大鼠脑缺血再灌注损伤与盐酸法舒地尔的保护作用

背景传统钙离子拮抗剂脑保护作用并不确实,盐酸法舒地尔是一种新型钙离子拮抗剂,具有强大的扩血管作用和保护缺血脑组织的作用.目的研究盐酸法舒地尔作为细胞内钙离子拮抗剂对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用.设计随机对照的实验研究.地点和对象全部实验于解放军总医院实验动物中心完成.选择体质量250～300 g健康SD大鼠30只(解放军总医院实验动物中心提供),以Haruo Nagasawa法建立脑缺血模型,分为盐酸法舒地尔组15只和生理盐水组15只.另选体质量250～300 g健康SD大鼠50只(解放军总医院实验动物中心提供),以Carys M Bannister转流法制作局灶缺血模型.转流法模型50只大鼠5只一组分为10组,各用于测定盐酸法舒地尔和生理盐水治疗动物缺血前,缺血60min,再灌注20,60,120min缺血区脑组织乳酸含量.干预用线栓法和转流法制作大鼠大脑中动脉区缺血再灌注模型,于缺血前30 min分别给予盐酸法舒地尔和生理盐水.主要观察指标缺血后5,60 min和再灌注30 min的局部脑血流量(rCBF);术后3,24,48 h神经功能;缺血60 min,再灌注20,60,120 min缺血脑组织乳酸含量.结果法舒地尔组缺血5,60 min,再灌注30 min局部脑血流(rCBF)为[(3.11±0.02),(3.60±0.02),(8.04±0.10)mL/(100 g·min)]明显高于对照组[(2.63±0.04),(3.17±1.29),(6.74±0.03)mL/(100 g·min)];法舒地尔组神经功能好于对照组;再灌注60,120min乳酸含量法舒地尔组[(7.2±0.3),(7.4±0.2)mmol/kg]少于对照组[(10.2±0.3),(10.0±0.3)mmol/kg].结论盐酸法舒地尔能改善动物模型缺血脑组织局部血流量,加速再灌注过程乳酸清除,具有脑保护作用.     

丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法：利用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。治疗组缺血时腹腔注射丹皮酚，缺血2h再灌注24h观察对神经功能缺陷评分、脑组织病理形态改变、脑梗死体积的影响。结果：与对照组[(2．27&;#177;0．70)分]比较，丹皮酚治疗组[(1．67&;#177;0．72)分]症状改善，神经功能缺陷评分减少(t=2．302，P=0．029)，脑组织病理形态改变减轻。梗死体积治疗组[(105．25&;#177;9．48)mm^3]较对照组[(117．26&;#177;7．94)mm^3]减小，但两者之间差异无显著性意义(t=2．173，P=0．062)。结论：丹皮酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有一定的脑保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织髓过氧化物酶活性及吲哚美辛的干预作用

