携带tk基因的EB病毒复制子表达载体对人肝癌细胞的转导,？…

研究携带ｔｋ基因ＥＢ病毒复制子表达载体对人肝癌细胞的转导，杀伤和旁观者效应。方法设更昔洛韦组、阿昔洛韦组和对照组共３组，脂质体包裹质粒转染人肝癌细胞后分别加入不同浓度药物；已转染基因的细胞与未转染的细胞不同比例混合，每孔分别加入ＧＣＶ。     

TK自杀基因对甲胎蛋白阳性肝癌的特异性杀伤作用

目的观察腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)/丙氧鸟苷(GCV)自杀基因系统在体内外对人肝癌细胞的杀伤效应.方法在体外按MOI值为100、10、1、0用重组腺病毒转染人肝癌细胞BEL-7402和SMMC-7721,48 h后用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率.在两种肝癌裸鼠模型上,瘤体内注射重组腺病毒(1×1012 pfu/L)0.1 ml,GCV作用后观察抑瘤效果.结果体外MOI为100时,可杀死99.8%的BEL-7402细胞和17.8%的SMMC-7721细胞,两者差异有显著性(P＜0.05).体内BEL-7402组肿瘤生长明显受到抑制.结论在体内外,腺病毒介导的含AFP调控序列的HSV-tk/GCV自杀基因系统对甲胎蛋白(AFP)阳性肝癌细胞具有特异性杀伤作用,该系统可望用于肝癌的特异性基因治疗.     

腺病毒介导多基因对肝癌细胞生长的影响

目的 研究腺病毒介导的多种基因在肝癌细胞中的表达和对肝癌细胞生长的影响。方法 构建含人ｐ５３、Ｂ７－１、ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－２ ４种目的基因的重组腺病毒载体,感染３种肝细胞癌细胞系和肝细胞系Ｌ０２,运用ＥＬＩＳＡ、免疫组化、流式细胞仪等方法,检测目的基因在肝癌细胞中的表达,和对肝癌细胞生长的抑制及诱导其凋亡的作用。结果 肝癌细胞对腺病毒高度易感,腺病毒多重感剂量为５０（５０ＭＯＩ时）,可使９０％左     

体外腺病毒介导的HSV—tk／GCV对产生AFP的人肝癌细胞的影响

目的 观察腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV-tk)/丙氧鸟苷（GCV）自杀基因系统在体外对人肝癌细胞的选择性杀伤效应。方法 采用含有甲胎蛋白基因启动子，增强子和HSV-tk基因的嵌合基因，插入腺病毒中形成重组腺病毒（AdrAFPTK),将该重组腺病毒分别感染体外培养的甲胎蛋白阳性人肝癌细胞BEL-7402和甲胎蛋白阴性人肝癌细胞SMMC-7721，逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测HSV-tk基因的转录表达，观察GCV对人肝癌细胞的选择性杀伤作用。结果 GCV在体外对重组腺病毒转染的甲胎蛋白阳性的人肝癌细胞BEL-7402有明显的杀伤作用和“旁观效应”，而对重组腺病毒转染的甲胎蛋白阴性的人肝癌细胞SMMC-7721无明显作用。结论 在体外，表达HSV-tk基因的甲胎蛋白的人肝癌细胞可被受甲胎蛋白基因表达调控序列控制的自杀基因HSV-tk特异性杀伤，表现出极高的细胞专一性，重组腺病毒AdrAFPTK可望用于肝癌的特异性基因治疗。     

正、反义Heparanase基因对肝癌细胞转移潜能的影响

目的 研究正、反义人Heparanase基因对肝癌细胞转移潜能的影响。方法 将正、反义人 Heparanase 基因稳定转染肝癌细胞系HepG2,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学检测转染细胞 Heparanase mRNA及蛋白表达;裸鼠尾静脉注射转染细胞 30 d后,称量肺重、计数肺表面转移结节数;肺脏常规切片、苏木素-伊红(HE)染色。结果 转染正义、反义基因促进或抑制 Heparanase mRNA和蛋白表达;反义组裸鼠肺脏重量、肺表面转移结节数较对照组显著减少(P<0.01),正义组则相反;HE染色表明正义组裸鼠肺脏有大量转移灶,反义组仅见少量小转移灶。结论 Heparanase基因对肝癌细胞转移潜能有明显的促进作用,反义基因则显著抑制肝癌细胞的转移。     

