宫内接触甲基汞对发育阶段大鼠脑神经细胞凋亡和细胞周 …

目的：探讨宫内接触甲基汞所致脑发育神经细胞损伤的机理。方法：对妊娠７￣１０ｄ的大鼠每天灌胃给予４ｍｇ／ｋｇ氯化甲基汞。对２０ｄ胎鼠和出生１￣７ｄ幼鼠的脑组织行流式细胞术定量分析。结果：（１）宫内接触甲基汞可诱导初生期大鼠脑神经细胞凋亡。（２）宫内接触甲基汞对脑神经细胞周期有一定的影响。结论：宫内接触低剂量甲基汞是以诱导凋亡的方式致脑神经细胞损伤。     

氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c—Jun表达的影响

目的：探讨氯化甲基汞（ＭＭＣ）对发育脑组织损伤的机理。方法：将Ｗｉｓｔａｒ系妊娠大鼠于妊娠７￣１０ｄ连续灌胃给予ＭＭＣ ４ｍｇ／ｋｇ,取Ｐ１（ｐｏｓｔｎａｔａｌ ｄａｙ １）,３,５,７,１０,１５仔鼠脑组织制备常规组织切片,采用免疫组织化学法检测ｃ－Ｊｕｎ表达。结果：对照组发育阶段仔鼠大、小脑有ｃ－Ｊｕｎ表达。随着出生后时间延长,大,小脑ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞数下降,并且ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞上有典型凋     

氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c-Jun表达的影响

目的 :探讨氯化甲基汞 (MMC)对发育脑组织损伤的机理。方法 :将 Wistar系妊娠大鼠于妊娠 7～ 1 0 d连续灌胃给予 MMC 4mg/kg,取 P1 (postnatal day 1 ) ,3,5,7,1 0 ,1 5仔鼠脑组织制备常规组织切片 ,采用免疫组织化学法检测 c- Jun表达。结果 :对照组发育阶段仔鼠大、小脑有c- Jun表达。随着出生后时间延长 ,大、小脑c- Jun阳性细胞数下降 ,并且 c- Jun阳性细胞具有典型凋亡形态。实验组 c- Jun表达有高于对照组的趋势 ,其中 P7,1 0 ,1 5小脑中 c- Jun表达明显高于对照组 (P<0 .0 5)。结论 :c- Jun参与了脑细胞发育中正常的凋亡过程。MMC诱导大鼠脑发育中神经细胞凋亡 ,可能是通过 c- Jun表达实现的。     

宫内生长受限胎鼠脑神经细胞凋亡的研究

目的探讨宫内胎儿生长受限(FGR)胎鼠脑组织中神经细胞凋亡的变化。方法将实验用SD大鼠分为实验组和对照组,实验组采用烟酒复合因素制成宫内FGR胎鼠模型,实验组每天于上午9点置于20 cm×20 cm×20 cm自制密闭纸箱中,预留直径1 cm的进气孔,点燃的香烟通过此孔置入,固定,每天烟气环境中3次,每次15~20 m in,燃烟1~1.5支,间隔2~3 h。每天固定时间白酒9 mL.kg-1灌胃1次。对照组于相同时间置于密闭环境中,相同时间等量生理盐水灌胃,实验结束后(实验组妊娠20 d)剖宫取胎称重后断头取脑。通过原位末端缺口标记法观察2组胎鼠大脑顶叶皮质和第三脑室周围灰质神经元凋亡的状况。结果实验组顶叶皮质分子层和第三脑室周围皮质层的凋亡细胞较对照组明显增加,凋亡细胞数和凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性宫内缺氧在导致宫内FGR的同时可引起胎鼠大脑顶叶皮质分子层和第三脑室周围灰质神经细胞凋亡明显增加,间接反应出宫内FGR胎鼠有宫内神经系统损伤存在。     

