纳米淡水珍珠粉对成骨细胞成骨活性的影响

目的 研究纳米淡水珍珠粉(nanonized freshwater pearl powder, NFPP)对成骨细胞成骨活性的影响。方法 将NFPP与成骨细胞在体外共同培养,以纳米羟基磷灰石(nanonized hydroxyapatite, NAHA)作为阳性对照组,空白组作为阴性对照组,以细胞贴壁实验检测成骨细胞的黏附,CCK-8法检测成骨细胞的增殖,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)试剂盒检测成骨细胞的分化,茜素红染色检测成骨细胞矿化结节的形成。结果 成骨细胞的增殖、分化在实验组与两对照组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05),但细胞贴壁率实验组与阳性对照组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组中矿化结节面积高于两对照组。结论 NFPP能促进成骨细胞的增殖、分化与矿化结节的形成,但对成骨细胞黏附的促进作用与NAHA基本一致。     

镉对体外培养成骨细胞增殖、凋亡、分化及矿化的影响

目的探讨镉对体外培养成骨细胞（osteoblast,OB）增殖、凋亡、分化及矿化的影响。方法用混合酶消化法分离大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养;成骨细胞与不同浓度的Cd2＋作用后,MTT法测定细胞增殖;AO/EB双染法进行凋亡形态学观察;PNPP法检测碱性磷酸酶活性;矿化结节计数和面积测量分析镉对成骨细胞矿化能力的影响。结果各剂量组氯化镉均可抑制成骨细胞增殖,其中2.0μmol/L以上剂量组与对照组相比差异有统计学显著意义（P〈0.01）;16.0μmol/L、32.0μmol/L剂量组OB可见较多凋亡细胞;各时点、各剂量组氯化镉均能抑制ALP活性,尤其是48h以上影响作用更明显（P〈0.01）;0.5μmol/L、1.0μmol/L浓度的氯化镉可明显抑制成骨细胞矿化能力。结论镉离子可以抑制成骨细胞增殖、分化及矿化能力,促进成骨细胞凋亡,对成骨细胞的骨形成能力有明显抑制作用。     

携带重组腺病毒 BMP-2的巨噬细胞对 C3H10细胞成骨分化的影响

目的：探讨携带 BMP-2（Bone Morphogenetic protine-2）腺病毒的巨噬细胞对小鼠 C3H10细胞的增殖和成骨分化的作用。方法：感染重组腺病毒 BMP-2的巨噬细胞与小鼠 C3H10细胞共培养。MTT 方法检测共培养体系中 C3H10细胞的增殖能力;共培养7 d 对 C3H10细胞进行 ALP 染色和活性检测;细胞培养至21 d,进行标茜素红染色检测矿化结节;定量 PCR 实验验证过表达腺病毒载体 BMP-2有效性并且检测 Runx2的表达;Western blot检测细胞中磷酸化 Smad1/5/8蛋白表达。结果：与对照组相比,巨细胞过表达 BMP-2与 C3H10细胞共培养后,可以促进 C3H10细胞增殖;ALP 染色程度和活性上升;矿化结节增多;定量 PCR 结果显示 Ruxn2 RNA 表达增加, Western blot 结果显示 Ruxn2蛋白表达上升。结论：过表达 BMP-2的巨噬细胞可以促进小鼠 C3H10细胞的增殖,并且可能通过 BMPs 经典途径促进 C3H10细胞的成骨分化。     

