十一味甘露微丸对绝望小鼠模型行为及海马TrkB、5-HT系统的影响

目的观察十一味甘露微丸在小鼠行为绝望模型中小鼠行为学及海马5-HT转运体编码基因(Slc6a4),5-HT1A受体编码基因(Htr1a)和脑源性神经营养因子受体B(TrkB)mRNA表达的影响,并进一步检测小鼠海马中5-HT和多巴胺(DA)含量。方法 50只昆明种小鼠随机分为5组,分别为阳性对照组(氟西汀0.01 g/kg),空白对照组,十一味甘露微丸低剂量组(0.25g/kg),中剂量组(0.5g/kg),高剂量组(1.0g/kg),除空白对照组外其他实验组采用小鼠悬尾实验和小鼠强迫游泳实验模型。给药7天后观察记录小鼠悬尾实验和强迫游泳实验的累计不动时间。随后脱臼处死小鼠并取出海马,采用荧光定量PCR技术,检测小鼠海马中Slc6a4,Htr1a和TrkB基因水平的变化,进一步采用ELISA检测试剂盒测定小鼠海马中5-HT和DA含量。结果与空白对照组比较,十一味甘露微丸0.5g/kg、1g/kg组能明显缩短小鼠悬尾不动时间和强迫游泳不动时间,显著降低小鼠海马S1c6a4基因和Htr1a基因mRNA的表达而促进Tr KB基因mRNA的表达,同时显著增加小鼠海马5-HT含量。结论十一味甘露微丸在小鼠抑郁药物评价模型中对行为绝望小鼠模型具有一定抗抑郁的作用。其抗抑郁机制可能通过增加TrkB的基因表达而加强神经元营养作用,同时抑制小鼠海马5-HT转运体,降低5-HT1A受体表达,从而提高中枢5-HT系统的功能和兴奋性发挥的。     

百合知母汤总皂苷调节5-HT功能治疗抑郁症的作用机制

目的:分析百合知母汤总皂苷(SBZ)调节5-羟色胺(5-HT)功能治疗抑郁症状的作用机制,同时探讨百合知母的药对优势。方法:SD大鼠采用孤养配合慢性不可预见性温和刺激诱发抑郁模型,分为抑郁症模型组,百合总皂苷组(100 mg·kg~(-1)),知母总皂苷组(220 mg·kg~(-1)),SBZ组(240 mg·kg~(-1)),百忧解组(FLU,10 mg·kg~(-1)),另设正常组,每组11只;正常组和抑郁症模型组给予等量0.5%阿拉伯树胶溶液,其他组别给予相应剂量的药物。测量各组大鼠强迫游泳不动时间,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血液、大脑5-HT含量;免疫荧光检测大脑皮层及海马5-HT1a阳性表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马5-HT合成基因色氨酸羟化酶1(TPH1),突触囊泡单胺转运体(SLC18A1),突触相关蛋白-25(SNAP25)mRNA水平以及5-HT1a受体信号传导下游调节基因RGS19在血液以及下丘脑的mRNA表达。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测5-HT转运体蛋白(SERT)在海马和下丘脑表达水平。结果:与模型组比较,SBZ明显降低抑郁大鼠强迫游泳不动时间(P0.05),上调血液以及大脑5-HT含量(P0.05),上调大脑皮层以及海马5-HT1a阳性表达(P0.05,P0.01)。SBZ上调海马TPH1,SLC18A1和SNAP25 mRNA表达,同时上调血液、下丘脑组织RGS19 mRNA表达(P0.05,P0.01)。SBZ下调海马和下丘脑SERT蛋白表达(P0.01)。结论:SBZ激活5-HT合成基因TPH1表达,同时下调SERT表达抑制5-HT重摄取,增加中枢5-HT含量;上调5-HT1a受体及其下游RGS19基因表达调节受体功能及其信号传递;同时SBZ通过上调SLC18A1和SNAP25表达改善神经突触递质传递能力,最终达到抗抑郁的效果。SBZ抗抑郁药效与百合总皂苷、知母总皂苷对比具有显著优势。     