腺病毒驱动KDR启动子介导CD/TK融合基因系统对肝癌细胞的靶向杀伤作用

目的 研究腺病毒介导的KDR启动子驱动CD/TK双自杀基因系统（AdKDR- CDglyTK）对肝癌细胞选择性杀伤作用。方法 将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后，体外感染表达KDR的BEL-7402细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株，并给予不同浓度的前药5-FC和/或GCV，观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应。结果 所得病毒滴度为2.5×10^12pfu/ml。两种细胞的感染率相似，其感染率随腺病毒滴度的递增而增加。RT-PCR方法 检测发现：感染AdKDR-CDglyTK的BEL-7402有目的 基因CDglyTK的表达，感染AdKDR- CDglyTK的LS174T细胞无目的 基因表达。表达KDR的BEL-7402细胞对前药具有较高的敏感性，不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感（F=750.03，P〈0.001）。融合基因的疗效优于任一单自杀基因（F=275.89，P〈0.05）。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养，观察到该体系明显的旁观者效应。结论 KDR基因启动子可调控双自杀基因系统选择性杀伤表达KDR的肝癌细胞。     

表达IL-24基因的溶瘤腺病毒对肝癌细胞的抑制作用

目的 研究携带IL-24基因的溶瘤腺病毒对肝癌细胞抑制生长和转移的作用.方法 构建Ad.HS4.AFP.E1A/IL-24,病毒的复制由人甲胎蛋白启动子控制,携带IL-24基因.检测病毒在不同细胞系中的选择性复制,以及对高转移潜能人肝癌细胞系MHCC97-H的生长抑制、诱导凋亡和抑制转移能力(侵袭、运动、黏附)的作用.结果 Ad.HS4.AFP.E1A/IL-24在肝癌细胞SMMC-7721、Hep3B和MHCC97-H中选择性表达,而不影响正常肝细胞L02(P＜0.05).Ad.HS4.AFP.E1A/IL-24可明显抑制MHCC97-H细胞的增殖,诱导其凋亡,并抑制其体外运动、侵袭和黏附能力(P＜0.01).RT-PCR和明胶酶谱显示其抑制肝癌作用与抑制MMP-2的表达有关.结论 携带IL-24基因的溶瘤腺病毒能够选择性抑制肝癌细胞的增殖并抑制其转移.

Abstract：

Objective To investigate the selective oncolytic role and antitumor action of a novel recombinant adenovirus containing E1A and IL-24 on hepatocellular carcinoma cell(HCC). Methods The recombinant adenovirus expressing IL-24 (Ad. HS4. AFP. E1A/IL-24) was constructed by using modified human alpha-fetoprotein (HS4-AFP) promoter to drive adenovirus E1A gene and II-24 gene.Cell Counting Kit-8 were performed to test the selective cytotoxicity of the virus in hepatocellular carcinoma cell lines SMMC-7721, Hep3B, MHCC97-H and hepatocyte cell line L02 . The mRNA and protein expression of IL-24 gene were detected by RT-PCR and western blot. Cell growth curves and Annexin V/PI assay were used to study cell proliferation and apoptosis of MHCC97-H. The anti-metastatic effects of the recombinant adenovirus were evaluated in cell adhesion, migration, and cell motion. Matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) expression was examined by RT-PCR and zymography.Results Selective replications of Ad. HS4. AFP. E1A/IL-24 adenovirus were observed in over expression AFP cell line MHCC97-H, a highly metastatic potential HCC cell line but not in hepatocyte cell line L02. The mRNA and protein of IL-24 were also over expressed in MHCC97-H. This recombinant adenovirus also showed the significant oncolytic action on MHCC97-H but not on L02 (P＜0. 05). Besides, the recombinant adenovirus significantly inhibited MHCC97-H metastatic potential such as cell adhesion, migration and invasion as well(P＜0.01). Conclusion The selective oncolytic adenovirus expressing E1A and II-24 has a selective antitumor effect and play an inhibitory role in metastasis of HCC.     