不同浓度地塞米松诱导大鼠间充质干细胞向成骨细胞的分化

目的　观察不同浓度地塞米松 (DEX)诱导大鼠间充质干细胞 (MSCs)向成骨细胞分化。方法　采用原代MSCs体外培养技术 ,取大鼠后肢双侧股骨和胫骨骨髓 ,通过静置贴壁获取MSCs。以DEX、β 甘油磷酸钠和抗坏血酸作为诱导剂 ,测定诱导后细胞的MTT增殖率 ,碱性磷酸酶 (ALP)活性以及矿化结节形成能力。应用ALP染色法观察细胞形态 ,并在倒置相差显微镜下观察诱导过程中细胞形态的变化。结果　低浓度 (10 -8、10 -9、10 -10 mol/L)DEX诱导后的细胞形态由长梭形逐渐变为立方形 ,ALP表达明显升高 (P <0 .0 1)并且能够形成矿化结节 ;高浓度 (10 -6、10 -7mol/L)DEX明显抑制MSCs的增殖 (P <0 .0 1) ,抑制ALP表达 (P <0 .0 1) ,细胞形态由饱满的长梭形变为胞质宽大的扁平形 ,呈瘫痪状 ,且不能形成矿化结节。结论　低浓度DEX能够诱导大鼠MSCs向成骨细胞分化 ,而高浓度DEX抑制MSCs向成骨细胞的分化     

MSCs旁分泌对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡的影响

目的: 探讨骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）旁分泌因子肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡的影响及其机制。方法: 将SD大鼠MSCs传代至第3代后分为未转染组、转染HGF-siRNA组及转染阴性对照（NC）-siRNA组,分别进行相应处理。通过ELISA、蛋白质印迹法检测各组MSCs细胞上清中及细胞中HGF、转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）含量和蛋白表达量。用浓度为1 μmol/L的多柔比星处理H9C2细胞4 h后分为4组：单独培养组、MSCs共培养组、与HGF-siRNA-MSCs共培养组及与NC-siRNA-MSCs共培养组。培养24 h后通过流式细胞术Annexin Ⅴ/PI双染法检测H9C2细胞凋亡率。结果： HGF-siRNA组MSCs上清中TGF-β1浓度为（519.23±24.34）pg/mL,明显高于未转染组［（459.65±11.78）pg/mL］及NC siRNA组[（459.33±11.78）pg/mL]（P均＜0.05）;转染HGF-siRNA组MSCs中TGF-β1表达量亦明显高于其他两组。HGF-siRNA-MSCs与H9C2细胞共培养组中H9C2细胞凋亡率为（18.54±0.64)%,较MSCs共培养组［(6.65±0.49)%］及NC-siRNA-MSCs共培养组［(9.70±1.62)%］明显增加（P均＜0.05）。结论： MSCs旁分泌因子HGF通过抑制TGF-β1的表达对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡起保护作用。     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离纯化与成骨鉴定

[目的] 研究大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs) 的分离纯化和在诱导条件下的成骨能力.[方法] 取SPF级SD大鼠6只,采用全骨髓贴壁培养法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,取传至第3代的MSCs进行细胞形态和免疫组化鉴定;应用含地塞米松、B-甘油磷酸钠和维生素C的诱导分化培养液诱导传代细胞向成骨细胞分化,检测碱性磷酸酶 (ALP) 的活性和细胞矿化作用进行成骨细胞鉴定.[结果] 全骨髓贴壁培养法能有效分离纯化大鼠骨髓MSCs,MSCs 在含体积分数为10%胎牛血清的低糖 DMEM(L-DMEM) 养液中生长性状相对稳定,增殖速度快;诱导条件下,细胞ALP活性明显增高,并出现了矿化结节.[结论] 建立了一种体外分离纯化、培养扩增大鼠骨髓 MSCs 的方法,成骨能力肯定,为中药蛋白质组学研究提供材料基础.     

miR-30a-5p在人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中的生物学功能及验证

目的：探讨并验证重组miRNA-30a-5p体外转染对人骨髓间充质干细胞（MSCs）向成骨细胞分化的生物学作用。方法：人工重组合成从人骨髓MSCs定向成骨分化差异性表达miRNA基因芯片结果中筛选成骨性表达量显著增高的miRNA-30a-5p。从人体骨髓中分离培养MSCs,成骨诱导分化过程中于体外转染重组miRNA-30a-5p,并通过茜素红S法染色检测钙盐沉积、碱性磷酸酶（ALP）钙钴法染色及ALP比色法定量检测成骨细胞ALP活性,对比观察研究重组miRNA-30a-5p在人骨髓MSCs定向成骨诱导分化过程中的生物学功能。结果：成功分离培养人骨髓MSCs并诱导其成骨定向分化。经体外向MSCs转染miRNA-30a-5p并诱导其成骨定向分化,转染效率为（37.32±2.43）%。分别于诱导培养第14、21天行ALP染色观察、ALP活性测定、茜素红钙盐结节染色检测各组细胞成骨活性,结果显示miRNA-30a-5p mimics转染组MSCs成骨分化特性显著性增强（P〈0.05）。结论：miRNA-30a-5p在MSCs定向成骨分化的过程中具有一定的促进增强作用,被转染的MSCs向成骨细胞定向分化表达有所增加,为进一步阐明人骨髓MSCs定向成骨分化的分子生化机制,细胞移植修复治疗骨缺损奠定了理论基础。     