逍遥散对嗅球摘除抑郁模型大鼠的抗抑郁作用机制研究

目的:观察逍遥散对嗅球摘除抑郁模型大鼠血清单胺类神经递质水平,及海马与皮质部位5-HT1A、5-HT2A mRNA表达、5-HT1A蛋白表达的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法:手术摘除方法建立SD大鼠的嗅球摘除抑郁模型。逍遥散三个剂量(30g/kg、15g/kg、7.5g/kg)和阿米替林(0.01g/kg)连续灌胃给药4周。高效液相-电化学法测定大鼠血清NE、AD、DA与5-HT水平,Real-time PCR测定大鼠海马及皮质部位5-HT1A、5-HT2A mRNA表达,Western-blotting法测定5-HT1A受体蛋白表达水平。结果:与正常组或假手术组比较,嗅球摘除抑郁模型大鼠血清NE、5-HT含量显著降低,海马与皮质部位5-HT1A mRNA表达水平相对下调,5-HT2A mRNA表达相对上调,5-HT1A蛋白表达水平明显下调,提示该模型动物存在单胺类神经递质水平紊乱表现。与模型组比较,逍遥散(30g/kg、15g/kg)提高血清NE、AD含量,30g/kg逍遥散提高5-HT含量,7.5g/kg亦提高血清NE含量;逍遥散(30g/kg、15g/kg)显著上调模型大鼠海马、皮质部位5-HT1A受体蛋白表达量,对5-HT1A、5-HT2A mRNA的异常表达有一定改善作用,7.5g/kg剂量明显上调皮质5-HT1A mRNA表达水平。结论:逍遥散对嗅球摘除抑郁模型大鼠的抗抑郁作用发挥与提高血清单胺类神经递质(NE、AD、5-HT)水平,上调海马、皮质部位5-HT1A mRNA表达及5-HT1A受体蛋白表达水平有关,表明逍遥散的作用机制与调控5-HT能神经功能有关。     

加味四逆散对慢性应激大鼠海马区5羟色胺2A受体(5-HT2AR)及其mRNA表达的影响

目的:探讨加味四逆散对慢性应激模型大鼠海马区5-HT2A受体及其mRNA表达的影响。方法:选择Open-feild法评分相近的74只成年SD大鼠,随机分为对照组、模型组、氟西汀组、加味四逆散高,中,低剂量组。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠抑郁模型,以免疫组织化学法和原位杂交法研究大鼠海马区5-HT2AR及其mRNA表达的变化。结果:与对照组比,模型组和加味四逆散高剂量组海马区5-HT2AR表达降低(P0.01,P0.05);模型组、氟西汀组和加味四逆散中剂量组5-HT2AR mRNA表达降低(P0.01,P0.05)。与模型组比,各治疗组5-HT2AR及mRNA的表达均升高(P0.05,P0.01)。各组之间5-HT2AR/mRNA的变化无统计学差异。结论:慢性应激能诱发大鼠轻度抑郁障碍和海马区5-HT2AR及其mRNA的低表达。加味四逆散改善慢性应激大鼠的抑郁症状可能与调节海马区5-HT2A受体系统增高其表达有关。     

匝迪-5味丸对急性应激所致行为绝望小鼠的抗抑郁作用研究

目的初步观察匝迪-5味丸的抗抑郁作用。方法通过小鼠悬尾实验(TST)、小鼠强迫游泳实验(FST)及利血平致小鼠抑郁模型,并以盐酸氟西汀为对照,观察连续7 d给匝迪-5味丸后对急性应激所致行为绝望小鼠的影响及腹腔注射利血平诱发抑郁模型小鼠的眼睑下垂、运动不能及体温变化的影响。结果与空白组比较,阳性对照组、匝迪-5味丸高、中剂量组均能缩短小鼠TST不动时间(P0.01);与空白组比较,阳性对照组,匝迪-5味丸高、中、低剂量组均能缩短小鼠FST不动时间(P0.05或P0.01)。与模型组比较,阳性对照组,匝迪-5味丸的高、中、低剂量组明显对抗利血平所致小鼠眼睑下垂、运动不能及体温降低(P0.05或P0.01)。结论匝迪-5味丸能改善急性应激所致行为绝望小鼠及利血平诱导小鼠抑郁状态,其作用机制值得进一步研究。     

