抗小鼠IgA血清的研制

<正> 抗小鼠IgA血清是鉴定鼠单克隆抗体Ig类属的必需试剂之一,国外均利用小鼠骨髓瘤细胞培养物或癌腹水为原材料,提取抗原制备相应抗血清。但国内缺乏这类细胞,若用小鼠血清为原材料,其中IgA含量少,纯化较困难。本文报道选用分泌小鼠IgA类抗体的杂交瘤细胞培养物,经纯化小鼠IgA后免疫羊制成相应的抗血清。以期提供系列参考试剂。     

抗人IgA单克隆抗体的特性分析和初步应用

用常规免疫法和脾内直接注射抗原(SIgA)法免疫小鼠,平行作细胞融合实验,建立4株分泌抗人IgA McAb杂交瘤细胞株,所得McAb对人IgA有较高特异性和抗体效价,经免疫印染法表明对α重链呈特异性。用抗原竞争抑制ELISA和ELISA添加试验分析McAb的抗原结合位点,均表明McAb A4与A1b、A3b、A9针对不同的抗原位点。用于检测EB病毒VCA和EA的IgA抗体,显示满意的特异性和敏感性,这将为有关试剂的生产提供稳定的抗体来源。     

十二指肠溃疡时的血清抗IgA抗体

血清抗IgA抗体常见于选择性IgA缺乏症患者,但在正常对照者或其他疾病患者中罕见。Wilson报导应用不敏感的血凝方法在十二指肠溃疡患者中发现抗分泌性IgA抗体,促使作者进行此项研究。作者研究了200例内窥镜检查确诊的十二指肠溃疡患者、192名对照者和31例选择性IgA缺乏症(IgA     

CCR9/CCL25介导小鼠经生殖道hCGβ避孕疫苗粘膜免疫后B细胞归巢

目的：探讨hCGβ粘膜避孕疫苗体液免疫的分子机制。方法：分别用1010个重组乳酸杆菌Lb.pIlac、Lb.pIlac-hCGβ经小鼠生殖道粘膜途径免疫6～8周龄BALB/c小鼠,3周后相同剂量加强免疫1次。间接ELISA检测加强免疫后2周阴道灌洗液中抗hCGβIgG和IgA抗体滴度;ELISPOT检测分泌抗hCGβIgG和IgA抗体分泌细胞数;RT-PCR筛查小鼠子宫B细胞上18种趋化因子受体和相关趋化因子CCL25;FCM和ELISA分析CCR9/CCL25的表达。结果：经小鼠生殖道粘膜接种1010Lb.pIlac-hCGβ可在生殖道局部诱导产生抗hCGβIgG和IgA抗体,且以IgG抗体为主;局部存在抗hCGβIgG和IgA抗体分泌细胞,而以IgG抗体分泌细胞为主;粘膜免疫后,小鼠生殖道局部B细胞上CCR9表达增高,粘膜局部相应配体CCL25表达亦增高。结论：重组乳酸杆菌活疫苗Lb.pIlac-hCGβ经小鼠生殖道粘膜免疫可诱导有效的免疫应答;粘膜局部CCR9/CCL25可介导B细胞归巢至生殖道局部,这可能增强hCGβ粘膜避孕疫苗的避孕效果。     

鼠疫组分疫苗诱导小鼠体液免疫应答研究

目的通过检测鼠疫组分疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫应答,对其免疫原性进行评价。方法将小鼠随机分成4个实验组,免疫后5周内眦采血,检测血清中抗F1抗原和rV抗原IgG及IgA抗体;充分暴露气管,沿气管上端剪一楔形口,用PBS冲洗肺泡制备肺冲洗液,检测肺冲洗液中抗F1抗原和rv抗原IgG及IgA抗体。结果血清中可产生较高效价的抗F1抗原和rV抗原IgG抗体以及较低效价的抗F1抗原IgA抗体。肺冲洗液中可检测到抗F1抗原和rV抗原的IgG抗体,但无特异性IgA产生。结论鼠疫组分疫苗能诱导小鼠产生较强的血清抗体应答,肺冲洗液可检测到一定的IgG抗体,该疫苗有希望成为我国新一代鼠疫疫苗。     