β-磷酸三钙复合改良型富血小板纤维蛋白对兔成骨细胞增殖与分化的影响

目的 探讨β-磷酸三钙(β-TCP)复合改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)对兔成骨细胞增殖和分化的影响。方法 选取新西兰乳兔取颅顶骨制备成骨细胞,成年雄性新西兰大白兔取耳中央动脉血制备兔A-PRF。实验分为4组：A-PRF(A-PRF组)、β-TCP(β-TCP组)及β-TCP+A-PRF复合物(复合组)分别与成骨细胞共培养,空白组无材料仅培养成骨细胞。扫描电镜观察成骨细胞在不同材料上的形态结构,黏附、生长及增殖情况;细胞计数试剂盒8(CCK-8)定量分析4组成骨细胞增殖情况;ELISA检测Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)分泌情况;茜素红染色检测矿化结节的形成情况。结果 成骨细胞与材料复合培养后,电镜下见细胞在β-TCP表面和内部空隙中,以及A-PRF材料表面生长增殖。CCK-8结果显示,β-TCP组培养前5 d,细胞生长增殖受到抑制,其余3组细胞未见明显异常;随培养时间延长细胞增殖明显,培养过程中复合组和A-PRF组细胞数量明显高于β-TCP组(P<0.05)。成骨相关蛋白检测结果显示：Col-Ⅰ、ALP和OCN的分泌均随时间延长而增加,同一...     

骨髓成骨细胞在合成碳酸磷灰石表面的分化增殖研究

目的：研究骨髓基质细胞转化的成骨细胞在磷酸盐溶液浸泡法合成的碳酸磷灰石（fabricated carbonate apatite．CAp）上的分化增殖。方法：通过Ca（OH）：的碳酸化生成的CaCO3浸泡在60℃、1mol／L磷酸氢二钠盐溶液中14d后。合成具有优良机械性能的低结晶性B型CAp团块。应用骨髓成骨细胞作为实验工具,观察体外细胞在CAp及作为对照组的烧结羟基磷灰石（sintered hydroxide apatite,HAP）、CaCO3、Ca（OH）2上的生长情况,定量分析碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）及骨钙素（osteocalcin,OC）在成骨过程中不同时期的表达,并通过扫描电子显微镜（SEM）对细胞形态进行观察。结果：在早期培养7h后,CAp上细胞贴壁率高于对照组;随后细胞不断增殖,在7d后生长细胞数目呈现为：烧结HAP〉CAp〉CaCO3,而成骨细胞分化的标志——ALP活性与OC水平的表达也呈同样的趋势。SEM结果显示黏附在以上三种材料上的成骨细胞形态无明显差异。结论：通过磷酸盐溶液浸泡法合成的CAp能够促进体外培养成骨细胞黏附与增殖,有利于细胞向成骨分化．促进骨形成．有望成为理想的人工骨材料．     

补肾复方胶囊含药血清对成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响

目的：观察补肾复方胶囊含药血清对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。方法：从新生SD大鼠颅骨获取成骨细胞进行培养,取第三代大鼠成骨细胞,分别予以5%、10%、20%浓度的含药血清和10%对照血清培养,测定成骨细胞的增殖率、碱性磷酸酶活性、骨钙素含量、矿化结节数目。结果：与对照组比较,除3d、6d的低浓度组外,其它各组、各时间点均可增加成骨细胞增殖,差异有统计学意义（P〈0.05或0.01）;除低浓度组培养24 h外,各浓度给药组培养24 h、48 h、72 h后,碱性磷酸酶分泌均呈不同程度增加（P〈0.05或0.01）;各浓度均可增加骨钙素的分泌（P〈0.05或0.01）,尤以高剂量组为显著（P值均〈0.01）;中、高浓度可以显著促进矿化结节形成,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：补肾复方胶囊含药血清在体外可以促进成骨细胞的增殖、分化和矿化,为其治疗骨质疏松提供实验依据。     