熟眠胶囊对失眠模型大鼠脑内不同组织5-HT_(1a)、5-HT_(2a)受体表达的影响

目的观察熟眠胶囊对失眠大鼠脑内5-HT1a、5-HT2a受体表达的影响。方法将成年雄性Wistar大鼠60只随机分为正常对照组(N组)、失眠模型组(M组)、地西泮组(D组)、熟眠胶囊高、中、低组(SM-H、SMM、SM-L组),每组10只,采用腹腔注射PCPA法造模。造模成功后,给药组分别给予熟眠胶囊(28,14,7 g/kg)、地西泮(0.525 mg/kg),N组、M组给予相应容量的蒸馏水,连续给药7 d,分别观察各组大鼠下丘脑、海马内5-HT1a、5-HT2a受体mRNA表达量的变化。结果与N组相比,M组下丘脑、海马5-HT1a表达量明显降低、5-HT2a表达量明显升高,差异有统计学意义(P0.05、P0.05);与M组相比,D组下丘脑、海马5-HT1a表达量明显升高、5-HT2a表达量明显降低,差异有统计学意义(P0.05、P0.05);与M组相比,SM-H、SM-M组下丘脑、海马5-HT1a表达量明显升高(P0.05、P0.05)、5-HT2a表达量明显降低(P0.05、P0.05),差异有统计学意义。结论熟眠胶囊可以通过调节失眠模型大鼠下丘脑、海马中5-HT1a、5-HT2amRNA的表达发挥治疗作用。     

肉蔻五味丸、槟榔十三味丸、广枣七味散三种蒙药对产后抑郁症大鼠行为学及海马DA、5-HT、BDNF的影响

目的：观察蒙药肉蔻五味丸、广枣七味散、槟榔十三味丸对产后抑郁症模型大鼠行为学及海马中5-HT、DA、BDNF含量的影响。方法：将SD雌性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、氟西汀组、肉蔻五味丸组、广枣七味散组、槟榔十三味丸组,建立产后抑郁症大鼠模型并给予药物灌胃,观察大鼠体质量、行为学及海马中5-HT、DA、BDNF含量变化。结果：与空白组比较,模型组大鼠体质量增长缓慢、蔗糖偏好率降低、水平得分及垂直得分减少、游泳不动时间延长（P<0.01）,海马5-HT、DA、BDNF表达下降（P<0.01）,氟西汀、肉蔻五味丸对以上指标均有改善作用（P<0.05,P<0.01）,广枣七味散、槟榔十三味丸仅有部分改善作用。结论：三种蒙药不同程度改善PPD大鼠抑郁样行为,总体疗效由高到低依次为肉蔻五味丸、槟榔十三味丸、广枣七味散,可能作用机制与调节海马中的5-HT、DA、BDNF有关。     

肠安Ⅰ号方对肠易激综合征内脏高敏感大鼠5-HT信号系统及海马BDNF mRNA表达的影响

目的探讨肠安Ⅰ号方对肠易激综合征内脏高敏感大鼠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号系统及海马脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA表达的影响。方法采用慢性束缚应激结合游泳致疲劳法建立肠易激综合征内脏高敏感大鼠模型,将造模成功的大鼠按体重区组随机分为模型组(9只)、得舒特组(9只,27 mg/kg)、氟西汀组(9只,3.6 mg/kg)、肠安Ⅰ号高剂量组(9只,22.6 mg/kg)、中剂量组(9只,11.3 mg/kg)、低剂量组(9只,5.7 mg/Kg),另设正常组(10只)。各给药组给予相应药物灌服,模型组按照给药体积灌服生理盐水,1次/日,共干预14日。通过腹部回缩反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分标准确定疼痛压力阈值,免疫组化方法检测结肠5-HT水平的变化,免疫荧光RT-PCR法检测大鼠海马组织5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1a)、BDNF mRNA表达。结果与正常组比较,用药前各组大鼠直肠扩张时的疼痛阈值明显降低(P0.01)。与正常组比较,用药后模型组大鼠疼痛阈值明显下降,结肠5-HT水平及海马5-HT1a、BDNF mRNA表达明显升高(P0.01)。与模型组比较,氟西汀组、肠安Ⅰ号各剂量组疼痛阈值明显上升,得舒特组、肠安Ⅰ号高、中剂量组结肠5-HT水平明显降低(P0.05,P0.01),肠安Ⅰ号各剂量组海马组织5-HT1a、BDNF mRNA表达明显降低(P0.01),氟西汀组海马组织BDNF mRNA表达亦明显降低(P0.01)。结论肠安Ⅰ号方的作用靶点部位涉及"脑-肠"两部分,可降低大鼠直肠扩张疼痛域值,下调结肠黏膜5-HT水平,下调海马组织中BDNF和5-HT1a mRNA的表达。     