目的：探讨大鼠脑缺血再灌注后脑组织髓过氧化物酶活性和脑组织病理形态改变及其相关性，以及吲哚美辛对脑缺血再灌注后的保护治疗作用。方法：实验于2003-09／2004-06在大连医科大学分子生物学实验室完成。采用线栓法将SD大鼠制成大脑中动脉再灌注模型。将l15只SD大鼠分成脑缺血2h再灌注后1，2，3，4，5ci5个实验组．每组15只，每个时间点各配1个假手术组，每组8只。另将45只SD大鼠分成对照组(脑缺血2h再灌注后3d）10t只，治疗1组(再灌注前给药活至再灌注后3d)15只，治疗2组(再灌注后1h给药活至再灌注后3d)15只。观测各组脑组织髓过氧化物酶活性以评估此时脑组织中中性粒细胞黏附和浸润作用，同时观测脑梗死灶体积及脑组织病理形态变化(脑组织大体、光镜和电镜的病理变化)。结果：160只SD大鼠全部进入结果分析。①脑缺血再灌注后脑梗死灶体积：逐渐增大，第3天达高峰[(199．74&;#177;1．63)％，P&;lt;0.05]。②脑组织髓过氧化物酶活性：在脑缺血再灌注后逐渐升高，第3天达高峰[(3．73&;#177;0.17)U／g脑组织，P&;lt;0．05]，然后逐渐下降。③神经组织缺血坏死病理检查改变：第3天最明显，并且在第3天时缺血脑组织中中性粒细胞浸润最明显与脑组织髓过氧化物酶活性的改变相一致。④两组相关参数比较；治疗组脑梗死灶体积均明显小于对照组[(10.04&;#177;0．93)％．(8．62&;#177;0．73)％，(19．74&;#177;1．63)％]，脑组织髓过氧化物酶活性均明显，小于对照组[(1．85&;#177;0．10)U／g，(1．65&;#177;0.11)U／g,(3．73&;#177;0．17)U／g．P&;lt;0．001]。⑤脑组织病理形态改变轻微，中性粒细胞浸润不明显：再灌注前1h用药组效果更明显，但与治疗组之间无显著差异。结论：①脑组织髓过氧化物酶、脑梗死灶体积与缺血脑组织中中性粒细胞浸润的多少相一致，脑组织髓过氧化物酶活性可反应缺血脑组织中中性粒细胞浸润的程度。②吲哚美辛对脑缺血再灌注损伤具有显著的保护作用。     

醒脑静注射液对脑缺血再灌注损伤家兔血清白细胞介素8的影响

背景：目前有关醒脑静注射液(xingnaojing injection，XNJI)对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury，CIRI)时血清白细胞介素8水平的影响，及其脑功能保护机制研究尚少。目的：观察XNJI对CIRI家兔血清白细胞介素8水平的影响，并探讨其脑保护机制。设计：完全随机设计，对照实验研究。地点与材料：本研究的地点为温州医学院病理生理教研室。材料为选用28只日本大耳白兔，雌雄不拘，体质量2．2～3．0kg，由温州医学院实验动物中心提供。干预：28只家兔随机分为假手术对照组、缺血再灌注组和醒脑静注射液组，分别在缺血前、缺血30min、再灌注30min，60min，120min取静脉血，测定血清白细胞介素8浓度，实验结束取脑组织观察脑超微结构的变化。主要观察指标：血清白细胞介素8浓度的动态变化；脑组织超微结构的改变。结果：脑缺血再灌注期间，缺血再灌注组不同时点血清白细胞介素8水平明显高于醒脑静注射液组[缺血30min为(0．62&;#177;0．18)ng／L及(0．43&;#177;0．08)ng／L，P&;lt;0.05；再灌注30min，为(0．73&;#177;0．19)ng／L及(0．45&;#177;0．09)ng／L；再灌注60min，为(0．87&;#177;0．29)ng／L及(0．47&;#177;0．06)ng／L；再灌注120min为(1．03&;#177;0．43)ng／L及(0．44&;#177;0．07)ng／L，再灌注各时点组均P＜0．01]，超微结构发生异常改变；醒脑静注射液组不同时点血清白细胞介素8浓度显著低于缺血再灌注组[醒脑静注射液组缺血30min为(0．48&;#177;0．07)ng／L，P＜0．05；再灌注30min，(0．50&;#177;0．08)ng／L；再灌注60min为(0．55&;#177;0．14)ng／L；再灌注120min为(0．59&;#177;0．17)ng／L，再灌注各时点组P＜0．01]，其超微结构异常改变较缺血再灌注组明显减轻。结论：XNJI能有效降低白细胞介素8的水平，这可能是它减轻CIRI的又一重要机制。     

