五味子总DNA提取方法的比较

目的:建立一套适合从五味子种子中提取高质量DNA的方法,为进一步开展五味子分子鉴定奠定基础。方法:比较SDS法、高盐低pH值法以及改进的CTAB法,运用紫外光谱和电泳分析方法测定所得DNA样品的纯度与浓度。结果:3种方法中CTAB改良法所得DNA纯度最高,完整性好,且该方法稳定可靠。结论:CTAB改良法是适合从五味子中提取高质量DNA的方法。     

植物中药材总 DNA 提取方法的比较

随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术已经应用于中药材的鉴别,如何从多种或药材提取到总ＤＮＡ来进行相关性研究是一个关键的课题。从植物中提取基因组ＤＮＡ的方案众多,其中较垢方案有三类：（１）用苯酚－氯仿（变性蛋白）作为提取介质。（２）用ＣＴＡＢ（既能裂解细胞壁,又有去除多糖）作为提取杂质。（３）用高盐低ＰＨ介质作为提取介质。经过比较,我们认为第（３）套方案快捷、经济,达于基层单位应用。     

广地龙药材DNA提取方法的优选

目的建立一种适合于广地龙干燥药材DNA的提取方法。方法参考陈旧皮张标本的DNA提取方法,并对样品预处理、酶解条件、沉淀时间等对影响DNA质量的重要因素,进行了筛选和优化。结果按优选的方法提取的总DNA的含量和纯度完全符合引物扩增分析的要求。结论该提取方法不仅解决了地龙类动物干燥药材DNA提取的难题,而且操作简便实用、DNA提取效率高,所得DNA的质量也满足后期DNA分子鉴定。     

山茱萸药材鲜品与干品总DNA提取方法比较

目的:探讨山茱萸药材鲜品与干品总DNA的提取方法,比较鲜、干品总DNA质量,为以后的研究奠定基础。方法:采用改良CTAB法A,B和经典SDS法,提取山茱萸药材鲜品和干品总DNA,对其进行DNA含量测定和电泳检测。结果:改良CTAB法A提取山茱萸药材鲜品与干品总DNA的OD260/OD280比值在1.7~1.9之间,电泳条带清晰,无拖尾,对山茱萸药材鲜品与干品DNA进行综合比较,结果显示鲜品获得的DNA质量高于干品。结论:改良的CTAB法A是分离高质量完整DNA的方法简便、快速,该方法得到的DNA适合下一步分子生物学研究。     

山药总皂苷提取工艺研究

目的：优化山药总皂苷提取工艺。方法：采用UV法和HPLC法测定山药总皂苷和薯蓣皂苷,以二1者的含量为指标,通过单因素循环试验和正交设计试验考察乙醇体积分数、溶剂倍量、提取时间和提取次数对提取过程的影响,优化提取工艺。结果：确定最佳提取工艺为30倍量60%的乙醇回流提取三次,每次2h,总皂苷的含量为2.174mg·g-1,薯蓣皂苷的含量为0.790mg·g-1。结论：优化后的提取工艺稳定、可行,适用于山药总皂苷的提取。     

开口箭DNA提取方法比较

目的:筛选从开口箭不同类型材料中提取DNA的最佳方法。方法:采用十二烷基磺酸钠(SDS)法,改良SDS法,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法4种方法分别对开口箭的新鲜茎、硅胶干燥茎、烘干茎、新鲜叶片和硅胶干燥叶片这5类材料进行DNA提取。从DNA的完整性、纯度、得率等方面对DNA进行比较,确定开口箭不同材料DNA提取的最适方法。结果:采用改良CTAB法提取的硅胶干燥茎和叶片的A_{260 nm}/A_{280 nm}均在1.8~1.9,纯度最高,且完整性较高,提取效果较其他方法更佳;其余材料则均有不同程度的污染, 新鲜叶片的A_{260 nm}/A_{280 nm}普遍很低。结论:从硅胶干燥叶片和茎的开口箭材料中更容易提取出纯度高、完整度好的DNA。改良CTAB法是适合开口箭DNA提取的有效方法,通过改良CTAB法从硅胶干燥叶片和茎的开口箭中更容易提取纯度高、完整度好的基因组DNA。     

