白藜芦醇对小鼠肾纤维化TGF-β_1/Smads信号转导通路的干预研究

目的:观察白藜芦醇对单侧输尿管梗阻(UUO)构建的小鼠肾纤维化模型TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响,探讨其对肾纤维化的干预作用及其机制。方法:40只雄性ICR小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组,UUO模型(UUO)组,UUO+白藜芦醇低剂量(20 mg/kg)治疗(ResL)组,UUO+白藜芦醇高剂量(40 mg/kg)治疗(ResH)组,UUO+氯沙坦(10 mg/kg)治疗(Los)组,每组8只。均于术后当天灌胃给药,每24 h 1次。14 d时处死小鼠,留取血清检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾组织行HE和Masson染色,观察病理结果,实时荧光定量PCR检测肾组织TGF-β_1、Smad2、Smad7 mRNA的表达。结果:白藜芦醇可以减轻肾组织纤维化的病理损害,使肾组织TGF-β_1、Smad2 mRNA表达降低,Smad7 mRNA表达升高(P0.05,部分P0.01),以高剂量组改善最显著。结论:白藜芦醇可呈剂量相关性下调TGF-β_1、Smad2及上调Smad7来抑制TGF-β_1/Smads信号转导通路,从而发挥抗肾间质纤维化的作用。     

黄精皂苷对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨黄精皂苷对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法采用单次腹腔注射大剂量链脲佐菌素(55 mg/kg)建立糖尿病肾病大鼠模型,并随机分为模型组,黄精皂苷低(35 mg/kg)、高(70 mg/kg)剂量组及厄贝沙坦(17.5 mg/kg)组,每组10只;另随机选取10只健康Wistar大鼠作为正常组,各组灌胃给药,1次/d,正常组及糖尿病肾病模型组灌胃等体积蒸馏水,给药时间为16周。检测各组大鼠一般状态、肾脏系数、尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白总量、肾脏组织病理形态变化、Ⅳ型胶原及Wnt4、β-catenin表达。结果与模型组比较,黄精皂苷组大鼠一般状态及肾脏病理形态均得到一定程度改善;与模型组比较,黄精皂苷组大鼠肾脏系数,尿素氮、血肌酐及第8、12、16周的24 h尿蛋白总量明显减少(P0.05);与模型组比较,黄精皂苷组大鼠Ⅳ型胶原及Wnt4、β-catenin表达均也明显降低(P0.05)。结论黄精皂苷可以通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的激活,抑制肾小管间质纤维化进程,最终发挥肾脏保护作用。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏病理及肾脏TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的分析化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏病理及肾脏TGF-β_1/Smad信号通路相关因子表达的影响。方法糖尿病大鼠模型采用高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立,大鼠分为正常对照组、模型组、中药组和厄贝沙坦组,各组相应药物剂量灌胃。灌胃16周检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量(24hUTP),肾组织行光镜、电镜观察,Real-time PCR检测肾脏TGF-β_1、Smad2、Smad7mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组各项指标均有差异(P0.05);与模型组比较,两治疗组Scr、BUN、24hUTP及TGF-β_1、Smad2 mRNA表达水平明显下降(P0.05),Smad7 mRNA表达水平明显上升(P0.05),病理损伤明显减轻;与厄贝沙坦组比较,中药组24hUTP明显降低(P0.05)。结论化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smad信号通路有关。     

