维生素E及叶酸对高血糖孕鼠子代心肌细胞凋亡的影响

目的探讨维生素E(Ve)及叶酸对高血糖诱导的乳鼠心肌细胞凋亡蛋白caspase-3表达的影响。方法将50只清洁级成年SD孕鼠随机分为5组,分别为正常对照组(A组)、妊娠糖尿病组(B组)、叶酸组(C组)、维生素E组(D组)和Ve+叶酸组(E组)。除对照组外,其余大鼠于妊娠d 1腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg制备妊娠糖尿病动物模型,对照组给予等量0.1 mmol/L(p H 4.5)柠檬酸钠—柠檬酸缓冲液。孕d 5,D、E 2组予50 mg/kg维生素E灌胃,C、E组予0.4 mg/kg叶酸灌胃,A、B组予等量的生理盐水灌胃,持续7 d。取自然分娩的乳鼠心肌组织于光镜下观察心肌结构的改变,应用免疫组织化学法检测各组乳鼠心肌细胞caspase-3抗原的表达。蛋白免疫印迹(western-blot)检测各组乳鼠心肌细胞caspase-3的表达。结果 (1)造模前各组血糖值比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后,B、C、D、E组血糖值明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.01);B、C、D、E 4组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)光镜下观察B、C、D、E组乳鼠心肌组织呈现不同程度损伤,表现为细胞坏死、水肿、轮廓不清,心肌纤维排列疏松紊乱、炎性细胞浸润。(3)5组乳鼠心肌细胞凋亡蛋白caspase-3的表达不同,差异有统计学意义(P<0.01)。结论妊娠糖尿病孕鼠对子代心肌细胞凋亡影响明显,孕期补充维生素E、叶酸对乳鼠心肌细胞凋亡有明显改善作用,且叶酸抑制凋亡的作用优于维生素E,同时补充维生素E和叶酸的效果优于单独补充一种。     

CYP7B1与ER在胆汁淤积孕鼠胎鼠肝脏中的表达

目的 探讨雌激素受体(ERα、ERβ)与胆固醇7α羟化酶(CYP7B1)mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积(ICP)孕鼠、胎鼠肝脏中的表达及其意义.方法 对照组孕鼠30只注射精制植物油;研究组孕鼠30只注射17-α-乙炔雌二醇.两组孕鼠分别于妊娠第13天、17天、21天断尾采母鼠血检测,于妊娠第21天抽取母鼠、胎鼠血并提取肝脏组织.应用酶联免疫吸附试验检测两组孕鼠及胎鼠血清中胆酸水平;应用实时定量PCR技术检测两组胎鼠肝脏ERα、ERβ、CYP7B1 mRNA的表达.结果 ①在妊娠第17天、21天研究组母鼠胆汁酸水平明显高于对照组(55.7±3.2μmol/L vs 23.4±1.2μmol/L,t=2.541,P<0.05;61.4±2.4μmol/L vs 25.5±2.1μmol/L,t=2.621,P<0.05);研究组胎鼠胆汁酸水平明显高于对照组(27.4±2.3μmol/L vs 11.5±2.6μmol/L,t=2.631,P<0.05);②研究组胎鼠肝脏CYP7B1 mRNA水平明显高于对照组(2.15±0.01vs 0.25±0.02,t=2.563,P<0.05);③研究组ERα mRNA水平明显高于对照组(0.81±0.02 vs 0.35±0.01,t=2.534,P<0.01).结论 ICP孕鼠胎鼠肝细胞ERα、CYP7B1的表达升高,胆汁酸的合成与代谢调节机制存在障碍,可能是导致ICP胎儿围生儿死亡发生的原因之一.     

