SDZ诱导肺癌A549细胞凋亡

目的旨在探讨SDZ体外对肺癌A549细胞生长的作用。方法采用hoechst染色、荧光显微镜下观察SDZ诱导肺癌A549细胞凋亡的作用。结果经SDZ1000μg／ml作用24h肿瘤细胞即可发生凋亡,凋亡率达31．7％。结论SDZ体外可诱导肺癌A549细胞凋亡。     

藤茶双氢杨梅树皮素对Hela细胞及A2780细胞增殖的抑制作用

目的探讨藤茶双氢杨梅树皮素（ampelopsin,APS）的抗肿瘤作用。方法以四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）、克隆形成法观察APS对Hela细胞及A2780细胞的体外抑制作用。结果APS均能明显抑制体外培养的Hela细胞及A2780细胞的生长,MTT法的半数抑制浓度（IC50）分别为24．6μg／mL和1．2μg／mL,集落形成法中APS质量浓度在4．4～22．2μg／mL时抑制率均为100％。结论藤茶APS对体外培养的Hela细胞及A2780细胞均有明显的抑制作用。     

罗汉果提取物诱导肺癌细胞A549凋亡的研究

目的探讨罗汉果醇诱导肺癌细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法通过分离、纯化得到罗汉果醇单体,以肺癌细胞A549为对象,采用MTT法检测罗汉果醇对肺癌细胞的抑制作用;利用荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期;以蛋白印迹法检测罗汉果醇对p21、Bcl-2蛋白表达的影响。结果罗汉果醇能抑制肺癌细胞的增殖,具有促进细胞凋亡、阻滞细胞周期的作用;蛋白印迹检测表明,罗汉果醇可以促进p21表达升高,Bcl-2表达下降。结论罗汉果醇通过调节p21、Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡和周期阻滞,从而促进肺癌细胞A549的凋亡。     

冬凌草甲素诱导人肺腺癌细胞株A549凋亡及其机制研究

目的:探讨冬凌草甲素(oridnin)对人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡的影响。方法:利用MTT法检测oridnin对A549细胞增殖作用的影响;Hoechst33258染色观察给药后细胞形态改变;透射电镜观察给药后细胞超微结构改变;FITC-Annexin V/PI双标记检测细胞凋亡率。结果:Hoechst33258染色和透射电镜观察,oridonin给药后A549细胞出现空泡变性,染色质高度凝集;FITC-AnnexinV/PI双标记检测oridnin(25,50,100μmol/L)作用细胞48h后凋亡率分别为1.5%,6.2%,59.7%。结论:Oridonin对A549细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。     

夏枯草乙醇提取物体外诱导肺癌细胞A549凋亡的研究

目的探讨夏枯草乙醇提取物对人肺癌细胞系A549细胞的增殖、迁移、细胞周期及凋亡的影响。方法不同质量浓度夏枯草提取物作用于人肺癌A549细胞,采用MTT比色法、细胞划痕实验等检测其对肿瘤细胞的生长及迁移的抑制作用,应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化情况,并使用Annexin-V FITC和PI双染试剂盒进行凋亡分析。结果一定质量浓度的夏枯草提取物可明显抑制肺癌细胞的增殖和迁移,并呈量效和时效关系,可诱导细胞发生G0/G1期或G2/M期细胞周期阻滞,且Sub G1峰比例明显上升,在低、中质量浓度(1.0和2.0mg·L-1)时以晚期凋亡为主,在高质量浓度(4.0mg·L-1)时主要发生早期凋亡。结论夏枯草提取物可抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移,改变细胞周期,诱导肿瘤细胞凋亡。     

枸杞多糖对人肺癌A549细胞影响的研究

目的:探讨枸杞多糖(LBP)对人肺癌A549细胞的影响及作用机制。方法:将LBP作用于肺癌A549细胞,应用M TT法、电镜和钙离子测定等技术测定LBP的抗肿瘤作用及作用机理。结果:LBP呈剂量依赖性(100m g/L~2000m g/L)地抑制人肺癌A549细胞的增殖,诱导其凋亡,并可使细胞内钙离子浓度升高。结论:LBP可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与细胞内钙离子浓度升高有关。     

