重组新城疫病毒rL-RVG诱导人胃腺癌细胞内质网应激和凋亡

目的: 观察新城疫病毒(newcastle disease virus, NDV)及稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(recombinant avirulent NDV LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein,rL-RVG)对胃腺癌HGC细胞内质网应激及凋亡的影响。方法: 将HGC细胞随机分为对照组、NDV组和rL-RVG组,分别转染PBS、NDV和rL-RVG 24 h,免疫印迹法和免疫荧光检测糖调节蛋白78 (glucose regulated protein 78, GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)表达。再将HGC细胞随机分为对照组、4-苯基丁酸钠盐(sodium phenylbutyrate, 4-PBA)组、rL-RVG组和4-PBA+rL-RVG组,4 PBA组和4-PBA+rL-RVG组分别加入4-PBA预处理4 h,然后rL-RVG组和4-PBA+rL-RVG组分别转染rL-RVG,对照组和4-PBA组转染PBS,免疫印迹法检测各组细胞GRP78、CHOP和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果： 感染HGC细胞24 h后,NDV组及rL-RVG组GRP78和CHOP表达明显高于对照组(P均<0.05),且rL-RVG组明显高于NDV组(P<0.01)。4 PBA预处理后,4-PBA+rL-RVG组GRP78、CHOP、caspase-3蛋白表达和细胞凋亡率较rL-RVG组明显降低(P<0.05)。结论： rL-RVG较NDV更易引起胃腺癌HGC细胞内质网应激,且与凋亡相关。     

内质网应激参与调控肺心病心肌细胞线粒体途径凋亡

目的 探讨内质网应激在慢性肺源性心脏病心肌细胞线粒体凋亡途径中的作用及机制。方法 24只8周龄Wistar大鼠随机分为缺氧组、干预组和对照组,每组8只。缺氧组大鼠采用常压间歇缺氧法建立肺心病模型,每天给予生理盐水灌胃;干预组大鼠同样构建肺心病模型,每天给予内质网应激抑制剂4-PBA灌胃;对照组大鼠在普通饲养笼中饲养,每天给予生理盐水灌胃。处理21 d后处死大鼠并分离右心室,TUNEL法测定右室细胞凋亡率,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,Western blot检测右心室心肌组织中内质网应激标志性分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及抗CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、线粒体途径凋亡相关蛋白Bcl-2和细胞色素C表达水平。结果 与对照组相比,缺氧组大鼠右心室肥大、心肌细胞凋亡率明显增加(均P<0.001),CHOP、GRP78、Bcl-2、线粒体释放细胞色素C均明显增加(P≤0.001)。而与缺氧组相比,干预组大鼠右心室细胞凋亡减少,右心室肥大减轻(均P<0.001),CHOP及GRP78表达水平下调(均P<0.05),Bcl-2表达下降(P=0.020...     

炎症状态下高脂介导的内质网应激在系膜细胞损伤中的作用及机制

目的观察炎症状态下高脂介导的内质网应激在人肾脏系膜细胞(HMCs)损伤中的作用,并探讨高脂在肾脏损伤中的作用机制。方法体外培养HMCs,分为对照组、高脂组、炎症组、高脂+炎症组、高脂+炎症+4-苯基丁酸(4-PBA)干预组(4-PBA干预组),分别培养24、48和72h。用油红O染色观察HMCs胞内脂质沉积水平;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖变化;实时荧光定量PCR检测GRP78、纤连蛋白(FN)mRNA水平;免疫细胞化学半定量分析糖调节蛋白78(GRP78)蛋白水平。结果 (1)与对照组比较,高脂组、炎症组、高脂+炎症组HMCs胞内脂质沉积增多(P均<0.01),细胞增殖增快,且呈时间依赖性(P均<0.01),同时FN mRNA表达升高(P均<0.01);与高脂+炎症组比较,4-PBA干预组胞内脂质沉积减少(P均<0.01),细胞增殖减慢(P均<0.01),且FN mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。(2)与对照组比较,高脂组、炎症组、高脂+炎症组GRP78mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);而4-PBA干预组GRP78mR-NA和蛋白表达较高脂+炎症组降低(P均<0.01)。(3)在24、48及72h,细胞脂质沉积水平与其增殖、GRP78蛋白及FN mR-NA水平均呈正相关(P均<0.01),GRP78蛋白表达水平与细胞增殖和FN mRNA水平呈正相关(P均<0.05)。结论炎症状态下,高脂可通过启动HMCs内质网应激致细胞损伤。     

