JAK2/STAT3通路在大鼠创伤性脑损伤中作用的研究

目的研究JAK2/SAT3在大鼠创伤性脑损伤过程中的作用。方法健康雄性SD大鼠72只,采用随机数字表法分为对照组、创伤组、AG490组;各组依次分为6 h、12 h、24 h、72 h四个亚组;创伤组于规定时间点采用液压冲击法致伤动物,对照组不予致伤;运用Western blot、免疫组化分析各组脑组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达情况;运用Real-time PCR分析各组脑组织TNF-αm RNA、IL-6 m RNA表达情况。结果大鼠创伤性脑损伤后p-JAK2、p-STAT3蛋白在6 h开始升高,72 h时仍处于较高水平,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),给予AG490干预后,其表达显著降低,差异具有统计学意义;脑损伤后6 h可见TNF-αm RNA、IL-6 m RNA少量表达,12 h其表达水平开始增强,72 h仍有少量表达;给予JAK2选择性拮抗剂AG490干预后其表达显著降低,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 JAK2/STAT3信号通路可能参与了创伤性脑损伤的发展过程,阻断该通路可减轻创伤性脑损伤炎症细胞因子的表达。     

JAK2/STAT3/HIF-1α信号通路对脑卒中的影响

信号转导和转录激活因子3(STAT3)是信号转导和转录激活因子的一种,其作用体现在细胞信号的交流和基因的转录等方面,Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/STAT3/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路对脑卒中的影响极为重要。然而,JAK2/STAT3/HIF-1α信号通路在大脑中所起到的具体作用,尤其是在脑卒中之后是保护或是损害,至今仍无定论。该文阐述JAK2/STAT3/HIF-1α信号通路的激活或抑制在脑卒中(特别是脑缺血再灌注)中所发挥的作用,提出脑卒中急性期抑制JAK2/STAT3/HIF-1α信号通路的表达、康复期激动JAK2/STAT3/HIF-1α信号通路的表达、抑制与激动的结合运用可能是今后对JAK2/STAT3/HIF-1α信号通路的研究方向。     

IncRNA HOTAIR通过介导JAK2/STAT3通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制

目的 探究长的非编码RNA( IncRNA )HOX转录反义基因间RNA( HOTAIR )通过介导Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制.方法 前瞻性分析2019年6月至2020年7月三二O一医院收治的接受肾上腺肿瘤手术切除的60例患者,提取人原发性肿瘤和邻近...     

秦艽对佐剂性关节炎大鼠JAK2/STAT3信号通路的调控作用

目的:研究秦艽醇提物抑制佐剂性关节炎(adjuvantinduced arthritis,AA)大鼠及阻断Janus激酶2-信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的可能机制。方法:雄性,SD大鼠,48只,随机分为6组,每组8只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导AA大鼠模型。致炎第12天后,各组给予相应药物,每日1次,连续16d,处死,对大鼠体质量进行监测,并对大鼠进行关节评分;HE染色,对固定部位踝关节进行病理学观察;酶联免疫吸附实验(ELISA)法测SD大鼠血清中IL-6、IL-10和TNF-α的含量;Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)的相对蛋白表达。结果:与模型组相比,秦艽醇提物(2.5、5、10g/kg)组不仅可减轻大鼠关节病理损伤程度,减少血管翳生成,减轻组织增生,还可明显抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达。结论:秦艽醇提物对AA大鼠具有较好的抑制作用,可能通过抑制JAK2及STAT3过度激活磷酸化,即抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白相对表达水平,进而阻断JAK2/STAT3信号转导通路有关。     

IL-6和MMP-9在银屑病皮损检测中意义的研究

目的 研究银屑病患者皮损中IL-6和MMP-9表达水平,阐明其在实验室检测中的意义.方法 采用免疫组化法对20例进行期银屑病皮损标本和20例对照组标本中IL-6和MMP-9的表达量检测并进行比较.结果 进行期银屑病皮损IL-6和MMP-9表达分布分别与对照组相比差异有统计学显著性意义(χ2=36.19,χ2=40.0,P<0.01) ;IL-6和MMP-9的表达与银屑病分级有关(P< 0.01);IL-6和MMP-9的表达之间呈正相关(r=0.984).结论 IL-6和MMP-9可作为进行期银屑病皮损的实验室诊断重要指标之一.     

