多帕菲、顺铂及5-FU联合治疗晚期胃癌疗效观察

2001年1月以来,我们应用多帕菲联合顺铂、5氟尿嘧啶（5-FU）治疗晚期胃癌患者40例,疗效较好。现报告如下。临床资料：本文40例Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者均经病理证实,其中腺癌39例,腺鳞癌1例。男28例、女12例,中位年龄65岁。患者治疗前Karnofsky评分均〉70分,血常规及血肝肾功均正常,无化疗禁忌证。     

顺铂对人卵巢癌KK细胞周期动力学的影响

顺铂 (c DDP)为广谱抗肿瘤药物 ,但其抗肿瘤作用的分子机制至今仍不甚清楚。已有研究证实 ,在某些细胞系中顺铂的抗肿瘤作用与其诱导的细胞凋亡有关。为此 ,我们以人卵巢癌 KK细胞为研究对象 ,采用流式细胞检测技术 ,探讨顺铂对卵巢癌细胞周期动力学的影响。现报告如下。1　资料与方法1 .1　主要试剂及仪器　顺铂和碘化丙啶 (PI)为 Sig-ma公司产品。RPMI- 1 6 4 0培养基为美国 Promega公司生产。一抗 p5 3单克隆抗体 (DO- 1 )和 p2 1多克隆抗体 (C- 1 9)为美国 Santa Cruz公司产品。流式细胞仪为美国 Beckman Coulter生产的 Epics …     

康莱特、顺铂和5-氟尿嘧啶联用治疗晚期胰腺癌临床观察

1999年3月至2002年9月，我们采用康莱特(KLT)、5-氟尿嘧啶(5-Fu) 顺铂(DDP)联合化疗方案(KFP方案)治疗晚期胰腺癌，取得较好近期疗效。现报告如下。     

奥沙利铂、顺铂联合5-FU/LV治疗晚期胃癌的系统评价

目的:收集中英文相关随机对照试验的研究结果进行Meta分析,对奥沙利铂联合5-FU/LV(FOLFOX)方案的疗效进行评价.方法:采用Cochrane系统评价方法.检索Cochrane Library、PubMed、EMBase、中国生物医学文献数据库(CBM)、中文期刊全文数据库,中文科技期刊全文数据库(CSJD)等数据库,并辅以手工检索和其他检索.结果:共8个随机对照试验662例患者纳入研究,其中1个随机对照研究来自美国,另7个均来自中国:且8篇RCT存在偏倚的可能性均为中等程度.FOLFOX与顺铂联合5-FU/LV(PLF)方案治疗胃癌在1年生存率方面差异无统计学意义,但在总的生存率方面有显著差异.其OR值和95%CI分别为1.37(0.93,2.01)、1.93(1.41,2.66).3/4级的不良反应中白细胞减少和恶心呕吐等治疗组轻于对照组;在外周神经毒性反应方面,治疗组重于对照组,差异有统计学意义;而血小板减少方面差异无统计学意义.其OR值和95%CI分别为0.48(0.28,0.83)、0.26(0.16,0.42)、7.38(2.16,25.23)及1.20(0.44,3.30).结论:FOLFOX方案总有效率优于PLF方案,但是1年生存率并不优于对照组.白细胞减少和恶心呕吐治疗组轻于对照组,外周神经毒性重于对照组.     

奥曲肽联合5-FU对人胃癌细胞株SGC-7901生长的影响

用不同浓度的奥曲肽联合5-FU作用SGC-7901细胞后，用MTT法测定细胞生长抑制率，流式细胞仪检测细胞中的Bel和Bax蛋白。结果奥曲肽作用于SGC-7901细胞24h后，可显著抑制胃癌细胞的生长，相同浓度奥曲肽加入80μg/ml 5-FU，细胞抑制率明显增强，与单用奥曲肽相比，P〈0.05；经奥曲肽及5-Fu处理的胃癌细胞，其Bcl蛋白表达显著减少，而Bax蛋白表达显著增加，二药联合与单药应用相比，P〈0.05。认为奥曲肽可显著抑制胃癌细胞的生长，奥曲肽联合5-FU对胃癌细胞的生长抑制作用增强；其作用机制是下调SGC-7901的Bel蛋白表达，而上调Bax蛋白表达。     

