不同检测方法对肺结核患者肺泡灌洗液中结核杆菌的诊断价值

目的：探讨不同检测方法对肺结核患者肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中结核杆菌的诊断 价值。方法：收集2013年1月至2015年12月在长沙市中心医院住院的100例患者的BALF,其中临床确诊为肺结核患者 65例,另选取35例作为对照,分别应用BALF涂片法、聚合酶链反应(PCR)、膜-反向斑点杂交技术(reverse dot blot, RDB)同步检测肺结核杆菌。结果：BALF涂片法,PCR检测,RDB法对结核杆菌诊断阳性率依次为43.08%,73.84%, 92.31%,3种检测方法阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。BALF涂片法灵敏度、特异度、符合率、阴性预测值分 别为43.08%,88.57%,59.00%,45.59%;PCR检测分别为73.85%,100.00%,83.00%,67.31%;RDB法分别为92.31%, 100.0%,95.00%,87.50%。结论：RDB法不仅能准确诊断结核杆菌,且能快速、简单地分辨肺结核杆菌耐链霉素 (SM)、利福平(RFP)、异烟肼(INH)基因型,具有较高的临床应用价值。     

肺结核患者肺泡灌洗液中结核杆菌检测的方法学评价

目的 探讨不同检测方法 对肺结核患者肺泡灌洗液(BALF)中结核杆菌的诊断价值.方法收集100例患者的BALF,其中临床确诊为肺结核患者65例设为结核组,余下的35例非肺结核患者作为对照组,分别应用BALF涂片法、聚合酶链反应法(PCR)、膜-反向斑点杂交技术(RDB)进行同步检测肺结核杆菌.结果 BALF涂片检查法对结核杆菌的诊断阳性率为43.08%,PCR为73.84%,RDB为92.31%,3种检测方法阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05).BALF涂片法敏感度、特异度、符合率、阴性预测值分别为43.08%、77.14%、36.00%、17.78%,PCR分别为73.85%、100.00%、83.00%、67.31%,RDB分别为92.31%、100.0%、95.00%、87.50%.结论 RDB不仅能准确诊断结核杆菌,且能快速、简单地分辨肺结核杆菌耐链霉素、利福平、异烟肼基因型,具有较高的临床应用价值.     

膜-反向斑点杂交技术检测肺结核患者肺组织和肺泡灌洗液中的结核杆菌

目的探讨膜-反向斑点杂交技术（RDB）在病理石蜡组织和肺泡灌洗液检测结核杆菌的临床应用价值。方法以97例病理石蜡组织、97例肺泡灌洗液为研究对象,分别以膜-反向斑点杂交、实时荧光PCR（RT—PCR）、抗酸染色三种方法检测结核杆菌,对三种方法进行方法学评价。结果结核组病理石蜡组织、肺泡灌洗液三种方法检测的总阳性率分别为：抗酸染色为32．8％,RT—PCR阳性率为82．8％,RDB阳性率为89．9％,两两比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,对照组三种方法检测结果均为阴性;三种结核杆菌的检测方法的方法学评价,RDB灵敏度（90．6％）、约登指数（0．91）、符合率（93．9％）、阴性预测值（85．0％）均较好。结论膜-反向斑点杂交技术在病理石蜡组织和肺泡灌洗液结核杆菌的检测上有很高的临床应用价值,值得临床推广应用。     

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核菌

目的：本研究评价聚合酶链反应（PCR）技术检测支气管肺泡准洗液中结核杆菌DNA的作用。方法：应用PCR技术对161例（肺结核81例，非肺结核80例作为对照）支气管肺泡灌洗液（BALF）进行结核菌DNA检测。结果：结核组BALF的阳性率：PCR为69．l％、徐片抗酸染色为86％、培养为98％，PCR的阳性率与涂片和培养比较，差异有显著性（P＜0．01）。非结核对照组BALF的阳性率为：PCR2.5％，涂片0％，培养0％。结论：PCR技术测定BALF中的结核菌是诊断肺结核的一种快速、敏感、特异的方法，尤其适用于无痰的患者。     