开心解郁汤对抑郁症模型大鼠脑皮质5-HT水平和海马与大脑皮层5-HTA亚型受体 mRNA表达的影响

目的:观察具有培元开郁作用的“开心解郁汤”对大鼠脑皮质中5-羟色胺(5-HT)水平和海马及大脑皮层5-HT1A受体和5 -HT2A受体mRNA表达以及行为学能力的影响.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、抑郁症组、抑郁症+中药组、抑郁症+西药组,采用慢性不可预见性温和应激方法(CUMS)造成抑郁症大鼠模型.造模同时开始给药,中药组给予开心解郁汤(按生药量计,22 g·kg-1,西药组给予盐酸氟西汀2.4 mg·kg-1,其余各组给同体积生理盐水,每日1次,连续ig给药22 d.分别于实验前、抑郁1,8,15,22 d记录大鼠体重;并观察大鼠行为学变化.于22 d后分取脑皮质,应用高效液相色谱技术分析脑皮质中5 -HT水平变化;于22 d后分取脑皮质和海马区,采用实时荧光定量PCR技术,测定大鼠海马及脑皮质中5-HT1A和5-HT2A受体mRNA水平改变.结果:与正常对照组相比,抑郁造模各组体重增长明显减慢,体重增加数和糖水消耗量均下降,旷场实验测定水平活动和垂直活动次数均下降(P＜0.01,P＜0.05),给与中药干预后,大鼠体重增长有所增快,与抑郁模型组比较有显著差异.糖水消耗量、水平活动和垂直活动次数均较模型组明显增加(P＜0.01,P＜0.05);同时抑郁造模后5-HT总体水平呈现下降,给予中药和西药治疗后5-HT水平有显著升高(P＜0.05).模型组大鼠海马组织中5-HT1AR mRNA水平下降,而5-HT2AR mRNA水平升高,中药及西药治疗后均可不同程度地降低;而在脑皮质中5-HT1AR和5-HT2AR mRNA水平的改变则呈现相反的变化.结论:CUMS可引起大鼠行为学改变并致体重减轻和行为学改变,造成大鼠抑郁模型.开心解郁汤可以降低海马中5-HT1A受体mRNA和脑皮质中5-HT2A受体mRNA水平,同时升高海马中5-HT2A受体mRNA和脑皮质中5-HT1A受体mRNA水平,而部分实现其对抑郁症的治疗作用.     

肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠行为及海马单胺递质的影响

目的:观察蒙药肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠行为及海马单胺递质的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法:60只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、盐酸氟西汀组(3.6 mg·kg-1)及肉蔻-5味丸低、中、高剂量组(0.2,0.4,0.8g·kg-1),每组10只。采用慢性不可预见性应激与孤养结合的造模方法复制抑郁模型,造模同时ig给药,每天1次,连续给药21 d。以体重变化,矿场试验(open-field test),糖水消耗试验来进行行为学评价,酶联免疫法(ELISA)检测大鼠海马5-羟色胺(5-HT),去甲肾上腺素(NE),多巴胺(DA)单胺递质的含量。结果:给予21 d应激后,模型组大鼠体重增长缓慢,糖水消耗量、Open-field试验水平活动得分和垂直活动得分及海马5-HT,DA,NE的含量较正常组显著降低(P0.05,P0.01),与模型组相比氟西汀和肉蔻-5味丸可不同程度改善其抑郁状态,氟西汀组、肉蔻-5味丸高、中剂量组大鼠海马5-HT,DA,NE的含量显著增加(P0.05,P0.01)。结论:肉蔻-5味丸的抗抑郁作用可能与提高脑内5-HT,NE,DA单胺递质的含量相关。     

交泰丸对利血平诱导小鼠抑郁模型的影响

[目的]探讨交泰丸对利血平诱导小鼠抑郁模型的影响。[方法]采用小鼠强迫游泳实验(FST)、小鼠悬尾实验(TST)和小鼠利血平拮抗实验,通过高效液相色谱(HPLC)测定小鼠海马和皮质组织中单胺类神经递质[去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)]含量的变化,探讨交泰丸的抗抑郁作用。[结果]交泰丸组方各剂量组均能明显减少FST和TST的不动时间,并且均能拮抗利血平诱导的小鼠眼睑下垂和体温下降,而且可以逆转NE和5-HT的减少以及降低5-HIAA的含量。[结论]交泰丸具有明显的抗抑郁作用,并且可以通过调节海马组织和皮质中NE和5-HT的含量而发挥抗抑郁作用。     