顺铂联合乌苯美司对卵巢癌SKOV3细胞体外生长的作用

目的 探讨不同浓度乌苯美司、顺铂及两药联合对卵巢癌SKOV3细胞体外生长的作用.方法 不同浓度的乌苯美司、顺铂及两药联合作用于体外培养的卵巢癌SKOV-3细胞24 h,MTT法分别检测SKOV-3细胞体外生长的抑制率,联合指数法评价两药对卵巢癌SKOV-3细胞的联合作用.结果 经不同浓度的乌苯美司、顺铂及两药联合作用后,SKOV-3细胞生长受到抑制,且呈剂量依赖性,两者之间具有协同作用.结论 乌苯美司及顺铂单用可以抑制卵巢癌SKOV-3细胞的体外生长,两者联合应用可以增强顺铂对卵巢癌细胞体外生长的抑制作用.     

补中益气汤对人胃癌顺铂耐药细胞株奥沙利铂化疗敏感性的作用及机制

目的:观察补中益气汤对人胃癌顺铂耐药细胞株SGC-7901CDDP奥沙利铂化疗敏感性的增强作用及机制。方法:将30株SGC-7901CDDP细胞株随机分为空白对照组、奥沙利铂组和补中益气组,每组10株,均置于DMEM高糖培养液中培养。空白对照组不添加其他药液培养,奥沙利铂组添加奥沙利铂注射液1 mL模拟化疗环境,补中益气组添加奥沙利铂注射液1 mL+补中益气汤3 mL进行培养。培养48 h后进行细胞化疗敏感性指标(细胞凋亡率、细胞迁移率、细胞周期、细胞生物学参数及化疗增敏比)及反应机制相关因子(survivin、Bcl-2、NF-κB)检测。结果:与空白对照组比较,奥沙利铂组和补中益气组的细胞凋亡率均较高(P<0.05),且补中益气组的细胞凋亡率明显高于奥沙利铂组(P<0.05)。在24 h和48 h两个时点,奥沙利铂组和补中益气组的划痕面积明显低于空白对照组(P<0.05),且补中益气组的划痕面积更小(P<0.05)。与空白对照组比较,奥沙利铂组和补中益气组细胞处于G2/M期的DNA占比明显下调,处于G1、S期的DNA占比明显上升(P<0.05);与奥沙...     

DAPT及顺铂对人卵巢癌H08910细胞生物学性能的影响

目的观察γ-分泌酶抑制剂DAPT及顺铂对人卵巢癌H08910细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响,为卵巢癌治疗提供新思路。方法常规培养H08910细胞至对数生长期,随机分为DAPT组、顺铂组、联合组及对照组,前三组分别以不同质量浓度DAPT、顺铂及DAPT＋顺铂处理,采用四甲基偶氮唑蓝（MIT）比色法检测细胞增殖情况,倒置显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,体外迁移及侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力。结果与对照组比较,DAPT组、联合组细胞增殖明显受抑（P均〈0．05）,且呈DAPT作用时间和剂量依赖性,尤以联合组为著（P〈0．05）;倒置显微镜下对照组细胞形态正常,DAPT组及联合组均出现细胞密度减低及凋亡现象;DAPT组、顺铂组、联合组细胞凋亡率均显著高于对照组（P均〈0．05）,尤以联合组为著（P均〈0．05）;与对照组比较,余三组细胞迁移抑制率、细胞侵袭抑制率均显著升高（P均〈0．05）,尤以联合组为著（P均〈0．05）。结论DAPT与顺铂可协同抑制人卵巢癌H08910细胞增殖、促进细胞凋亡、降低细胞侵袭及迁移能力,此为卵巢癌的治疗提供了新思路。     

索拉非尼联合顺铂对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的探讨多靶点酪氨酸激酶抑制剂索拉非尼联合顺铂（DDP）对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法构建人肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白对照组、溶剂对照组、索拉非尼组、DDP组和联合用药组。观察用药前后肿瘤大小,测体质量,并计算瘤重,绘制肿瘤生长曲线;应用免疫组化检测肿瘤微血管密度（MVD）。结果索拉非尼和DDP单药均能抑制肿瘤生长,两药联合疗效明显增强（P〈0．05）。与对照组和顺铂组相比,索拉非尼组和联合用药组能明显抑制肿瘤血管生成,MVD值均明显降低,以联合用药组最为明显（P均〈0．05）。结论索拉非尼联合DDP能增强抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长及微血管生成。     