铅对胎鼠脑组织中蛋白激酶C和钙调蛋白M表达的影响

目的 研究铅对不同发育时期胎鼠脑组织中蛋白激酶C(PKC)与钙调蛋白(CaM)mRNA和蛋白表达的影响.方法 孕鼠随机分为去离子水对照组、0.2%醋酸铅组和1.0%醋酸铅组,从妊娠第0天起开始通过自由饮水染铅.分别于孕12、18 d处死孕鼠,取胎鼠脑组织,原子吸收光谱法测定脑铅含量,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Westen blotting)法分别观察各组PKC与CaM mRNA及蛋白的表达情况.结果 同一发育时期的染铅组胎鼠脑铅含量高于对照组,同一剂量染铅组孕18 d时胎鼠脑铅含量高于孕12 d时,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05).孕12 d时,与相应的对照组(mRNA:PKC:1.03±0.01、CaM:0.80±0.01,蛋白:PKC:0.70±0.05、CaM:0.75±0.05)相比,1.0%醋酸铅组胎鼠脑内PKC与CaM的mRNA(0.86±0.03、0.71±0.02)和蛋白表达(0.49±0.03、0.46±0.03)均降低;孕18 d时,0.2%和1.0%醋酸组胎鼠脑内PKC与CaM的mRNA和蛋白表达均较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 孕期母鼠染铅可使胎鼠脑组织铅含量升高,并引起PKC与CaM mRNA和蛋白表达水平的下降.     

孕期高脂喂养对胎鼠心肌细胞的影响

目的 探讨Sprague-Dawley(SD)大鼠妊娠期高脂喂养对胎鼠心肌细胞的影响。方法 选择清洁级SD大鼠,雄性10只、雌性20只,鼠龄96～103 d,体重240~260 g。适应性喂养3 d后SD雌性大鼠与雄性大鼠按2∶1比例合笼过夜,次日早上检查,以阴道涂片发现精子为妊娠第0天。将孕鼠随机分为A、B两组,每组10只。A组予普通饲料喂养,B组予高脂饲料喂养,分别喂养至孕期的第21天。禁食16 h采集血标本测定血脂。取胎鼠心肌组织,分别于光镜和电镜下观察心肌细胞结构的改变。结果 孕第21天,与A组孕鼠比较,B组孕鼠血总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇明显升高(P=0.000),而高密度脂蛋白胆固醇明显下降(P=0.001)。在光镜下观察两组胎鼠心肌细胞HE染色切片,B组细胞结构欠清晰,细胞存在水肿,细胞胞核形态不规则,细胞核内染色加深。两组胎鼠心肌组织超微结构观察提示:与A组比较,B组细胞内细胞器模糊,线粒体嵴断裂,数量减少等。结论 高脂喂养的SD大鼠孕期存在脂代谢异常(高胆固醇血症、高低密度脂蛋白胆固醇血症及低高密度脂蛋白胆固醇血症),其胎鼠存在心肌细胞损害。     

甲醛暴露对胎鼠心肌蛋白表达的影响

目的通过检测胎鼠心肌蛋白表达水平,探讨母鼠孕期甲醛暴露对其胎鼠心脏胚胎发育的影响。方法将性成熟的雌性SD大鼠随机分为试验组(孕后甲醛吸入,A组;孕前13天甲醛吸入,B组)和对照组(未进行甲醛吸入,C组)。A组母鼠在发现受孕后,立即给予甲醛吸入至怀孕第14天;B组母鼠孕前13天给予甲醛吸入至怀孕后第14天;对照组母鼠不进行甲醛吸入。3组母鼠喂养方式无差异。在SD大鼠怀孕后第14 d时取出胎鼠,对胎鼠心肌组织进行心肌蛋白表达检测分析。结果 (1)母鼠甲醛暴露组胎鼠心肌MYBPC3表达水平较未吸入甲醛组升高[A组:(25.35±0.092)ng/μl,B组:(28.42±0.120)ng/μl,对照组:(20.47±0.013)ng/μl],且升高程度与吸入甲醛时间长度有剂量效应关系(P0.01);(2)甲醛暴露组胎鼠心脏发育调节因子GATA4表达水平较未暴露组胎鼠的低[A组:(31.44±0.327)ng/μl,B组:(25.64±0.008)ng/μl,对照组:(35.26±0.052)ng/μl];(3)甲醛暴露组胎鼠心肌Bcl-2蛋白家族表达较未暴露组胎鼠的表达增加[A组:(33.62±0.401)ng/μl,B组:(37.47±0.328)ng/μl,对照组:(27.4±0.254)ng/μl],从而调节心肌细胞凋亡的过程。结论通过对胎鼠心肌蛋白表达水平的检测,我们发现母鼠孕前及孕期甲醛暴露可提高胎鼠心肌MYBPC3、Bcl-2蛋白的表达,降低胎鼠心肌GATA4蛋白的表达。     