磁共振波谱分析灯盏细辛对实验性缺血再灌注脑损伤的影响

目的：探讨蛋白激酶C抑制剂灯盏细辛对活体实验性脑梗死大鼠脑组织氮一乙酰天门冬氨酸(naeetyl aspartate，NAA)及乳酸等代谢产物的影响。方法：18只大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、灯盏细辛治疗组，每组动物6只。建立活体动物大脑中动脉栓塞再灌注模型，采用磁共振波谱技术，分别对缺血再灌注组及灯盏细辛治疗组鼠脑组织NAA及乳酸等代谢产物变化进行观察和比较。结果：在缺血60min再灌注1，3，6h灯盏细辛均能有效减少脑缺血后乳酸／磷酸肌酸+肌酸的上升(灯盏细辛治疗组分别为1．09&;#177;0．18，0．81&;#177;0．23，0．79&;#177;0．27；缺血再灌注组分别为0．55&;#177;0．23，0．57&;#177;0．12，0．58&;#177;0．13)和NAA／磷酸肌酸+肌酸的下降[灯盏细辛治疗组分别为0．09&;#177;0．07，0。20&;#177;0．11，0．19&;#177;0．12；缺血再灌注组分别为1．09&;#177;0．34，0．99&;#177;0．37，1．16&;#177;0．27](P&;lt;0．01)。结论：灯盏细辛具有显著的缺血后脑保护作用。     

钙预适应对缺血再灌注心肌细胞的保护作用

目的：从细胞水平研究钙预适应对培养心肌细胞的缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法：实验选用3日龄健康清洁级SD乳鼠15只，雌雄不限，体质量10～15g。体外分离培养SD乳鼠心肌细胞，以模拟缺血溶液和模拟再灌注溶液模拟体内缺血再灌注过程，将培养心肌细胞随机分别用正常对照组、缺血再灌注组、钙适应缺血再灌注组，实验结束后检测心肌细胞活性、培养基乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)水平和心肌细胞凋亡。结果：模拟缺血再灌注可引起明显的心肌细胞损伤，无钙复钙可明显减少模拟缺血再灌注对心肌细胞的损伤，钙适应缺血再灌注组细胞的台盼蓝摄取率、LDH活性、凋亡指数[(6．2&;#177;1．2)％，(1592．0&;#177;111．7)μkat／L，(6．2&;#177;0．4)％]均明显低于缺血再灌注组[(24．6&;#177;1．8)％，(2873．9&;#177;43．3)μkat／L，(10．6&;#177;0．6)％](t=19．02，23．92，13．64，P&;lt;0．01)。结论：在细胞水平上证实了无钙复钙预适应对缺血再灌注心肌细胞有明显的保护作用。     

川芎嗪在骨骼肌缺血再灌注损伤中的作用

目的：观察川芎嗪对兔缺血再灌注骨骼肌相关生化指标含量的影响以及超微结构的改变，探讨川芎嗪对骨骼肌缺血再灌注损伤的作用。 方法：实验于2004-06／2004—08在潍坊医学院显微解剖学实验室完成。取清洁级成年新西兰白兔30只，建立后肢骨骼肌缺血再灌注损伤模型。实验随机分为对照组、缺血再灌注组和川芎嗪组，每组10只。缺血后4h，川芎嗪组自耳缘静脉注射盐酸川芎嗪注射液（含川芎嗪20g/L，山东潍坊制药厂有限公司生产，批号：030618）5mg／kg，对照组及缺血再灌注组注射等量生理盐水。注射完毕后立即撤去血管夹和橡皮带以恢复供血，再灌注后2h3组分别自术侧股静脉采集血样3mL，制备血清，测定天冬氨酸氮基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙二醛和超氧化物歧化酶含量；取术侧胫前肌，常规制备超薄切片，行电镜观察。 结果：30只动物均进入结果分析。①缺血再灌注组血清天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙二醛含量明显高于对照组[（142．2&;#177;8．1）。（27．3&;#177;3．5）U／L；（318&;#177;35）（153&;#177;21）U／L；（3141&;#177;271），（1783&;#177;289）U／L；（5．86&;#177;0．59），（3．77&;#177;0．43）μmol／L；t=47．237-8．856，P〈0．01]，川芎嗪组与对照组比较除天冬氨酸氨基转移酶外均无明显升高[（59．7&;#177;3．3）U／L,t=13．320，P〈0．01]。②缺血再灌注组超氧化物歧化酶活性明显低于对照组[（325．51&;#177;30．62），（443．49&;#177;38．13）NU／mL,t=8．404，P〈0．01]，川芎嗪组与对照组比较无明显降低[（422．37&;#177;23．77），（443．49&;#177;38．13）NU／mL,t=1．504，P〉0．05]。③电镜下观察可见缺血再灌注组显示线粒体空泡样变，嵴断裂，毛细血管内皮细胞微绒毛减少，三联体异常，双侧终池宽大，横小管粗细不等；川芎嗪组三联体完整，糖原颗粒较多，毛细血管内皮细胞内有吞饮小泡，内皮细胞可见轻微损伤，肌纤维基本正常。 结论：川芎嗪可减轻缺血再灌注对骨骼肌造成的损伤，对缺血再灌注骨骼肌具有保护作用。     

