人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤模型的建立及耐药性检测

目的建立人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤模型,并检测其多药耐药性,为进行肿瘤多药耐药逆转剂的筛选和体内实验研究奠定基础。方法采用皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型;观察裸鼠生长状况;移植瘤生长情况;进行瘤重及瘤体积比较;移植瘤P-gp耐药蛋白表达;原代培养细胞,检测移植瘤模型多药耐药性。结果人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤组织病理学检查为低分化腺癌,移植瘤组织原代细胞培养后,P-gp表达强阳性+++,具有多药耐药性,模型建立成功。结论成功建立了人胃癌SGC7901/VCR裸鼠多药耐药移植瘤模型,为胃癌耐药研究提供了较理想的动物模型。     

HepG2/Adm裸鼠移植瘤的建立及多药耐药特性评价

目的:建立一种人肿瘤多药耐药(MDR)细胞株裸鼠移植瘤模型并探讨其多药耐药机制,为体内研究逆转肿瘤多药耐药提供模型.方法:SPF级动物常规饲养,裸鼠腋窝皮下接种1×109个细胞,观察其成瘤率及生长特性;MTT法检测药物敏感性;流式细胞术、PR-PCR法检测裸鼠移植瘤细胞与原代细胞的耐药特征.结果:HepG2/Adm裸鼠移植瘤的成瘤率100%;HepG2/Adm细胞及HepG2/Adm裸鼠移植瘤对阿霉素(ADM)的IC50分别为4.21μg/ml和4.10μg/ml,两者比较未见显著性差异(P>0.05).原代及裸鼠体内HepG2/Adm的p-gp、MRP及LRP的表达率分别为92%和91.8%,88.7%和88.1%、81.1%和80.7%,差异无显著意义;二者MDR相关基因mRNA表达量无差异(P>0.01).结论:以细胞建立的裸鼠移植瘤模型具有多药耐药特性,为研究人肿瘤MDR提供了理想的动物模型.     

SGC-7901/HCPT裸鼠皮下移植瘤的建立和鉴定

目的:建立多药耐药人胃癌细胞裸鼠移植瘤模型并探讨移植瘤的耐药特性。方法:将人胃癌细胞株SGC-7901和耐药细胞株SGC-7901/HCPT分别接种于裸小鼠左侧背部皮下和右侧背部皮下,在SPF级动物合格环境下饲养,观察肿瘤细胞成瘤情况,用MTT法比较移植瘤细胞对羟基喜树碱的敏感性及免疫组化测定其耐药基因TOPO-Ⅰ表达的变化。结果:SGC-7901和SGC-7901/HCPT裸小鼠移植成瘤率为100%,无自行消退现象。MTT法测定SGC-7901/HCPT和SGC-7901/HCPT/nude的IC50分别为4.686μg/mL和4.381μg/mL,与移植前细胞比较,差异无统计学意义。耐药基因TOPO-Ⅰ表达分别为2.964±0.162和2.953±0.172,差异无著性意义。结论:以SGC-7901/HCPT细胞建立的裸鼠皮下耐药移植瘤模型,仍保持体外的耐药活性和基因表型,为耐药机制和逆转的研究提供了良好的动物模型。     

A549肺腺癌细胞株BALB/C-nu/nu裸鼠骨转移模型的建立

目的 探讨A549肺腺癌细胞株裸鼠骨转移模型建立的可行性.方法 选择健康6～8周龄Balb/c-nu/nu裸鼠20只,将20只Balb/c-nu/nu裸鼠采用经皮左心室内注射法,将A549肺腺癌细胞株接种于裸鼠体内,接种后饲养观察Balb/c-nu/nu裸鼠的成瘤情况.结果 全部裸鼠均完成经皮心脏肺腺癌细胞的种植,共造模成功12只,占到全部裸鼠的60％.造模成功的裸鼠成瘤天数经SPSS分析,结果符合正态分布,得出裸鼠成瘤天数的均值、标准差、及可信区间.结论 通过经皮左心室内注射A549肺腺癌细胞株,建立Balb/c-nu/nu裸鼠肺腺癌骨转移模型,方法可行性强,科学可靠,成膜率高,可用于肺腺癌骨转移发病机制的研究.     