新生鼠窒息致心肌损伤与HO-1 mRNA、NF-кB表达关系的实验研究

目的:建立近似人类新生儿窒息的病理过程的新生鼠窒息心肌损伤模型,观察心肌HO-1 mRNA、NF-кB表达关系及血中CK-MB、cTnI的变化。方法:正常对照组8只,窒息组80只(分为窒息组40只,窒息+ZnPP组40只)。又分为窒息后6 h,24 h,48 h,72 h,7天,5个不同的时间段采血和心肌样本。①电镜下观察心肌组织细微病变;②原位杂交技术检测HO-1 mRNA在心肌组织的表达;③免疫组化技术检测NF-кB在心肌组织的表达;④ELISA技术检测血中CK-MB、cTnI水平。结果:窒息组:电镜下各时段心肌组织均有线粒体肿胀;核固缩,肌浆网肿胀;窒息+ZnPP组:电镜下各时段均有心肌细胞融合,肌丝溶解,线粒体肿胀,线粒体脊溶解。窒息+ZnPP组的病理损伤比窒息组严重。窒息组血中CK-MB,cTnI水平明显高于对照组,有统计学差异(P<0.01);窒息+ZnPP组血中CK-MB,cTnI水平也明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);窒息组血中CK-MB,cTnI水平明显低于窒息+ZnPP组,差异有统计学意义(P<0.05)。窒息组心肌组织细胞HO-1 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);窒息+ZnPP组心肌细胞HO-1 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);窒息+ZnPP组与窒息组比较,HO-1 mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。窒息组心肌组织细胞NF-кB表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);窒息+ZnPP组心肌细胞NF-кB表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);窒息+ZnPP组与窒息组比较,NF-кB表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①新生鼠窒息后心肌组织和细胞受到明显的损伤,CK-MB,cTnI在外周血中明显升高,心肌细胞融合,肌丝溶解,线粒体肿胀;②外周血中CK-MB持续时间较短,cTnI在血中持续时间较长,约7天,提示对心肌损伤的防治应持续至窒息后7天,以免加重心肌损伤和后遗症发生;③HO-1 mRNA表达与NF-кB表达呈负相关;④提示在窒息致心肌损伤的防治中,可适时使用HO-1 mRNA诱导剂,减少炎性细胞因子对心肌的损伤。     

新生鼠窒息致心肌损伤与HO-1mRNA、NF-κB表达关系的实验研究

目的:建立近似人类新生儿窒息的病理过程的新生鼠窒息心肌损伤模型,观察心肌H0-1 mRNA、NF-κB表达关系及血中CK-MB、cTnI的变化.方法:正常对照组8只,窒息组80只(分为窒息组40只,窒息+ZnPP组40只).又分为窒息后6 h,24 h,48 h,72 h,7天,5个不同的时间段采血和心肌样本.①电镜下观察心肌组织细微病变;②原位杂交技术检测HO-1 mRNA在心肌组织的表达;③免疫组化技术检测NF-κB在心肌组织的表达;④ELISA技术检测血中CK-MB、cTnI水平.结果:窒息组:电镜下各时段心肌组织均有线粒体肿胀;核固缩,肌浆网肿胀;窒息+ZnPP组:电镜下各时段均有心肌细胞融合,肌丝溶解,线粒体肿胀,线粒体脊溶解.窒息+ZnPP组的病理损伤比窒息组严重.窒息组血中CK-MB,cTnI水平明显高于对照组,有统计学差异(P＜0.01);窒息+ZnPP组血中CK-MB,cTnI水平也明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);窒息组血中CK-MB,cTnI水平明显低于窒息+ZnPP组,差异有统计学意义(P＜0.05).窒息组心肌组织细胞HO-1 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);窒息+ZnPP组心肌细胞HO-1 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);窒息+ZnPP组与窒息组比较,HO-1 mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).窒息组心肌组织细胞NF-κB表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);窒息+ZnPP组心肌细胞NF-κB表达高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);窒息+ZnPP组与窒息组比较,NF-κB表达明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:①新生鼠窒息后心肌组织和细胞受到明显的损伤,CK-MB,cTnI在外周血中明显升高,心肌细胞融合,肌丝溶解,线粒体肿胀;②外周血中CK-MB持续时间较短,cTnI在血中持续时间较长,约7天,提示对心肌损伤的防治应持续至窒息后7天,以免加重心肌损伤和后遗症发生;③HO-1 mRNA表达与NF-κB表达呈负相关;④提示在窒息致心肌损伤的防治中,可适时使用HO-1 mRNA诱导剂,减少炎性细胞因子对心肌的损伤.     

