RP-HPLC测定四川产红毛五加药材茎皮及叶中不同采收期绿原酸的含量

目的:分析四川产红毛五加药材中不同采收期茎皮及叶中绿原酸含量的差异。方法:测定四川产红毛五加茎皮药材及叶中不同采收期绿原酸的含量。色谱条件:KromasilC₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃。流动相乙腈-2‰磷酸水溶液(10∶90),检测波长327nm,流速1mL·min^-1。结果:绿原酸在0.355～3.55μg与峰面积具有良好的线性关系;回归方程为Y=2.11×10⁶X-2.24×10⁵,r=0.9995(n=6);平均回收率为100.1%,RSD为0.9%(n=9)。结果:红毛五加茎皮药材花期(6～7)月绿原酸含量较低,其苗期(3～4月)、果期(8～9月)的含量均保持在比较高的水平;同采收时间的叶中绿原酸高于茎皮。结论:从成分绿原酸的角度考虑,建议川产红毛五加叶可作为绿原酸提取新的源料,茎皮药材不在花期(6～7月)采收。     

赤雹根中Dubioside F的分离纯化及含量测定

目的: 分离纯化赤雹根中的dubioside F,鉴定结构并测定不同产地赤雹根中dubioside F的含量. 方法: 通过硅胶柱色谱分离纯化,以CHCl₃-MeOH-H₂O (14:7:1)为洗脱剂,得到单体化合物,根据其理化性质和波谱数据,鉴定该单体化合物为dubioside F;再以分离得到的dubioside F为对照品,测定不同产地赤雹根药材中dubioside F的含量.采用Discovery-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-水(24:76),流速1.0 mL·min^-1,检测波长200 nm. 结果: dubioside F在0.98~24.5 μg线性关系良好(r=1),平均回收率96.96%, RSD 1.1%. 结论: 首次对赤雹根中单体皂苷类成分(dubioside F)进行含量测定,测定方法简便、快速、可靠.不同产地种植、野生的赤雹根药材dubioside F的含量,分别以吉林省和龙市、河北省宽城县出产的为最高.可为进一步的赤雹根药材质量控制的研究提供依据.     

基于HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定结合化学计量学的怀牛膝质量评价＊

目的 本实验采用HPLC方法建立来自3个产地15批怀牛膝药材的指纹图谱，并对β-蜕皮甾酮，25R-牛膝甾酮，25S-牛膝甾酮进行含量测定，同时通过化学计量学的方法对15批怀牛膝进行质量评价。方法 选用Waters SunFire C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，检测波长280 nm，以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱，流速为1.0 mL·min^-1，柱温25℃，进样量10 μL。以β-蜕皮甾酮峰为参照峰，运用软件《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对15批怀牛膝药材进行相似度分析，使用Metabo Analyst 5.0网站进行聚类热图分析，使用SIMCA 14.1软件进行PCA和PLS-DA分析。结果 标定了31个共有指纹峰，指认了3个已知成分，并对其进行含量测定，化学计量学分析结果将15批怀牛膝药材样品分为3类，并且筛选了不同产地间潜在的差异性成分。结论 该方法具有良好的精密度、重复性以及稳定性，可为怀牛膝的质量评价与控制提供科学依据及参考。     

藏药桃儿七HPLC指纹图谱产地识别及质量评价

目的： 建立藏药桃儿七的HPLC指纹图谱,比较不同产地桃儿七成分含量差异,进行产地识别,综合评价桃儿七质量。方法： 采用HPLC,Agilent Zorbax SB C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,乙腈-0.04%甲酸水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,对16批桃儿七样品进行指纹图谱测定,并使用主成分分析和聚类分析对指纹图谱进行产地识别和质量评价。结果： 建立了桃儿七药材指纹图谱;对16批样品相似度比较,标定了29个共有峰;各产地样品成分组成基本相同,但是含量存在一定差异;对各样品进行化学模式识别,根据主成分得分,产自西藏的药材质量最好。结论： 该方法能够用于桃儿七药材综合评价及质量控制。     