35例支气管肺泡灌洗液结核杆菌PCR分析

对35例未能排除肺结核病患者,经纤支镜检查后回收支气管肺泡灌洗液(BALF),井取样行结核杆菌PCR(简称 BALF TB—PCR)检查,结果发现,16例结核病中,其 BALF TB—PCR(+)者11例,阳性率69%;而非结核病的19例中,其 BALF TB—PCR(+)者4例,提示 BALF TB—PCR 检查可作为结核病的辅助诊断。     

应用聚合酶链反应检测支气管肺泡灌洗液中的乙肝病毒

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了４５例肺科病人的支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中乙肝病毒（ＨＢＶ），同时对其中２４例作血清ＨＢＶ检测，发现ＢＡＬＦ中ＨＢＶ阳性率为２６．６７％（１２／４５）、血清ＨＢＶ阳性率为４１．６７％（１０／２４）；血清ＨＢＶ阳性者其ＢＡＬＦ方有可能检出ＨＢＶ、血清ＨＢＶ阴性者其ＢＡＬＦ不能检出ＨＢＶ，ＢＡＬＦ中ＨＢＶ脱氧核糖核酸（ＨＢＶ－ＤＮＡ）可以复制、有传染性。     

支气管肺泡灌洗液实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌-DNA对肺结核的诊断价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对肺结核患者支气管肺泡灌洗液（BALF）结核分枝杆菌-DNA（TB-DNA）检出的临床意义。方法肺结核病122例,采用FQ-PCR对其BALF中TB-DNA进行检测,并与痰涂片法、痰FQ-PCR法和BALF沉淀涂片法作比较分析。结果 122例肺结核患者BALF中FQ-PCR法阳性率72.9%（涂阳19例、涂阴70例）,与痰涂片（15.6%）、痰FQ-PCR（39.3%）和BALF沉淀涂片（31.1%）比较,具有显著性差异（P〈0.05）。结论 FQ-PCR对BALF中TB-DNA的检测具有敏感度高、特异性强等特点,对结核病的确诊率高于常规方法,在痰涂阴和不典型结核患者的诊断方面提供了良好的依据。     

4种不同肺结核支气管肺泡灌洗液诊断方法的比较研究

目的 比较不同诊断方法在肺结核患者的支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）检出率及利福平耐药率差异,进而评估不同检测技术在肺结核临床诊断中的应用价值。 方法 回顾分析河北省胸科医院就诊的肺结核患者297例,同一时间分别采用BACTEC MGIT960快速培养系统（培养法）、改良抗酸染色法（染色法）、Gene Xpert MTB/RIF系统（Xpert法）及TB-DNA PCR-荧光探针法（PCR法）对同一患者的BALF样本进行MTB及利福平耐药检测,并分析不同诊断方法的结果差异。 结果 培养法、染色法、Xpert法和PCR法的MTB阳性检出率分别为46.465%（138/297）、30.640%（91/297）、55.556%（165/297）和36.364%（108/297）,差异有统计学意义（χ2=44.336,P＜0.001）。Xpert法MTB阳性检出率显著高于其他3种方法,培养法显著高于染色法及PCR法,差异有统计学意义（Xpert法相对于其他3种的χ2值分别为4.911、37.592和22.023,P＜0.05;培养法相对于另外2种的χ2值分别为15.698、6.245,P＜0.05）,而染色法与PCR法阳性率之间差异无统计学意义（P＞0.05）。培养法、Xpert法和PCR法的利福平耐药检测结果分别为10.145%（14/138）、9.091%（15/165）和10.185%（11/108）,差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 4种检测方法在肺结核患者BALF样本中MTB阳性检出率差异较大,BACTEC MGIT960快速培养系统和Gene Xpert MTB/RIF系统能够较好地应用于肺结核患者BALF中MTB及利福平耐药检测,且Xpert法MTB阳性检出率更高、检测时间更快速,而利福平耐药检出率差异无统计学意义（P＜0.05）。     

荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌的价值

目的分析使用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测结核分支杆菌的应用价值。方法收集首都医科大学附属北京同仁医院临床各科室各类结核病或疑似结核病患者检测标本178例,使用FQ-PCR法进行结核分枝杆菌脱氧核糖核酸检测,标本同时进行抗酸染色显微镜下观察。结果 FQ-PCR法和抗酸染色涂片法对不同来源标本检测结核分枝杆菌的结果存在较好的一致性(Kappa=0.615,P<0.01)。使用FQ-PCR法检测结核分枝杆菌的阳性检出率为12.9%,抗酸染色涂片法的阳性检出率为6.2%,二者比较差别有统计学意义(χ2=4.682,P<0.05)。结论 FQ-PCR法检测标本中的结核分枝杆菌的灵敏度高于传统的抗酸染色涂片法,可作为结核病病原学诊断的优先方法。     

