胞数与集落形成单位。ELISA方法检测间充质干细胞培养上清中含有的细胞因子。结果:与间充质干细胞共培养的造血干细胞增殖率明显高于单独培养的造血干细胞(P0.05)。此外,在培养体系中添加外源性细胞因子可明显提高造血干细胞增殖率(P0.05)。间充质干细胞能分泌多种细胞因子,包括GM-CSF、IL-7、IL-8、IL-11、SCF和SDF-1α。结论:脐带血间充质干细胞作为细胞滋养层可用于体外扩增造血干细胞,间充质干细胞分泌的细胞因子可能介导MSC对HSC增殖的支持作用。     

脐带血来源的间充质干细胞对CD34+细胞增殖的支持作用及其机制

目的:探讨脐带血来源的间充质干细胞体外支持造血干细胞扩增的能力及所涉及的可能机制.方法:将来源于脐血的造血干细胞与间充质干细胞共培养14 d,然后计数造血干细胞数与集落形成单位.ELISA方法检测间充质干细胞培养上清中含有的细胞因子.结果:与间充质干细胞共培养的造血干细胞增殖率明显高于单独培养的造血干细胞(P＜0.05).此外,在培养体系中添加外源性细胞因子可明显提高造血干细胞增殖率(P＜0.05).间充质干细胞能分泌多种细胞因子,包括GM-CSF、IL-7、IL-8、IL-11、SCF和SDF-lα.结论:脐带血间充质干细胞作为细胞滋养层可用于体外扩增造血干细胞,间充质干细胞分泌的细胞因子可能介导MSC对HSC增殖的支持作用.     

骨髓间充质干细胞分化的成骨细胞支持脐血造血干祖细胞的研究

本研究利用骨髓间充质干细胞诱导分化的成骨细胞构建二维培养体系,探讨其体外支持脐血干/祖细胞生存的作用.体外进行人骨髓间充质干细胞（MSC）原代培养后诱导为成骨细胞,构建二维培养体系.将免疫磁珠分选的CD34^＋脐血干/祖细胞接种于其中,在无外源性细胞因子情况下进行体外培养,进行CFU,HPP-CFU和LTC-IC测定并将其分别与MSC、成骨细胞,MSC/成骨细胞（1：2）作为饲养细胞的二维培养体系实验结果相比较.结果发现：在所构建的造血干/祖细胞（HSPC）二维培养体系中,骨髓MSC诱导成骨细胞对于脐血造血干/祖细胞培养的支持作用显著优于其他各组培养体系,尤其对长期造血干细胞（long term-HSC）体外生存有更为明显地支持作用.结论：骨髓间充质干细胞诱导成骨细胞构建的二维体系对于脐血干/祖细胞体外培养具有支持作用,进一步证实成骨细胞对造血干细胞生存与增殖具有重要调控作用.     

脐血造血干／祖细胞研究进展

脐血和骨髓均富含造血干／祖细胞，但二者在造血干／祖细胞的含量上存在差别。脐血中各CD34^ 细胞亚群有着独特的免疫表型。脐血造血干／祖细胞能在体外扩增，扩增后的CD34^ 细胞能在SCID小鼠体内造血，由脐血CD34^ 细胞可以生成淋巴细胞和内皮细胞。脐血造血干／祖细胞移植与骨髓造血干／祖细胞移植在患者的生存率、复发率及移植免疫排斥等方面均具有可比性，有着极大的潜在价值。