榄香烯诱导肺癌A549细胞凋亡作用的剂量和时间依赖性研究

目的探讨榄香烯对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法每批细胞按空白对照组和药物处理组随机分组,检测榄香烯对癌细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞光度分析术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察。结果榄香烯存在剂量依赖性和时间依赖性,榄香烯在48 h、72 h对A549细胞周期有明显影响;榄香烯可阻滞A549细胞于S期并诱导细胞凋亡,但细胞凋亡率并不完全与药物浓度成正相关。结论榄香烯对肿瘤细胞具有较强的增殖抑制作用,在一定药物浓度范围内,随药物浓度的增加榄香烯可使细胞凋亡率升高,但超过一定作用浓度,药物的细胞毒作用增强,细胞凋亡率则呈下降趋势。     

花旗松素对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用及其机制研究

目的研究花旗松素对人肺癌细胞A549增殖的抑制作用,并探讨其诱导细胞凋亡的可能机制。方法 WST-1法检测不同质量浓度(0~200μg/m L)花旗松素对A549细胞增殖的影响;Annexin-V/PI双染法检测花旗松素对A549细胞凋亡的影响;细胞免疫荧光法观察花旗松素处理后A549细胞中凋亡蛋白Bax的表达;Western blotting法检测Bcl-2、Akt、P53蛋白表达的变化。结果 WST-1法检测到花旗松素能有效抑制A549细胞的增殖,呈现时间–剂量–效应关系。通过流式细胞仪分析,花旗松素诱导细胞凋亡,上调了促凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制Akt的过表达,并且促进P53的表达。结论花旗松素对A549细胞的增殖具有显著的抑制作用,其诱导的凋亡机制可能与Bcl-2、Akt相关信号通路的激活有关。     

藤茶双氢杨梅树皮素对人肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用

目的：探讨藤茶双氢杨梅树皮素（APS）的抗肿瘤作用。方法：以MTT法、生长曲线法、克隆形成法观察APS对人肝癌BEL-7404细胞的体外抑制作用。结果：MTT法中，APS对BEL-7404细胞的IC50为22．99μg／mL；细胞生长曲线法提示其对BEL-7404细胞生长有明显抑制作用；克隆形成法中，药物浓度在9．88μg／mL以上时抑制率为100％，药物浓度为6．58μg／mL时抑制率为69．65％。结论：APS对BEL-7404细胞的增殖有明显的抑制作用。     

蛇毒心脏毒素诱导肺癌A549细胞的凋亡机制研究

目的:研究眼镜蛇心脏毒素(CTX)诱导肺癌A549细胞凋亡的机制。方法:MTT法测定CTX体外细胞毒性作用;吉姆萨染色法观察CTX对A549细胞形态学的影响;线粒体膜电位(JC-1)法检测CTX诱导A549细胞后细胞JC-1的变化;流式细胞仪检测CTX对A549细胞凋亡的影响;Western blot法测定细胞色素C、凋亡蛋白酶前体(Procaspase)-3、Procaspase-9的表达;通过S180小鼠肉瘤模型检测CTX体内抗肿瘤活性。结果:CTX作用于A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为0.770μg/ml;0.5、1.0、2.0μg/ml CTX可引起A549细胞明显缩小,在高倍镜下可观察到胞核皱缩,形成染色质边集等形态学改变;流式细胞仪检测到CTX使A549细胞出现凋亡,并且具有量效关系;5μg/ml CTX作用于A549细胞0.5 h可使细胞JC-1降低;胞浆中检测到细胞色素C时,Procaspase-9的含量没有明显变化,随后逐渐减少,CTX诱导细胞凋亡具有时效关系;体内抑瘤实验显示在剂量为0.5、1.0、2.0 mg/kg时CTX对A549细胞有明显的抑制作用。结论:CTX对A549细胞有细胞毒性,可以使线粒体内细胞色素C释放,并激活Procaspase-9和Procaspase-3诱导A549细胞的凋亡。     