刺梨黄酮对诱导大鼠肾纤维化TGF-β1/Smads信号转导干预作用及机制分析

目的:探讨观察刺梨黄酮对UUO模型大鼠肾纤维化TGF-β1/Smads信号转导干预作用,并分析其机制。方法:将75只造模成功的肾纤维化大鼠随机分为5组,即假手术组、模型对照组、氯沙坦钾组、刺梨黄酮中剂量及大剂量组,每组各15只。氯沙坦钾组给予氯沙坦钾灌胃;刺梨黄酮中剂量及大剂量组分别给予刺梨黄酮灌胃。模型组和假手术组均同时给予同等容积的生理盐水。干预14 d后,观察24 h Upro、Scr、BUN,对比各组大鼠肾脏组织TGF-β1、Smad2/3、Smad7蛋白表达水平,分析刺梨黄酮对肾纤维化大鼠作用机制。结果:干预过程中,模型组和氯沙坦钾组各有1只大鼠死亡。模型组、氯沙坦钾组、刺梨黄酮中剂量和大剂量组24 h Upro、Scr和BUN水平较假手术组显著升高(P0.01);治疗后氯沙坦钾组、刺梨黄酮中剂量和大剂量组较模型组显著降低;与氯沙坦钾组相比,刺梨黄酮中剂量组24 h Upro、Scr和BUN表达水平无明显差异(P0.05)。免疫组化显示模型组、氯沙坦钾组和刺梨黄酮不同剂量组中,各组TGF-β1、Smad2/3表达均明显高于假手术组(P0.01),各治疗组的表达水平明显低于模型组(P0.05)。各组Smad7的表达均明显低于假手术组(P0.01),各治疗组的表达水平明显高于模型组(P0.05)。与氯沙坦钾组比较,刺梨黄酮中剂量组TGF-β1、Smad2/3、Smad7表达水平无明显差异。结论:刺梨黄酮中剂量组可显著改善肾纤维化大鼠肾功能指标,推测和抑制TGF-β1、Smad2/3蛋白表达、激活Smad7蛋白表达有关。     

消渴平合剂对STZ诱导的糖尿病肾病大鼠TGF-β_1/Smad7信号转导通路的影响研究

目的:观察消渴平合剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠TGF-β1/Smad7信号转导通路的影响,探讨其对DN的防治作用及机制。方法:复制DN大鼠模型,随机分为正常组10只,模型组10只、厄贝沙坦组10只和消渴平合剂组10只。12周时处死大鼠,观察各组大鼠24 h尿蛋白变化情况,检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG)、一氧化氮(NO),大鼠肾组织行HE染色,免疫组化检测肾组织TGF-β1及Smad7蛋白。结果:消渴平合剂可以改善DN大鼠的一般状况,明显降低24 h尿蛋白定量(P0.01),减轻肾组织病理性损害。与模型组比较,消渴平合剂组BUN、Scr、TG含量显著降低(P0.01),NO含量明显升高(P0.01);肾组织TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.01),Smad7蛋白表达显著升高(P0.01)。结论:消渴平合剂可用于治疗糖尿病肾病,其机制可能与抑制DN大鼠肾脏TGF-β1/Smad7信号转导通路的激活有关。     

Wnt/β-catenin通路在糖尿病肾病大鼠的表达及化瘀通络中药的干预作用

目的探讨Wnt/β-catenin通路在糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的表达及化瘀通络中药对其的干预作用。方法 60只大鼠中选取10只为对照组,其余大鼠给予高糖高脂饲料喂养联合ip小剂量链脲佐菌素(STZ)制备DN模型。成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、化瘀通络中药组,各组ig给药,20周末检测24 h尿蛋白定量,RT-PCR法检测Wnt4、β-catenin m RNA表达,免疫组化及Western blotting法检测Wnt4、β-catenin蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量及Wnt4、β-catenin m RNA和蛋白的表达量明显升高(P0.01)。与模型组比较,中药组及厄贝沙坦组24 h尿蛋白定量及Wnt4、β-catenin m RNA和蛋白的表达量明显降低(P0.05、0.01)。结论化瘀通络中药可减少DN大鼠尿蛋白,且能够抑制大鼠肾脏存在的Wnt/β-catenin通路高表达,该作用可能是其减少蛋白尿排泄的主要途径之一。     

抗纤灵方对肾纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路表达的影响

目的:研究抗纤灵方对5/6肾切除所致肾纤维化大鼠的治疗效果,并探讨其分子作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组(n=10),假手术组(n=10),5/6肾切除肾纤维化造模组(n=30)。将造模成功的大鼠随机分为模型组、抗纤灵组、氯沙坦钾组。氯沙坦钾组、抗纤灵方组每日分别给予氯沙坦钾(33. 3 g·kg-1)及抗纤灵方(21 g·kg-1)灌胃治疗,其余组都用等体积的生理盐水。持续8周灌胃后处死,检测各组大鼠血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),24 h尿蛋白(24 h-Pro);苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理学改变;马松(Masson)染色观察肾脏纤维化程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测肾脏转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad2,Smad3,Smad7蛋白和mRNA在肾脏组织中的表达。结果:与正常组和假手术组比较,模型组大鼠的SCr,BUN,24 h-Pro上升,纤维化面积和肾脏损伤评分增加,TGF-β_1,Smad2,Smad3 mRNA与蛋白表达升高,Smad7 mRNA与蛋白表达显著下降(P 0. 01)。与模型组相比,氯沙坦钾组、抗纤灵方组可减少纤维化面积,降低肾脏损伤评分,SCr,BUN,24 h-Pro,TGF-β_1,Smad2,Smad3 mRNA与蛋白的表达水平,Smad7mRNA与蛋白表达显著上调(P 0. 01),但低于正常组与假手术组的水平。结论:中药抗纤灵方可通过抑制TGF-β_1/Smad通路来延缓肾纤维化。     