PNP-CD融合自杀基因系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

目的 分析PNP-CD融合自杀基因系统对肝癌细胞HepG2的杀伤作用并探讨其可能的机制.方法 利用重组PCR定点诱变法制备融合基因PNP-CD.将PNP-CD插入真核表达载体pcDNA3.0中,构建融合自杀基因表达载体pcDNA3.0/PNP-CD.经酶切、PCR及测序鉴定重组体,G418筛选获得稳定转染pcDNA3.0/PNP-CD的抗性细胞克隆.用RT-PCR和Western Blotting法检测PNP-CD基因在HepG2细胞中的表达.用台盼蓝排斥法检测细胞生长曲线,用MTT法检测细胞细胞克隆对相应前药敏感性及所导致的旁观者效应.结果 融合基因片段PNP-CD正确插入了pcDNA3.0中,pcDNA3.0/PNP-CD在HepG2细胞中实现了表达.细胞抗性克隆对特定的前药高度敏感.在两种前药联合作用下,pcDNA3.0/PNP-CD所致旁观者效应明显强于只给予MeP-dR一种前药所致旁观者效应.结论 具有双自杀基因功能的PNP-CD融合基因系统是肝癌基因治疗中一种高效治疗载体,对肝癌细胞有着良好的杀伤作用.     

表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA的增殖腺病毒对肝癌细胞的抑制作用

目的 观察表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA(hTERT-siRNA)的增殖腺病毒(ZD-hTERT)对人肝癌Bel-7402细胞增殖及凋亡影响.方法 ZD-hTERT、增殖腺病毒ZD-EGFP、表达hTERT-siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad-hTERT、增殖缺陷腺病毒Ad-EGFP分别感染人肝癌Bel-7402细胞.Western blot法检测ElA表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测hTERT表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活;结晶紫染色法检测细胞毒作用;原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡.结果 感染ZD-hTERT、ZD-EGFP的Bel-7402细胞表达ElA;抑制hTERT表达作用依次为ZD-hTERT>Ad-hTERT>ZD-EGFP>Ad-EGFP;抑制Bel-7402细胞生长及细胞毒作用依次为ZD-hTERT>ZD-EGFP=Ad-hTERT>Ad-EGFP.感染ZD-hTERT、ZD-EGFP、Ad-hTERT、Ad-EGFP的Bel-7402细胞凋亡率(%)分别为(88.1±2.2)、(39.2±2.1)、(42.1±5.1)、(7.5±2.1),ZD-hTERT诱导凋亡作用最高(P<0.01).结论 表达hTERT-siRNA的增殖腺病毒能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞hTERT基因表达,进而抑制其增殖,促进其凋亡.     

野生型和突变型RASSF1A基因对人肝癌细胞生长的影响

目的　探讨野生型 /突变型RASSF1A基因的表达对人肝癌细胞株QGY 770 3在体内外生长的影响。方法　构建突变型RASSF1A基因的真核表达载体 ,通过脂质体介导的基因转染法将野生型 /突变型RASSF1A基因的真核表达载体及空载体转染肝癌细胞株QGY 770 3 ,G418筛选稳定表达株 ,并以逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和Westernblot进行鉴定。通过细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤性试验对各稳定表达株的生物学行为进行检测。结果　成功建立稳定表达野生型和突变型RASSF1A基因的肝癌细胞株。以转染空载体的QGY 770 3细胞为对照 ,野生型RASSF1A基因的表达可明显抑制肝癌细胞在体外的生长 ,显著降低肝癌细胞在软琼脂中形成的克隆数目 (P <0 .0 1)和大小 ,显著减慢裸鼠皮下瘤的生长速度和重量 (P <0 .0 1)。突变型RASSF1A基因的表达对肝癌细胞的生长影响不大。结论　野生型RASSF1A的重表达有助于QGY 770 3恶性表型的逆转 ;野生型RASSF1A基因是一个肝癌相关的抑癌基因。     