IL-6/STAT3通路在肺结核患者巨噬细胞免疫中的作用机制

目的 探讨白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路在肺结核患者巨噬细胞免疫中的作用机制.方法 选取2017年10月至2019年10月在武汉市金银潭医院接受治疗的肺结核患者92例(观察组)作为研究对象,同期健康体检者95例(对照组)作为对照,收集受试者空腹外周静脉血,蛋白免疫印迹(Weste...     

lncRNA HOTAIR通过介导JAK2/STAT3通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制

目的探究长的非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义基因间RNA(HOTAIR)通过介导Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)通路调节肾上腺肿瘤细胞增殖和凋亡的机制。方法前瞻性分析2019年6月至2020年7月三二〇一医院收治的接受肾上腺肿瘤手术切除的60例患者,提取人原发性肿瘤和邻近的健康组织,并分别作为病理观察组和对照组。将大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株PC12分为对照组(PC12细胞系)、过表达组(lncRNA HOTAIR过表达转染)和敲低组(shRNA lncRNA HOTAIR转染)。RT-PCR检测lncRNA HOTAIR的mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞增殖能力;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测促炎因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)]水平;蛋白印迹分析JAK2/STAT3、核因子κB(NF-κB)相关通路蛋白的表达。结果病理观察组较健康对照组lncRNA HOTAIR mRNA表达升高(P<0.05)。转染24 h和48 h后,3组细胞增殖率均显著高于转染12 h(P<0.05);对照组和过表达组细胞增殖能力均随转染时间显著增强(P<0.05);转染24 h和48 h后,过表达组细胞增殖数目较对照组显著升高(P<0.05),敲低组细胞增殖数目较HOTAIR过表达组显著降低(P<0.05)。与对照组相比,过表达组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05),敲低组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05),与过表达组相比,敲低组细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及JAK2、STAT3、NF-κB(p65)蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论lncRNA HOTAIR通过上调促炎细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)水平,激活了JAK2/STAT3通路,调节肾上腺肿瘤细胞的增殖和凋亡。     

JAK2/STAT3信号通路在应激性溃疡大鼠胃黏膜炎症反应中的作用研究

目的：探讨Janus激酶2（JAK2）/信号转导与转录激活子3（STAT3）信号通路在应激性溃疡（SU）的胃黏膜炎症反应过程中的作用。方法：选用雄性清洁级SD大鼠96只,随机分为4组,分别为：正常对照组（NC组）、应激性溃疡组（SU组）、抑制剂组（AG490组）、二甲基亚砜组（DMSO组）。建立水浸束缚SU大鼠模型。4组大鼠分别于实验开始后2h、4h、8h、16h各取6只,测定胃黏膜血流量（GMBF）,计算溃疡指数（UI）。观察胃黏膜组织学变化,测定TNF-α、IL-1β、IL-6以及JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3的表达量。结果：SU组GMBF明显低于NC组,而UI明显高于NC组（P〈0.01）;AG490组GMBF明显高于SU组,而UI明显低于SU组（P〈0.01）。通过造模前给予抑制剂AG490,胃黏膜病理学变化明显改善。SU组TNF-a、IL-1β、IL-6以及p-JAK2、p-STAT 3表达量明显高于NC组（P〈0.01）,而AG490组较SU组显著降低（P〈0.01）。结论：JAK2/STAT 3信号通路参与了SU大鼠胃黏膜炎症反应过程,使用JAK2特异性抑制剂AG490可以减轻SU大鼠胃黏膜炎症反应。     