黄葵素对糖尿病肾病大鼠氧化应激、炎症反应和TGF-β1/Smad2信号通路的影响

目的探讨黄葵素对糖尿病肾病大鼠氧化应激、炎症反应和TGF-β₁/Smad2信号通路的影响。方法将60只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病肾病组、黄葵素低剂量组、黄葵素高剂量组,每组15只。造模成功后第2天,黄葵素低剂量组和黄葵素高剂量组分别给予黄葵素75 mg/kg和150 mg/kg灌胃,对照组和糖尿病肾病组给予生理盐水灌胃,均1次/d,连续8周。血糖仪测定各组大鼠空腹血糖(FPG)水平;双缩脲法测定各组大鼠24 h尿蛋白量;全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平;ELISA检测各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察各组大鼠肾组织病理变化;Masson染色观察各组大鼠肾组织纤维化情况;免疫组织化学染色检测各组大鼠肾组织中TGF-β₁表达情况;ELISA检测各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)表达水平;Western blot检测各组大鼠肾组织中TGF-β₁和p-Smad2蛋白表达水平。结果与对照组比较,糖尿病肾病组大鼠FPG、SCr、BUN、24 h尿蛋白量及血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平均明显升高(P均<0.05),肾组织坏死明显,可见大量炎性细胞,肾小球和肾小管中有大量蓝色的胶原纤维,肾组织中TGF-β₁阳性表达率和肾组织中MDA水平、TGF-β₁蛋白表达水平、Smad2蛋白的磷酸化水平均明显升高(P均<0.05),肾组织中SOD和GSH水平均明显降低(P均<0.05)。与模型组比较,黄葵素各组大鼠FPG、SCr、BUN、24 h尿蛋白量、IL-1β、TNF-α、IL-6水平及肾组织中MDA水平、TGF-β₁蛋白表达水平、Smad2蛋白的磷酸化水平均明显降低(P均<0.05),肾组织中SOD和GSH水平均明显升高(P均<0.05)。结论黄葵素可减轻糖尿病肾病大鼠的炎症反应、氧化应激和肾损伤,抑制TGF-β₁/Smad2信号通路的激活,对糖尿病肾病具有潜在的治疗作用。     

百令胶囊对糖尿病肾病大鼠TGF-β_1/Smad信号通路影响的实验研究

目的:研究百令胶囊对糖尿病肾病大鼠TGF-β1、Smad2/3、Smad7蛋白表达的影响,探讨其对糖尿病肾病的作用机制及治疗效果。方法:雄性Wistar大鼠70只随机分为4组:正常对照组、模型组、百令胶囊组、厄贝沙坦组。单侧肾切除加链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病肾病动物模型,造模成功后开始灌胃给药,然后定期测定24小时尿蛋白量、血糖、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN);光镜观察肾小球、肾小管组织结构变化;免疫组织化学技术检测肾组织TGF-β1、Smad2/3、Smad7蛋白的表达。结果:模型组各个时期血糖和24小时尿蛋白、SCr、BUN均明显高于正常对照组,TGF-β1、Smad2/3蛋白表达明显增强,Smad7蛋白表达呈弱阳性,肾组织出现明显的病理变化;经百令胶囊治疗后,24小时尿蛋白量、SCr、BUN均降低,而血糖无明显变化,TGF-β1、Smad2/3蛋白表达下调,Smad7蛋白表达增强。结论:百令胶囊能够改善肾功能,改善糖尿病肾病大鼠肾脏病理变化,调节TGF-β1/Smad信号通路是其作用机制之一。     