放射线敏感性自杀基因的构建及其在肝癌细胞中的表达

目的　利用可被放射线激活而转录的早期生长反应基因 1 (Egr 1 )启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (tk)在肝癌细胞中高效表达。方法　构建以Egr 1为启动子 ,以tk为目的基因的重组质粒 pET ,经脂质体介导转染人肝癌细胞株SMMC 772 1 ,经G41 8抗性筛选、分别以 0、5、7.5、1 0、1 5、2 0Gy剂量γ射线照射、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)半定量分析、比较tk基因的mRNA表达。结果　转染后的肝癌细胞株经射线照射后其tkmRNA的表达较未照射组 (55 .2±7.2 )有明显提高 ,以 1 5Gy最为显著 (1 1 7.2± 1 1 .1 ,P <0 .0 0 1 )。结论　经γ射线照射后 ,可被放射线转录激活的Egr 1启动子可引起tk基因在肝癌细胞中高效表达 ,从而为肝癌的基因 放射治疗的实验研究打下坚实的基础     

原发性肝细胞癌中WAF1/CIP1基因的表达及其临床病理意义

目的　探讨原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因ｍＲＮＡ 的表达与临床病理学指标的关系和意义。方法　采用半定量ＲＴＰＣＲ方法,检测ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因在３０ 例ＨＣＣ及其癌旁肝组织中的表达。结果　肝癌组织ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ｍＲＮＡ 表达相对值低于其相应癌旁肝组织［（１ ．１０±０ ．４３）Ｕ 对（１．３１±０．４１）Ｕ,Ｐ＜０ ．０５］ ,有卫星灶形成的肝癌低于无卫星灶形成的肝癌［（０．８６ ±０．２９）Ｕ 对（１ ．３２ ±０．４４）Ｕ,Ｐ＜ ０．０１］ ,但其在ＨＣＣ的其他病理学指标中差异无显著性（ Ｐ＞０ ．０５） 。结论　ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ 基因的表达异常可能参与ＨＣＣ的发生、发展,并与肝癌细胞的浸润和转移分子机制有关。     

逆转录病毒介导单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因对胰腺癌细胞的杀伤作用

目的：观察单纯疱疹病毒－胸苷激酶（HSV－tk)／丙氧鸟苷（GCV）基因治疗系统在体内外对人胰腺癌细胞的杀伤效应。方法：构建含HSV－tk基因的重组逆转录病毒载体pDOR-tk-neo,经病毒包装细胞PA317产生重组逆转录病毒,后者将HSV－tk基因转入人胰腺癌细胞系PC－2细胞内,筛选出稳定表达HSV－tk的细胞克隆PC－2／tk。测定PC－2/tk细胞在体外对GCV的敏感性及其旁观杀伤效应PC－2／tk细胞在裸鼠皮下成瘤,观察GCV的治疗作用。结果：GCV对PC－2/tk细胞有明显的杀伤作用,且其作用呈现剂量和时间依赖性特点以及旁观杀伤效应,对母本细胞则无明显毒性。裸鼠腹腔注射GCV后对移植瘤有明显治疗作用。结论：表达HSV－tk的人胰腺癌细胞在体内外均可被GCV有效杀伤。     

人肝癌细胞株与正常肝细胞株MicroRNA差异表达谱研究

目的 建立SMMC-7721人肝癌细胞株与CCC-HEL-1人正常肝细胞株MicroRNA(miRNA)差异的表达谱,确定差异的miRNA,为进一步研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用和肝癌的治疗提供新的线索.方法 体外培养SMMC-7721人肝癌细胞株和CCC-HEL-1人正常肝细胞株.用TRIzol法提取细胞的总...     