胎盘MT1及ZnT1在低锌致胎鼠心脏畸形的表达

目的 探讨胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1在低锌诱导大鼠胚胎心脏发育畸形中的作用及可能机制.方法 SD成年健康清洁级雌鼠50只,随机分为:极低锌、低锌、中等低锌、边缘低锌及常锌组.分别饲以不同含锌量饲料.常规方法 交配受孕,于孕19天开胸抽取孕鼠下腔静脉血检测血锌值;剖取胚心行胎鼠心脏组织学观察;RT-PCR法半定量测定胎盘中金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1.结果 各低锌组孕鼠血锌值明显低于常锌组(均P<0.05);极低锌、低锌及中等低锌组较常锌组胚心畸形率明显增加(均P<0.05);极低锌、低锌及中等低锌组胚鼠胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1 mRNA表达较常锌组明显降低(均P<0.05);心脏畸形胚鼠胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1 mRNA表达较正常胚鼠明显降低(均P<0.05).结论 中等以上低锌孕鼠胚心畸形率明显增加,可能与胎盘金属硫蛋白-1及锌转运蛋白-1 mRNA表达下降有关.     

孕鼠维生素A缺乏对子代心脏GATA-4基因表达的影响

目的探讨孕鼠维生素A(VA)缺乏对子代心脏GATA-4基因表达的影响。方法清洁级断乳健康雌性SD大鼠48只,随机分为正常对照(VAN组)组,VA缺乏组(VAD组)和边缘性VA缺乏(MVAD组)组各16只,分别喂养普通饲料、VA缺乏饲料和边缘性VA缺乏饲料。10 w后与成熟SD雄性大鼠交配,分别取孕13.5d、孕18.5d胚胎心脏和新生鼠心脏。透射电镜下观察新生鼠心脏超微结构变化。用RT-PCR和Western blot方法检测孕13.5d、18.5d和新生鼠心脏GATA-4基因mRNA和蛋白表达。结果与VAN组比较,VAD组和MVAD组的新生鼠心脏电镜下出现心肌纤维模糊,排列紊乱断裂,明暗带不清,线粒体排列不规则等。VAD组在3个时期的GATA-4基因mRNA和蛋白表达均低于VAN组(P<0.01);MVAD组在孕13.5d和18.5d的GATA-4基因mRNA和蛋白水平与VAN组之间存在差异(P<0.05),其新生鼠心脏GATA-4基因蛋白水平亦明显低于VAN组(P<0.01)。结论孕鼠VA缺乏影响子代心脏GATA-4基因水平,可能导致子代心脏超微结构的变化,进而造成心脏发育异常。[营养学报,2012,34(4):322-326]     