微小RNA-21在顺铂联合5-氟尿嘧啶抑制肺癌细胞株作用中的表达变化

目的探讨顺铂和5-氟尿嘧啶在体外联合用药对肺癌细胞株A549细胞存活率、细胞周期的影响以及在这过程中微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)表达水平的变化。方法顺铂和5-氟尿嘧啶单药或联合用药处理肺癌A549细胞后,采用CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪技术检测细胞周期;实时荧光定量PCR检测miR-21的表达变化。结果顺铂和5-氟尿嘧啶单药对A549细胞的抑制作用都具有浓度依赖性,两者联合用药48h后细胞的存活率明显低于单药组(P0.05),并且细胞形态改变更加明显,悬浮、变圆的细胞也更多;顺铂处理A549细胞后,将细胞阻滞于S期和G2期,5-氟尿嘧啶阻滞A549细胞于S期,联合用药后细胞阻滞于S期和G2期;随着顺铂和5-氟尿嘧啶作用浓度的增加,miR-21的表达水平上调,联合用药后miR-21的表达亦上调,但趋势没有顺铂组明显(P0.05)。结论顺铂在体外联合5-氟尿嘧啶对A549细胞存活率的抑制有协同作用,同时可以上调细胞内miR-21表达水平。     

Synergistic anticancer properties of docosahexaenoic acid and 5-fluorouracil through interference with energy metabolism and cell cycle arrest in human gastric cancer cell line AGS cells

AIM: To explore the synergistic effect of docosahexaenoic acid(DHA)/5-fluorouracil(5-FU) on the human gastric cancer cell line AGS and examine the underlying mechanism.METHODS: AGS cells were cultured and treated with a series of concentrations of DHA and 5-FU alone or in combination for 24 and 48 h. To investigate the synergistic effect of DHA and 5-FU on AGS cells, the inhibition of cell proliferation was determined by MTT assay and cell morphology. Flow cytometric analysis was also used to assess cell cycle distribution, and the expression of mitochondrial electron transfer chain complexes(METCs)?Ⅰ, Ⅱ and Ⅴ in AGS cells was further determined by Western blot analysis. RESULTS: DHA and 5-FU alone or in combination could markedly suppress the proliferation of AGS cells in a significant time and dose-dependent manner. DHA markedly strengthened the antiproliferative effect of 5-FU, decreasing the IC50 by 3.56-2.15-fold in an apparent synergy. The morphological changes of the cells were characterized by shrinkage, cell membrane blebbing and decreased adherence. Cell cycle analysis showed a shift of cells into the G0/G1 phase from the S phase following treatment with DHA or 5-FU(G0/G1 phase: 30.04% ± 1.54% vs 49.05% ± 6.41% and 63.39% ± 6.83%, respectively, P 0.05; S phase: 56.76% ± 3.14% vs 34.75% ± 2.35% and 25.63% ± 2.21%, respectively, P 0.05). Combination treatment of DHA and 5-FU resulted in a significantly larger shift toward the G0/G1 phase and subsequent reduction in S phase(G0/G1 phase: 69.06% ± 2.63% vs 49.05% ± 6.41% and 63.39% ± 6.83%, respectively, P 0.05; S phase: 19.80% ± 4.30% vs 34.75% ± 2.35% and 25.63% ± 2.21%, respectively, P 0.05). This synergy was also reflected in the significant downregulation of the expression of METCs in AGS cells.CONCLUSION: Synergistic anticancer properties of DHA and 5-FU may involve interference with energy production of AGS cells via downregulation of METCs and cell cycle arrest.     

芦荟大黄素联合氟尿嘧啶对人胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨芦荟大黄素(AE)与5-氟尿嘧啶(5-FU)体外协同作用及对人胃癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 MTT法检测药物对细胞增殖抑制作用;光镜观察细胞生长状态,计数细胞分裂指数;电镜观察药物对细胞超微结构的影响;TUNEL法检测细胞凋亡.结果 AE单独应用对细胞的增殖抑制作用弱,与5-FU合用明显抑制细胞生长,呈剂量依赖性;药物作用48 h后,联合用药组细胞分裂指数显著降低,可见大量细胞皱缩,胞膜界限模糊,核膜消失,核质浓缩及凋亡小体形成;TUNEL法分析显示,联合用药组细胞凋亡率为(69.4±4.1)%,与AE组[(15.7 4±1.9)%]、5-FU组[(33.5±2.8)%]比较差异显著(P<0.05).结论 AE与5-FU联合应用能有效抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡,二药具有协同增效作用.     