中药调节兔膝骨关节软骨代谢作用的研究

目的研究中药对软骨细胞活性及代谢反应的调节规律,探讨中药治疗骨关节炎的作用机理。方法从细胞增殖(MTT法)、细胞DNA合成(3H-TdR掺入率)、蛋白多糖的形成(甲苯胺蓝染色)和Ⅱ型胶原的合成(3H-脯氨酸掺入)观察兔膝骨关节软骨细胞代谢变化。结果鹿茸多肽及维骨力对细胞增殖及蛋白多糖合成有促进作用,益气通络方对细胞增殖及蛋白多糖合成起抑制作用。益气通络组、鹿茸多肽组及维骨力组对软骨细胞的增殖有促进作用,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);鹿茸多肽组及维骨力组对软骨细胞DNA及Ⅱ型胶原的合成有促进作用,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);益气通络组对软骨细胞代谢起抑制作用(P<0.05)。结论益气通络方阻断分解代谢细胞因子,防止胶原纤维转型而促进细胞增殖;鹿茸多肽促进软骨细胞合成代谢而促进软骨细胞增殖,维骨力保护软骨细胞而促进软骨细胞增殖。     

感觉、运动神经匀浆对兔成骨细胞增殖与成骨功能的影响

目的 研究兔周同感觉、运动神经匀浆对兔骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞增殖与成骨能力的影响.探讨周围神经影响成骨的可能原因.方法 提取大隐神经、坐骨神经肌支分别作为感觉、运动神经组织,制备匀浆.体外培养兔骨髓间充质干细胞,常规成骨诱导后鉴定备用.以含感觉、运动神经匀浆的诱导培养基、成骨诱导培养基、无地米诱导培养基及对照培养基作用于干细胞来源的成骨细胞,观察其增殖、分化及矿化情况.结果 感觉神经组较其他各组显著促进成骨细胞增殖(P<0.01),成骨诱导组及对照组抑制细胞增殖(P≤0.001);感觉神经匀浆显著促进成骨细胞总蛋白及碱性磷酸酶(ALP)的合成(P<0.05),成骨诱导组及对照组ALP蛋白比活性显著高于运动神经组及无地米组(P<0.05);感觉神经组、成骨诱导组及对照组茜素红结合量显著高于无地米组及运动神经组(P<0.001),前三组之间无显著性差异.结论 感觉神经成分能显著促进成骨细胞的增殖、分化与矿化,运动神经成分未见促成骨作用.     

鹿茸提取物治疗骨质疏松症研究

鹿茸提取物不仅能促进成骨细胞的增殖也能促进破骨细胞的分化,其增殖活性呈现出浓度依赖性,并且不产生种属特异性,鹿茸可用于治疗骨质疏松症。鹿茸的提取物治疗骨质疏松症的药理作用与多种有效活性物质相关,但其作用机制目前为止仍然缺乏深度研究,包括用药的多少、毒副作用都不明确。今后的研究方向应该转向鹿茸的药理作用。     

表面修饰对纳米晶胶原基骨细胞相容性的影响

目的:探索纤维蛋白(fibrin,FB)修饰的纳米晶胶原基骨(nanoHydroxyapatite/collagen,nHAC)支架材料上成骨诱导的骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)黏附、增殖及分化的情况。方法:实验分为两组:实验组,纤维蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FB-nHAC);对照组,单纯的纳米晶胶原基骨(nHAC)。将SD大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导为成骨细胞,种植于支架材料上,体外复合培养。通过检测支架材料的细胞黏附率、不同时间点(3,7,10,14 d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶表达量以及扫描电镜观察细胞在支架材料上的生长状况,比较分析不同支架材料与细胞生物相容性差异。结果:大鼠MSCs经诱导培养14 d后,I型胶原免疫荧光染色为阳性;实验组支架材料的细胞黏附率显著高于对照组(P<0.05);且相同时间点实验组支架材料中的细胞数及碱性磷酸酶表达量也明显高于对照组(P<0.05);电镜观察发现两组材料上均有细胞生长,但实验组的细胞生长状况明显好于对照组。结论:表面修饰纤维蛋白后的nHAC支架材料具有更好的细胞黏附、增殖及促成骨分化能力。     