右美托咪定对H9C2细胞内质网应激性损伤的影响及机制研究

目的研究右美托咪定（DEX）对H9C2心肌细胞内质网应激反应（ERS）的影响,探讨可能的发生机制。方法取正常培养的大鼠H9C2细胞,同时进行对照培养和缺氧/复氧（H/R）培养,其中H/R条件为5%CO2和95%N2密闭缺氧装置中缺氧3h后,常氧条件下培养3h。以含有1滋mol/LDEX和1mmol/L4-苯基丁酸（4-PBA）的培养基提前孵育细胞1h和24h。采用低损伤法检测各组细胞上清液的乳酸脱氢酶（LDH）浓度、CCK-8法检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡率,以及RT-PCR和Westernblot法检测内质网应激特异性分子葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、Caspase-12的mRNA及蛋白表达情况。将H9C2细胞分设Control组、毒胡萝卜素（TG）组、4-PBA组以及p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂（SB202190）组并进行相应的干预,Westernblot法检测各组p38MAPK和p-p38MAPK的表达,以及GRP78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达情况。结果与Control组相比,H/R组的H9C2细胞活力减低,细胞上清液LDH浓度增加,细胞凋亡率增加（P＜0.05）;与H/R组比较,DEX+H/R组的细胞活力明显增加,细胞上清液LDH浓度明显下降,细胞凋亡率下降（P＜0.05）;与DEX+H/R组比较,4-PBA+DEX+H/R组的H9C2细胞损伤被逆转,GRP78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达也进一步升高。在Control组、TG组和DEX+TG组之间,p38MAPK的表达均无统计学差异,但是TG组的p-p38MAPK表达明显增加,DEX能够抑制p-p38MAPK表达增加（P＜0.05）;与TG组比较,DEX+TG组的GRP78、CHOP、Caspase-12的mRNA及蛋白表达被抑制,但是DEX+SB202190+TG组的GRP78、CHOP、Caspase-12mRNA及蛋白表达被逆转增高。结论DEX对H/R损伤下的H9C2心肌细胞具有保护作用,其作用机制与抑制细胞ERS有关,通过调控p38MAPK能够减轻细胞损伤和凋亡。     

车叶草苷通过内质网应激促进胰腺癌细胞凋亡的机制研究

目的:探讨车叶草苷(ASP)通过内质网应激(ERS)诱导胰腺癌(PC)细胞凋亡的机制。方法:选取人胰腺癌PANC-1细胞作为研究对象。将PANC-1细胞按照随机数字表法分为4组，分别为对照组、ASP组、ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-Phenylbutyric acid, 4-PBA)组和ASP+4-PBA组。采用CCK-8检测细胞增殖情况，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况，Transwell法检测细胞迁移，蛋白质印迹法检测细胞中活化转录因子6(ATF6)、C/BEP环腺苷酸反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、活化的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及肌醇依赖性激酶1α磷酸化蛋白(p-IRE1α)相对表达水平。结果:随着ASP浓度的增加，PANC-1细胞增殖率呈下降趋势。与对照组相比，ASP组迁移细胞数量降低，细胞凋亡率增加，ATF6、CHOP、cleaved-caspase-3、PERK及p-IRE1α蛋白相对表达水平上升，差异均有统计学意义(P<0.05)。与ASP组相比，ASP+4-PBA组细胞迁移数量增多、细胞凋亡...     