Isoliquiritigenin inhibits the proliferation and induces the apoptosis of human non-small cell lung cancer a549 cells

1. Isoliquiritigenin (ISL) is a natural pigment with the simple chalcone structure 4,2',4'-trihydroxychalcone. In the present study, we report, for the first time, ISL-induced inhibition of the proliferation of the human non-small cell lung cancer A549 cell line. 2. The results showed that ISL not only inhibited A549 cell proliferation, but also induced apoptosis and blocked cell cycle progression in the G1 phase. An ELISA assay demonstrated that ISL significantly increased the expression of p53 and p21/WAF1 protein, which caused cell cycle arrest. 3. An enhancement in Fas and its two ligands, namely membrane-bound Fas ligand (mFasL) and soluble Fas ligand (sFasL), may be responsible for the apoptotic effect induced by ISL. 4. Taken together, the results indicate that the p53 and Fas/FasL apoptotic system may participate in the antiproliferative activity of ISL in A549 cells.     

内源性大麻素对人肺癌A549细胞增殖的影响及机制初探

目的观察N-arachidonoyl ethanolamide(Anandamide,AEA)对A549细胞的作用并且探讨AEA的作用机制。方法倒置显微镜观察细胞的形态学变化,并用MTT法考察细胞增殖情况。结果AEA引起A549细胞死亡,且呈现剂量依赖性,IC50为(50.90±11.27)μmol·L-1。A549细胞上表达有辣椒素受体(vanilloid receptor 1,VR1),AEA对A549的作用,不可以被VR1特异性的拮抗剂Capsazepine(~10μmol·L-1)和Ruthenium Red(~10μmol·L-1)所拮抗。但AEA的作用可以被阿司匹林所减轻(P<0.05或P<0.01)。结论①AEA引起A549细胞死亡并不依赖VR1。②AEA的环氧化酶代谢产物Prostaglandin-ethanolamide(SPG-EAs)有可能参与该过程。     

左旋一叶蔌碱诱导人非小细胞肺癌A549细胞自噬机制的研究

目的：研究左旋一叶荻碱诱导人非小细胞肺癌A549、细胞自噬的机制。方法：常规体外培养人非小细胞肺癌A549细胞株,取对数生长期的细胞传代24h后加入不同浓度（6．25、12．5、25、50、100、200μMol／L）左旋一叶荻碱处理,分别继续培养24、36、48h后,用CCK-8法测定细胞增殖活性;倒置显微镜下观察对照组和各实验组的细胞形态变化;分别用不同浓度（0、20μmol／L）左旋一叶荻碱作用A549细胞48h后,进行单丹磺酰尸胺（monodansylcadaverine,MDC）染色,分别通过荧光显微镜检测细胞自噬发生情况;荧光定量RT-PCR法检测Beclin1在mRNA水平表达变化情况。结果：左旋一叶荻碱可以抑制A549细胞增殖,并且呈浓度和时间依赖性（P〈0．05）。其中,21．204μmol／L左旋一叶荻碱作用A549细胞48h后,细胞死亡率接近50％;倒置显微镜观察到药物作用后细胞形态发生了明显变化;随着左旋一叶荻碱剂量增加,MDC阳性细胞的荧光强度及细胞内MDC荧光颗粒数目明显增加。另外,研究还发现随着药物浓度的上升,自噬基因Beclin 1的表达明显增强。结论：左旋一叶荻碱具有抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡,其作用具有浓度和时间依赖性。左旋一叶荻碱上调自噬基因Beclin 1 mRNA的表达水平可能是其诱导A549细胞自噬性凋亡的机制之一。     