幼龄小鼠短期甲基汞中毒致细胞凋亡

目的探讨甲基汞所致免疫损伤机制。方法将幼龄小鼠分为6组除对照组外实验5组分别各皮下注射甲基汞1、2、4、8、10mg/(kg.d),连续7d,15d后取胸腺,进行形态学、流式细胞术和DNA琼脂糖凝胶电泳等观测,研究不同剂量组小鼠胸腺细胞凋亡变化。结果甲基汞诱导小鼠胸腺细胞凋亡,凋亡率随剂量增大而增加,第15天凋亡率从(5．42±0．95)％增至(59．30±1．17)％;光镜下实验3、4、5组均观察到胸腺细胞凋亡的典型形态变化;琼脂糖凝胶电泳结果呈"梯形"条带。结论甲基汞可诱导小鼠胸腺细胞凋亡。     

谷氨酸对大鼠胶质细胞细胞周期和凋亡及坏死的影响

关于缺血期间胶质细胞的功能状态、细胞周期的变化以及胶质细胞的死亡形式研究较少。谷氨酸(Ｇｌｕ)作为脑内主要的兴奋性神经递质,与癫痫的发生以及神经元的损伤有密切联系[1],我们观察了离体培养的大鼠皮层胶质细胞经不同浓度的谷氨酸刺激后胶质细胞细胞周期的改变和细胞凋亡及坏死的比例,以期明确脑缺血病理损害介质Ｇｌｕ对胶质细胞功能状态的影响,为探讨缺血性神经细胞的生存与死亡机制提供理论依据。一、材料与方法1胶质细胞培养:(1)神经细胞原代培养:参照Ｍａｎｔｈｒｏｐｅ等[2]的方法,取孕18ｄＳＤ大鼠鼠脑皮质,用完全培养基37℃,…     

水蛭肽注射液对大鼠脑神经细胞凋亡的影响

目的探讨水蛭肽注射液对脑神经保护作用机制。方法采用栓线法阻塞大鼠大脑中动脉,制作MCAO模型即脑缺血再灌注损伤模型。实验动物脑缺血再灌注后进行神经功能评分并观察脑组织神经细胞凋亡的形态,计算脑组织神经细胞凋亡的百分率。结果水蛭肽注射液能降低损伤后大鼠神经功能评分,能抑制再灌注损伤后脑组织神经细胞凋亡。与川芎嗪对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论水蛭肽注射液能减低脑神经细胞凋亡的发生率,对缺血脑组织具有保护作用。     

氯化甲基汞诱导脑胶质瘤细胞凋亡的形态学变化及意义

目的：通过观察氯化甲基汞(MMC)诱导大鼠脑胶质瘤细胞凋亡的形态学改变,探讨MMC的抗脑胶质瘤作用。方法：制备大鼠脑胶质瘤动物模型,将造模成功的大鼠随机分为对照组和实验组,实验组大鼠注射C6脑胶质瘤细胞1周后,每天灌胃给予10 mg·kg^-1MMC,连续5 d;对照组给予相同体积的生理盐水。除自然死亡外,其余存活大鼠在第24天全部处死,取大鼠脑组织,光镜及透射电镜观察其病理组织学改变。结果：大体病理显示,实验组大鼠肿瘤体积明显小于对照组;光镜下显示,实验组大鼠C6胶质瘤细胞生长密度低于对照组,并可见细胞体积变小、核固缩深染的凋亡形态学改变细胞。透射电镜显示,实验组大鼠肿瘤细胞发生核固缩、染色质周边化、核断裂、胞浆空泡变性等改变;对照组大鼠肿瘤细胞核体积增大,外形不规则,核常染色质为主,核仁突出。结论：MMC具有抑制大鼠体内C6胶质瘤增殖的作用,其机制可能是通过诱导胶质瘤细胞凋亡实现。     

大鼠生后不同发育阶段下丘脑细胞凋亡的研究

目的：探讨大鼠生后下丘脑不同发育阶段细胞凋亡的规律及禁水对细胞凋亡的影响。方法取生后发育不同阶段的大鼠下丘脑,（１）用Ｂｏｕｉｎ液固定,骼ＴＵＮＥＬ染色;（２）用改良的Ｂｏｕｉｎ液固定,核固红结晶比染色。结果：（１）委后１ｄ凋亡细胞最多,主要位于下且脑背侧偶室旁核附近。生后５ｄ,凋亡细胞明显减少。以后凋亡的亡细胞越业越少。６０ｄ和见到凋亡细胞,两种以方法结果相似;（２）成年大鼠禁水后,未见凋亡细胞     