壳聚糖-明胶-果胶仿生网络膜对间充质干细胞增殖和矿化的影响

目的：探讨采用壳聚糖、明胶和果胶制备的仿生网络膜对间充质干细胞（MSCs）增殖和矿化的影响,评价其用于构建组织工程骨的可行性。方法：采用仿生学方法,将壳聚糖、明胶和果胶按照一定比例制作成新型仿生网络膜。实验分为对照组（MSCs+常规培养基）、材料组（MSCs+网络膜+常规培养基）和材料+成骨诱导培养基（OS）组（MSCs+网络膜+OS培养基）。倒置相差显微镜下观察细胞形态表现,扫描电镜（SEM）观察细胞生长及细胞外基质分泌情况,MTT法检测细胞增殖情况（MSCs分为阴性对照组和材料组,分别以空白培养液和含材料的培养液培养）,茜素红染色检测细胞中钙无机物表达情况,实时聚合酶链反应（Real time-PCR）测定细胞中骨钙素（OC） mRNA和骨桥蛋白（OPN） mRNA表达水平。结果：网络膜材料呈半透明薄膜状,倒置相差显微镜下MSCs为短梭形,细胞成簇状聚集生长。SEM下观察,细胞培养第7天可见梭形细胞;培养第14天时细胞数量增多,以伪足状突起锚定于材料表面;培养第21天时,细胞聚集并分泌大量细胞外基质。材料组细胞增殖水平与阴性对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。茜素红染色,网络膜上细胞被染成橘红色。Real time-PCR法,材料组和材料+OS组MSCs中OC mRNA在接种后第7和14天时表达水平较低,第21天时其表达水平明显升高,达到峰值;OPN mRNA在第7天明显表达,第14天时表达水平达峰值,第21天略有下降;与对照组比较,不同时间点材料组和材料+OS组细胞中OC mRNA和OPN mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,而材料组与材料+OS组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：壳聚糖-明胶-果胶仿生网络膜具有良好的生物相容性,MSC在其表面可正常生长和增殖,在不加诱导剂的情况下可以诱导MSCs表达矿化相关的基因和蛋白。     

鹿茸多肽对β-淀粉样蛋白诱导脊髓神经元细胞凋亡的保护作用

[目的]探讨鹿茸多肽对β-淀粉样蛋白诱导脊髓神经元细胞凋亡的保护作用。[方法]体外进行胎鼠脊髓神经元细胞培养传代,细胞进入对数生长期后进行实验。MTT比色法检测不同浓度β-淀粉样蛋白作用24h后细胞活力变化;检测25μmol／L β-淀粉样蛋白作用24h后,细胞凋亡百分数和观察细胞caspase-3表达情况。[结果]不同浓度的β-淀粉样蛋白作用24h后对细胞活力均明显下降,并呈剂量依赖性（P〈0．05）;鹿茸多肽可明显抑制β-淀粉样蛋白诱导的脊髓神经元细胞凋亡现象（P〈0．05）,且可使caspase-3的表达量下降。[结论]鹿茸多肽通过抑制β-淀粉样蛋白诱导脊髓神经元细胞caspase-3表达增高而对其细胞凋亡发挥保护作用,本实验为探索新的治疗脊髓神经损伤的药物提供了重要的理论基础。     

Wild-type smad3 gene enhances the osteoblastic differentiation of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells in vitro