支气管肺泡灌洗液和血清肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值

目的 探讨支气管肺泡灌洗液和血清中肿瘤标志物,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角质蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA21-1)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)在肺癌早期诊断中的临床价值.方法 采用电化学发光法测定70例肺癌住院患者及40例肺部良性疾病患者支气管肺泡灌洗液和血清中CEA、NSE、CYFRA21-1水平.结果 肺癌患者支气管肺泡灌洗液和血清3项肿瘤标志物平均含量均高于肺部良性疾病患者(P＜0.01).支气管肺泡灌洗液中3种标志物的含量明显高于血清中的含量(P＜0.05).联合检测两项及3项阳性者均使支气管肺泡灌洗液和血清诊断肺癌的敏感性和准确性得到提高.Ⅲ、Ⅳ期肺癌组支气管肺泡灌洗液和血清中3项肿瘤标志物的表达水平均高于Ⅰ Ⅱ期患者(TNM分期),Ⅰ Ⅱ期肺癌组支气管肺泡灌洗液中3项肿瘤标志物的表达水平高于肺良性病组(P＜0.05).结论 支气管肺泡灌洗液CEA、CYFRA21-1、NSE检测对肺癌的早期诊断价值优于血清,联合检测支气管肺泡灌洗液和血清中的肿瘤标志物能大大提高临床诊断肺癌的阳性率.     

Detection of hepatitis B viral DNA in liver with polymerase chain reaction

The sensitivity of PCR was determined for detection of HBV DNA in paraffin-embed-ded liver tissue with different methods for sample preparation.Of 8 cases of HBeAg-positiveHBV infection,HBV DNA was detected in 6 by extracting DNA from both frozen and dewaxedsamples,but in none by direct reaction.Of 12 cases subjected to Southern blot hybridization,HBV DNA was detected in 7 by this technique,in 10 by PCR with both methods of DNA extrac-tion and in 3 by direct PCR.The results showed that PCR was sensitive and was comparablewith blot hybridization in detecting intrahepatic HBV DNA.In comparison between differentmethods of sample preparation,the viral detection rate from the dewaxed samples was near thatfrom the frozen ones,while by the direct reaction HBV DNA could be detected only in a fewsamples with high level of infection.     

Xpert MTB/RIF对初治涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液检测的研究

目的 探讨Xpert MTB/RIF检测支气管肺泡灌洗液对初治涂阴肺结核的早期快速诊断价值。方法 对南通市第六人民医院2015年6月—2018年1月连续三次痰涂片阴性的疑似初治肺结核住院患者332例,在抗结核治疗前行支气管镜检查,收集支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid,BALF）,行结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF检测,比较三种方法的阳性率,并分别以培养阳性及临床诊断为标准,计算Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果 共有279例初治涂阴肺结核和53例非肺结核患者入组,279例初治涂阴肺结核的BALF检测结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF阳性率分别为2.51%、25.81%及50.90%,Xpert MTB/RIF阳性率明显高于涂片法及培养法,差异有统计学意义。以MGIT960培养阳性为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为98.61%（71/72),特异度为100%（53/53）;阳性预测值为100.00%（71/71）,阴性预测值98.15%（53/54)。以临床诊断为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为50.9%（142/279),特异度为100%（53/53）。阳性预测值为100%（142/142）,阴性预测值27.89%（53/190)。以DST 结果为金标准,Xpert MTB/RIF 检测利福平耐药的敏感度、特异度分别为 87.5％,98.44％,Xpert MTB/RIF与 DST两种方法检测利福平耐药的一致率达到 97.22％。且检测完成时间仅需2 h。结论 BALF中Xpert MTB/RIF检测敏感度、特异度均较高且能判断是否对利福平耐药,对初治涂阴肺结核有较大的早期快速诊断价值。     