A549肺腺癌细胞株BALB/C- nu/nu裸鼠骨转移模型的建立

［摘要］ 目的　探讨A549肺腺癌细胞株裸鼠骨转移模型建立的可行性．方法　选择健康6～8周龄Balb/c-nu/nu 裸鼠20只,将20只Balb/c-nu/nu 裸鼠采用经皮左心室内注射法,将A549肺腺癌细胞株接种于裸鼠体内,接种后饲养观察Balb/c-nu/nu 裸鼠的成瘤情况．结果　全部裸鼠均完成经皮心脏肺腺癌细胞的种植,共造模成功12只,占到全部裸鼠的60%．造模成功的裸鼠成瘤天数经SPSS分析,结果符合正态分布,得出裸鼠成瘤天数的均值、标准差、及可信区间．结论　通过经皮左心室内注射A549肺腺癌细胞株,建立Balb/c-nu/nu裸鼠肺腺癌骨转移模型,方法可行性强,科学可靠,成膜率高,可用于肺腺癌骨转移发病机制的研究．     

分泌乙型肝炎病毒标志物的裸鼠人肝癌移植瘤模型的建立

【目的】建立具有分泌乙型肝炎病毒(HBV)标志物的人肝癌裸鼠移植瘤模型。【方法】采用HBV基因转染的HePG2细胞株(2.2.15细胞)接种于4~6周龄BALB/c-nu裸小鼠项肩部皮下,观察移植瘤出现时间及测量其大小;36 d后处死裸鼠,取血检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)和HBV-DNA等HBV标志物及肝癌相关蛋白甲胎球蛋白(AFP),并取瘤组织作病理检查。【结果】出瘤率及肿瘤出现时间与细胞接种量有关;荷瘤鼠血清HBsAg、HBeAg和HBV-DNA检测均为阳性,AFP分泌量达(350±11.5)μg/L;光镜下可见与人肝癌相似的病理改变。该模型一定程度具有类似人HBV复制的原发性肝癌形态学特征。【结论】成功建立了分泌HBV标志物的裸鼠人肝癌移植瘤模型。     

复方浙贝颗粒联合阿霉素对K562/A02移植瘤抑瘤率影响研究

目的观察复方浙贝颗粒联合阿霉素对多药耐药细胞K562/A02裸鼠移植瘤抑制率的影响。方法将多药耐药K562/A02细胞接种于BALB/c-nu裸鼠腋前皮下构建移植瘤模型,分别测实验各组肿瘤体积,实验结束后处死小鼠,剥离肿瘤称重,并依据公式计算抑瘤率。结果复方浙贝颗粒各剂量组的肿瘤、瘤重与空白对照组比较,有统计学意义（P＆lt;0.05）;复方浙贝颗粒高、中剂量组肿瘤体积、瘤重与阿霉素对照组比较,有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论复方浙贝颗粒（高、中剂量）伍用阿霉素能够明显增加阿霉素对多药耐药细胞（K562/A02）移植瘤杀伤的敏感性。     

裸基因对小鼠胸腺发育的影响

分别对7、14、21、28、35、60、90日龄的BALB/c-nu/nu、BALB/c-nu/+和BALB/c-+/+三种基因型小鼠的胸腺进行检查。结果发现BALB/c裸小鼠(nu/nu)缺乏胸腺,杂合子小鼠(nu/+)的胸腺重量和胸腺皮质厚度均明显低于纯合子正常小鼠(+/+)。提示突变小鼠胸腺的表现型受裸基因及基因型的控制。     

裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系的建立及其生物学特性研究

目的:建立裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系并研究其生物学特性.方法:采用逐步递增长春新碱(VCR)剂量的方法培养高成瘤性人白血病细胞系K562-n,采用细胞培养技术、透射电镜观察、流式细胞术、RT-PCR、免疫组化、染色体核型分析及体内接种等方法研究其生物学特性.结果:建立1株裸鼠高成瘤性人白血病多药耐药细胞系K562-n/VCR.与K562-n细胞比较,K562-n/VCR细胞对VCR耐药为其297.38倍,对蒽环类、鬼臼类等多种化疗药物具有交叉耐药性,bcr-abl融合基因仍为阳性,裸鼠体内成瘤性不变,但成瘤潜伏期缩短,成瘤体积明显增大.结论:裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系K562-n/VCR具有其独特的生物学特性.     

载紫杉醇PLGA微球在Skov3卵巢癌荷瘤小鼠体内的治疗效果

目的   应用乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载紫杉醇(PTX)PLGA微球,评价PTX-PLGA微球对荷瘤小鼠治疗效果。方法   采用4周龄雌性BALB/c-nu裸小鼠建模,将卵巢癌Skov3细胞株注射于裸鼠背部一侧,制备裸小鼠皮下移植瘤。设空白对照组、生理盐水组、PLGA微球悬液组、PTX注射液组和PTX-PLGA微球悬液组。分别对成瘤后荷瘤鼠进行治疗、观察记录、绘制肿瘤生长曲线。对Skov3移植瘤裸小鼠瘤内直接注射药物并应用免疫组化法检测移植瘤微血管密度(MVD)、相关死亡促进因子(Bad)。结果   给药6周后,PTX-PLGA微球组瘤内注射抑瘤效果明显大于其他各组(P＜0.05),肿瘤体积明显减小,癌细胞增殖受到抑制。结论   PTX-PLGA微球瘤内直接注射对卵巢癌的治疗有明显体内抑瘤效果。     