板蓝根基因组DNA提取方法的比较

目的:建立并优化板蓝根基因组DNA的提取方法。方法:以板蓝根为实验材料,分别采用CTAB法、改进的CTAB法和试剂盒法(硅胶膜技术)对其基因组DNA进行提取和纯化,然后对其提取产物做光密度、琼脂糖凝胶电泳检测。结果:紫外光谱检测表明,常规的CTAB法的A 260/A 280比较低,不在理想值之间,而改进的CTAB法和试剂盒法均在理想值之间。琼脂糖电泳检测证实,常规的CTAB法提取的DNA条带最弱,其它两种方法的DNA条带很清晰,DNA没有降解,无拖尾现象。     

植物药材总DNA提取

目的 为获得高质量的DNA，研究木质部较发达的根，根茎类以及茎木类药材的DNA提取方法。方法 总DNA的提取过程包括用Tris缓冲液洗净，CTAB抽提和纯化。结果 对升高，Chong木，木香，乌药，芍药和木通等进行了DNA提取，能较好的去除色素，多糖等干扰PCR物质。结论 本法使用常用试剂，成本低，易于推广，为药材DNA分子鉴别的应用奠定了基础。     

紫花白及基因组DNA提取方法的比较

目的比较紫花白及基因组DNA提取方法。方法选择改良CTAB法、TIANGEN植物基因组DNA提取试剂盒、ZOMANBIO植物基因组DNA提取试剂盒、SDS法提取紫花白及叶片基因组DNA,通过UV光谱法、琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量和完整性,利用SPSS20.0软件对DNA得量差异性作统计分析,并进行SSR及ITS2引物扩增分析。结果改良CTAB法所提取的DNA质量明显较高,完整性良好,能满足SSR-PCR要求,并可有效扩增;SDS法所得DNA则不能扩增出ITS2序列。结论改良CTAB法更适合提取紫花白及基因组DNA。     

天麻总DNA提取的研究

采用CTAB、SDS两种提取法及液氮、玻璃砂两种研磨方法提取干天麻总DNA,并进行了比较,同时讨论了相关问题,为解决如何从天麻干品中快速提取总DNA进行了探索。     

天麻总DNA提取的研究

采用CTAB、SDS两种提取法及液氮、玻璃砂两种研磨方法提取干天麻总DNA，并进行了比较，同时讨论了相关问题，为解决如何从天麻干品中快速提取总DNA进行了探索。     

苦参总碱提取方法的比较研究

黑龙江省产苦参所含生物碱成分,经乙醇法、氨-氯仿法、阳离子交换树脂法三种提取方法的对比实验,证明树脂法收率高、质量好。与苦参原生药酸水浸出液做薄层层析对照实验,结果与原生药生物碱成分的种类和相对含量完全一致。证明树脂法工艺保持了原生药特性。     

钩吻总生物碱提取方法的比较

 本文从提取工艺、周期、产率和总碱纯度等方面比较了四种钩吻生物总碱提取法，结果认为氯仿热提法较好。     

市售鹿茸片基因组DNA提取方法的比较

目的建立一种稳定高效获得鹿茸片DNA基因组的提取方法,为相似形态中药总DNA提取奠定基础,便于应用分子生物学进行药材鉴定。方法将乌鲁木齐市售鹿茸饮片选取3份为材料,通过两种试剂盒和CTAB三种不同方法提取,提取的DNA再进行琼脂糖凝胶电泳法、紫外分光光度法进行浓度和纯度检测。结果 3种方法均可以从市售鹿茸饮片中提取到基因组DNA,但天根组织提取试剂盒得到的基因组DNA的纯度和浓度最高,提取效果最佳;CTAB法提取效果相对最差。结论天根组织提取试剂盒基因组DNA提取方法操作简便、稳定、高效,提取的DNA效果较好,纯度和浓度检查均合格。     