支气管肺泡灌洗液中3种肿瘤标志物的含量检测及意义

目的:研究支气管肺泡灌洗液(BALF)中3种肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白片段21-1(CYFRA21-1)、组织多肽特异性抗原(TPS)对肺癌的临床诊断意义.方法:采用电化学发光免疫分析仪法(Elecys2010)、酶联免疫吸附法分别检测62例肺癌患者、36例肺部良性病变患者血清及BALF中CEA和CYFRA 21-1,TPS的含量.结果:肺癌患者BALF中3种肿瘤标志物的含量明显高于肺部良性病变患者(P＜0.05),且随着TNM临床分期升高,肿瘤标志物的含量也明显升高.在不同病理类型的肺癌中,3种肺癌肿瘤标志物升高的程度均有所不同.BALF中肿瘤标志物的含量与同期血清中的含量相比,出现更早且浓度更高,尤以TPS升高最为明显.结论:BALF中3种肺癌标志物的检测在肺癌的早期诊断、病理类型的推断及预后判断方面都有一定的意义,其临床价值优于血清.     

Effects of early bronchoalveolar lavage fluid collected from dogs with smokeinhalation injury on the lungs of rats

Whether early massive bronchoalveolar lavage can remove the harmful substances from the lungs injured with smoke inhalation remains uncertain. This study was designed to observe the effects of early massive bronchoalveolar lavage fluid (BALF) on the healthy lungs in rats. Methods: Mongrel dogs were inflicted with severe smoke inhalation injury.. The injured lungs were lavaged with large amount of normal saline in the first hour after injury and the BALF was collected. The BALF was injected into the healthy lungs of 30 rats (group C) in the dosage of 5 ml/kg. The functions and pathological changes of the lungs were observed 24 h after perfusion with the BALF. The data were compared with those of 23 rats (group B) whose lungs were perfused with the BALF collected from normal dogs and those of 21 rats (group A) whose lungs were perfused with normal saline. Results: The mortality rate 24 h after lung perfusion was higher in group C than in groups A and B. The survivors of group C exhibited fluctuation of respiratory rate (RR), remarkable decrease of PaO2, significantly higher content of lung water, decrease of total static pnlmonary, compliance and pulmonary expansion index, and increasse of inflammatory cytokines in the tissues of lungs. Only slight mechanic obstructive effect on the airway was observed in rats of group A and B. The pathological changes of the lungs of the rats in group C were similar to those of the dogs with actual smoke inhalation injury.. Conclusion: Our findings indicate that the BALF collected from dogs with acute severe smoke inhalation injury, in the early stage after injury injured the normal lungs of rats with the bioactive substances in the BALF. These findings show us that it is a valuable therapeutic procedure to apply massive bronchoalveolar fluid lavage in the early stage after inhalation injury.     

肺泡灌洗液γ-干扰素释放试验对肺结核诊断的价值

目的 探讨肺泡灌洗液γ-干扰素释放试验在肺结核诊断中的价值。方法 选择2020年5月—2021年1月于河北省胸科医院就诊的可疑肺结核患者97例为研究对象,以酶联免疫斑点试验（enzymelinked immunospot assay,ELISpot）检测两组患者全血及肺泡灌洗液γ-干扰素释放试验的差异,探讨肺泡灌洗液γ-干扰素释放试验对肺结核的诊断价值。结果 两组患者性别、年龄差异无统计学意义（P>0.05）。活动性肺结核组血和肺泡灌洗液-γ干扰素释放试验的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为90.0%（45/50）和92.0%（46/50）、53.8%（21/39）和76.9%（30/39）、71.4%（45/63）和83.6%（46/55）、80.8%（21/26）和88.2%（30/34）。非结核组血和肺泡灌洗液γ-干扰素释放试验阳性率为46.2%（18/39）和23.1%（9/39）,与活动性肺结核组比较,差异均有统计学意义（P<0.01）。活动性肺结核组血和肺泡灌洗液培养滤液蛋白γ-干扰素释放试验斑点数分别为（56.66±13.38）和（80.86±16.65）,差异有统计学意义。既往结核病史及肺结核接触史能提高血γ-干扰素释放试验的阳性率,而对肺泡灌洗液γ-干扰素释放试验则无。结论 肺泡灌洗液γ-干扰素释放试验在活动性肺结核诊断中敏感度及特异度均较高,且不受既往肺结核病史及结核接触史的影响,更能体现肺结核的活动性。