选择性IgA缺乏症血清中抗反刍动物蛋白抗体的探讨

<正> 血清IgA含量的测定对于选择性IgA缺乏症(Selective IgA Deficiency,SIgAD)的诊断具有十分重要的意义。一般采用单向环状免疫扩散试验进行测定,作为试剂的IgA抗体多为马抗人或羊抗人IgA。早在七十年代,Ammann等曾报告,SIgAD患者血清中可存在抗反刍动物蛋白的抗体。WHO     

唾液IgA抗麦醇溶蛋白抗体可作为腹腔病的标志物

腹腔病是小儿吸收不良的重要原因,确诊通常依靠小肠活检.小肠活检不仅有创伤性,而且需暴露于射线,活检结果亦不理想.近年来发现唾液IgA抗麦醇溶蛋白抗体(IgA AGA)可作为成人腹腔病诊断的有益指标,文章评价了唾液IgA AGA测定在小儿腹腔病诊断中的价值.141例儿童病人,年龄6个月～18岁,     

EB病毒衣壳抗原IgA抗体胶体金快速检测法的建立及应用

目的建立了一种快速检测人血清中EB病毒衣壳抗原(VCA)IgA抗体的胶体金免疫层析(GICA)方法。方法预先将EB病毒衣壳抗原(EB-VCA)包被在硝酸纤维素膜上,将鼠抗人IgA抗体免疫金固化在金标垫上。检测时,样本通过层析作用向上流动,样本中的IgA抗体首先被胶体金标记的鼠抗人IgA抗体捕获,其中的EB-VCAIgA抗体再与包被在硝酸纤维素膜上的EB-VCA特异性结合,最后形成包被固相上的EB-VCA与EB-VCAIgA抗体及胶体金标记鼠抗人IgA抗体的三元复合物,通过检测线胶体金沉淀颜色的变化来定性判定样本中是否存在EB-VCAIgA抗体。结果采用自制的GICA试纸条进行了1028份临床标本的盲法检测,并与酶联免疫吸附试验的EB-VCAIgA抗体诊断试剂盒进行比对,结果表明两种试剂检测的总符合率达到94.56%,阳性符合率为93.40%,阴性符合率为95.17%,Kappa值为0.873,两种诊断试剂具备一致的诊断价值。结论用于检测血清中的EB-VCAIgA抗体的GICA试纸条的制备条件已基本建立,其检测结果特异性强、稳定性好、操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备。     

选择性IgA缺陷和丙种球蛋白治疗原发性免疫缺陷患者的抗IgA抗体

作者用酶联免疫吸附试验检测了106例供血者,40例丙种球蛋白治疗的原发性免疫缺陷患者和46例选择性IgA缺陷患者血清中的抗IgA抗体。结果发现5.6％的供血者、17.5％原发性免疫缺陷患者和36.8％选择性     

用重组汉坦病毒NP、GP检测急性期HFRS患者血清中特异性IgG、IgM、IgA抗体

目的 探讨肾综合征出血热(HFRS)患者急性期IgA、IgG、IgM抗体的变化规律。方法 使用套式RT-PCR检测此次病毒感染情况。用杆状病毒表达的汉坦病毒重组核蛋白(rNP)和糖蛋白(rGP)为抗原，使用ELISA方法检测了14例急性期肾综合征出血热患者的6l份系列血清中的IgA、IgG、IgM抗体。结果 14例肾综合征出血热患者中，ll例患者的血清用RT-PCR检出家鼠型汉坦病毒核酸。几乎所有肾综合征出血热患者早期即有IgA、IgM、IgG抗体的迅速升高，抗rNP抗体滴度明显高于rGP。3种抗rNP抗体中早期IgG上升趋势最为显著，IgM与IgA次之，IgM与IgA上升趋势相近，但IgA的滴度明显高于IgM。抗rGP抗体中XgA变化最显著，IgG次之。IgM发病2周内总的变化趋势不明显，但是发病l周内滴度上升趋势明显，而发病第2周内则呈下降趋势。其中l例RT-PCR阳性的患者，早期IgM未测出，IgA的滴度却较高。l例重度患者，抗糖蛋白IgG、IgM和IgA抗体滴度均低于其他患者，且整个急性期一直维持较低水平。结论 肾综合征出血热急性期IgA、IgG、lgM变化具有明显的规律，抗糖蛋白和核蛋白抗体病患规律不同，检测IgM的同时检测IgA，可以提高诊断的准确性。     

抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β_2糖蛋白1抗体在系统性红斑狼疮患者中的意义

目的探讨抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者中的意义。方法分别采用化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附法检测372例SLE患者、80例其他结缔组织病患者及60例健康体检者血清中抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体。同时分析这4个指标与SLE及其病情严重程度的相关性。结果在检测的372例SLE患者组中,抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体的阳性率分别为31.45%、14.52%、10.22%和29.03%,其表达水平分别为(90.39±35.43)U/ml、(41.25±23.16)U/ml、(32.27±15.77)U/ml、(61.42±21.69)U/ml,与SLEDAI积分呈正相关(P0.05)。在80例疾病对照组中,抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体的阳性率分别为7.50%、2.50%、0和1.25%。而在60例正常对照组中,4项检测结果均为阴性。抗IgG型心磷脂抗体阳性与血小板减少、白细胞减少、血栓形成、习惯性流产和肾脏病变有关;抗IgM型心磷脂抗体阳性与血小板减少、白细胞减少、血栓形成和肾脏病变有关;抗IgA型心磷脂抗体阳性与血小板减少、血栓形成和肾脏病变有关;抗β_2糖蛋白1抗体阳性与血小板减少、白细胞减少、溶血性贫血、血栓形成、习惯性流产和肾脏病变有关。结论抗IgG、IgM、IgA型心磷脂抗体和抗β_2糖蛋白1抗体在SLE的发病及病情发展中起到了非常重要的作用,定量和联合检测对SLE的诊断、病情严重程度的评价、判断预后及疗效观察等均有重要的临床意义。     

280例不育症男性精奖浆抗精子抗体IgA与精子参数的研究

目的通过对男性患者精子质量分析,精浆抗精子抗体（antisperm antibodyAsAb）检测,分析精浆中抗精子抗体IgA与精子质量各项参数的相关性的。方法采用禁欲3-7天不育症患者的精液标本检测精子质量,进行精浆抗精子抗体检测.后对检测抗精子抗体阳性抗精子抗体阴性患者分组进行精子质量参数的统计学分析。结果280例不育男性抗精子抗体阳性率为15.35%,其精子的密度/活率活动度/均低于阴性组,两组间存在显著差异（P〈0.01）。结论精浆抗精子抗体IgA与精子密度、活率、精子活力关系密切是男性不育的主要原因之一。     

幽门螺杆菌感染小鼠及其抗原免疫小鼠后体液免疫应答的比较

目的：比较BALB／c小鼠感染H.pylori后以及经H.pylori UreB抗原口服免疫后的体液免疫应答的差异。方法：80只BALB／c小鼠分为感染组和免疫组，感染组灌喂H.pylori小鼠适应株；免疫组灌喂重组H.pylori UreB抗原和佐剂LTB。在试验的0，2，6和10周时每组分别取10只小鼠收集唾液及血液标本，用ELISA法检测抗UreBIgG和IgA抗体，同时采集胃组织作H.pylori感染检测。结果：感染组小鼠在灌喂H.pylori后2，6，10周，感染率均为100％，其血清中抗UreB IgG增高明显，但血清及唾液中均未见IgA的明显升高，；免疫组小鼠在初次免疫后第6，10周后，血清及唾液中抗UreB,IgG和IgA抗体的均显著升高。结论：H.yplori感染BALB／ c小鼠不能诱导其产生明显的特异性黏膜免疫应答，而重组UreB可作为良好的免疫原诱导其产生分泌型IgA抗体。     