大蒜素对卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP增殖的影响及机制

目的探讨大蒜素对卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP凋亡的影响及机制。方法将SKOV-3/DDP细胞随机分为四组,大蒜素组加入40μg/mL的大蒜素,顺铂组加入40μg/mL的顺铂,联合组加入大蒜素和顺铂各40μg/mL,对照组不干预。各组分别培养24、48 h。采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法测定Bax、Bcl-2mRNA表达;Western blot法测定Bax、Bcl-2蛋白表达。结果顺铂组、大蒜素组、联合组各时点(24 h、48 h)增殖抑制率明显高于对照组,联合组明显高于大蒜素组、顺铂组,P均<0.05。顺铂组、大蒜素组、联合组各时点Bax mR-NA和蛋白水平明显高于对照组,大蒜素组、联合组Bcl-2 mRNA和蛋白水平明显低于对照组,P均<0.05;顺铂组48 h Bcl-2蛋白明显高于对照组,P<0.05;联合组各时点Bax mRNA和蛋白水平明显高于、Bcl-2 mRNA和蛋白水平明显低于对照组,P均<0.05。结论大蒜素诱导SKOV-3/DDP凋亡作用优于顺铂,两者联合具有协同作用,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

5-氟尿嘧啶作用人肝癌细胞系SMMC-7721后残存细胞中肿瘤干细胞比例增加

目的主要探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)作用肝癌细胞系SMMC-7721后残余细胞中NCAM/CD56、ICAM-1/CD54、EpCAM、CD133及ABCG2阳性细胞表达率的变化。方法检测不同浓度5-FU作用于SMMC-7721细胞系前后细胞增殖能力的变化,流式细胞仪检测残存细胞的细胞周期分布以及5种表面标志物阳性细胞表达率的变化。结果不同浓度5-FU均可抑制SMMC-7721增殖。使用10μg/mL的5-FU浓度作用48 h进一步研究,SMMC-7721细胞周期各期细胞比例均较对照组有影响,且G0/G1、S和G2/M期5-FU作用前后差异有统计学意义(P<0.05),G0/G1期阻滞明显。5-FU处理使SMMC-7721 5种细胞表面标志物阳性细胞比例均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05),阳性细胞比例均明显升高。结论上述实验提示肝癌干细胞逃避5-FU单药物的杀伤可能是临床上肝癌化疗失败和肿瘤复发的重要原因,同时,此实验方法可以作为肝癌干细胞富集的科研模型。     

雷公藤内酯醇对耐顺铂人卵巢癌细胞株COC_1/DDP增殖和凋亡的影响

目的观察雷公藤内酯醇（TP）对耐顺铂（DDP）人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞增殖和凋亡的影响。方法用10ng/ml TP（TP组）培养COC1/DDP细胞24、48、72 h,每组设3个复孔及3个对照孔。采MTT法检测两组细胞的细胞增殖抑制率。用透射电镜观察培养24 hTP组细胞的凋亡形态,用DNA电泳分析细胞DNA凋亡状况。结果 TP组COC1/DDP细胞增殖抑制率且呈时间依赖性提高（P均〈0.05）。作用24 h后,透射电镜观察可见TP组COC1/DDP细胞表面微绒毛消失,细胞核固缩、染色质凝集成新月状,有凋亡小体形成。DNA电泳可见TP组DNA断裂形成＂梯形＂条带。结论 10 ng/ml TP对COC1/DDP细胞有明显的抑制增殖和促凋亡作用。     