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目的　了解甲状腺滤泡状癌细胞中导入内皮抑素 (Endostatin ,ES)基因对体内外生长的影响 ,并探讨其作用机制。方法　用逆转录病毒载体将ES基因导入FTC133 细胞中 ,采用RT PCR和ELISA检测导入基因在肿瘤细胞的表达。观察肿瘤在裸鼠模型中的生长状况。用抗CD31抗体对肿瘤切片进行免疫组织化学染色检测微血管 ,计算微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)。检测血清中ES和VEGF浓度。 结果　顺利将ES基因导入到FTC13 3 中得到稳定表达ES的肿瘤细胞系FTC133 rvEndo。后者在体外增值速度与母系相似。而在裸鼠模型中 ,其肿瘤生长速度明显慢于母系。种植 33天后 ,FTC133 组肿瘤大小为 ( 30 0 2± 44 1)mm3,FTC13 3 rvEndo组为 ( 5 5 7± 15 2 )mm3,两组间差异有显著性 (P =0 0 0 0 2 )。免疫组化染色表明FTC133 rvEndo肿瘤中血管内皮细胞数明显减少 ,MVD为 34 86± 10 6 8;而对照组为 6 4 71± 17 0 5 ,差异有显著性 (P =0 0 0 2 0 )。带瘤鼠血清人VEGF浓度FTC133 rvEndo组为 ( 8 99± 0 6 5 )ng/L ,明显低于对照组 ( 2 9 34± 5 5 5 )ng/L( P =0 0 0 98)。结论　利用逆转录病毒载体可将ES基因转入甲状腺滤泡状癌细胞系中 ,该基因的导入通过抑制血管生成使肿瘤体内生长速度减慢。其机制可能与抑制肿瘤细胞     

Parkin基因在肝细胞癌中的表达与临床意义

目的 探讨Parkin基因mRNA及其蛋白在肝细胞癌中的表达规律及其临床意义。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学（S-P）法检测58例肝细胞癌中Parkin基因mRNA及蛋白的表达情况，结合病人的临床病理资料分析Parkin基因在肝细胞癌中的意义。结果 肝癌组织中Parkin基因mRNA及蛋白的表达明显降低，阳性率分别为22．4％（13／58）和25．9％（15／58），明显低于癌旁肝组织的表达阳性率：94．8％（55／58）和89．7％（52／58），其差异有统计学意义（P〈0．05），且Parkin基因蛋白表达的缺失与病人的性别、肿瘤的大小、甲胎蛋白（AFP）、HBsAg、以及有无肝硬化无关（P〉0．05），而与肿瘤的分化程度、有无包膜及有无门静脉癌栓有关（P〈0．05）。结论 Parkin基因在肝细胞癌的发生过程中可能起重要的作用，其表达水平可能成为肝细胞癌诊断及判断其生物学特性的重要分子生物学指标。     

携带白细胞介素2基因的质粒型真核表达载体在大鼠肝中导入方法和途径的研究

目的研究肝癌基因治疗中的基因体内导人方法和途径。方法采用一种携带人白细胞介素2（IL－2）cDNA的质粒型EB病毒复制子表达载体，用Wistar大鼠建立点注射、门静脉注射和肝动脉注射加阻断法模型。每种模型分裸基因和脂质体-质粒注射两组，定期行免疫组化染色检测IL－2基因的表达。结果各组动物基因注射后3天即可见基因表达，3～7天时达到高峰，7天后开始下降。以裸基因肝动脉注射加栓塞表达效果最好。脂质体质粒注射不增加表达效率。结论基因直接导入结合手术和介入治疗方法可应用于肝癌的临床治疗。     

