AVA炭疽疫苗述评

美国"9.11"事件后紧接着又发生了炭疽恐怖事件,至2001年11月28日,CDC报道共发现11例吸入性炭疽,其中5例死亡;相继发现7例皮肤炭疽,另有5例疑似皮肤炭疽;在这次炭疽热事件中可能有30 000人以上暴露于炭疽孢子.由于炭疽具有以下特点:①炭疽芽孢能通过空气传播感染给人,②吸入性炭疽的高病死率,③与其他生物战剂相比,炭疽芽孢更加稳定,因此炭疽是最可能的生物战剂之一.     

炭疽诊疗新进展

炭疽是由炭疽芽孢杆菌引起的主要发生在食草动物间的一种人兽共患病, 包括皮肤炭疽、胃肠炭疽、肺炭疽、炭疽性败血症、炭疽性脑膜脑炎5种临床类型。现结合近年来发表的炭疽相关文献, 对炭疽的流行病学、临床表现、诊断、治疗等进展进行综述。     

炭疽芽孢杆菌的分离鉴定及其与疫苗株的鉴别诊断

目的建立炭疽芽孢杆菌临床分离株和疫苗株的鉴别诊断方法,为炭疽疫情判断和疾病控制提供依据。方法以炭疽芽孢外壁胶原样蛋白的编码基因bclA和pXO1质粒上的aat序列为靶点,设计引物,通过PCR扩增片段多态性和测序结果分析可变串联重复序列(VNTR)。在生物安全3级实验室分离炭疽菌体蛋白,使用MALDL-TOF/TOF质谱仪进行检测,BioTyper软件分析图谱。结果炭疽分离株与Ⅱ号、无荚膜疫苗株,VNTR分析结果均有不同。2个分离株测定bclA基因序列全长均为1 113 bp,编码的蛋白包含66个GXX重复和5个BclA重复。质谱分析发现,2个分离株菌体蛋白表达峰图基本一致,而2个疫苗株与之相比有很大的差异,许多蛋白的表达明显下调。结论两种方法都能够有效鉴别炭疽临床分离株和疫苗株。     

重组IL-2、IL-6、TNF-α作为血吸虫病疫苗佐剂的研究

目的：观察重组IL－2、IL－6和TNF－α（rIL-2,rIL-6,rTNF-α）作为血吸虫病抗独特型抗体疫苗佐剂的可行性，并探讨其作用机制。方法：日本血吸虫抗独特型抗体NP30主动免疫BALB／c小鼠，分别联用rIL-2,rIL-6和rTNF-α，观察其对小鼠的保护性免疫作用，以及对宿主体液免疫和细胞免疫的影响。结果：rIL-2和rIL-6能明显提高NP30疫苗对小鼠宿主的保护性作用，减虫率和减卵率均明显提高，减虫率从单用NP30的40．6％分别提高到53．5％和55．7％，减卵率从46．5％分别提高到68．7％和69．8％；二者均使血清特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体明显升高；另外，足垫试验结果显示NP30加用rIL-2可引发迟发型变态反应。rTNF-α无增强NP30的保护性免疫作用。结论：rIL-2和rIL-6可作为血吸虫病抗独特型抗体疫苗的佐剂，其作用机制与同时增强Th1和Th2免疫应答有关。     

弓形虫表面抗原P30DNA疫苗免疫小鼠诱导细胞免疫应答的研究

目的 观察弓形虫表面抗原P30DNA疫苗诱导小鼠产生的细胞免疫应答。方法 大量制备重组真核表达质粒pBK-P30,用生理盐水（NS）稀释至1μg/μl,1次肌注免疫BALB／c小鼠,分别在免疫后5和10周,通过ConA刺激,MTT法测定免疫鼠脾脏T淋巴细胞转化率;使用间接免疫荧光法,用流式细胞仪对CD4^ 、CD8^ T细胞亚群进行测定。结果 ConA刺激小鼠脾T淋巴细胞发生增殖反应,pBK-P30免疫组与对两对照组及对照组之间的差异均无显著性（P＞0．05）。T细胞亚群CD4^ 、CD8^ 动态分析,CD4^ T细胞在各组增殖均不明显（P＞0．05）,但免疫组CD8^ 细胞数量升高,CD4^ /CD8^ 比率下降,与空质粒pBK-CMV对照组和NS对照组之间差异均有显著性（P＜0．05,P＜0．01）,pBK-CMV对照组与NS对照组之间差异也有显著性（P＜0．01）。免疫后10周,与NS对照组相比较,免疫组和pBK-CMV对照组CD8^ 细胞仍升高（P＜0．01）,但它们之间的差异无显著性（P＞0．05）。结论 弓形虫表面抗原P30DNA疫苗能诱导BALB／c小鼠产生一定的细胞免疫应答。     