干扰NETO2通过调控JAK2/STAT3信号通路抑制肺腺癌细胞增殖和转移能力

目的 研究神经纤毛及唾样蛋白2(NETO2)在肺腺癌中的表达及临床意义,并探讨NETO2对肺腺癌细胞增殖和转移能力的作用及其机制。方法 采用免疫组化检测NETO2在肺腺癌组织中的表达水平,并分析NETO2的表达与肺腺癌患者临床病理参数及预后的关系。培养肺腺癌细胞A549,随机分为对照组(si-NC组)和实验组(si-NETO2-1组、si-NETO2-2组),分别转染NC siRNA和NETO2 siRNA-1、NETO2 siRNA-2,Western blot检测各组细胞中NETO2蛋白的表达水平;MTS实验和平板克隆实验检测各组细胞的增殖能力;Transwell实验检测各组细胞的转移能力;Western blot检测各组细胞中JAK2/STAT3信号通路蛋白JAK2、pJAK2、STAT3和pSTAT3蛋白表达。结果 免疫组化结果显示,与癌旁组织相比,NETO2在肺腺癌组织中的表达增加(P<0.05),NETO2高表达与肺腺癌患者肿瘤T分期、淋巴结转移和TNM分期均相关(P<0.05),与NETO2低表达的肺腺癌患者相比,NETO2高表达的肺腺癌患者生存预后较差;与s...     

JAK/STAT3通路在瘦素促进肺癌细胞增殖机制中的作用

目的:探讨瘦素在促进肺癌细胞增殖过程中的可能机制,并探讨其在肺癌发生发展中的作用.方法:MTT法检测瘦素对肺癌A549细胞的促增殖作用.流式细胞术检测不同浓度瘦素处理组肺癌A549细胞的增殖率.免疫细胞化学法检测经不同浓度瘦素处理的A549细胞中STAT3、p-STAT3及Bcl-2蛋白的表达.结果:STAT3、p-STAT3及Bcl-2蛋白在A549细胞中均有表达.瘦素处理后的A549细胞中STAT3、p-STAT3及Bcl-2的表达随着处理浓度增加而增强,且100ng/mL瘦素处理组表达增加最明显,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05);瘦素刺激A549细胞24h后增殖效应最明显,且100.ng/mL组G2/M期细胞所占的比例较对照组和10ng/mL组显著增加(P＜0.05).结论:瘦素可能通过JAK/STAT3通路,活化STAT3介导抗凋亡基因Bcl-2的过度表达而使肺癌细胞呈持续增殖.     

CTR9‐mediated JAK2/STAT3 pathway promotes the proliferation,migration, and invasion of human glioma cells

BackgroundCTR9 (Cln three requiring 9) has been reported to be implicated in protein modification and oncogenesis of several human cancers. However, the protein expression and mechanism of CTR9 in glioma progression remain unclear.MethodsWe analyzed mRNA expression of CTR9 and CTR9‐related survival curves in the public database. Then, we detected CTR9 expression in glioma tissues and constructed U251 and U87 cells with stable silencing or overexpression of CTR9. Cell function tests and Western blot were conducted to explore the effects of CTR9 on glioma proliferation, invasion and migration, and the specific mechanism. All the date was presented as means ± SEM. Two‐sample t test and one‐way analysis of variance (ANOVA) were used to identify whether there was a significant difference between each group of data.ResultsWe found that CTR9 was overexpressed in glioma and inversely associated with glioma patient survival. The results manifested that knockdown of CTR9 suppressed the proliferation, migration, and invasion of glioma cells, while overexpression facilitated them. The underlying molecular mechanism may involve the regulation of JAK2/STAT3 pathway by CTR9.ConclusionOur present study indicates that CTR9 is highly expressed in glioma and related to glioma grading and prognosis. CTR9 regulates malignant behaviors of glioma cells by activating JAK2/STAT3 pathway. Therefore, CTR9 may be a promising biomarker for the targeted therapy and prognosis evaluation of glioma.     