VA对小鼠胚胎中Hox-3.5表达的影响

目的 观察小鼠胚胎组织中Hox-3．5 mRNA的表达及VA缺乏和补充对其表达的影响。方法 初断乳的昆明小鼠，雌鼠60只随机分为正常对照组(N)、VA缺乏组(A)、妊娠第0d丰h充VA组(B)和妊娠第7d补充VA组(C)。N组饲含VA4000 U／kg饲料，A组饲VA缺乏饲料，B、C组在交配前饲VA缺乏饲料，在交配后分别于妊娠第0d或妊娠第7d饲含10000U／kg饲料。雄鼠饲以普通饲料。在妊娠第12d。剖腹取出胎鼠，采用原位杂交方法探测小鼠胚胎Hox-3．5 mRNA的表达，同时检查孕鼠血清VA水平。结果 在正常情况下，小鼠妊娠第12d胚胎组织Hox-3．5mRNA有表达，孕鼠血清VA缺乏时，妊娠第12d胚胎组织Hox-3．5mRNA的含量明显减少；妊娠第0d补充VA，Hox-3．5mRNA的含量与N组无差异；妊娠第7d补充，Hox-3．5mRNA的含量虽比A组增加，但仍明显低于N组。结论 VA可能在转录水平调控Hox-3．5的表达．     

CYP1A1、GSTT1、GSTM1基因与乳腺癌易感性的病例对照研究

目的探讨雌激素代谢通路相关基因CYP1A1、GSTT1、GSTM1与乳腺癌易感性的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)、限制性片段长度多态性(RFLP)及琼脂糖凝胶电泳法,对天津市360例正常女性和315例女性乳腺癌患者的CYP1A1、GSTT1、GSTM1基因及多态性进行检测,Logistic回归分析评估单基因、联合基因以及相关因素对乳腺癌的危险度。结果 CYP1A1基因、GSTT1基因、GSTM1基因在两组间分布频率有差异(χ2值分别为20.677,47.250,43.621,P=0.000)。基因型联合分析显示,随着携带危险基因型数目的增加,个体罹患乳腺癌的危险性增加(χ2=51.366,P=0.000)。多因素非条件Logistic回归分析结果显示,CYP1A1基因与体育锻炼、摄入肉类(每日多于150g)、摄入蔬菜(每日超过300g)的交互作用有统计学意义[OR(95%CI)分别为0.465(0.362～0.597)、1.559(1.344～1.808)、0.465(0.362～0.597)];GSTT1基因缺失、GSTM1基因缺失是乳腺癌的危险因素[OR(95%CI)分别为3.245(1.645～6.375)、2.462(1.818～3.334)],且GSTT1基因与体育锻炼、累计行经年数的交互作用有统计学意义[OR(95%CI)分别为1.546(1.113～2.147)、3.735(1.401～9.956)],GSTM1基因与哺乳期限、绝育手术的交互作用有统计学意义[OR(95%CI)分别为1.206(1.024～1.420)、1.690(1.353～2.111)]。结论雌激素代谢通路相关基因与乳腺癌发生有关,且其与雌激素暴露影响因素、生活方式等存在交互作用。     

Niemann-Pick C1 Like 1研究新进展

Niemann-Pick C1 Like 1(NPC1L1)是肠道胆固醇吸收的关键蛋白,也是胆固醇吸收抑制剂依泽替米贝的分子作用靶点.NPC1L1的表达受一些核因子受体调控.敲除apoE-/-小鼠NPC1L1基因能显著抑制动脉粥样硬化的发生和发展,为动脉粥样硬化和冠状动脉性心脏病提供了新的治疗靶点.     

母亲和新生儿GSTM1、GSTT1和细胞色素P_(450)1A1基因多态性与早产易感性关系

目的探讨母亲和新生儿GSTM1、GSTT1基因以及细胞色素P4501A1基因多态性对早产的影响。方法采用病例-对照调查方法,应用多重PCR和限制性内切酶PCR(RFLP-PCR)技术对早产母亲和对照母亲以及早产新生儿和对照新生儿GSTM1、GSTT1基因和CYP1A1基因MSPI位点多态性分别进行检测。结果GSTM1、GSTT1基因和CYP1A1基因MSPI位点多态性在早产母亲和对照母亲组中没有显著性差异(P>0.05);以上基因在早产新生儿和对照新生儿组中也没有显著性差异(P>0.05)。GSTM1与GSTT1联合基因型在母亲和新生儿的病例与对照组中也没有显著性差异(P>0.05);GSTT1缺失型和CYP1A1变异型联合基因在早产母亲组与对照母亲组中有显著性差异(χ2=4.683,P<0.05,OR=2.440)。结论携带GSTT1缺失型基因以及CYP1A1变异型基因的母亲,其发生早产的危险性增大。     