塞来昔布对人肺癌A549细胞株增殖抑制和凋亡诱导作用观察

目的 体外研究选择性环氧化酶2 (COX-2)抑制剂塞来昔布对人肺癌细胞株A549增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT比色法)观察不同浓度的塞来昔布对人肺癌细胞株A549的增殖抑制作用,TUNEL染色检测细胞凋亡,并用含半胱氨酸的门冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)活性检测试剂盒检测其活性变化.结果 塞来昔布能够以浓度依赖性方式有效地抑制K562细胞增殖,药物的Ic50为33.98 μmol·L-1;TUNEL染色分析显示给予不同浓度塞来昔布的细胞与未给予塞来昔布的细胞相比凋亡率有差异(P＜0.05),经塞来昔布处理的A549细胞内caspase-3的A405较正常对照组有显著增加(P＜0.05).结论 塞来昔布能够抑制A549细胞增殖,并呈药物浓度依赖性;塞来昔布能以浓度依赖性方式诱导K562细胞凋亡,其机制涉及caspase-3活化的信号转导途径.     

荷包牡丹碱对人肺癌A549细胞生长及端粒酶活性的抑制作用

目的探讨荷包牡丹碱对人肺癌A549细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 A549细胞加入荷包牡丹碱0～200μmol.L-1分别作用24,48和72 h,MTT法测定A549细胞的生长抑制作用。荷包牡丹碱0～20μmol.L-1作用72 h,端粒重复序列扩增(TRAP)法测定端粒酶活性。变温紫外法检测荷包牡丹碱9μmol.L-1对端粒酶G-四链体的稳定作用。结果荷包牡丹碱25,50,100和200μmol.L-1作用细胞72 h后的抑制率分别为33.4%,88.2%,88.6%和89.4%,明显高于正常对照组细胞(P<0.05),并具有量效(r=0.906,P<0.05)和时效(r=0.949,P<0.05)性。与正常对照组相比,荷包牡丹碱5,10,15和25μmol.L-1可有效抑制A549细胞端粒酶的活性(P<0.05),相对TRAP端粒酶活性从正常对照组的1.471±0.102分别降低为1.093±0.054,1.013±0.016,0.554±0.034,0.365±0.081(P<0.05)。荷包牡丹碱9μmol.L-1使G-四链体的熔点值从正常对照组的48℃提高到54℃。结论荷包牡丹碱可以通过稳定G-四链体结构,抑制端粒酶活性,有效抑制人肺腺癌细胞A549的生长。     

斑蝥素对A549细胞增殖抑制作用的研究

目的研究斑蝥素对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法采用MTT法检测斑蝥素对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析A549细胞周期及斑蝥素对细胞周期的影响。结果斑蝥素对A549细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为使A549细胞周期出现明显的G2/M期阻滞。结论斑蝥素对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用。     

