p38 MAPK信号途径在高糖诱导的大鼠肾系膜细胞中激活的意义

目的 探讨高糖状态下肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号途径与其下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREBI)、转化生长因子β1(TGF-β1)及细胞外基质表达的关系. 方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予低糖和/或甘露醇、高糖和/或SB203580(p38 MAPK特异性抑制剂)干预.采用免疫细胞化学法观察p38 MAPK蛋白的表达情况;Westernblotting检测p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白(p-p38 MAPK、p-CREB1)的表达;RT-PCR榆测TGF-N和FN mRNA的表达;放免法测定细胞上清液中层黏连接蛋白(LN)和Ⅳ型胶原的含量. 结果 与低糖组、低糖+甘露醇组相比,高糖刺激可使p38 MAPK蛋白发生核转移,p-p38 MAPK、p-CREB1表达明显上调,TGF-β1和FN mRNA的表达增强,LN和Ⅳ型胶原含量增加.SB203580能明显抑制p38 MAPK蛋白的核转移,降低p38 MAPK和CREB1的磷酸化,并抑制TGF-β1和FN mRNA表达,使LN和Ⅳ型胶原的分泌减少. 结论 高糖状态激活p38 MAPK信号途径参与了高糖诱导的肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌.     

延肾制剂对系膜细胞产生ICAM-1和VCAM-1的影响

 目的观察中药复方制剂延肾(以下简称延肾制剂,YSH)对重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)刺激后体外培养的人肾小球系膜细胞产生细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion moleculeI,ICAM-1)和血管细胞粘附分子-1(Vascular cell adhesion molecule,VCAM-1)的影响,冀以从细胞生物学水平探讨延肾防治慢性肾功能衰竭(Chronic renal failure,CRF)的作用机制.方法采用双抗夹心ELISA法,分别加入重组rhIL-1β及rhIL-1β+YSH大鼠血清.观察体外培养的人肾小球系膜细胞在rhIL-1β刺激后,ICAM-1和VCAM-1的生成及YSH对ICAM-1和VCAM-1生成的影响.结果 rhIL-1β可明显刺激人肾小球系膜细胞产生ICAM-1和VCAM-1,YSH大鼠血清对rhIL-1β刺激后人肾小球系膜细胞所产生的ICAM-1和VCAM-1有抑制作用,其抑制程度与药物浓度有一定的量效关系.结论延肾对rhIL-1β刺激后肾小球系膜细胞所产生的ICAM-1和VCAM-1有明显的抑制作用,提示YSH抑制系膜细胞自分泌ICAM-1和VCAM-1是预防肾小球硬化发生发展的重要作用机制之一.     

延肾口服液对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖及产生白细胞介素-8的影响

 目的观察具有补气、活血、化浊作用的中药复方延肾口服液(以下简称延肾)对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖及产生白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)的影响,从细胞生物学水平探讨延肾防治慢性肾功能衰竭(Chronic renal failure,CRF)的作用机制.方法采用MTT比色法和双抗夹心ELISA法,观察延肾大鼠血清对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖和IL-8生成的影响.结果脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)可明显刺激人肾小球系膜细胞增殖和产生IL-8,延肾大鼠血清对LPS刺激后人肾小球系膜细胞增殖和产生IL-8有抑制作用,其抑制程度与药物浓度有一定的量效关系,即随药物浓度的增加对系膜细胞增殖和产生IL-8的抑制率也相应增加.结论延肾对LPS刺激后肾小球系膜细胞增殖和产生IL-8有明显的抑制作用,提示延肾抑制系膜细胞增殖和自分泌IL-8是预防肾小球硬化发生发展的重要作用机制之一.     

PTEN编码蛋白对TGF-β1刺激大鼠肾成纤维细胞分泌ColⅣ、FN的抑制作用

目的 观察PTEN基因编码蛋白对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激大鼠肾成纤维细胞分泌Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)的影响.方法 用重组PTEN腺病毒转染体外培养大鼠肾成纤维细胞,实验分为4组,对照组,TGF-β1组(给予TGF-β1刺激),PTEN TGF-β1组(Ad-PTEN转染后给予TGF-β1刺激)和GFP TGF-β1组(Ad-GFP转染后给予TGF-β1刺激).倒置荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,RT-PCR检测PTEN mRNA表达.转染36h后TGF-β1体外刺激,TGF-β1刺激24h后ELISA法检测细胞上清中ColⅣ、FN水平.结果 PTEN腺病毒转染后可见明显绿色荧光蛋白表达,PTEN mRNA表达增多.TGF-β1组及GFP TGF-β1组较对照组ColⅣ、FN分泌量明显增多,PTEN TGF-β1组较TGF-β1组及GFP TGF-β1组ColⅣ、FN分泌量明显降低(P＜0.05).结论 PTEN基因编码蛋白能抑制TGF-β1刺激所致大鼠肾成纤维细胞分泌ColⅣ、FN,故可能具有抑制残肾纤维化、延缓残肾毁损速度的作用.     