肾病Ⅰ号方对单侧输尿管梗阻大鼠Wnt通路Wnt4和β-catenin表达的影响

目的研究肾病Ⅰ号方对Wnt通路中Wnt4和β-catenin表达的影响及肾病Ⅰ号方抗肾纤维化的机理。方法雄性SPF级SD大鼠108只,随机分为假手术组、模型组、西药组(盐酸贝那普利)、肾病Ⅰ号方高、中、低剂量组,每组18只。假手术组仅游离左侧输尿管,其余5组行左侧输尿管结扎术,于术后第2天灌胃。各组分别于灌胃后第7、14、21天随机选取6只大鼠留取24 h尿液,检测24 h尿蛋白(24 h UP);心脏取血,检测血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN);处死大鼠,取肾脏组织行Masson染色,光学显微镜下观察肾脏组织病理改变;免疫组化方法观察Wnt4和β-catenin在肾间质的阳性表达情况。结果模型组和给药组大鼠血Scr和BUN较假手术组显著升高(P0.05),24 h UP无统计学差异(P0.05),Masson染色示蓝色胶原组织增多,Wnt4和β-catenin表达增加(P0.05)。西药组和肾病Ⅰ号方高、中、低剂量组大鼠血Scr和BUN较模型组显著降低(P0.05),24 h UP差异无统计学意义(P0.05),Masson染色示蓝色胶原组织减少,Wnt4和β-catenin表达降低(P0.05)。与西药组比较,肾病Ⅰ号方高、中、低剂量组大鼠各检测指标无统计学差异(P0.05)。结论肾病Ⅰ号方可保护肾小管,并可能通过降低肾小管上皮细胞中Wnt4和β-catenin的表达,减少细胞外基质堆积,从而达到抗肾纤维化的作用。     

参芪保肾颗粒剂对阿霉素肾病大鼠转化生长因子β1表达的影响

目的:观察参芪保肾颗粒剂对阿霉素肾病大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨本药延缓CRG进展的作用机理.方法:采用阿霉素肾病大鼠,分为5组,分别给予参芪保肾颗粒剂2.0g/k·d-1、5.0g/kg·d-1及0.25%苯那普利10mg/kg·d-1灌胃,给药至第18W.观察24h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮、肌酐清除率,肾小管-间质病理变化,并用免疫组化法观察转化生长因子β1(TGF-β1)在肾组织的表达.结果:给药组尿蛋白含量、血Scr、BUN明显降低(P＜0.01),肾小管-间质病理变化,给药组明显减轻,TGF-β1主要表达于肾小球内皮细胞、肾小管上皮细胞,给药组阳性表达率明显减少.结论:参芪保肾颗粒剂可使尿蛋白量减少,降低血Ccr、BUN,改善肾功能,减轻肾小管-间质损伤,使TGF-β1在肾脏组织内的表达明显下调,此可能是本药延缓CRF进展的作用机理之一.     

疏利三焦法通过转化生长因子-β途径调节糖尿病肾病足细胞凋亡机制的研究

目的研究疏利三焦法通过转化生长因子-β(TGF-β)途径调节糖尿病肾病足细胞凋亡的机制。方法 48只SD大鼠,随机抽取8只作为对照组,余40只进行糖尿病肾病模型造模,取60 mg/kg的链脲佐菌素(STZ)溶解于0.1 mol/L灭菌枸橼酸钠缓冲液(pH 4.0)进行腹腔注射,对照组大鼠腹腔注射等量灭菌枸橼酸钠缓冲液。将34只造模成功大鼠随机分为模型组8只、缬沙坦组8只、疏利组9只、疏利高组9只。疏利组予三消汤9 mL/(kg·d)灌胃;疏利高组予三消汤18 mL/(kg·d)灌胃;缬沙坦组予缬沙坦10 mg/(kg·d)灌胃;对照组和模型组予0.9%氯化钠注射液18 mL/(kg·d)灌胃,连续给药8周。干预8周后,观察大鼠血糖、肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量及肾脏TGF-β_1、Smad2/3蛋白、Smad7蛋白和足细胞凋亡水平。结果模型组、缬沙坦组、疏利组、疏利高组血糖、肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量水平均高于对照组(P0.05);缬沙坦组、疏利组、疏利高组肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量,疏利组、疏利高组血糖与模型组比较均降低(P0.05);疏利组、疏利高组血糖、肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量均低于缬沙坦组(P0.05);疏利高组血糖、肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量均低于疏利组(P0.05)。模型组、缬沙坦组、疏利组、疏利高组TGF-β_1、Smad2/3蛋白、足细胞凋亡均高于对照组(P0.05),Smad7蛋白低于对照组(P0.05);缬沙坦组、疏利组、疏利高组TGF-β_1、Smad2/3蛋白、足细胞凋亡均低于模型组(P0.05),Smad7蛋白高于模型组(P0.05);疏利组、疏利高组TGF-β_1、Smad2/3蛋白、足细胞凋亡均低于缬沙坦组(P0.05),Smad7蛋白高于缬沙坦组(P0.05);疏利高组TGF-β_1、Smad2/3蛋白、足细胞凋亡低于疏利组(P0.05),Smad7蛋白高于疏利组(P0.05)。结论疏利三焦法可通过抑制TGF-β/Smad信号通路激活,进而抑制足细胞凋亡,缓解糖尿病肾病病情,值得进一步研究探讨。     