厚朴花浸出物测定方法的建立与不同产地药材质量评价

目的 建立厚朴花超高效液相色谱法（UPLC）特征图谱与浸出物的测定方法,筛选最佳厚朴花药材产地,为厚朴花药材质量评价提供依据。方法 采用冷浸法与热浸法为提取方法,以水、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇为提取溶剂提取厚朴花浸出物,测定浸出物含量。采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）;流动相为乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;柱温30 ℃;流速0.35 mL·min^–1;检测波长300 nm,测定厚朴酚与和厚朴酚含量。以厚朴花浸出物含量、厚朴酚与和厚朴酚总含量、特征图谱共有峰总峰面积作为综合评价指标,优选厚朴花浸出物的测定方法,并通过测定不同产地厚朴花浸出物与特征图谱,评价不同产地厚朴花药材的质量。结果 建立了厚朴花药材的UPLC特征图谱共有模式,标定了12个共有峰,不同产地10批药材总峰面积为13.18~43.66,均值为24.21。建立了厚朴花药材的含量测定方法,不同产地10批药材厚朴酚与和厚朴酚总质量分数为0.31%~0.80%,均值为0.48%;厚朴花浸出物测定方法选择热浸法,75%乙醇为溶剂,不同产地10批药材浸出物质量分数为16.28%~24.36%,均值为20.42%。结论 建立的厚朴花浸出物测定方法稳定、可靠,为厚朴花浸出物限度的制定提供了参考;以四川省产的厚朴花药材质量为佳,对厚朴花药材质量评价及生产利用具有一定的参考意义。     

多波长融合玄参饮片HPLC指纹图谱研究

目的：建立玄参多波长融合HPLC指纹图谱,为玄参的质量提供新方法。方法：采用多波长融合HPLC测定不同产地玄参饮片。色谱条件：Thermo C₁₈柱,乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱。多波长检测（0~5 min为230 nm,5~13 min为210 nm,13~23 min为320 nm,23~50 min为278 nm,流速1 mL·min^-1）,柱温30 ℃。结果：建立了多波长融合玄参饮片HPLC指纹图谱共有模式,确认25个共有峰,标定其中6个峰,10批玄参样品相似度均>0.90。结论：建立的指纹图谱色谱峰数较多,色谱信息量大,适用于玄参饮片的质量评价。     

瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱

目的：建立瓜蒌皮药材的 HPLC 指纹图谱。方法：采用 Agilent TC-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.2%冰乙酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长 260 nm,流速 0.8 mL·min^-1,柱温 25℃,进样20 μL。结果：建立了瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱,方法学考察结果良好,确立了13个共有峰,其中5个共有峰得到确认,10批瓜蒌皮样品指纹图谱的相似度均>0.9。结论：该方法稳定性、重复性好,建立的指纹图谱可为瓜蒌皮的质量评价提供依据。     

不同产地和不同品种枸杞子中多糖成分测定

目的 通过比较19批不同产地宁夏枸杞果实和3批北方枸杞果实的总糖含量、重均相对分子质量（M_w）及单糖组成,探索枸杞中多糖成分的差异性。方法 采用水提醇沉法获得22批枸杞的粗多糖成分,以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定总糖含量;Shodex SB-806 HQ型凝胶柱和Shodex SB-804 HQ型凝胶柱串联,流动相为0.1%氯化钠溶液,柱温为40 ℃,柱流速为0.5 mL·min^–1,采用凝胶渗透色谱-示差检测器-多角度激光光散射法（GPC-RI-MALLS）测定M_w及分布系数;选择Zorbax Eclipse XDB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液,柱温为35 ℃,流速为1.0 mL·min^–1,检测波长为250 nm,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化-高效液相色谱-光电二极管阵列检测器（HPLC-PDA）测定单糖组成,同时建立单糖组成指纹图谱。结果 22批枸杞样品中粗多糖成分的质量分数为3.24%~8.66%,M_w为0.733×10⁶~3.191×10⁶;多糖成分均由9种单糖组成,其中阿拉伯糖含量最高。结果显示,不同产地宁夏枸杞粗多糖结构较为一致,但北方枸杞中多糖成分在结构上与宁夏枸杞存在较明显差异,主要体现在M_w、色谱峰面积比及半乳糖醛酸含量上。结论 宁夏枸杞和北方枸杞的粗多糖成分在结构上有较大差异,且通过建立的单糖组成及M_w测定方法可以对其进行有效区分,可为枸杞质量标准完善及枸杞资源评价提供方法和思路。     

毛鸡骨草药材的HPLC指纹图谱

目的：建立毛鸡骨草药材的指纹图谱,为控制和评价药材质量提供依据。方法：用高效液相色谱法,Lichrospher C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相甲醇-0.1%三氟乙酸（35：65）,流速0.8 mL·min^-1,检测波长272 nm,柱温室温。测定10批毛鸡骨草药材的指纹图谱,并进行相似度比较。结果：建立了毛鸡骨草药材的HPLC指纹图谱,确定9个共有峰,利用对照品指认其中4个峰。10批毛鸡骨草药材的相似度>0.98。结论：建立的方法快速、准确,为评价毛鸡骨草药材的质量提供参考。     