IL －6／STAT3信号通路在脓毒症早期大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴中的表达及意义

目的：探讨大鼠脓毒症早期出现的HPA轴过度激活与IL－6／STAT3信号通路的内在联系。方法24只健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（ Control组）、假手术组（ Sham组）、模型组（CLP组）三组。采用盲肠结扎穿孔（CLP）法建立脓毒症模型,术后6 h处死,分离出下丘脑、垂体、肾上腺组织。 RT－PCR检测下丘脑组织CRH、IL－6、STAT3、SOCS3 mRNA水平,垂体组织阿片促黑色素原（ POMC）、IL－6、STAT3、SOCS3 mRNA水平,肾上腺组织 IL－6、STAT3、SOCS3 mRNA水平。结果 CLP组较Control组、Sham组下丘脑组织中CRH、IL－6、STAT3、SOCS3 mRNA表达水平明显增加（P＜0.01）,垂体组织中POMC、IL－6、STAT3、SOCS3 mRNA表达水平明显增加（P＜0.01）,肾上腺组织中IL－6、STAT3、SOCS3 mRNA表达水平明显增加（P＜0.01）。Control组与Sham组各指标比较差异无统计学意义。结论脓毒症早期出现的HPA轴过度激活与IL－6／STAT3信号通路有着密切联系。针对IL－6／STAT3信号通路这一靶点进行干预,有望改善脓毒症状态下HPA轴的过度激活,为脓毒症的治疗提供新的思路。     

STAT3反义寡核苷酸对肺腺癌裸鼠移植瘤辐射增敏的研究

目的：探讨STAT3反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）对肺腺癌裸鼠移植瘤辐射增敏的影响,为提高恶性肿瘤的辐射敏感性提供新的思路和方法。方法建立裸鼠体内肺腺癌移植瘤动物模型,待瘤体直径＞0.5 cm后,瘤内多点注射STAT3 ASODN,给药剂量：15 mg/kg,1次/d,连续2周,给药后2 h联合γ射线局部照射总剂量20 Gy,每次2 Gy,每周5次,连续2周,照射剂量率0.75 Gy/min,定期测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;测量肿瘤质量,计算抑瘤率;记录存活情况,估算生存率,绘制生存曲线,计算总生存期;免疫组化检测肿瘤组织细胞内STAT3蛋白表达变化情况;Western Blot 检测肿瘤组织内 P-STAT3、Bcl-xL、CyclinD1蛋白表达情况。结果反义（antisense,AS）＋照射（irradiation,IR）组肿瘤体积治疗第8天开始明显小于其余各组肿瘤体积（P＜0.05）;AS＋IR组的抑瘤率为68.4%,高于IR组与AS组的之和;AS＋IR组的平均总生存期为（28.38±0.96）d,明显高于IR组及无义（nonsense,NS）＋IR组（P＜0.005）;STAT3蛋白及其下游Bcl-xL、CyclinD1蛋白表达变化明显下降, STAT3蛋白磷酸化水平也降低。结论 STAT3反义寡核酸能够增强肺腺癌裸鼠移植瘤的辐射敏感性,具有良好的放疗增敏剂临床应用开发前景。     

钩吻总碱通过JAK2/STAT3/Survivin通路调控人舌癌细胞株Tca8113增殖、凋亡的作用探讨

目的观察钩吻总碱对人舌癌细胞株Tca8113增殖、凋亡的作用,并探讨其对酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)/Survivin通路的调控作用。方法取人舌癌细胞株Tca8113,培养至对数期,分装至6孔板中,分为对照组、A组、B组和C组,每组设置5个复孔。A组、B组和C组分别加入25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的钩吻总碱处理(20μl),对照组加入等量PBS缓冲液。以倒置显微镜观察72 h后各组细胞形态;以MTT法检测24 h、48 h、72 h后细胞增殖抑制率;以流式细胞仪检测72 h后细胞凋亡率;以RT-PCR检测72 h后JAK2、STAT3、Survivin mRNA相对表达量;以WB检测72 h后IL-6蛋白、JAK2、STAT3、Survivin蛋白表达并计算p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-Survivin/Survivin。结果72 h后,倒置显微镜下观察结果显示对照组细胞紧密,轮廓清晰,贴壁生长状态良好;A组细胞有浮起、变圆,B组和C组可见不同程度细胞壁皱缩和细胞碎片,其中C组变化最为明显,B组次之,A组变化最轻;各组24 h、48 h、72 h后增殖抑制率比较差异均有统计学意义(P<0.05),各组增殖抑制率均随时间延长显著增长,且呈时间依赖性和剂量依赖性;各组72 h后细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05),各组凋亡率均随剂量升高显著增高;各组72 h后JAK2、STAT3、Survivin mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05);各组p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-Survivin/Survivin比较差异均有统计学意义(P<0.05),每两组间比较也可见差异具有统计学意义(P<0.05),其中对照组均最高,A组均次之,B组均稍低,C组均最低;各组IL-6蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论钩吻总碱能够呈剂量依赖性抑制人舌癌细胞株Tca8113增殖、促进凋亡,推测与直接调控JAK2/STAT3/Survivin通路,抑制JAK2、STAT3、Survivin蛋白磷酸化有关。     

慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长的影响

目的观察慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长的影响。方法将pRNAT-shSTAT3重组慢病毒质粒进行包装产生病毒液,测定其滴度,感染大肠癌HT-29细胞,筛选获得阳性细胞株,实时定量PCR和Westernblot检测shRNA对STAT3基因的沉默效率,MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果成功包装慢病毒,其病毒悬液的滴度为2×107TU/mL。病毒液感染大肠癌HT-29细胞,经G418筛选获得稳定细胞株,实时定量PCR和Western blot结果分别显示HT-29细胞STAT3mRNA表达和蛋白明显减弱,表达量分别为(16.9±2.1)%、(18.8±2.4)%(P0.01)。MTT结果显示STAT3基因沉默后的大肠癌HT-29细胞生长明显减慢,G0/G1期细胞占(68.73±2.88)%,S期细胞占22.93±1.10%,与对照组相比差异显著(P0.01)。结论慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长有明显的影响,细胞生长速度明显减慢,细胞阻滞于G0/G1期。     

STAT3、MMP-2在肝细胞癌中的临床意义

目的:探讨STAT3与MMP-2在肝细胞癌中的临床意义。方法:应用免疫组化法检测肝细胞癌组织及癌旁组织中STAT3与MMP-2的表达,分析STAT3、MMP-2与病理分化、TNM分期、生存期的关系。结果:STAT3与MMP-2在肝癌组织表达阳性率分别为71.4%、73.2%,癌旁组织中阳性率分别57.1%、80.4%,肝癌组织STAT3与癌旁组织中MMP-2的表达呈正相关(r=0.483,P<0.01)。结论:STAT3与MMP-2参与肝癌的发生发展过程,可作为评估肝细胞癌转移、侵袭及术后预后的指标。     

表皮生长因子受体和RAS/MAPK信号通路相关蛋白在肺腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨 RAS／MAPK信号传导通路与肺腺癌临床病理特征以及预后的关系。方法采用免疫组织化学法和蛋白印迹法（Western blot）检测23例肺腺癌患者及9例非癌肺疾病患者组织标本中表皮生长因子受体（EGFR）、磷酸化信号转导转录因子1（pSTAT1）和磷酸化 RAS／MAPK信号通路活化蛋白（pERK1／2）的表达。结果EGFR和活化蛋白 pERK1／2在23例肺腺癌患者中表达率分别为73．9％（17／23）和65．2％（15／23）,半定量分析显示肺腺癌组pERK1／2蛋白水平显著高于非癌组（1．303±0．656）％ vs （0．262±0．213）％,且pERK1／2表达与肺腺癌患者的病理分级程度和有无淋巴结转移之间差异有统计学意义（χ2＝12．049和6．626,均P ＜0．05）,肺癌不同 TNM分期间 pERK1／2表达差异无统计学意义;STAT1在23例肺腺癌患者肺组织中阳性表达率为30．4％,与非癌组比较差异无统计学意义。结论 RAS／MAPK信号传导通路的激活与肺腺癌的发生、发展和转移密切相关,可作为评估肺腺癌进展的有价值的指标。