Strategy of gene therapy for liver cirrohosis and hepatocellular carcinoma

Background/Purpose. Liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC) are major causes of morbidity and mortality worldwide, without effective therapies. Our aim was to establish a novel approach for the diseases utilizing in-vivo gene therapy. Methods. To achieve effective gene expression in vivo, we employed a well-established transfection method, hemagglutinating virus of Japan (HVJ)-liposome. Liver cirrhosis, characterized by parenchymal collapse, was induced by dimethylnitrosamine (DMN) in rats, leading to accumulation of fibrous tissue. Muscle-directed gene transfer of hepatocyte growth factor (HGF) was performed in this model. As an approach for HCC therapy, suicide gene therapy using ganciclovir (GCV) with transfer of the herpes thymidine kinase (HSVtk) gene was tested. Alpha-fetoprotein (AFP) is highly expressed in many cases of HCC. To achieve specific gene expression of HSVtk in AFP-producing tumors, we employed the HSVtk gene driven by the AFP promoter (AFP-TK1), encapsulated in the HVJ-liposome. APF-producing HUH7 tumors in vivo were established in the livers of severe combined immunodeficiency (SCID) mice, by the injection of HUH7 cells into the portal vein. Results. All cirrhotic rats died of liver dysfunction by 7 weeks after the initial injection of DMN. After repeated transfection with the HGF gene, increased concentrations of HGF in plasma and tyrosine phosphorylation of the c-Met/HGF receptor in the liver were detected, and the established massive hepatic fibrosis had almost totally disappeared and all cirrhotic rats survived. Repeated in-vivo transfection with AFP-TK1, using the HVJ-liposome, followed by GCV treatment, achieved abrogation of tumors in the liver, and improved survival. Conclusions. Our data indicate that the gene therapy may hold promise for the treatment of patients with liver cirrhosis and HCC. Received: July 25, 2002 / Accepted: August 5, 2002 RID="*" ID="*" Offprint requests to: J. Fujimoto     

Survivin在肝癌中的表达及其与肝癌增殖活性的相关分析

目的研究survivin在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与肝癌增殖活性的相关意义.方法应用免疫组织细胞化学技术检测31例肝细胞癌组织,8例肝硬化组织和4例正常肝组织中survivin及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果正常肝组织和肝硬化组织中均无survivin表达,31例肝细胞癌组织中19例(61.3%)survivin表达阳性.与正常肝组织和肝硬化组织相比,survivin在肝癌组织中表达率显著升高(P＜0.001).低分化肝癌其survivin表达阳性率显著高于高分化肝癌.此外,survivin表达与肝癌增殖活性显著相关,survivin阳性肿瘤具有较高的增殖活性,其PCNA指数30.5%明显高于survivin表达阴性肿瘤15.8%(P＜0.05).结论 survivin在肝癌中呈现高表达,这种特异性表达与肝癌的低分化性和高增殖有关,可能涉及到肝癌的发生和进展.survivin基因有望成为肝癌诊断和治疗的新靶点.     

启动子区甲基化对miRNA-122表达及肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨DNA甲基化对肝特异性miRNA-122表达调控以及肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 甲基化测序检测肝细胞中miRNA-122启动子区的甲基化状态.实时定量PCR检测肝细胞中miRNA 122表达水平.流式细胞仪与CCK8检测去甲基化对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.结果 与人原代正常肝细胞[(21.9±11.4)％]比较,Huh7、HepG2、QSG-7701细胞系miRNA-122启动子区的甲基化程度[分别为(87.6±9.3)％、(89.0±14.3)％、(69.5±11.5)％],均明显升高(P=0.000),尤其以Huh7、HepG2两种癌细胞系升高最为明显.与人原代正常肝细胞[(2.83×104±3746)]比较,三种细胞系miRNA-122的表达明显下降,其中以Huh7和HepG2两种癌细胞系降低最明显(P=0.007).与空白对照比较,在10 μmol/L的5氮杂-2′-脱氧胞苷作用下,Huh7和HepG2两种癌细胞系甲基化程度明显降低(P=0.038,0.025);而其miRNA-122表达明显升高(P=0.008,0.003).与空白对照组比较,Huh7细胞与HepG2细胞经去甲基化处理后细胞的凋亡均明显增加(P=0.001,0.027).结论 肝特异性miRNA-122的表达受DNA甲基化的明显调控,且与肝癌细胞的凋亡密切相关.miRNA122的甲基化调控可能参与了肝癌的发生和发展.