UPLC同时测定野菊花中蒙花苷和绿原酸含量

目的: 建立UPLC同时测定不同产地野菊花中蒙花苷和绿原酸含量的分析方法。方法: 采用超高效液相色谱系统, C₁₈ 色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm),流动相乙腈-0.1%磷酸水,以0.2 mL·min^-1的流速进行梯度洗脱,检测波长326 nm,柱温25℃。结果: 蒙花苷在3.0~120.0 mg·L^-1线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率99.43%,RSD 1.54%(n=6);绿原酸在0.48~19.2 mg·L^-1线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率98.67%,RSD 2.13%(n=6)。结论: UPLC法分析速度快,重复性好,结果准确且高效、简便,可用于野菊花中蒙花苷和绿原酸含量的测定。     

氮、磷、钾和微量元素对栽培刺五加药材质量影响的研究

目的探讨植物生长营养元素对刺五加药材质量的影响。方法生长季节叶面喷施大量元素N、P、K及微量元素Fe2+、Mn2+、Cu2+、Zn2+和B,采用高效液相色谱法测定营养元素对刺五加根和茎中刺五加苷B、刺五加苷E、绿原酸、异秦皮啶含量。结果磷元素有增加刺五加苷B的趋势;磷、钾、铁、铜和硼可提高刺五加根中苷E的含量,且又随用量增加有提高的趋势,但对刺五加茎的影响较小。结论本研究可为刺五加GAP规范化种植和栽培提供参考。     

刺五加根茎活性成分与生态因子的相关性

目的：确定影响刺五加根茎品质的生态因子,为刺五加野生抚育和栽培提供依据。方法：采用高效液相色谱法测定我国东北三省10个产地30个种群根茎中刺五加苷B、刺五加苷E、绿原酸、异秦皮啶含量,应用偏最小二乘回归分析法对所得数据与温度、地形、光照、水分等7个生态因子进行相关性分析。结果：影响刺五加苷B的含量最大生态因子是纬度、年降水量、年平均气温、日照时数和七月最高气温;各种生态因子对刺五加苷E的含量影响差异不大;影响绿原酸的含量最大生态因子是日照时数、七月最高气温、坡度;影响异嗪皮啶含量最大的生态因子为坡度、七月最高气温、年平均气温、纬度和年降水量。综合各生态因子的作用,对野生刺五加根茎品质的影响较大的生态因子为日照时数、坡度、七月最高气温。     

不同产地种质和环境对刺五加药材质量影响的研究

目的：探讨种质和产地环境对刺五加药材质量的影响。方法：将我国东北11个不同产区种质种植在同一产地、同一产地种质种植11个不同产地,采用高效液相色谱法以刺五加苷B和刺五加苷E的含量为指标评价不同刺五加药材质量。结果：同产地不同种群的种质对刺五加药材质量的影响较大,而不同产地种质对药材质量影响较小;刺五加质量受环境影响较大,存在适宜产地的边缘效应。结论：在黑龙江省北部和辽宁省南部山区种植刺五加在某种程度上可提高药材质量。     

不同性别类型刺五加根茎和茎有效成分季节积累规律的研究

目的评价不同性别类型刺五加根茎和茎有效成分季节积累规律,从而确定出优质药材性别类型和最佳采收期。方法采用RP-HPLC色谱法检测刺五加苷B、绿原酸及刺五加苷E和异嗪皮啶含量。结果不同性别类型刺五加的有效成分含量季节积累规律相似。长花丝刺五加中刺五加苷B、刺五加苷E和绿原酸含量大于短花丝刺五加,特别在花期前(7月中旬)表现更加明显。异嗪皮啶的含量相反,短花丝类型高于长花丝类型。结论长花丝刺五加优于短花丝刺五加,春季和秋季活性成分含量较高。     

胶束电动毛细管电泳同时检测刺五加中紫丁香苷及绿原酸的含量

 目的建立简单、快速且能同时分离测定刺五加中紫丁香苷、绿原酸含量的胶束电动毛细管电泳法。方法采用胶束电动毛细管电泳法,缓冲体系为100mmol·L^-1 NaH₂PO₄-100mmol·L^-1 Borax-100mmol·L^-1 SDS-双蒸水(6.25∶43.75∶37.5∶12.5,pH9.25),熔融石英毛细管柱(25μm×45cm),分离电压为16kV,检测波长为254nm,进样时间为25s,进样高度10cm。结果紫丁香苷、绿原酸在0.0625～2.0000,0.2500～8.0000g·L^-1与峰面积线性关系良好,线性方程依次为:Y=112904ρ+1645.1(r=0.9999),Y=98191ρ-165.11(r=0.9999);样品回收率分别为100.78%和99.56%;两种成分含量以刺五加根中最高。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,可用于刺五加药材的质量控制,不同部位两成分均存在一定的差异。     