三碘甲状原氨酸在PHA刺激T细胞中的作用

人们早已认识到甲状腺激素对淋巴细胞代谢有明显的和微细的影响。作者曾证明,短期有效地阻断鸟类甲状腺激素释放,可抑制对羊红细胞的体液免疫应答。阻断解除后,甲状腺激素释放可引起不正常的抗体合成增加。抗体合成受抑制程度和三碘甲状原氨酸(T3)受硫脲的抑制程度直接相关。这一点在小鼠动物模型中亦得到证实。本文报导     

抗人血清型IgA单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和鉴定

本文使用从IgA骨髓瘤患者血清中提出的IgA,免疫BALB/c小鼠,采用常规细胞融合的方法,获得4株针对IgA的单克隆抗体杂交瘤细胞系。抗体效价培养上清为10~(-2),诱生腹水ELISA测定为10~(-1)～10~(-6),冻存6个月后复苏,腹水效价仍保持10~(-1)～10~(-6)。染色体分析为102,基本上是Sp2/0骨髓瘤细胞染色数68和小鼠脾细胞42之和,说明为杂交瘤细胞。专一鉴定:本McAb经ELISA测定证明,仅与IgA起反应,小鼠亚类测定证明为IgG_1本McAb与     

IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能

目的：研究IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能。方法：用流式细胞仪分析外周血γδT细胞比率并检测血清IgA的水平，以抗TCRγδ单克隆抗体（mAb）固相法，体外选择性地扩增γδT细胞住体外培养的条件下，以抗CD3抗体刺激48h后．用ELISA法测定培养体系中TGF-β1的水平。结果：IgA肾病患暂外周血γδT细胞的比例升高，并与血清IgA的水平呈正相关。用抗TCRγδmAb固相法能获得高纯度的γδT细胞。经抗CD3抗体刺激的IgA肾病患者的γδT分泌TGF-β1的量比正常对照组明显升高。结论：IgA肾病患者的γδT细胞可通过大量分泌TGF-β1参与该病的发生、发展。     

双重染色免疫荧光法评价选择性IgA缺乏症的B细胞成熟度

选择性IgA缺乏症(SIgAD)的发病机理至今尚未十分明确。本研究力图探讨SIgAD患者B细胞分化受阻的阶段。5例患者血清IgA均少于5mg/dl。以RITC抗IgA荧光抗体和FITC抗IgD或IgM荧光抗体采用免疫荧光技术对患者外周血淋巴细胞进行双重染色。以正常成人作为对照测定B细胞的数量和表型。结果显示患者的IgA-B细胞百分数较成人低。大多数TgA-B细胞不同于成人,多同时表达表面IgM、IgD和IgA。这说明SIgAD患者的IgA-B细胞成熟受阻于分化的早期阶段。     

应用放射免疫(双抗体-PEG法)测定儿童血清IgA正常值

<正> 血清IgA约占血清免疫球蛋白总量的20％,不少抗细菌与抗病毒抗体属于这一类型,IgA正常值与个人以往感染史、年龄、环境等因素的影响有关。应用放射免疫分析测定IgA精确度较高,IgA与SIgA有共同的抗原性,放射免疫测定时只需要IgA和SIgA标准不同,用分泌型抗IgA血清能同时检测STgA和血清型IgA,有利于两者结果比较。目前血清IgA放射免疫法测定正常值报道甚少,为此,我们应用放射免疫分析方法对150例正常儿童血清IgA进行了测定。     

甲型肝炎患者肠道内抗HA的IgA抗体的发现

甲型肝炎(HA)病毒在肠道内是否能形成局部免疫,还未有报导。作者报告,从发病早期起每日取HA患者大便作检查材料。结果发现在大便中有抗HA的IgA抗体,证     

IgA肾病动物模型研究进展

根据不同的发病机制IgA肾病动物模型类型较多。应用细菌外膜蛋白或外毒素作为免疫原引起体内IgA复合物增加,另外病毒及真菌外膜成分也可作为免疫原。自发性高IgA血症小鼠具有自发性IgA肾病倾向,利用转基因或基因敲除手段可以制作自发性IgA肾病模型。体内IgA主要在肝脏代谢,肝脏损伤可以作为诱导IgA肾病发病的途径。