内质网应激抑制剂4-PBA预处理对脑死亡致供肝细胞凋亡的影响及临床意义

目的:探讨脑死亡时肝脏组织内内质网应激的活化对供肝质量的影响及其机制。方法:健康成年雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组(S组)、脑死亡组(BD组)及脑死亡+内质网应激抑制剂4-苯丁酸(4-PBA)组(PBA组),每组10只。S组大鼠麻醉后行股动脉置管、颅骨钻孔置管及气管插管,但不行颅内加压。BD组大鼠行股动脉置管、颅骨钻孔置管及气管插管,采用渐进式颅内加压的方式建立大鼠脑死亡模型。PBA组在脑死亡模型建立后腹腔注射给予内质网应激抑制剂4-PBA。S组大鼠维持麻醉6h,BD、PBA组大鼠脑死亡维持6h后分别取各组大鼠肝脏标本行TUNEL凋亡检测及Western Blot检测内质网应激相关蛋白及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)表达量。结果:TUNEL凋亡检测:与S组相比,BD组及PBA组肝脏细胞凋亡率明显升高,且BD组凋亡率明显高于PBA组。Western Blot检测:与S组相比,BD组及PBA组肝脏标本内质网应激相关蛋白CHOP、ATF6及Grp78表达量均明显升高,且BD组明显高于PBA组。而BD组及PBA组PP2A磷酸化水平明显降低,且PBA组明显低于BD组。结论:脑死亡时供肝细胞凋亡增加,同时内质网应激及PP2A活性均升高,抑制内质网应激的活化程度后PP2A活性也出现下降,提示内质网应激可能是通过PP2A导致肝细胞凋亡。     

大黄素诱导人肾上皮HK-2细胞凋亡及内质网应激的介导作用

目的 研究大黄素诱导人肾小管上皮HK-2细胞凋亡的作用及其机制是否与内质网应激有关。方法 不同浓度大黄素处理HK-2细胞不同时间。MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、转录激活因子3（ATF3）和X盒结合蛋白1（XBP1）的基因表达,Western blotting法检测caspase-3、GRP78、CHOP、真核生物启动因子2α（eIF2α）的蛋白表达。结果 大黄素以浓度相关方式降低HK-2细胞存活率,诱导caspase-3剪切。RT-PCR检测表明,大黄素能诱导内质网相关基因GRP78、CHOP、ATF3基因表达,Western blottinh检测结果进一步证实大黄素能诱导GRP78、CHOP的蛋白表达。大黄素还明显诱导eIF2α磷酸化和XBP1 mRNA剪切。在大黄素给药之前给予内质网应激干扰药4-苯基丁酸和salubrinal,能增加HK-2细胞的存活率。结论 大黄素能诱导HK-2凋亡,内质网应激参与了大黄素诱导HK-2细胞凋亡的作用。     

雷公藤内酯醇对肺癌荷瘤小鼠髓系抑制性细胞的影响及机制研究

目的探讨雷公藤内酯醇对肺癌髓系抑制性细胞（myeloidderivedsuppressorcells,MDSC）的影响及其分子机制。方法将6~8周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、雷公藤内酯醇组、内质网应激抑制剂（4-PBA）组和4-PBA+雷公藤能内酯醇组4组,每组8只。取5×106个/mlA549细胞接种于小鼠腋下皮下,建立肺癌移植瘤模型;雷公藤内酯醇组每日腹腔注射0.2ml（浓度为1滋g/ml）雷公藤内酯醇+0.4ml0.9%氯化钠注射液,4-PBA组每日腹腔注射0.4ml（浓度为100滋g/ml）4-PBA+0.2ml0.9%氯化钠注射液,4-PBA+雷公藤内酯醇组每日注射0.2ml雷公藤内酯醇和0.4ml4-PBA,对照组给予腹腔注射等量的0.9%氯化钠注射液。每周监测小鼠的肿瘤体积变化,第21天处死小鼠剥离皮下肿瘤,并测量肿瘤的重量;分离提取脾脏组织细胞,采用流式细胞术分析各组MDSC细胞数量;用流式细胞术分选MDSC,膜联蛋白V/碘化丙啶双染法分析MDSC细胞凋亡,RT-qPCR法分析MDSC中重组人精氨酸酶1（ARG1）、一氧化氮合酶（iNOS）;Westernblot法分析MDSC中Bcl-2、Bax、CHOP、GRP78和PERK的表达水平。结果与对照组相比,雷公藤内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均明显降低,MDSC比例、ARG1、iNOSmRNA表达均明显下降,MDSC细胞凋亡率、CHOP、GRP78和PERK表达均明显增加（均P＜0.05）;与雷公藤内酯醇组相比,4-PBA+雷公藤内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均增加,MDSC比例、ARG1、iNOSmRNA均明显增加,细胞凋亡率和CHOP、GRP78和PERK表达均明显降低（均P＜0.05）;与4-PBA组相比,4-PBA+雷公藤能内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均明显降低（均P＜0.05）。结论雷公藤内酯醇对肺癌A549细胞移植瘤具有抑制作用,其机制与雷公藤内酯醇诱发内质网应激抑制MDSC有关。     