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠脾细胞TNF-α和IL-1变化的研究

目的：研究日本血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗对小鼠脾细胞产生TNF－α和IL－1的影响。方法：实验1分别采用10 6CFU和10 8CFU疫苗皮下免疫BALB／C鼠,免疫后8W用日本血吸虫尾螺进行攻击感染,感染后66W剖杀小鼠,同时设有PBS对照组,实验2用10 6CFU疫苗皮下和注射分别免疫小鼠,于免疫后,0,4,8,10,14和16W各剖杀4只,分离脾脏,用Sj26或丝裂原刺激脾细胞,用ELISA法检测脾细胞上清液中TNFα水平,用成纤维细胞增殖法检测IL－1于免疫后4－8W达最高水平,静脉注射组TNF－α和IL－1分别于免疫后16w和4－8W达较高水平。结论：日本血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗促进小鼠脾细胞较早分泌TNF－α和IL－1,它们在血吸虫保护免疫中起重要作用。αααα     

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠保护性免疫力的影响因素

目的 探讨血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗对小鼠保护性免疫力的影响因素。方法 将实验动物随机分为 ,以免疫后不同攻击感染时间,不同免疫途径和不同免疫粢九为主要参数,。结果 各实验组经为２９．６９％～３９．７４％,各实验组减虫率和减卵率与对照组相比,差异均有显著意义（Ｐ〈０．０５）或极显著意义（Ｐ〈０．０１）。结论 ８周,ＳＣＩ组可诱导最佳的保护性免疫效果。     

IL-18重组体联合HBV S基因核酸疫苗免疫小鼠的实验

目的：研究IL－18重组体对HBV S基因核酸疫苗诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫反应的影响，以探求HBV核酸疫苗免疫预防和治疗的新策略。方法：将pcDNA3-S单独或联合pcDNA3-18免疫Balb/c小鼠，检测特异性体液免疫和细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应，并作HBsAg特异性淋巴细胞增殖试验和特异性细胞因子诱导试验。结果：与pcDNA3-S免疫组比较，pcDNA3-18和pcDNA3-S联合免疫组小鼠的抗－HBs水平略高，但差异无显著性（P＞0．05）。特异性CTL活性显著升高（P＜0．05）。免疫小鼠的脾细胞体外经特异性抗原HBsAg刺激后，联合免疫组脾细胞上清液中IFN－γ水平显著升高（P＜0．05），IL－4水平差异无显著性（P＞0．05），联合免疫组特异性HBsAg作用后脾细胞的刺激指数（SI）高于pcDNA3-S免疫组，但差异无显著性（P＞0．05）。结论：IL－18重组体联合HBV S基因核酸疫苗免疫小鼠，可促进机体诱导特异性TH1细胞和CTL细胞反应，增强机体的特异性细胞免疫功能，IL－18是具有较好应用前景的免疫佐剂。     

乙型肝炎病毒核心DNA疫苗研究进展

第一代乙型肝炎疫苗是从乙型肝炎表面抗原(HBsAg)无症状携带者血清中分离HBsAg颗粒,经灭活后制成的乙型肝炎血源疫苗;第二代乙型肝炎疫苗即为HBSAg基因重组疫苗,该疫苗可诱导体液免疫应答产生中和抗体,但不能诱导细胞免疫应答,     

炭疽免疫预防研究的现状及动向

炭疽是由炭疽芽孢杆菌(bacillusanthracis)引起的人畜共患急性传染病。草食家畜是主要易感动物,人对炭疽中等易感。在正常情况下人类炭疽多由屠宰病畜、接触污染皮、毛、骨粉、尘土和误食病畜肉引起,是典型畜源性传染病。根据感染途径,人炭疽临床分为3型,其中吸入性炭疽(肺炭疽)易误诊,病死率高达50%～100%。炭疽杆菌在宿主体内和完整尸体内保持繁殖体形态,不形成芽孢,一旦尸体被屠宰、解剖、剥皮,接触到有氧环境,易形成芽孢,难以彻底清除,而成为顽固的疫源地。历史上曾发生多次动物炭疽暴发流行,经济损失严重。目前,全球动物炭疽时有发生,…     