当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:研究当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad信号通路的调控作用,探讨其对DN大鼠的作用及产生该作用可能的机制。方法:采用一次性大剂量(60 mg·kg-1)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DN大鼠模型。将DN大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及当归-红芪超滤膜提取物低、中、高剂量组,之后开始灌胃给药,每天1次,8周后测空腹血糖(FBG),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),24 h尿蛋白;光镜观察肾组织结构变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量;免疫组化法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平明显升高,ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量明显升高,肾组织病理结构异常较为明显,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,当归-红芪超滤膜提取物各组均不同程度降低了DN大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平(P0.05);ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量降低(P0.05),肾组织病理结构异常得到改善,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达减少(P0.05,P0.01),TGF-β_1,Smad2/3 mRNA表达减少(P0.05,P0.01)。结论:当归-红芪超滤膜提取物可改善DN大鼠肾功能病变,延缓DN慢性病理进展,其机制可能与其抑制TGF-β_1/Smad信号通路有关。     

肾衰宁胶囊对糖尿病肾病大鼠肾功能及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的观察肾衰宁胶囊对糖尿病肾病大鼠肾功能及Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨肾衰宁胶囊的肾保护作用。方法将50只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、肾衰宁低剂量组、肾衰宁中剂量组和肾衰宁高剂量组,每组10只。对除正常组外,其他组均进行糖尿病肾病造模。造模成功后,肾衰宁低、中、高剂量组分别灌胃0. 11 g/kg、0. 22 g/kg、0. 44 g/kg肾衰宁胶囊,正常组、模型组灌胃等量生理盐水,均连续8周。末次给药24 h后,取各组大鼠血、尿,用于检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及尿蛋白;取各组大鼠肾脏,分别进行HE染色、Masson染色,并采用Western-blot法检测肾组织中Wnt-1及β-catenin的相对表达量。结果模型组尿蛋白、SCr及BUN水平均明显高于正常组(P均0. 05),肾衰宁各剂量组尿蛋白、SCr及BUN水平均明显低于模型组(P均0. 05),且肾衰宁各剂量组呈剂量依赖性降低(P均0. 05)。HE染色显示肾衰宁各剂量组大鼠肾组织间质炎性浸润等病理改变明显轻于模型组,Masson染色显示肾衰宁各剂量组大鼠肾组织胶原沉积量明显少于模型组,且肾衰宁高剂量组病理改变更轻。模型组大鼠肾组织中Wnt-1及β-catenin相对表达量均明显高于正常组(P均0. 05),肾衰宁各剂量组大鼠肾组织中Wnt-1及β-catenin相对表达量均明显低于模型组(P均0. 05),且肾衰宁各剂量组呈剂量依赖性降低(P均0. 05)。结论肾衰宁胶囊可有效改善糖尿病肾病肾损伤,可能与其有效调节Wnt/β-catenin信号通路有关。     

通腑泄浊法对慢性肾脏病大鼠TGF-β1/p38MAPK信号通路的调节作用

目的考察通腑泄浊法对慢性肾脏病大鼠TGF-β1/p38MAPK信号通路的调节作用。方法 30只大鼠随机分为空白组、模型组、通腑泄浊法组、大黄配方颗粒组,灌胃给予2.5%腺嘌呤混悬液(200 mg/kg)建立慢性肾脏病大鼠模型。8周给药后,检测肾功能指标、肾脏病理变化、24 h尿蛋白、尿毒症毒素、TGF-β1/p38MAPK信号通路、肾脏纤维化程度。结果与模型组比较,通腑泄浊法组尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胱抑素(CysC)、同型半胱氨酸(HCY)、硫酸吲哚酚(IS)、24 h尿蛋白、IL-6、TGF-β1水平,α-SMA、TGF-β1、p-p38MAPK蛋白表达,肾脏纤维化程度显著降低(P0.05,P0.01)。结论通腑泄浊法可通过减少尿毒症毒素、抑制被活化的TGF-β1/p38MAPK信号通路来延缓慢性肾脏病大鼠肾纤维化进展。     