内质网应激在对比剂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用

目的:探讨内质网应激(ERS)在对比剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用及N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护作用。方法:将不同浓度(50,100,150mgI/ml)碘普罗胺分别加入体外培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中孵育1h;10mmol/L NAC预处理细胞1h后,加入100mgI/ml碘普罗胺共孵育1h。Hoechst-33342染色法检测肾小管上皮细胞凋亡率;荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)的产生;Western印迹法检测细胞内内质网功能调节蛋白GRP78、内质网源性转录因子CHOP表达水平。结果:对比剂呈浓度依赖性诱导NRK-52E细胞凋亡,且呈浓度依赖性诱导NRK-52E细胞内ROS生成及GRP78、CHOP蛋白表达上调(P<0.05);经NAC预处理后,细胞内ROS生成及细胞凋亡率明显下降(P<0.05),且GRP78、CHOP蛋白表达下调(P<0.05)。结论:碘普罗胺能诱导肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与细胞内ROS生成增加,诱发ERS,上调GRP78、CHOP蛋白表达有关。抗氧化剂NAC通过降低NRK-52E细胞内ROS介导的ERS,减少肾小管上皮细胞凋亡。     

橄榄苦苷抑制丙烯醛诱导的HBE细胞内质网应激的机制研究

目的：探讨橄榄苦苷（oleuropein,OP）和丙烯醛（acrolein,ACR）对人支气管上皮样细胞（human bronchial epithelial cells,HBE）内质网应激（endouplasmic reticulum stress,ERS）相关的增殖与凋亡影响的可能机制。方法： OP与ACR联合处理HBE细胞,MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法和流式细胞检测细胞凋亡,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78,GRP78）和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA 表达;雄性Sprague-Dawley大鼠经ACR腹腔注射和(或)橄榄叶提取物（olive leaf extract,OLE）灌胃处理,取大鼠肺组织,Western blot法检测ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA 表达。结果：体外实验证实ACR可以抑制HBE细胞的增殖,诱导其凋亡;联合OP处理后,ACR抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用明显受到抑制;同时,ACR上调HBE细胞中ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,联合OP可抑制GRP78和CHOP的表达;在mRNA水平上,ACR单独处理上调了ERS相关分子GRP78和CHOP 的mRNA表达水平,而联合OP处理,GRP78和CHOP的mRNA水平未见明显变化;Sprague-Dawley大鼠体内实验结果与体外细胞实验基本一致。结论：ACR抑制HBE细胞增殖,促发ERS,进而诱导HBE细胞凋亡。在蛋白质翻译水平上,OP可以通过抑制ERS途径,拮抗ACR诱导的细胞凋亡效应。     

大鼠压疮局部不同干预温度对内质网应激及细胞凋亡的影响

目的比较大鼠压疮局部不同干预温度对内质网应激(ERS)及细胞凋亡的影响,为临床防治压疮提供实验依据。方法使用缺血再灌注法建立压疮模型,将40只SPF级成年雄性SD大鼠随机分成假手术组(sham组)、模型组、热干预组和冷干预组4组。在实验终点于冰上剪取各组大鼠受压部位肌肉组织,用HE染色观察骨骼肌病理学变化;Western blot检测内质网应激相关蛋白GRP78、caspase-12与CHOP的表达水平;免疫荧光观察caspase-12与CHOP的表达情况;TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果与模型组相比,热干预组的骨骼肌细胞损伤程度加重,凋亡细胞增多,免疫荧光结果显示caspase-12与CHOP的阳性表达增加,Western blot结果显示GRP78、caspase-12与CHOP的表达较模型组均上升(P0.05);而冷干预组骨骼肌细胞损伤程度减轻,凋亡细胞减少,免疫荧光结果显示caspase-12与CHOP的阳性表达减少,Western blot结果显示GRP78、caspase-12与CHOP的表达较模型组均下降(P0.05)。结论局部冷干预通过抑制内质网应激介导的凋亡通路而减轻大鼠压疮损伤;局部热干预加剧ERS而促进细胞凋亡的发生,加重大鼠压疮损伤。     