参竹精片协同戊巴比妥钠对小鼠睡眠及5-HT的影响

[目的]观察参竹精片对睡眠的影响。[方法]选昆明小鼠随机分为正常对照组、参竹精片0.5、0.25、0.125 g/kg组,分别单次灌胃给药和连续7 d给药,末次给药后2 h,各组小鼠分别以30 mg/kg(阈下剂量)和50 mg/kg(阈剂量)腹腔注射戊巴比妥钠,观察小鼠入睡时间、入睡率及睡眠时间,测定脑干组织5-羟色胺(5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量。[结果]与正常组比较,单次灌胃给药和连续7 d给药,参竹精片可明显增加戊巴比妥钠(阈下剂量)致小鼠的入睡率(0.5 g/kg,P0.05),减少戊巴比妥钠(阈剂量)致小鼠的入睡时间(P0.01),延长睡眠时间(P0.01),增加脑干组织5-HT含量(P0.05)。[结论]参竹精片可促进脑组织分泌5-HT,减少入睡时间、提高入睡率、延长睡眠时间,具有一定改善睡眠的作用。     

逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为的影响

目的探讨逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为的影响。方法脂多糖诱导抑郁样小鼠模型,小鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组(3.03 mg/kg)及逍遥散低、高剂量组(15、30 g/kg),检测强迫游泳实验、悬尾实验中不动时间,血清、海马、皮层IL-6、TNF-α水平,海马、皮层IDO、5-HT水平,尼氏染色观察海马神经元形态学变化。然后,脂多糖诱导大鼠海马神经元细胞炎症模型,细胞随机分为空白组、模型组、氟西汀组(10μmol/L)及空白血清、含药血清低、高剂量组(4%、8%),检测上清液NO、IL-6、TNF-α水平,裂解液5-HT、IDO水平,IL-6、TNF-α、5-HT1A、IDO1 mRNA表达。结果与模型组比较,逍遥散组显著缩短强迫游泳实验中不动时间(P0.01),显著降低血清IL-6水平及皮层IL-6、TNF-α、IDO水平(P0.05,P0.01),显著升高海马5-HT水平(P0.01);高剂量组显著缩短悬尾实验中不动时间(P0.01),显著上调皮层5-HT水平(P0.01),显著增加海马平均光密度(P0.05);低剂量组显著降低海马IL-6水平(P0.05)。与模型组比较,含药血清组显著下调IL-6、TNF-α、IDO1 mRNA表达(P0.05,P0.01),显著上调5-HT1A mRNA表达(P0.01);高剂量组显著下调NO、IL-6、TNF-α、IDO水平(P0.01),显著上调5-HT水平(P0.01);低剂量组显著降低IDO水平(P0.01)。结论逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为有拮抗作用,其机制可能与抑制炎症反应有关。     

经前舒颗粒对大鼠海马5-HT含量及其5-HT3B受体表达的影响

目的:观察经前舒颗粒对郁怒模型大鼠海马5-HT<,3B>受体蛋白表达和mRNA水平以及5-HT含量的影响,研究郁怒情绪的中枢机制,探讨经前舒颗粒的中枢作用机制.方法:以居住入侵方法制备大鼠郁怒情绪模型,给药组给予调肝方药经前舒颗粒,模型组给予灭菌饮用水,并设不造模正常组,用蛋白质印迹技术(WB)检测各组大鼠海马5-HT<,3B>受体蛋白水平表达量,半定量RT-PCR技术检测各组大鼠海马5-HT<,3B>受体mRNA的表达.高效液相色谱-荧光检测器检测海马中5-HT的含量.结果:与正常组比较,模型组大鼠海马5-HT<,3B>受体mRNA水平和蛋白表达水平都极显著升高(P<0.01),5-HT含量显著下降(P<0.05);与模型组比较,经前舒颗粒组大鼠海马蛋白表达和mRNA水平都极显著降低(P<0.01),5-HT含量显著升高.结论:郁怒刺激能显著升高大鼠海马5-HT<,3B>受体蛋白表达和mRNA表达水平并显著降低5-HT的含量,调肝方药经前舒颗粒可能通过下调海马过高的5-HT<,3B>受体蛋白表达和mRNA水平以及上调5-HT含量达到调肝解郁治疗疾病的目的.     