A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒感染力比较

目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒序列比较同源性在99%以上,本实验旨在比较两株病毒感染BALB/c小鼠研究感染力强弱。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/California/4/2009(CA4)两株病毒分别连续10倍稀释后,对4~6周龄雌性BALB/c小鼠经乙醚麻醉后进行滴鼻攻毒,每个稀释度接种10只实验小鼠,测定CA7 MLD50为101.24/0.05 mL,检测小鼠感染、致病的多项指标,观察期为14 d。结果相同TCID50的CA7和CA4病毒感染小鼠,CA4感染小鼠后14 d内死亡率为20%,而CA7感染小鼠后8 d内死亡率为100%。CA7 106TCID50感染的小鼠病理表现为重度弥漫性间质性肺炎,CA4 106TCID50感染的小鼠病理表现为中度-重度间质性肺炎。结论在相同条件下,CA7感染力明显强于CA4。     

LC/MS/MS法测定兔血浆中的盐酸伪麻黄碱及美敏伪麻溶液的药动学研究

目的建立兔灌胃美敏伪麻溶液后血浆中的盐酸伪麻黄碱的LC/MS/MS测定方法,并研究该制剂的药动学。方法兔灌胃给药后采集各时点血样,经甲醇沉淀蛋白法处理,应用HPLC-ESI-三级四极杆串联质谱测定盐酸伪麻黄碱的浓度,采用统计矩分析方法计算药动学参数。结果盐酸伪麻黄碱的线性范围为1～300 ng.mL-1（r=0.995 5）,回收率为97.5%～108.5%,RSD均小于10%;药动学参数：t1/2为（1.8±0.4）h,Cm ax为（26.6±9.6）μg.L-1,Tm ax为（0.6±0.3）h,AUC0-t为（82.8±24.6）μg.h.L-1。结论建立的方法灵敏、准确、快速、特异性强,适用于盐酸伪麻黄碱的血药浓度测定和药动学研究。     

重庆地区C/adrq+亚型 HBV流行株PreS/S、EnhII/CP/PreC标准参照序列的初步建立

目的：建立重庆地区基因型C／血清型adrq HBV流行株PreS/S、EnhII/CP/PreC基因标准参照序列，为HBV变异的研究奠定基础。方法：测定18例无症状携带者HBV的PreS/S、EnhII/CP/PreC序列，应用同源性分析和对齐比较等方法确定HBV亚型，并拟定基因型C／血清型adrq HBV的PreS/S、EnhII/CP/PreCC标准参照序列。结果：9株基因型B／血清型adw2、6株基因型C／血清型adrq ，3株基因型B／血清型aywl；建立的重庆地区HBV基因型C／血清型adrq HBV流行株PreS/S、EnhII/CP/PreC标准参照序列与东北华南地区同亚型的标准序列比较分别用13个、2个核苷酸差异，可引起4个、1个氨基酸差异。结论：初步建立了重庆地区基因型C／血清型adrq HBV流行株PreS/S、EnhII/CP/PreC基因标准照参照序列。     

PET/CT和微PET/CT的应用

PET/CT一出现就成为最先进的医学影像设备。它是PET和CT的完美的结合,PET/CT的核心是可以进行图像融合,提供了来自两台扫描仪的信息。PET/CT的临床应用包括在肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等方面。PET/CT推进了影像医学的进步。微型PET/CT使现代医学基础研究获得质的飞跃。     

重庆地区HBV流行株PreS/S、EnhII/CP/PreC 基因标准参照序列的初步建立

目的：建立重庆地区HBV流行株PreS／S、EnhⅡ/CP／PreC基因标准参照序列，为HBV变异的研究莫定基础：方法：测定15例无症状携带HBV的PreS／S、EnhⅡ/CP／PreC序列，应用同源性分析和对齐比较等方法确定基因型／血清型，并拟定标准参照序列。结果：9株基因型B／血清型adw2、3株基因型B／血清型aywl、3株基因型C／血清型adrq ；建立的重庆地区HBV流行株(基因型B／血清型adw2)PreS／S、EnhⅡ/CP／PreC标准参照序列与华东华南地区同亚型的标准参照序列比较分别有6个、1个核苷酸差异。结论：初步建立了重庆地区HBV流行株PreS／S、EnhⅡCP／PreC基因标准参照序列。     

Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与自噬调控作用的研究进展

自噬是机体保守的自我防御机制,是将细胞内变形坏死的细胞器和多余蛋白降解为小分子,以供循环利用。自噬在生理和病理状态下均发挥重要作用,可通过多条信号通路影响胞内物质的表达。目前已知Ras/Raf/MEK/ERK信号通路不仅广泛参与调控细胞生长、增殖、分化、凋亡等多个生理病理过程,并且参与调控自噬,并具有促进肿瘤细胞发生自噬性死亡的作用,但是其具体参与调控自噬的作用机制尚未完全阐明。本文就Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与调控自噬的作用的研究进展进行详细阐述,以期为研究Ras/Raf/MEK/ERK信号通路调控自噬的作用机制提供参考。     

知母药材的HPLC/PDA/ELSD指纹图谱研究

[目的] 建立知母药材的高效液相色谱仪-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用(HPLC/PDA/ELSD)指纹图谱。[方法] 采用Waters Symmetry Shield^TM RP C18(5 μm,4.6 mm×250 mm )色谱柱,流动相为乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱流速1.0 mL/min,柱温30 ℃,检测波长258 nm,ELSD检测器载气气压30 Psi,漂移管温度80 ℃。[结果] 建立了知母的HPLC/PDA/ELSD指纹图谱,在HPLC-PDA色谱图中标定了17个共有峰,HPLC-ELSD色谱图中标定了14个共有峰。[结论] 该方法重复性好,可用于知母药材的全面质量控制。     

任意尿香草扁桃酸和高香草酸的肌酐比值测定诊断神经母细胞瘤

目的：探讨任意尿香草扁桃酸／肌肝（VMA／Cr)和高香草酸／肌杆（HVA／Cr）测定对神经母细胞瘤的诊断价值。方法：50例1－5岁正常儿童和11例2－5岁神经母细胞瘤患儿的任意尿标本，用高效液相色谱法测定VMA、HVA浓度，Beckmann自动生化分析仪测定肌酐（Cr)浓度，计算VMA／Cr、HVA／Cr。结果：1－5岁儿童的99％的正常值范围为VMA／Cr＜14．9mmol/mol，HVA／Cr＜23．8mmol/mol。11例神经母细胞瘤患儿中有10例VMA／Cr和HVA／Cr均超过正常值范围，诊断符合率90．9％。结论：任意尿VMA／Cr和HVA／Cr测定采样方便，诊断符合率高，可取代24h尿VMA、HVA总量测定法用于神经母细胞瘤术前诊断和术后随访。     

SEMSE/BALANCE/FFE技术在肝脏肿瘤诊断的应用

目的评价SENSE/BALANCE/FFE技术在肝脏肿瘤性病变中的应用.方法对利用SENSE/BALANCE/FFE技术行MRI检查的104例肝脏肿瘤患者的190个病灶,进行图像评价和定量分析,并与采用呼吸门控频率选择脂肪抑制T2WI序列(TSE/T2WI/SPIR)的图像比较.结果 SENSE/BALANCE/FFE结合技术扫描时间短,为8～16 s.实质性器官及血管结构清晰,边缘平滑,解剖层次分明.BALANCE无论有无流动的液体均为高信号,能清晰显示病变对门静脉及肝静脉的侵犯.190个病灶中,SENSE/BALANCE/FFE图像及T2WI/TSE图像分别检出了161个(85%,161/190)和171个(90%,171/190),前者略低,但两者间没有显著性差异(χ2=2.3845,P＞0.05).测量SENSE/BALANCE/FFE图像5 3个实性病灶信号为54 9.6434±44.56,20个血管瘤信号为1053.6385±55.20,53个肝囊肿信号为1918.1715±122.08,各种肿瘤间有显著差异(P＜0.01).结论 SENSE/BALANCE/FFE序列省时且实用性强,适合于肝脏病变的诊断.     

Avrami法研究环氧树脂／蒙脱土／咪唑纳米复合材料的固化动力学

运用Flory凝胶化理论和Avrami法研究环氧树脂／有机蒙脱土／咪唑插层型纳米复合体系在不同温度及不同有机蒙脱土用量时的固化动力学。实验表明，随固化温度的提高，Avrami速率常数k值增大，凝胶化时间tg缩短，凝胶点后的t1/2降低，固化速率加快，当固化温度低于90℃时，Avrami指数n值为3左右，而固化温度高于90℃时，n值为2左右。有机蒙脱土的加入，使固化速率加快，但并不改变固化反应的机理，Avrami方程可以很好地描述凝胶点后的固化动力学。