甲基汞暴露对仔鼠学习记忆能力的影响

目的评价出生前后甲基汞暴露对仔鼠学习记忆能力的影响. 方法将SD孕鼠分3组:对照组、低剂量组、中剂量组,后两组孕鼠自孕7 d至哺乳期分别予以0.1mg.kg-1.d-1和1mg.kg-1.d-1剂量的甲基汞暴露,Morris水迷宫对3组仔鼠学习获得和记忆保持能力进行测试和分析. 结果 Morris水迷宫学习获得试验测试结果表明:对照组定位能力较好,游泳轨迹以目标象限为主;而汞暴露组定位能力较差,游泳轨迹比较分散.汞暴露游速比对照组快,潜伏期长,其游程也更长,各组间呈现剂量效应关系(P <0.05).对照组、低剂量组、中剂量组的潜伏期(s)分别为24.21±2.13,48.55±3.78,55.04±4.15;目标象限游程占总游程百分比分别为34.73±1.42,26.104±1.29,28.65±1.21;总游程(cm)分别为576.51±57.94,1 387.90±112.57,1 584.38±121.55.记忆保持实验测试中的各项指标3组差异不明显.结论母鼠孕期及哺乳期甲基汞暴露可影响仔鼠学习、记忆能力,并以近期学习获得能力的损害为主,呈剂量效应关系.     

抗抑郁药万拉法新对大鼠海马神经细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:探讨抗抑郁药物万拉法新对谷氨酸(Glu)损伤的海马神经元凋亡、坏死细胞周期的影响,阐明其神经保护作用的机制.方法:采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制Glu损伤模型,实验分为正常对照、Glu损伤和万拉法新给药组,在体外通过FCM测定万拉法新应用前后神经元凋亡、坏死和细胞周期的改变情况.结果:与正常对照组比较,G...     

FTY720对颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡的抑制作用

目的探讨FTY720对颅脑损伤大鼠海马组织神经细胞凋亡的抑制作用。方法30只大鼠随机分成假手术组、模型组和治疗组,每组10只,采用改进的Feeney自由落体损伤装置建立大鼠颅脑损伤模型,假手术组大鼠切开头皮,颅骨钻孔后缝合头皮,不作外力打击。治疗组大鼠按1mg/kg剂量予FTY720腹腔注射,其他组大鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液1ml。24h后断头处死大鼠,分离海马组织,采用TUNEL法检测凋亡神经细胞,Western-blotting检测pro-caspase3/9蛋白表达,四肽荧光底物法检测caspase-3/9蛋白活性。结果模型组大鼠海马组织凋亡神经细胞比例、pro-caspase3/9蛋白表达和caspase-3/9蛋白活性较假手术组显著升高,而治疗组大鼠海马组织凋亡神经细胞比例、pro-caspase3/9蛋白表达和caspase-3/9蛋白活性较模型组显著下降。结论FTY720可显著抑制颅脑损伤大鼠海马组织神经细胞凋亡,具有脑保护作用。     

Long term effects of exposure to viral infections in utero

An analysis was conducted of the major findings of a long term follow up study of 3076 subjects who were exposed to viral infections in utero and who at the time of analysis were up to 40 years of age. Mortality and morbidity were compared with those in a control population matched for sex and date and area of birth. An excess of cancers (16 cases against seven) appeared to be clustered among those exposed to herpes viruses (varicella or cytomegalovirus). There was evidence of an increased risk of diabetes among those exposed to mumps during the first trimester (four cases among 128 subjects against none in 148 controls). The most surprising finding was a decrease of diseases of the skin and subcutaneous tissue and of the nervous system among subjects exposed to antenatal varicella zoster infection. The mechanism for the association may include production of fetal anti-idiotype antibodies in response to transplacentally acquired maternal autoantibodies.     