柴胡疏肝汤对慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马中5-HT含量及IL-1β, IL-6 mRNA表达的影响

目的:观察柴胡疏肝汤对慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马中5-羟色胺(5-HT)含量及白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6)mRNA表达的影响。方法:腹腔注射氯化锂-匹罗卡品制作癫痫-抑郁共病大鼠模型,将成功模型随机分为模型组,西酞普兰组,柴胡疏肝汤高、中、低剂量组。正常组10只。药物干预组分别给予西酞普兰10 mg·kg-1·d-1,柴胡疏肝汤高、中、低剂量10,5,2.5 g·kg-1·d-1,正常组与模型组对应给予等量生理盐水ig,连续4周,2次/d。通过强迫游泳(FST)和蔗糖消耗试验评估抑郁行为的变化;视频录像监测大鼠痫性发作次数;液相色谱-质谱法检测海马5-HT的含量;实时荧光定量PCR检测海马IL-1β,IL-6 mRNA的表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠FST累计不动时间明显延长,IL-1βmRNA表达量明显增加,糖水消耗量明显减少(P0.01),5-HT含量减少,IL-6 mRNA表达量增加(P0.05)。与模型组比较,药物干预4周后,西酞普兰,柴胡疏肝汤高、中剂量组大鼠痫性发作次数明显减少,FST累计不动时间明显缩短,糖水消耗量明显增加,海马中IL-1β,IL-6 mRNA的表达明显下调﹙P0.01﹚;5-HT的含量增加﹙P0.05﹚。西酞普兰组与柴胡疏肝汤高、中剂量组比较,各指标差异均无统计学意义。结论:柴胡疏肝汤高、中剂量具有抑制慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马中IL-1β,IL-6mRNA表达,促进5-HT表达,减少大鼠痫性发作次数,改善抑郁行为的作用。     

经前舒颗粒对大鼠海马5-HT3B受体mRNA水平和蛋白表达的影响

目的:观察经前舒颗粒对郁怒模型大鼠海马5-HT3B受体蛋白表达和mRNA水平以及5-HT含量的影响,研究郁怒情绪的中枢机制,探讨经前舒颗粒的中枢作用机制。方法:以居住入侵方法制备大鼠郁怒情绪模型,给药组给予调肝方药经前舒颗粒,模型组给予灭菌饮用水,并设不造模正常组,用蛋白质印迹技术(WB)检测各组大鼠海马5-HT3B受体蛋白水平表达量,半定量RT-PCR技术检测各组大鼠海马5-HT3B受体mRNA的表达。高效液相色谱-荧光检测器检测海马中5-HT的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠海马5-HT3B受体mRNA水平和蛋白表达水平都极显著升高(P<0.01),5-HT含量显著下降(P<0.05);与模型组比较,经前舒颗粒组大鼠海马蛋白表达和mRNA水平都极显著降低(P<0.01),5-HT含量显著升高。结论:郁怒刺激能显著升高大鼠海马5-HT3B受体蛋白表达和mRNA表达水平并显著降低5-HT的含量,调肝方药经前舒颗粒可能通过下调海马过高的5-HT3B受体蛋白表达和mRNA水平以及上调5-HT含量达到调肝解郁治疗疾病的目的。     

滋阴养血安神方对PCPA诱导失眠小鼠睡眠的影响

目的:探讨滋阴养血安神方对睡眠剥夺小鼠睡眠的影响及其机制。方法:利用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)制造睡眠剥夺模型,模定失眠小鼠戊巴比妥钠致睡眠的阈下及阈上剂量,分6组,空白对照组、模型组、滋阴养血安神方低剂量组(73 g/kg)、滋阴养血安神方中剂量组(146 g/kg)、滋阴养血安神方高剂量组(292 g/kg)、地西泮组(1.5 mg/kg),造模并给药7 d后,给予戊巴比妥钠诱导睡眠,观察对小鼠睡眠的影响,并检测小鼠海马5-羟色胺(5-HT)含量。结果:滋阴养血安神方可增加阈下剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠个数,缩短阈上剂量戊巴比妥钠的小鼠入睡潜伏期,与模型组对比有显著性差异(P0.01),能延长阈上剂量戊巴比妥钠诱导的睡眠时间,与模型组对比有显著性差异(P0.01);滋阴养血安神方高剂量组小鼠脑内5-HT含量显著高于模型组,与模型组对比有显著性差异(P0.05)。结论:滋阴养血安神方具有镇静、催眠作用,对失眠症的有一定的治疗作用,其对小鼠睡眠的影响机制之一可能是通过升高脑内海马5-HT含量实现的。     