滋补脾阴方药含药血清对内质网应激神经元损伤的保护作用及机制研究

目的:运用中药血清药理学方法研究滋补脾阴方药含药血清对内质网应激的保护作用并探讨其机制。方法:以N-糖链抑制剂衣霉素(tunicamycin,Tm)刺激小鼠神经瘤母细胞Neuro2a建立内质网应激模型,滋补脾阴方药含药血清为干预组,采用逆转录聚合酶链式反应方法观察葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)和凋亡促进因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/EBP homologousprotein,CHOP)的mRNA表达;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放试验观察Tm、星形孢菌素(staurosporine,STS)刺激Neuro2a细胞后的LDH泄漏率。结果:各浓度滋补脾阴方药含药血清预处理组GRP78及CHOP mRNA表达与Tm(5μg/ml)组相比,表达水平明显下调,差异有统计学意义(P<0.05),因此滋补脾阴方药含药血清可以抑制Tm诱导内质网应激时GRP78及CHOP mRNA的表达。各浓度滋补脾阴方药含药血清预处理组与Tm组相比,LDH泄漏率明显下降(P<0.05),因此滋补脾阴方药含药血清可以降低Tm和STS刺激后的LDH泄漏率。结论:滋补脾阴方药具有神经保护作用,其机制可能是通过抑制内质网应激及线粒体损伤。     

脑泰方含药血清对缺氧缺糖/复氧PC12细胞损伤的保护作用

目的 探讨脑泰方含药血清通过内质网应激相关通路调控缺氧缺糖/复氧PC12细胞凋亡,从而阐明脑泰方对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法 将PC12细胞分为正常组（常规培养）、模型组（OGD/R）、抑制剂（4-PBA）组及脑泰方低浓度（10%）、中浓度（15%）、高浓度（20%）组。CCK8法检测细胞活力;采用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）试剂盒检测LDH活性;Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化;Tunel染色检测细胞凋亡率;免疫荧光法和Western blot检测细胞Beclin-1、LC3、GRP78、CHOP、PERK蛋白表达情况。结果 模型组LDH活性增加,细胞凋亡率增加,细胞存活率下降（P<0.01）,GRP78、PERK、CHOP、LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白表达明显增加,LC3Ⅰ蛋白表达减少（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,抑制剂（4-PBA）组、脑泰方中浓度组、脑泰方高浓度组LDH活性降低,细胞凋亡率减少,细胞存活率明显增加（P<0.05,P<0.01）,GRP78、PERK、C...     

大黄酸通过非活性氧依赖性内质网应激通路诱导L-02细胞凋亡

研究大黄酸对人正常肝细胞L-02的凋亡作用及探讨其机制。应用MTT法评价大黄酸对L-02细胞的活性抑制作用;流式细胞术检测大黄酸诱导L-02细胞的凋亡;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot技术检测细胞内质网应激相关基因和蛋白的表达变化;并探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对内质网应激蛋白及caspase-4、caspase-3的影响。实验结果显示:大黄酸能够呈剂量和时间依赖性抑制L-02细胞活性,增加L-02细胞凋亡率;诱导细胞ROS水平增高,NAC预给药可显著降低其水平;大黄酸能显著上调L-02细胞内的葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、活化转录因子4(ATF-4)和C/EBP同源蛋白(CHOP)基因的mRNA水平;显著增加GRP 78,磷酸化c-jun 氨基末端激酶(p-JNK),CHOP蛋白表达;NAC不能抑制大黄酸诱导的GRP 78,p-JNK,CHOP蛋白表达上调,亦不能抑制大黄酸诱导的caspase-4及caspase-3活性增加。表明大黄酸能够诱导L-02细胞凋亡,其作用机制与非活性氧依赖性的内质网应激通路有关。     

姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡的机制

目的 探讨姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡作用及凋亡机制.方法 体外培养Jurkat细胞,用姜黄素处理12 h后,MTT法检测细胞存活率;流式细胞学检测细胞凋亡率;Western Blot检测凋亡相关蛋白和内质网应激蛋白的表达变化.结果 姜黄素显著抑制Jurkat细胞存活率.随着姜黄素浓度增加,Jurkat细胞凋亡率增加,并从早期凋亡发展为晚期凋亡.姜黄素降低Bcl-2蛋白表达,增加Bax蛋白表达,增加GRP78蛋白表达,活化Caspase-3表达增高.结论 姜黄素启动内源性凋亡途径和内质网应激途径诱导Jurkat细胞发生凋亡.     