芪葵颗粒对STZ诱导糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用及机制研究

目的:探讨芪葵颗粒对STZ诱导的糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用及其可能机制。方法:采用腹腔一次性注射STZ(60 mg/kg)建立糖尿病肾病大鼠模型,将造模成功的SD大鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦(15 mg/kg)阳性对照组及芪葵颗粒高(4.8 g/kg)、低(1.6 g/kg)剂量组,每组10只;另随机选取SD大鼠10只作为正常对照组。隔周分笼收集24 h尿液检测尿蛋白;检测血清Scr、BUN、IL-6、CRP含量及肾组织p38MAPK、TGF-β1m RNA表达;肾组织行HE染色,观察肾组织的病理形态。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低(P0.05),肾脏指数、尿蛋白、血清Scr、BUN、IL-6、CRP含量及肾组织p38MAPK、TGF-β1m RNA表达均显著升高(P0.05),肾脏病理损害明显。与模型组比较,芪葵颗粒各剂量组体质量显著升高(P0.05),肾脏指数、尿蛋白、血清Scr、BUN、IL-6、CRP含量及肾组织p38MAPK、TGF-β1m RNA表达显著降低(P0.05),且肾脏病理损害明显减轻。结论:芪葵颗粒可通过抑制炎症因子表达和p38MAPK信号通路的激活,从而发挥对STZ致糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用。     

清化固肾排毒颗粒对肾纤维化大鼠Wnt通路Wnt1和β-catenin表达的影响

目的观察清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠Wnt/β-catenin信号通路中Wnt1、β连环蛋白(β-catenin)表达的影响,从而探讨清化固肾排毒颗粒对肾间质纤维化的作用机制。方法 108只SPF级SD大鼠随机分为假手术组和模型组,清化固肾排毒颗粒高、中、低剂量(3.00、1.50、0.75 g/kg)组,洛丁新(1.60 mg/kg)组,每组18只;除假手术组外,各组大鼠均以结扎左侧输尿管制备单侧输尿管梗阻肾纤维化模型。各组分别于造模第7、14、21天时随机处死6只大鼠,采血,检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr)水平;取手术侧肾脏组织进行相关病理检测,分别采用HE染色和Masson染色评价肾小管间质纤维化损伤程度,免疫组织化学染色检测肾脏组织Wnt1和β-catenin的表达情况。结果与假手术组比较,各造模组大鼠血清SCr、BUN水平升高(P0.05),间质纤维化程度加重(P0.05),肾组织β-catenin表达明显增多(P0.05),随着输尿管梗阻时间延长,各指标程度加重;与模型组比较,清化固肾排毒颗粒高、中、低剂量组和洛丁新组大鼠血清SCr、BUN水平下降(P0.05),间质纤维化程度有所缓解(P0.05),肾组织β-catenin表达降低(P0.05)。免疫组化结果显示:与假手术组比较,各造模组大鼠肾小管上皮细胞内Wnt1、β-catenin高表达(P0.05),在梗阻后第7天Wnt1表达量最高(P0.05),随后降低;与模型组比较,清化固肾排毒颗粒各剂量组、洛丁新组大鼠Wnt1、β-catenin表达降低(P0.05)。结论清化固肾排毒颗粒可以改善肾纤维化的发生发展,其作用机制可能是通过抑制Wnt1、β-catenin的表达,起到保护肾脏的作用。     