铜川市甲型流感监测流行情况

目的通过甲型流感监测,探索铜川市2009年9月-2010年1月该病流行趋势。方法实时荧光定量PCR方法 (Real-timePCR)。结果共监测476份样本,阳性184份,阳性率38.7%。结论 184份阳性标本中,甲型H1N1阳性样140份,阳性率76.1%。     

环境外暴露及GSTT_1、GSTM_1基因型对1-羟基芘作为多环芳烃暴露标志物的影响

目的研究多环芳烃(PAHs)暴露(环境空气暴露和吸烟)、GSTT1、GSTM1基因型对1-羟基芘(1-OHP)作为PAHs暴露标志物的影响。方法选取51名巡警作为研究组,48名内勤警察作为对照组,测定两组人群环境空气中的PAHS浓度以及尿中的1-OHP浓度,采用HPLC方法分析环境空气中PAHs浓度和研究对象尿样中的1-OHP;PCR方法测定GSTT1、GSTM1基因型。结果对照组环境PAHs浓度为12.79ng/m3,研究组为20.85ng/m3。研究组、对照组内部相同吸烟条件下GSTT1、GSTM1不同基因型人群尿中1-OHP浓度没有差别,相同基因型下的非吸烟人群中,对照组尿中1-OHP浓度均小于研究组,吸烟人群中没有发现同样的规律。按吸烟分层后,研究组、对照组内部吸烟者尿中的1-OHP浓度均大于非吸烟者,并且对照组吸烟者尿中1-OHP浓度大于研究组非吸烟者。结论PAHs暴露及吸烟是影响尿中1-OHP浓度的重要因素;在环境空气中PAHs浓度较低的情况下,吸烟对尿中1-OHP浓度的贡献更大。但GSTT1、GSTM1基因型不是影响尿中1-OHP浓度的主要因素。     

硫酸基转移酶SULT1E1、SULT1A1基因多态性与子宫平滑肌瘤易感性的关联研究

目的:探讨硫酸基转移酶SULT1E1、SULT1A1基因多态性对子宫平滑肌瘤易感性的影响。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测子宫平滑肌瘤组和对照组SULT1E1基因rs3736599位点、SULT1A1基因rs9282861位点的多态性情况。结果:①病例组和对照组SULT1E1 rs3736599位点基因型分布差异有统计学意义(P=0.032),携带突变A等位基因(基因型为A/A和A/G)女性发生子宫平滑肌瘤的风险是野生型纯合子G/G女性的3.497倍(P=0.034,OR=3.497,95%CI:1.12～10.91)。②病例组和对照组SULT1A1 rs9282861位点基因型分布差异无统计学意义。结论:硫酸基转移酶SULT1E1基因rs3736599多态性可能与子宫平滑肌瘤易感性相关,携带突变A等位基因可能是子宫平滑肌瘤的危险因素。     

1起甲型H1N1流感暴发的调查

[目的]总结甲型H1N1流感暴发的经验、教训,为今后处理类似突发事件提供参考。[方法]采用现况调查的方法,对2009年10月发生在青岛某大学费县校区学生中的甲型H1N1流感暴发疫情进行调查。[结果]此次甲型H1N1流感暴发共发病16例,罹患率为0.28%。病例分布在2个年级、9个班,发病年龄为18-21岁,男生11例,女生5例,男女之比为2.20∶1。患者临床表现为发热、头痛、头晕、咳嗽、腰腿酸痛等症状。无明确与甲型H1N1流感病例和流感样病例接触史。[结论]这是1起发生在学校由甲型H1N1流感病毒感染引起的暴发疫情,控制措施及时有效。     