低密度脂蛋白对鼠肾小球系膜细胞TGF-β mRNA表达的影响

 目的 观察低密度脂蛋白(LDL)对鼠肾小球系膜细胞TGF-βmRNA表达的影响,以进一步探讨脂质在肾小球硬化形成中的作用机制.方法 运用Northern blot杂交技术并结合计算机图像分析,观察LDL刺激培养的鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖过程中,系膜细胞TGF-β mRNA表达的动态变化.结果 随着LDL浓度的升高,MC TGF-β mRNA表达呈上升趋势,在LDL为150 μg/ml,表达最强,LDL浓度为200 μg/ml,表达有所减弱.当LDL浓度为150 μg/ml以不同时间刺激MC时,MC TGF-β mRNA的表达呈时间依赖方式增加.结论 脂质不但能直接影响系膜细胞增殖、损伤和基质增多,导致肾小球硬化的形成及发展,而且通过影响系膜细胞表达TGF-β mRNA增强,使胞外基质成分过量聚积,间接介导肾小球损伤.     

不同浓度葡萄糖对大鼠间皮细胞增殖及细胞外基质产生的影响

观察了不同浓度葡萄糖对膜腹间皮细胞增殖和产生细胞外基质的作用，发现：①不同浓度的高渗葡萄糖可以抑制大鼠腹膜间皮细胞的增殖，引起间皮细胞的死亡，增强层粘连蛋白和Ⅳ型胶原的产生；②葡萄糖浓度与在此环境下培养的活细胞百分比呈负相关，但与层粘连蛋白的产生呈正相关，且活细胞百分比与层粘连蛋白的产生呈负相关。提示：培养液中葡萄糖的浓度在大鼠腹膜间皮细胞的增殖和细胞外基质的产生中起重要作用。     

性激素对肾小球系膜细胞增殖和胶原合成的影响

肾小球肾炎和高血压性肾小球硬化所致终末期肾衰 ,男性发病率高于女性[1] 。正常女性体内雌激素主要是雌二醇 (Ｅ2 ) ,其效能最强。雌酮 (Ｅ)和雌三醇(Ｅ3)多为Ｅ2 代谢产物。正常男性体内雄激素主要为睾酮 (Ｔ)。肾小球硬化包括细胞增殖和细胞外基质合成。本实验观察了Ｅ2 和Ｔ对体外培养大鼠肾小球系膜细胞 (ＭＣ)增殖和胶原合成的影响 ,并观察Ｅ和Ｅ3对ＭＣ增殖的影响。材料与方法雄性ＳＤ大白鼠 ,6～ 8周龄 ,15 0～2 0 0ｇ,由河南医科大学动物实验中心提供 ;3Ｈ ＴｄＲ ,中国原子能科学研究院提供 ;Ⅳ型胶原 (Ｃ Ⅳ )、层粘蛋白 (ＬＡＭ…     

高糖促进肾小球系膜细胞纤维连接蛋白合成的实验研究

为观察高糖状态下人类肾小球系膜细胞（GMC）增殖及纤维连接蛋白（FN）合成情况，体外培养GMC，以噻唑蓝掺入法（MTT）和细胞计数观察GMC增殖，用RT－PCR及双抗夹心ELISA方法检测FN的基因及蛋白质水平变化。结果发现，高糖对GMC增殖有抑制作用，对FN的合成呈浓度及作用时间依赖性增高。提示高血糖在糖尿病肾病的发生发展过程中起重要作用。     

高糖促进肾小球系膜细胞纤维连接蛋白合成的实验研究

目的 观察高糖状态下肾小球系膜细胞（GMC）增殖及纤维连接蛋白（FN）合成情况。方法 采用体外GMC培养,噻唑蓝（MTT）掺入法和细胞计数观察GMC增殖,用RT－PCR及双抗夹心ELISA方法检测FN的基因及蛋白质水平变化。结果 高糖对GMC增殖有抑制作用,对FN的合成呈浓度及作用时间依赖性增高。结论 高血糖在糖尿病肾病的发生发展过程中起重要作用。     