Summary This study examined the effect of wild-type Smad3 gene on the osteoblastic differentiation of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cellsin vitro. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) were stably transfected with the complexes of pcDNA3. 0-Myc-Smad3 or pcDNA3. 0-Myc-Smad3ΔC and Lipofectamine reagent. Immunofluorescence staining was performed to evaluate the c-Myc signal in MSCs. The cell proliferation was detected by MTT method. To clarify the osteoblastic characteristics in stably transfected MSCs, alkaline phosphatase (ALP) mRNA and core binding factor α1 (Cbfa1) mRNA were investigated by RT-PCR, and ALP activity and mineralization were examined by p-nitrophenolphosphate method and alizarin red staining respectively. PD98059, a specific inhibitor of the ERK signaling pathway, was used to determine the role of ERK in Smad3-MSCs osteoblastic differentiation. c-Myc signal was detected in Smad3-MSCs and Smad3 ΔC-MSCs. The proliferation of Smad3-MSCs was slower than that of Smad3 ΔC-MSCs or V-MSCs. The relative levels of ALP mRNA and Cbfal mRNA in Smad3-MSCs, as well as ALP activity and mineralization, were markedly higher than those in Smad3 ΔC-MSCs or V-MSCs. Although ALP activity and mineralization were slightly lower in Smad3-MSCs treated with PD98059 than in those without PD98059 treatment, no significant difference was found between them (P>0.05). It is concluded that the wild-type Smad3 gene, which is a crucial component promoting bone formation, can inhibit the proliferation of MSCs and enhance the osteoblastic differentiation of uncommitted MSCs and the maturation of committed MSCs independent of the ERK signaling pathway. ZHENG Qixin, male, born in 1952, Professor This study was supported by a grant from the National Natural Science Foundation of China (No. 30170270).     

兔骨髓间质干细胞的成骨诱导及鉴定

目的 :探讨体外成骨诱导的兔骨髓间质干细胞 ( MSCs)的形态和功能特征 ,以及其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法 :选用生长状态良好的兔骨髓间质干细胞 ,在体外进行成骨活性诱导 ,并进行形态学观察和碱性磷酸酶、骨钙素的测定。结果 :经过体外成骨诱导的兔 MSCs表现出增殖、聚集、结节和矿化期的阶段性形态特征 ,同时在刺激 1周后表达碱性磷酸酶活性 ,在结节期和矿化期表达骨钙素活性。结论 :体外成骨诱导的的兔 MSCs具有典型的成骨细胞的阶段性特征和功能性特征 ,可以作为骨组织工程的种子细胞     

不同低氧分压对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖分化的影响

目的研究体外不同低氧分压对SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖分化的影响。方法将体外培养的MSCs,分组置于常氧(21%)和低氧(2%、4%、6%、8%)培养箱中培养,用MTT法分别于1、3、5、7、9d检测细胞的增殖活性;用酶联免疫检测法分别于1、3、5、7、9d检测细胞碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)的表达。结果不同低氧分压对MSCs细胞增殖活性有明显促进作用(P<0.05);低氧分压抑制MSCs细胞的ALP和COLⅠ表达(P<0.05)。结论低氧微环境可促进MSCs的增殖活性,但对细胞的成骨向分化起到抑制作用。     

鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其机制

目的：制备鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,探讨其对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其可能机制。方法：将胶原溶液和壳聚糖溶液充分混匀,采用戊二醛交联法制备复合材料,扫描电子显微镜（SEM）下观察复合材料的微观结构。选择36只家兔建立兔下颌骨单侧缺损模型,分为实验组和对照组,每组又设4、8和12周亚组,每亚组各6只家兔。实验组家兔植入鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,对照组家兔不植入任何材料。分别于术后4、8和12周采用CT观察家兔造模部位的组织学及周围神经重建情况,免疫组织化学法检测家兔骨组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达量,SEM下观察骨缺损处的超微结构。结果：复合材料呈现规则的层状皱褶结构,支架内部孔径变大且以片状结构为主,是生物材料理想的结构。术后4周,实验组家兔有新骨生成,新生骨样组织致密材料大部分降解,VEGF呈高表达;术后8周,实验组家兔中的骨缺损部位骨小梁明显增多,VEGF表达呈下降趋势;术后12周,实验组家兔新骨形成且密度基本与正常组织一致,VEGF表达恢复正常。术后各时间点实验组家兔骨缺损愈合程度和成骨速度明显优于对照组。结论：鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合具有明显的促进作用,其机制可能与促进VEGF表达有关。