中麻黄基因组DNA不同提取方法的比较

目的:比较不同DNA提取方法,选择最适于中麻黄基因组的方法.方法:采用改良CTAB,SDS法、试剂盒法提取中麻黄基因组DNA;用琼脂糖凝胶电泳法和紫外分光光度法检测所得总DNA的得率和纯度,并进行ISSR-PCR扩增检测.结果:3种方法均可从新鲜中麻黄中提取出产量较高的基因组DNA,但其中改良CTAB法提取的总DNA纯度高,质量好,扩增产物的电泳条带也较明显;SDS法和试剂盒法提取的总DNA质量差,不适用于下游分子生物学实验.结论:改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法为中麻黄基因组DNA提取的最佳方法,该方法提取的基因组DNA适用于中麻黄基因组PCR扩增和其他分子生物学研究.     

影响总DNA提取因素的探讨

在中药生药学和栽培学研究领域,DNA分子标记技术正逐渐被广泛采用,并成为解决问题的常用手段之一。众所周知,提取得到优质的DNA是研究的前提,作者一直关注这方面的动向,同时也进行过这方面的综述和探讨[1-3]。最近,作者的课题组在进行雷公藤属3个种及种下多个居群之间遗传关系研究时,在从硅胶干燥的幼叶中提取总DNA的过程中,首次发现2个影响DNA提取的因素———实验样品量和2×CTAB提取体系中β-巯基乙醇的含量。1材料和试剂实     

中药何首乌总基因组DNA的提取

目的为获得高质量的何首乌总基因组DNA。方法采用CTAB法提取,对其提取方法进行改进。结果用改进的方法提取的样品DNA的OD260/OD280值在1.630~1.955之间,琼脂糖凝胶上主带清晰、降解较少,能完全被限制性内切酶EcoRⅠ和M seⅠ完全酶切,得到合适的AFLP指纹样式。结论改良的CTAB法提示提取何首乌DNA的理想方法,适合AFLP-PCR反应和其他分子生物学应用。     

皖贝母总RNA提取方法的比较研究

目的:针对皖贝母鳞茎富含多糖、酚类和其他多种次生代谢产物的特点,筛选一种简单高效的皖贝母总RNA提取方法。方法:用异硫氰酸胍法、皂土法、改进的SDS/酚法、RNAiso plus 4种方法分别提取皖贝母鳞茎总RNA,并对提取的RNA进行电泳及RT-PCR技术检测与分析。结果:皂土法提取的总RNA条带清晰无弥散,完整性好无明显DNA和其他杂质污染,适用于RT-PCR试验。结论:皂土提取法是一种适合于皖贝母总RNA抽提的简单高效的方法。     

文殊兰种子中总生物碱提取方法的比较

：目的 探讨提取文殊兰Crinum asiaticum种子中总生物碱的最佳提取方法以及工艺条件。方法 以文殊兰种子为原料,采用超声和加热回流2种提取方法提取文殊兰种子中的总生物碱。结果 响应曲面法优化结果表明,超声波法超声时间47 min,超声温度58 ℃,超声功率600 W,乙醇体积分数为95%,料液比1∶6,提取3次,提取总生物碱得率0.435 7%;加热回流法提取时间2.5 h,提取温度84 ℃,料液比1∶9,乙醇体积分数为95%,提取3次,提取总生物碱得率0.449 4%。结论 综合考虑总生物碱提取率、操作方法、除杂难易程度等因素,选用加热回流提取文殊兰种子中总生物碱较理想。     

桑叶片总RNA提取方法的比较研究

目的 研究桑叶片总RNA的提取方法.方法 采用Trizol法、CTAB法及RNA prep prue Plant Kit提取试剂盒提取法,分别提取桑叶片中的总RNA,并通过紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳及RT-PCR对提取效果进行分析比较.结果 3种方法均能从桑叶片中提取分离到总RNA,其中Trizol法能提取纯度较高、完整性较好的RNA,18S及28S带型清晰无弥散,A260/A280值为1.99,RNA产率为594.24μg/g,提取的总RNA适用于RT-PCR实验.结论 用Trizol法提取的桑叶片中总RNA可用于cDNA基因文库的构建及基因表达的差异分析.