刺五加中紫丁香苷的制备及其含量测定

目的:首先对刺五加中有效成分紫丁香苷进行了提取分离和结构鉴定,自制定量用的紫丁香苷标准品。方法:建立了刺五加中紫丁香苷的反相高效液相色谱定量法:以甲醇-乙腈-水-冰醋酸(14∶1∶85∶1,v∶v∶v∶v)为流动相,检测波长270nm。结果:紫丁香苷在1.24~31.0μg/mL质量浓度内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为100.1%(RSD 2.2%)。结论:该法简便快速,结果准确可靠。该方法可作为刺五加质量控制的手段之一。     

刺五加根茎活性成分与生态因子的相关性

目的：确定影响刺五加根茎品质的生态因子,为刺五加野生抚育和栽培提供依据。方法：采用高效液相色谱法测定我国东北三省10个产地30个种群根茎中刺五加苷B、刺五加苷E、绿原酸、异秦皮啶含量,应用偏最小二乘回归分析法对所得数据与温度、地形、光照、水分等7个生态因子进行相关性分析。结果：影响刺五加苷B的含量最大生态因子是纬度、年降水量、年平均气温、日照时数和七月最高气温;各种生态因子对刺五加苷E的含量影响差异不大;影响绿原酸的含量最大生态因子是日照时数、七月最高气温、坡度;影响异嗪皮啶含量最大的生态因子为坡度、七月最高气温、年平均气温、纬度和年降水量。综合各生态因子的作用,对野生刺五加根茎品质的影响较大的生态因子为日照时数、坡度、七月最高气温。     

高效液相色谱法测定川产藏药材红毛五加不同药用部位中腺苷的含量

 目的建立藏药红毛五加药材中腺苷的含量测定方法并比较红毛五加不同药用部位的腺苷含量。方法考察了回流法和超声法的优劣以及提取溶媒、提取次数、超声时间、料液比对腺苷提取率的影响;采用Kromasil C₁₈(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(5:95)为流动相,流速1.0mL·min^-1;柱温25℃;检测波长为258nm。结果腺苷的提取方法为以10倍量的水超声处理40min,提取1次;腺苷在0.07～0.69μg内呈良好的线性关系(r=0.9993),平均加样回收率为98.84%,RSD=0.80%(n=5);红毛五加各药用部位中的腺苷含量分别为:根0.47%,茎皮1.49%,茎刺0.42%,叶未检出。结论本方法简便、准确,重现性好,可用于红毛五加的质量控制,为该药材进一步开发利用提供科学依据。     

铁包金根、茎特征图谱的研究

目的： 建立铁包金根、茎HPLC特征图谱,为该药材质量评价研究提供参考。方法： 采用HPLC构建24批不同产地不同种类铁包金根、茎的特征图谱,通过聚类分析和主成分分析对特征图谱进行化学模式识别。结果： 以11个共有峰为特征指纹信息构建HPLC特征图谱,9批细叶勾儿茶和多叶勾儿茶根为一类,12个细叶勾儿茶和多叶勾儿茶的茎和3个多叶勾儿茶的根聚为一类。结论： HPLC特征图谱的构建为铁包金根、茎的质量评价研究提供参考依据。     

植物-土壤反馈对刺五加幼苗次生代谢产物的影响

目的:研究植物-土壤反馈对刺五加幼苗根、茎、叶次生代谢产物的影响。方法:通过温室盆栽试验,分别对未种植过刺五加的土壤(1组),连续3年种植刺五加的土壤(2组)和多年种植刺五加的土壤(3组),分别种植刺五加1年生幼苗,并对其根、茎、叶的次生代谢产物进行分析。结果:L-苯丙氨酸,原儿茶酸,刺五加苷B,绿原酸,咖啡酸,刺五加苷E,异嗪皮啶,芦丁,金丝桃苷,槲皮素在多年生长刺五加土壤种植,对刺五加幼苗叶和根均有显著性差异,但在茎中绿原酸和刺五加苷E无显著性差异。其中刺五加苷E,异嗪皮啶,芦丁和金丝桃苷在多年生刺五加土壤种植的幼苗叶中未检出。在刺五加幼苗的根中,多数次生代谢产物呈现正反馈;在刺五加幼苗的茎中,咖啡酸,刺五加苷E,金丝桃苷,槲皮素呈现负反馈;在刺五加幼苗的叶中多数次生代谢产物呈现正反馈。结论:植物和土壤在刺五加幼苗生长过程不同部位呈现出不同的反馈情况,整体而言,未种植过刺五加的土壤对刺五加幼苗的次生代谢产物更具优势。研究结果为阐述植物-土壤反馈对刺五加的影响提供研究基础,并为人工栽培刺五加提供了理论依据和技术支持。