血吸虫DNA疫苗的研究进展

血吸虫病是由复殖寄生吸虫引起的以虫卵肉芽肿和肝纤维化为主要特征的免疫性疾病，呈全球性分布，在74个国家大约2亿人受到不同程度的感染，6亿人受到潜在的威胁。血吸虫病的治疗已取得突破性进展，但是由于反复感染发生迅速，需要重复治疗，血吸虫病仍难以控制。故发展血吸虫疫苗是血吸虫病防治中的重要手段。1990年，Wolff等在进行基因治疗时，发现裸DNA直接注入体内可检测到基因编码的蛋白质，随后的研究发现裸DNA注射还可诱导机体产生针对基因编码产物的免疫反应。     

Saccharides cross-reactive with Bacillus anthracis spore glycoprotein as an anthrax vaccine component

Bacillus anthracis is a spore-forming bacterium that causes anthrax in humans and in other mammals. The glycoprotein BclA (Bacillus collagen-like protein of anthracis) is a major constituent of the exosporium, the outermost surface of B. anthracis spores. The glycosyl part of BclA is an oligosaccharide composed of 2-O-methyl-4-(3-hydroxy-3-methylbutanamido)-4,6-dideoxy-d-glucose, referred to as anthrose, and three rhamnose residues. A structure similar to anthrose, 4-(3-hydroxy-3-methylbutanamido)-4,6-dideoxy-d-glucose is found in the side chain of the capsular polysaccharide (CPS) of Shewanella spp. MR-4. Under certain growth conditions the bacteria produce a variant CPS lacking one methyl group on the hydroxybutyrate, 4-(3-hydroxybutanamido)-4,6-dideoxy-d-glucose. Contrary to anthrose, neither of the Shewanella CPSs is 2-O methylated. Here, we report that both Shewanella CPS variants react with anti-B. anthracis spore sera. We also found that these antisera reacted with flagellae of Pseudomonas syringae, reported to be glycosylated with a similar terminal saccharide, 4-(3-hydroxybutanamido)-4,6-dideoxy-2-O-methyl-d-glucose. Sera produced by immunization with Shewanella or P. syringae cells bound to B. anthracis spores but not to Bacillus cereus spores in a fluorescent microscopy assay. These experiments show that methylation of the anthrose at the O-2 of the sugar ring and at the C-3 of 3-hydroxybutyrate are not essential for induction of cross-reactive antibodies. We report the preparation, characterization, and antibody responses to protein conjugates of the two variants of Shewanella CPS. Both conjugates induced antibodies that bound to both Shewanella CPS variants by ELISA and to B. anthracis spores, as detected by fluorescent microscopy. We propose the use of Shewanella CPS conjugates as a component of an anthrax vaccine.     

Recent advances in DNA vaccine of hepatitis virus

Nucleic acid vaccine or DNA vaccine is a hopeful vaccine to prevent and treat viral hepatitis. Problems exist in different DNA vaccines for HBV or HCV. Optimal animal model should be established study vaccine against hepatitis. Apart from the strategy to enhance the efficiency of DNA vaccine, combined use of cytokines or chemokines, different routes of inoculation, design of optimal vector, ISS insertion in the plasmid vectors, etc to enhance the efficiency of DNA vaccine are reviewed.     

A dually active anthrax vaccine that confers protection against both bacilli and toxins

Systemic anthrax is caused by unimpeded bacillar replication and toxin secretion. We developed a dually active anthrax vaccine (DAAV) that confers simultaneous protection against both bacilli and toxins. DAAV was constructed by conjugating capsular poly-gamma-d-glutamic acid (PGA) to protective antigen (PA), converting the weakly immunogenic PGA to a potent immunogen, and synergistically enhancing the humoral response to PA. PGA-specific antibodies bound to encapsulated bacilli and promoted the killing of bacilli by complement. PA-specific antibodies neutralized toxin activity and protected immunized mice against lethal challenge with anthrax toxin. Thus, DAAV combines both antibacterial and antitoxic components in a single vaccine against anthrax. DAAV introduces a vaccine design that may be widely applicable against infectious diseases and provides additional tools in medicine and biodefense.