Detection of CYP1A1 gene polymorphism using designed RFLP and distributions of CYP1A1 genotypes in Japanese

Isoleucine (Ile)-valine (Val) polymorphism, which is caused by a point mutation from A to G in exon 7, is reported to be associated with an elevated risk of lung cancer among Japanese. Because CYP1A1 catalyzes bioactivation of environmental procarcinogens, such as benzo[a]pyrene, it is very important to study the clinical meaning of Ile-Val polymorphism using an epidemiological study. In an epidemiological study, easy, economical, rapid and reliable identification of the CYP1A1 genotype is necessary. The present study shows that the new method, designed restriction fragment length polymorphism (designed RFLP), can detect Ile-Val polymorphism of CYP1A1 The Ile-Val polymorphism detected using this new method was consistent with that found by the allele-specific PCR amplifications (ASA) method in six cases tested. This new method detected Ile-Va1 polymorphism of CYP1A1 using 240 healthy Japanese who lived in the northern Kyusyu region. The frequency of the genotypes was as follows: Ile/Ile, 159 (66.2%); Ile/Val, 65 (27.1%); Val/Val, 16 (6.7%). The frequency of the Ile gene was 0.798 and that of the Val gene, 0.202. There was no difference in Ile-Val polymorphism based on sex or age. Racial differences influenced the distribution of this polymorphism, but Japanese regional differences did not. Since this new method, designed RFLP, is rapid, reliable and suitable for large-scale screening of polymorphisms, it may be used routinely to detect Ile-Val polymorphism of CYP1A1 Furthermore, it will help to evaluate the relationship between CYP1A1 polymorphism and individual sensitivity to xenobiotics that may affect the incidence of lung cancer.     

CYP1A1和GSTM1基因多态与肺癌发病关系的病例-对照研究

目的 探讨肺癌易感性标记物CYP1A1及GSTM1基因多态以及吸烟等其他环境暴露因素与肺癌发生的关系。方法 采用病例-对照研究的方法，收集原发性肺癌病例91例以及非肺部疾患的住院病例(对照)91例，所有的研究对象均采静脉血进行DNA抽提，并用PCR方法检测CYP1A1以及GSTM1基因多态，同时调查研究对象吸烟等其他环境暴露因素。应用Logistic回归分析方法进行单因素和多因素的分析。结果 无论是单因素分析还是多因素分析均未显示出CYP1A1和GSTM1基因多态与肺癌发病的关联。多因素分析结果表明：化程度的OR为0．63(95％CI：0．45～0．86)，吸烟量的OR为1．56(95％CI：1．14～2．14)，无抽油烟机的OR为3．77(95％CI：1．48～9．56)，食用动物油的OR为1．67(95％CI：1.25～2．24)，常吃胡萝卜的OR为0．47(95％CI：0．22～0．98)，饮酒的OR为6．58(95％CI：1.53～28．30)，家族肺癌史的OR为3．75(95％CI：1．64～8．58)。结论 CYP1A1和GSTM1基因多态与肺癌发病无明显的关联，吸烟、饮酒、食用动物油、家族肺癌吏以及无抽油烟机是肺癌的危险因素，而高化程度和常吃胡萝卜与降低肺癌风险有关。     

甲型流感病毒SwH1N1血凝素蛋白HA1真核表达载体的构建与表达

目的构建甲型流感病毒SwH1N1血凝素蛋白(HA1)的真核表达载体,并表达其编码蛋白HA1。方法利用RT-PCR技术扩增HA1基因,克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T-HA1质粒。双酶切pMD18-T-HA1与PXJ40后回收并连接回收片段,构建PXJ40-HA1真核表达载体,鉴定后转染293T细胞,用免疫印迹法(western-bolt)鉴定重组HA1蛋白的表达。结果实验成功构建HA1基因的真核表达载体,并在真核细胞中表达出分子量为40kD的重组蛋白。结论成功构建的甲型流感病毒SwH1N1HA1基因的真核表达载体,可为后期的流感快速检测及基因工程疫苗的制备奠定良好的基础。