脑内注射凝血酶对大脑细胞凋亡的影响

目的 探讨脑内注射凝血酶（thrombin，TM）对周围组织Caspase-3蛋白表达和细胞凋亡机制的影响。方法 24只SD大鼠随机分为A，B，C3组，A组在大鼠右倒基底节区注入凝血酶（TM），B组注入TM＋组织蛋白酶G（catbepsia G，CATG），分别于注射后6，24，48，72，96h时间点处死，C组注入生理盐水。取脑组织应用Westernblot技术检测Caspase-3蛋白表达。结果 TM脑内注射后6h Caspase-3蛋白开始增加（P〈0．01），24h达高峰（P〈0．01），然后逐渐下降。TM＋CATG脑内注射后Caspase-3蛋白表达与对照组比较差异均无显著性（P〉0．05）。结论 TN脑内注射后Caspase-3蛋白表达明显增加，TM通过蛋白酶激活受体-1激活（PAR-1）激活Caspase-3，诱导细胞凋亡。     

孕期高盐饮食对胎鼠心肌细胞周期的影响

目的观察孕期给予高盐饮食后,胎鼠心肌细胞周期是否有改变及其与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的关系。方法将SD大鼠随机分为正常组和高盐组,在孕3至21d分别给予正常盐饮食和高盐饮食,孕21d时检测母鼠和胎鼠的血钠浓度、血浆渗透压、血浆AngⅡ浓度以及胎鼠心脏组织中的AngⅡ含量,称量孕21d胎鼠的心脏质量后,分离出心肌细胞,培养后检测细胞周期。结果与正常组相比,高盐组母鼠和胎鼠的血钠、血浆渗透压无明显改变（均P〉0．05）,母鼠和胎鼠血浆AngII浓度明显降低,而胎鼠心脏局部AngⅡ明显增加（均P〈0．05）。胎鼠心肌细胞G1期比例明显降低而s期比例明显增加,AngⅡ明显降低心肌细胞G1期比例并明显增加S期比例（均P〈0．05）,AngⅡ受体1型（AT。R）阻断剂可以阻断AngⅡ引起的细胞周期改变,而Ang11受体2型（AT2R）阻断剂对由AngⅡ引起的细胞周期改变无影响。结论孕期高盐饮食可能激活了胎鼠心脏局部AngⅡ,进而改变心肌细胞周期和影响胎鼠心脏发育,且AT1R介导了AngII对心肌细胞周期的影响。     

大鼠液压脑损伤导致皮质神经细胞的早期凋亡

目的:观察大鼠脑损伤后神经细胞的早期凋亡及其动态变化.方法:利用液压脑损伤致伤仪制作SD大鼠左顶叶中度脑损伤模型,对照组埋打击管但不致伤.动物致伤后分别于伤后6 h、24 h和48 h,采用流式细胞仪和电子显微镜,对大鼠液压脑损伤后神经细胞凋亡的动态过程进行观察.结果:流式细胞术检测结果显示大鼠液压脑损伤后6 h左侧顶叶皮质神经细胞即可出现早期凋亡现象.伤后6 h神经细胞的早期凋亡率为21.97%(P＜0.01),伤后24 h达高峰,为65.90%(P＜0.01),伤后48 h与伤后24 h比较无显著性差异.电镜观察发现伤后24 h可出现早期凋亡.结论:大鼠液压脑损伤后6 h即可出现神经细胞的早期凋亡,较以往报道的伤后神经细胞凋亡出现的时间更早.     