丹酚酸B干预肾间质纤维化Wnt/β-catenin信号通路的研究北大核心CSCD

目的探究丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对肾间质纤维化Wnt/β-catenin信号通路关键组分的影响并初步探索其量效关系,为丹酚酸B在临床慢性肾病的治疗提供理论依据。方法将32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只:假手术组(Sham),模型组即单侧输尿管结扎组(unilateral ureteral obstruction,UUO),丹酚酸B(Sal B)高、低剂量组(25,6.25 mg·kg^(-1)·d^(-1))。术后第21天,采血,取肾。检测各组小鼠血清肌酐(serum creatinine,Scr)和血清尿素氮(blood urea nitrogen,Bun)的含量;HE和Masson染色光镜下观察肾间质的病理改变;Western Blot技术检测肾组织Col.Ⅰ、α-SMA、E-cad、TGF-β1、β-catenin和p-GSK3β蛋白表达水平。结果与Sham组比较,UUO组小鼠的血Scr、BUN均明显升高(P<0.05,P<0.01);与UUO组比较,Sal B低剂量组小鼠的血Scr、BUN无明显变化(P>0.05);Sal B高剂量组小鼠的血Scr、BUN有不同程度的降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。HE、Masson染色结果,Sal B低、高剂量组小鼠肾间质病理变化明显轻于UUO组,评分显著减少(P<0.01)。肾组织Western Blot检测结果显示,与UUO组比较,Sal B低、高剂量组小鼠肾脏中Col.Ⅰ、α-SMA、TGF-β1的表达水平均有不同程度的下降(P<0.05,P<0.01),Sal B低剂量组E-cad的表达水平无明显变化,而Sal B高剂量组E-cad的表达水平则明显升高(P<0.01);β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达水平均显著下降(P<0.01),且高剂量组各项指标较低剂量组下降更为明显(P<0.05,P<0.01)。结论丹酚酸B可能通过介导Wnt/β-catenin通路的关键组分,来调控Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制UUO所致的小鼠肾间质纤维化。     

基于TGF-β1/Smad 通路探讨红花黄色素对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的保护作用

目的观察红花黄色素对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠的保护作用及其对转化生长因子β1（TGF-β1）/ Smad 信号通路的影响。方法采用腺嘌呤（250 mg·kg-1）灌胃建立肾纤维化大鼠模型。将SD 大鼠随机分为对照 组、模型组、氯沙坦组（9 mg·kg-1）及红花黄色素低、高剂量组（9、18 mg·kg-1）,每组10 只,灌胃给药,每天 1 次,连续30 d。检测大鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）含量;采用HE 和Masson 染色法观察大鼠肾脏组织病 理学变化;采用RT-qPCR 法检测大鼠肾组织中TGF-β1、Smad4 及Smad7 mRNA 表达情况;采用免疫组化法 及Western Blot 法检测大鼠肾组织中TGF-β1、Smad4 及Smad7 蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组 大鼠血清Cr、BUN 含量显著升高（P＜0.01）;大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA 及蛋白表达水平明显升高（P＜ 0.05）,Smad7 mRNA 及蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。与模型组比较,各给药组大鼠血清Cr、BUN 水平明 显降低（P＜0.05,P＜0.01）;各给药组大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA 及蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）, Smad7 mRNA 及蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。各组大鼠肾脏组织中Smad4 mRNA 及蛋白表达水平无明显 变化（P > 0.05）。结论红花黄色素对腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠具有保护作用,其机制可能与抑制TGF-β1/ Smad 信号通路有关。     

复方丹参片通过调控TGF-β1/Smad 通路及基质金属蛋白酶水平对肾纤维化大鼠的作用机制研究

目的基于TGF-β1/Smad 通路和基质金属蛋白酶水平探讨复方丹参片对肾纤维化大鼠的保护作用及相 关机制。方法采用灌胃腺嘌呤（250 mg·kg-1）的方式制备肾纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型 组、氯沙坦组（0.09 g·kg-1）及复方丹参低（0.3 g·kg-1）、高（0.6 g·kg-1）剂量组。各组大鼠给予相应剂量灌胃给 药,每日1 次,连续干预4 周。检测大鼠血清Cr、BUN 水平;采用HE 及Masson 染色法观察肾脏组织病理形 态及纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 蛋白表达水平;采用 Western Blot 法检测肾脏组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大 鼠血清Cr、BUN 水平明显升高（P＜0.05）;肾脏出现明显纤维化病变;肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、 TIMP-1 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Smad7、MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与模 型组比较,低、高剂量复方丹参片均能明显降低大鼠血清Cr、BUN 水平（P＜0.05）;明显改善肾脏纤维化病 变;降低肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、TIMP-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,升高Smad7、MMP-2、 MMP-9 蛋白表达水平（P＜0.05）。结论复方丹参片可能通过抑制TGF-β1/Smad 通路及提高基质金属蛋白酶 水平来实现对肾纤维化大鼠的保护作用。