NaB对人卵巢上皮癌细胞株3AO 增殖和凋亡的影响

目的 探讨丁酸钠（NaB）对人卵巢上皮癌细胞株3AO增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 用不同浓度NaB对3AO细胞作用不同时间,观察其对3AO细胞增殖活性的影响,分析细胞周期、DNA含量和细胞凋亡率的变化。结果 随培养时间延长,NaB浓度≥4mmol／L时．3AO细胞皱缩,数量渐减,同一NaB浓度下,3AO细胞增殖抑制率随作用时间的延长有增加趋势;NaB浓度为4mmol／L、8mmol／L、12mmol／L时,对3AO细胞增殖有明显抑制作用;NaB作用72h,随浓度升高,增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞百分率逐渐下降,与对照组相比差异有显著性,P〈0．05。NaB作用24h开始出现细胞周期阻滞,随浓度增高,G1期细胞增多,S期细胞减少,作用48h,出现细胞凋亡峰;增加NaB浓度或相同浓度增加作用时间,凋亡峰增高。结论 NaB呈剂量、时间依赖模式影响卵巢上皮癌细胞株3AO的体外增殖,可能通过G1期阻滞诱导卵巢上皮癌细胞凋亡。     

硫代修饰端粒酶反义核酸联合顺铂、阿霉素对胃癌细胞作用的研究

目的：探讨应用硫代修饰人端粒酶RNA（hTR)反义核酸后胃癌细胞对顺铂（DDP）和阿霉素（ADM）敏感性的变化。方法：采用脂质体将针对hTR模版区设计的13相碱基硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸CAGTTAGGGTTAG导入胃癌细胞SGC7901，应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法，流式细胞仪和TRAP－PCR－ELISA法测定联合应用化疗药后对细胞增殖，凋亡和端粒酶活性的影响。结果：化疗药物ADM和DDP地端粒酶活性抑制作用不同，而且有明显依赖趋势。hTR反义PS－ODN可增加ADR和DDP抑制胃癌细胞系SGC7901端粒酶活性，诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖的作用。结论：hTR反义PS－ODN在体外能增加胃癌细胞系SGC701对化疗药ADR、DDP敏感性，其机制可能与其抑制细胞端粒酶活性，诱导细胞凋亡有关。     

Interaction between cisplatin, 5-fluorouracil and vincristine on human hepatoma cell line (7721)

AIM To evaluate the killing effects of CDDP, 5-Fu and VCR on human hepaoma cell line (7721).METHODS The median-effect principle was used.RESULTS Killing effects of the individual drug were enhanced as the median concentration increased. Antagonism was produced when two drugs were used at a higher concentration (CI＞1), and synergism was achiened when CI＜1. Finally, the effect was influenced by both the ratios of drug concentration and the sequence of administration.CONCLUSION The drug administration order and drug concentrations are significant factors that need to be considered in clinical practice.INTRODUCTIONThe combined chemotherapy for malignant carcinoma is desired to produce efficacious synergism between each drug, alleviate side effects of drugs and delay drug resistance. Clinically, the interaction (namely synergism, summation and antagonism) of different anticancer drugs in combination is usually evaluated by Chou-Talalay′s combination index (i.e., median-effect principle)[1-9]. In this paper the combination effect between Cisplatin (Cis), 5-Fluorouracil (5-Flu) and Vincristine (VCR) on human hepatoma cell line 7721, was analyzed in vitro.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人胃癌细胞株MKN45诱导凋亡作用的研究

目的了解表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是否诱导人胃癌细胞株MKN45凋亡及其凋亡信号传导途径，为其临床应用提供进一步的理论依据。方法用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测EGCG对MKN45细胞生长的抑制作用；膜连蛋白V-异硫氰基荧光素（Annexin V-FITE）＋碘化丙啶（PI）方法测定EGCG作用后MKN45细胞的凋亡率；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测EGCG对MKN45细胞内castmse-3活性的影响；Rhodamine123染色检测EGCG作用后MKN45细胞内线粒体膜电位的改变情况。结果EGCG作用后MKN45细胞发生凋亡，随着EGCG作用时间的延长及浓度的增加．凋亡率增加。在EGCG作用8h后MKN45细胞内的caspase-3的活性开始升高，并于作用12h后活性明显升高。线粒体的膜电位于EGCG作用4h后就开始明显下降，并与时间和浓度正相关。结论EGCG可以诱导人胃癌细胞株MKN45细胞凋亡，且与作用时间及浓度正相关。EGCG对MKN45细胞凋亡的诱导是通过线粒体途径发生的．