抑制整合素连接激酶(ILK)表达对大鼠肾小球系膜细胞细胞问隙连接蛋白43表达的影响

目的 研究抑制整合素连接激酶(ILK)表达对大鼠肾小球系膜细胞(RMC)细胞问隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响.方法 将大鼠肾小球系膜细胞分为RMC组(n=6)、ILK-con siRNA转染组(n=6)和ILK-siRNA转染组(n=6).合成抑制ILK基因的siRNA,待细胞长至60%融合后,ILK-siRNA转染组和ILK-con sLRNA转染组分别用脂质体转染ILK-siRNA或ILK-con siRNA,RMC组仅加入脂质体,24h后收集细胞,提取总蛋白和总RNA,用RT-PCR和Western blotting观察ILK和Cx43 mRNA和蛋白的表达.转染后继续培养24、48、72h,MTT法检测细胞活力.结果 与RMC组和ILK-con siRNA转染组比较,ILK-siRNA组ILK mR-NA和蛋白的表达均下降30%～50%(P<0.05,P<0.01),Cx43 mRNA水平增加30%～40%(P<0.05),Cx43蛋白水平增加60%～70%(P<0.01).应用ILK-siRNA转染系膜细胞后24、48、72h,细胞活力均显著高于RMC组和ILK-con siRNA转染组(P<0.05,P<0.01).结论 抑制ILK途径可上调肾小球系膜细胞Cx43的表达,增强细胞活力;Cx43的调节可能是部分通过ILK途径实现的.     

Variations in Angles of Gait in Running

Variations in angles of gait are common and can cause injuries such as shinsplints. Stretching exercises and physical therapy can be used for tight or weak muscles.     

我院2006年肿瘤病区抗肿瘤药应用分析

目的:了解2006年我院肿瘤病区抗肿瘤药物应用情况,预测其发展趋势,为临床合理用药提供理论依据。方法:对我院肿瘤病区应用抗肿瘤药物的销售金额、DDD费用、DDDs、进行统计分析。结果:2006年我院肿瘤病区抗肿瘤药物销售金额列前三位的品类为多西他赛(15.6%)、易瑞沙(11.64%)和奥沙利铂(8.6%)。DDDs列前三位的品种是赛格恩(12.53%)、顺铂(10.34%)和艾恒(9.37%)。结论:进口化疗药物昂贵,应加快国产化疗药物及化疗辅助药物的研制。我院在抗肿瘤治疗中较多使用疗效确切、副作用小、价格便宜的国产抗肿瘤药物,在合理用药和保证疗效的前提下降低了治疗费用。     

游离NgR促进新生大鼠背根神经节突起体外生长

目的 观察生物合成的游离NgR对新生大鼠原代背根神经节(DRG)神经元突起生长的影响.方法 以ViraPowerTM慢病毒将NgR(310)ecto基因转染人培养的骨髓基质细胞,收集培养上清获得游离NgR.分离新生大鼠DRG神经元并分为两组,对照组直接将神经元种植到经含中枢神经系统(CNS)髓鞘蛋白包被的培养皿中培养;实验组先将骨髓基质细胞培养上清加入含CNS髓鞘蛋白的培养皿中,孵育4 h后再植入DRG神经元.两组细胞均在培养24 h后固定,进行βⅢ-tubulin免疫组织化学染色,图像观察神经元及其突起生长情况.结果 基因修饰的骨髓基质细胞,转染后48 h间接免疫荧光的方法检测可见胞浆内荧光表达.种植24 h后对照组DRG细胞很少有突起长出;而实验组DRG细胞中60%的神经元长出突起,且突起较长.结论 游离NgR能够竞争性结合脊髓损伤后局部分泌的轴突生长抑制因子,从而保护生理性NgR,可能是促轴突再生和脊髓功能恢复的一种新策略.     

经济管理科在医院微机联网中的作用

根据全军卫生工作安排,军队医院在近3年内陆续实施微机联网工作。我院是军区首家试点并正式开通的单位,经管科在全院微机联网过程中发挥了参与、协调和推动作用,保证了网络数字、信息的准确性、可行性。经过近1年的运行观察,发挥了良好的作用。我们的具体作法是:     

Characterization of in vivo chemistry of cations in the heart

A variety of laboratory procedures can be used to define the chemistry and pharmacokinetics of myocardial cationic imaging agents. These methods are utilized to define the in vivo chemistry of cationic heart agents, in order to understand the kinetics and mechanisms of: tissue and cellular transport, subcellular distribution, and intracellular localization. Transport across cell membranes can be active, passive or facilitated. Studies performed in erythrocytes, heart cells, slices and isolated perfused hearts using methods for separation of metabolites have shown a high degree of myocardial specificity for [99mTc]hexakis alkyl isonitrile by an uptake mechanism different from 201Tl. These studies demonstrate the importance of in vivo chemistry and pharmacokinetics in the development of new radiopharmaceuticals.