大黄素诱导对内质网应激相关蛋白表达及肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的研究大黄素对肝细胞癌Hep G2细胞作用后内质网应激(ERS)相关蛋白表达的影响。方法采用不同浓度大黄素(0、10、50、100μmol/L)处理Hep G2细胞48 h,通过四甲基偶氮唑蓝比色法测定大黄素对肿瘤细胞增殖的影响,流式细胞术检测大黄素对Hep G2细胞的凋亡率,采用蛋白印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)及caspase-12活化断裂后产生的活性片段的表达。结果大黄素以浓度依赖的方式抑制Hep G2细胞的增殖,促进细胞凋亡。大黄素处理Hep G2细胞后,内质网分子伴侣蛋白GRP78的表达明显增高;内质网相关凋亡分子CHOP和caspase-12的含量也显著增高,caspase-12活性增强。结论大黄素可能通过内质网应激相关途径诱导Hep G2细胞凋亡。     

大鼠肝纤维化进程中内质网应激相关蛋白的动态变化研究

目的探讨内质网应激(ERS)相关蛋白在大鼠肝纤维化形成与自发逆转过程中的作用。方法建立CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,免疫组化法检测各组ERS标志性蛋白CHOP、GRP78的表达;RT-PCR法检测CHOP、GRP78 mRNA的表达;Western blot检测CHOP蛋白表达变化。结果与正常组大鼠相比,模型组大鼠CHOP、GRP78的表达显著升高(P<0.05)。与模型组相比,停止CCl4诱导4周和8周后CHOP、GRP78表达降低(P<0.05)。结论 ERS存在于大鼠肝纤维化进程中,可能与肝纤维化的发生、发展和逆转存在密切联系。     

丙泊酚通过减轻炎症反应和内质网应激缓解烧伤后急性肾损伤

摘要:目的 探讨丙泊酚(propofol)是否通过减轻炎症反应和内质网应激缓解大鼠烧伤后急性肾损伤(acutekidney injury,AKI)。方法 采用热损伤法构建大鼠烧伤后 AKI模型,实验分为5组:假烧伤组、AKI组、丙泊酚组、4-PBA(内 质网应激抑制剂)组和4-PBA+丙泊酚组。苏木精-伊红(HE)染色观察造模后48h肾脏组织形态;生化检测仪检测血清 中BUN 和Cr含量;ELISA 法检测血清中炎症因子 TNF-α、IL-1β和IL-6水平;Westernblot法检测肾脏组织中内质网应 激相关蛋白 PERK、GRP78、CHOP和 Caspase-12的表达。结果 与假烧伤组相比,AKI组大鼠肾脏组织呈现明显的组 织病理学损伤,血清中 BUN、Cr、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(均 P<0.05),肾脏组织中 PERK、GRP78、CHOP 和 Caspase-12蛋白表达量显著升高(均P<0.05)。与 AKI组相比,丙泊酚组和4-PBA 组大鼠肾脏组织病理学损伤明显 减轻,血清中BUN、Cr、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著降低(均P<0.05),肾脏组织中PERK、GRP78、CHOP和Caspase12蛋白表达量显著降低(均P<0.05)。结论 丙泊酚可通过降低炎症因子水平和内质网应激相关蛋白的表达来缓解烧 伤后急性肾损伤。     

The expression of endoplasmic reticulum stress in recovery of CCl4 induced liver fibrosis in rat

目的 探讨内质网应激(ERS)相关蛋白在大鼠肝纤维化形成与自发逆转过程中的作用.方法 建立CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,免疫组化法检测各组ERS标志性蛋白CHOP、GRP78的表达;RT-PCR法检测CHOP、GRP78 mRNA的表达;Western blot检测CHOP蛋白表达变化.结果 与正常组大鼠相比,模型组大鼠CHOP、GRP78的表达显著升高(P<0.05).与模型组相比,停止CCl4诱导4周和8周后CHOP、GRP78表达降低(P<0.05).结论 ERS存在于大鼠肝纤维化进程中,可能与肝纤维化的发生、发展和逆转存在密切联系.