hsa-miRNA-30a-5p促进肺癌细胞A549增殖的机制研究

目的 研究hsa-miRNA-30a-5p促进肺癌细胞A549增殖的调控机制。方法 收集临床肺癌标本及癌旁组织5对,用荧光定量法（real time-PCR）和蛋白质印迹法（Western blotting）分别检测肿瘤及其癌旁组织中hsa-miRNA-30a-5p和SCARA5的蛋白含量;生物信息学预测hsa-miRNA-30a-5p与SCARA5基因3''UTR区结合位点,并通过荧光素酶报告基因法进行结合位点验证;构建SCARA5基因沉默表达载体pshRNA-SCARA5,脂质体瞬时转染pshRNA-SCARA5及hsa-miRNA-30a-5p阻遏物（miRNA-30a-5p inhibitor）到A549细胞,转染后48 h,real time-PCR检测细胞内hsa-miRNA-30a-5p含量,Western blotting检测细胞中SCARA5蛋白含量;MTT法检测转染后A549细胞对数期增殖活性。结果 肺癌组织中SCARA5蛋白表达量明显低于癌旁组织,组间差异显著（P<0.05）;肺癌组织中hsa-miRNA-30a-5p含量则明显高于癌旁组织,组间差异显著（P<0.05）。荧光素酶实验显示,与报告基因表达载体单独转染组比较,miRNA-30a拟似物（miRNA-30a-5p mimics）和miRNA-30a-5p inhibitor与野生型荧光素酶报告基因共转染组可以明显抑制或增强荧光素酶活性（P<0.05）;miRNA-30a-5p inhibitor转染细胞后48 h,与转染对照组比较,细胞内hsa-miRNA-30a-5p含量明显降低（P<0.05）,阴性对照（miRNA-30a-5p NC）转染组和转染对照组细胞内hsa-miRNA-30a-5p含量无显著差异（P>0.05）。转染后24~72 h,miRNA-30a-5p inhibitor转染组A549细胞增值活性明显降低（P<0.05）,而pshRNA-SCARA5转染能够逆转miRNA-30a-5p inhibitor增强A549细胞增殖活性的趋势,共转染组与miRNA-30a-5p inhibitor单独转染组及转染对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 Hsa-miRNA-30a-5p通过抑制SCARA5基因表达,增强A549细胞的增殖活性,转染miRNA-30a-5p inhibitor,可以抑制A549细胞增殖活性。     

鸦胆子油乳对肺癌细胞A549的抑制作用及其机制

目的研究鸦胆子油乳对肺癌细胞A549的抑制作用,并初步探讨其相关作用机制。方法以不同终质量浓度的鸦胆子油乳(0.50,1.25,2.50 g·L^-1)作用于肺癌细胞A549,并将其作为低、中、高3个质量浓度实验组,同时设置对照组(给予等量0.9%NaCl)。用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法检测各组肺癌细胞A549凋亡的形态学变化,用噻唑蓝(MTT)法和免疫印迹法检测各组肺癌细胞A549增殖抑制情况及凋亡抑制蛋白Survivin表达情况。结果干预24 h后,对照组及低、中、高3个质量实验组肺癌细胞A549增殖抑制率分别为(0.31±0.19)%,(37.24±6.21)%,(49.33±5.96)%,(61.25±6.23)%,干预48 h后,增殖抑制率分别为(0.32±0.21)%,(58.14±6.33)%,(65.28±5.79)%,(73.46±5.37)%,干预72 h后,增殖抑制率分别为(0.38±0.23)%,(68.58±5.87)%,(76.35±6.02)%,(83.97±5.64)%。与对照组比较,实验组肺癌细胞A549增殖抑制率显著升高(P<0.01),且随着鸦胆子油乳质量浓度增大和作用时间延长,肺癌细胞A549增殖抑制率呈逐渐升高趋势(P<0.05或P<0.01)。对照组和低、中、高3个质量浓度实验组Survivin蛋白灰度值分别为0.95±0.07,0.83±0.10,0.66±0.12,0.51±0.09;对照组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),且随鸦胆子油乳质量浓度增加,Survivin蛋白表达量呈逐渐降低趋势(P<0.01)。结论鸦胆子油乳可显著抑制肺癌细胞A549增殖,并诱导其凋亡,相关作用机制可能是其可有效抑制肺癌细胞A549中凋亡抑制蛋白Survivin的表达。     

低剂量卡铂诱导人肺癌细胞A549过早性衰老的作用研究

目的考察低剂量卡铂诱导人肺癌细胞A549过早性衰老的作用。方法 A549细胞经不同浓度卡铂处理,采用MTT法和克隆形成率试验检测卡铂对细胞增生的抑制作用;β-半乳糖苷酶染色试验检测卡铂诱导细胞衰老情况;FCM法检测卡铂对细胞凋亡和细胞周期分布的影响;全波长荧光酶标仪检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平变化。结果低剂量卡铂能诱导细胞衰老;不同浓度卡铂作用细胞48 h后,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞显著增多;细胞周期多停滞于G0/G1期,S期显著减少,且细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。结论低剂量卡铂能诱导人肺癌细胞A549过早性衰老。