慢性应激对大鼠海马区5-HT2AR及其mRNA表达的影响

目的：探讨慢性应激对大鼠海马区5-HT2A受体及其mRNA表达的影响。方法：选择open-feild法评分相近的20只成年SD大鼠随机分为对照组和模型组。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠抑郁模型，以免疫组化法和原位杂交法检测大鼠海马5-HT2AR及其mRNA的表达。结果：（1）模型组体重增长14d时明显低于对照组。（2）模型组水平活动和垂直活动于第7天后明显降低；糖水消耗量于第14天后明显减少。（3）模型组海马5-HT2AR及其mRNA表达均低于对照组（均P〈0．01）。结论：慢性应激能诱发大鼠轻度抑郁，其机制与海马5-HT2AR及其mRNA的低表达有关。     

逍遥散拆方药队的抗抑郁作用及部分机制研究

目的:观察逍遥散的拆方药队(柴胡、当归、薄荷,简称柴当薄组)对CUMS抑郁模型小鼠行为学及5-HT1A/2A受体激动剂所引起的小鼠行为反应的影响,揭示该拆方药组的抗抑郁作用及5-HT/BDNF信号通路作用机制。方法:慢性不可预知温和应激+孤养6周制备CUMS小鼠抑郁模型,造模第3周逍遥散全方(30g/kg)、柴当薄组(16.43g/kg、21.90g/kg)、阿米替林(10mg/kg)开始灌胃给药,连续4周,以小鼠体重、自主活动量、糖水偏爱百分比、空间记忆探索能力等行为学指标评价抗抑郁作用。ELISA法测定模型小鼠血清BDNF、5-HT水平及海马部位5-HT含量,及采用8-OH-DPAT(5-HT1A受体激动剂)、DOI(5-HT2A受体激动剂)引起小鼠行为学变化实验,探讨作用机制。结果:与模型对照组比较,柴当薄组16.43g/kg、21.9g/kg剂量均显著提高CUMS模型小鼠的自主活动、糖水消耗量,明显缩短水迷宫测试中定位航行的潜伏期;柴当薄组16.43g/kg可显著增加空间探索实验时目标象限运动距离及有效区域进入次数。柴当薄组16.43g/kg、21.9g/kg显著增加模型小鼠血清BDNF、5-HT含量及海马部位5-HT水平,显著对抗DOI所致的小鼠甩头反应;柴当薄组21.9g/kg对8-OH-DPAT引起的小鼠5-HT样行为表现出明显的协同作用。结论:逍遥散功效拆方研究所获得的柴当薄药组对CUMS模型小鼠有良好的抗抑郁作用,并能协同8-OH-DPAT、拮抗DOI的作用,抗抑郁作用机制可能与激动5-HT1A受体、阻断5-HT2A受体从而影响5-HT/BDNF受体信号通路有关。     

养阴舒肝颗粒对肝郁证模型小鼠行为学及脑内单胺类神经递质的影响

目的探讨养阴舒肝颗粒对肝郁证模型小鼠行为学和脑内单胺类神经递质的影响。方法采用孤养和慢性不可预见性温和刺激法制备肝郁证模型,观察小鼠造模期间的一般情况、体质量变化,取造模成功小鼠72只,按照体质量随机分为模型组,养阴舒肝颗粒低、中、高剂量组(3、6、12 g·kg~(-1)),逍遥丸组及盐酸氟西汀组,另取12只正常小鼠作为对照组,连续灌胃28 d。采用悬尾实验观察各组小鼠悬尾不动时间;测定额叶皮质和海马的质量;以ELISA试剂盒测定皮质和海马内多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量。结果与正常对照组比较,模型组小鼠悬尾不动时间明显延长,额叶皮质和海马内DA、5-HT含量均明显下降,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。与模型组比较,养阴舒肝颗粒高剂量组的小鼠悬尾不动时间明显缩短(P0.05),小鼠额叶皮质DA含量明显升高(P0.05);养阴舒肝颗粒中剂量组、高剂量组小鼠额叶皮质5-HT含量以及海马区DA、5-HT含量明显升高(P0.05)。结论养阴舒肝颗粒可以有效改善模型小鼠的肝郁状态,其机制可能与调节肝郁证小鼠的神经递质,升高额叶皮质及海马内的DA、5-HT有关。