DEHP短期重复暴露对大鼠神经行为学及脑脂质过氧化的影响

目的：初步探讨邻苯二甲酸二乙基己酯（DEHP）亚急性暴露对大鼠神经行为及脑脂质过氧化的影响及其机制。方法：初断乳雄性Wistar大鼠用10mg／kg／d、100mg／kg／d、1000mg／kg／d DEHP连续灌胃染毒30天。动态观察动物一般状况、体重变化；Morris水迷宫实验于2周及4周后动态测定神经行为学变化。染毒结束后断头处死大鼠，取全脑。硫代巴比妥酸法测定MDA含量；DTNB法检测GSH水平及GSH—PX活力；黄嘌呤氧化酶法分析SOD活力。结果：随着DEHP染毒浓度的增加，大鼠体重增长受限；无论2周末或4周末Morris水迷宫测试表明神经行为变化不明显；脂质过氧化水平及抗氧化酶活力亦未发生明显改变。结论：短期重复DEHP染毒初断乳大鼠尚未引起神经行为异常，未引起脑氧化损伤改变。对于DEHP神经毒性及其机制研究还有待于进一步确认及深入研究。     

孕期至幼年期低水平铅暴露仔鼠海马锌离子平衡的变化及其发育期海马神经元的损伤

目的:探讨孕期至幼年期铅暴露对仔鼠发育期海马神经元的损伤及其与Zn2+平衡的相关机制。方法：25只母鼠随机分为对照组母鼠（n=10）和铅暴露组母鼠（n=15）。从受孕当天开始至仔鼠生后7、14和21　d时间点分别将对照组和铅暴露组仔鼠随机各分为3组(P7、P14和P21组),每小组仔鼠8只,铅暴露组母鼠按上述时间段给予0.2%醋酸铅饮水,对照组母鼠正常饮水。在仔鼠生后上述时间点分别测定仔鼠血铅和脑铅含量,Timm’s染色观察海马苔藓纤维(MF),并采用免疫组织化学法检测锌离子转运体-1（ZnT-1）的表达水平。结果：铅暴露组仔鼠血铅和脑铅含量显著高于对照组（P<0.01）。铅暴露组仔鼠海马CA2区、CA3区出现大量变性细胞,且细胞排列松散,细胞层数减少。Timm’s染色,正常组仔鼠生后21　d开始出现MF发芽,其吸光度(A)值为0.135　0±0.024　3;铅暴露组仔鼠生后21　d MF发芽的A值为0.096 7±0.024 2,较正常组显著降低(P<0.01)。铅暴露组生后7 d仔鼠海马ZnT-1表达水平显著低于对照组（P<0.01）,生后14和21 d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：孕期至幼年期低水平铅暴露可能导致仔鼠海马神经元Zn2+失衡和海马神经元胞内Zn2+水平降低,后者可能参与铅暴露导致发育期神经损伤。     

亚慢性铝暴露对SD大鼠学习记忆功能及海马细胞凋亡作用的研究

目的探讨亚慢性铝暴露对SD大鼠学习记忆功能及海马细胞凋亡的影响。方法将40只初断乳SPF级SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为对照组(蒸馏水),低、中、高浓度组(分别是2mg/ml、4mg/ml、6mg/ml AlCl_3),采用自由饮水方式让大鼠连续染毒AlCl_33个月。采用Morris水迷宫试验来检测各组每只大鼠的认知能力。采用HE染色法检测大鼠海马的病理变化,TUNEL法检测海马凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果与对照组相比,低、中、高AlCl_3浓度组潜伏期长,差异均有统计学意义(q=4.28,P<0.01;q=7.41,P<0.01;q=9.85,P<0.01);三组铝染毒大鼠停留目标象限时间均短于对照组(F=11.62,P<0.01);三组铝染毒大鼠穿越平台次数均少于对照组(F=16.90,P<0.001)。三组不同浓度铝染毒组内两两比较显示,高浓度组和中浓度组的潜伏期均长于和穿越平台次数均少于低浓度组,高浓度组停留目标象限时间短于低浓度组和中浓度组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,铝暴露各浓度组大鼠海马神经元数目减少,胶质细胞数量增多;铝暴露组Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增多,Bcl-2/Bax比值降低,凋亡细胞数增多。结论亚慢性铝暴露可致大鼠学习记忆功能下降,其机制可能与AlCl_3诱导海马细胞Bcl-2表达下调、Bax表达上调有关。