大剂量硝酸甘油对大鼠离体缺血再灌注心肌细胞凋亡和Bax及Bcl-2的影响

目的：研究硝酸甘油是否对大鼠离体缺血再灌注心肌细胞凋亡和Bcl-2／Bax水平存在直接的影响。方法：实验选用SD大鼠30只，随机分为硝酸甘油组和对照组，每组15只。制备大鼠离体心肌缺血再灌注模型(缺血30min，再灌注120min)在再灌注开始时分别给以大剂量硝酸甘油(15μg／h，以950mL／L乙醇为溶剂)或950mL／L乙醇(3μL／h)。再灌注结束后，将缺血区剪下，制备石蜡切片，采用TUNEL技术检测心肌凋亡，免疫组化技术检测心肌组织的Bcl-2和Bax水平。结果：硝酸甘油组细胞发生凋亡数[(35．2&;#177;6．7)％]明显多于对照组细胞[(5.2&;#177;0．8)％](t=28.1，P&;lt;0.01)。对照组Bcl-2表达(5.7&;#177;1.3)明显强于硝酸甘油组(1．8&;#177;0.8)(t=11．9、P&;lt;0．01)。对照组Bax表达(5.9&;#177;1．3)明显弱于硝酸甘油组(9.1&;#177;1.3)(t=9．2，P&;lt;0．01)。结论：大剂量的硝酸甘油促进了大鼠离体缺血／再灌注心肌细胞凋亡，提高了Bax蛋白的水平，降低了Bcl-2蛋白水平；大剂量硝酸甘油对Bcl-2／Bax的调节可能是其促凋亡的主要机制之一。     

复方水蛭合剂对大鼠局灶性脑缺血细胞因子免疫损伤的保护作用

目的：探讨复方水蛭合剂对局灶性脑缺血细胞因子免疫损伤的保护作用。方法：Wistar大鼠正常组6只，空白对照组12只，复方水蛭合剂组36只。检测大鼠大脑中动脉缺血后6，24h脑组织匀浆白细胞介素1、肿瘤坏死因子、一氧化氮的变化及复方水蛭合剂对其影响。结果：大鼠大脑中动脉缺血后6，24h模型组脑组织匀浆肿瘤坏死因子、白细胞介素1、一氧化氮[6h：(73.47&;#177;7.04)kIU／L(0.87&;#177;0.05)μg／L(89.07&;#177;6.69)μmol／L，24h：(90．75&;#177;7.63)kIU／L(0.98&;#177;0．07)μg／L(114．16&;#177;9.03)μmol／L]明显比正常组[(57．55&;#177;4.85)kIU／L(0．70&;#177;0．09)μg／L(51．43&;#177;5．49)μnol／L]高(P＜0．01)，大、中剂量复方水蛭合剂组明显比空白对照组低(P＜0．05～0．01)。病理形态学检查：大、中剂量复方水蛭合剂组与空白对照组比较均较轻。结论：复方水蛭合剂对脑缺血所致的细胞因子的免疫损伤有保护作用。     

缺血预处理对缺血骨骼肌收缩功能的影响

背景：缺血预处理能有效提高骨骼肌缺血耐受性，减轻骨骼肌缺血再灌注期间的坏死范围，但缺血预处理对骨骼肌收缩功能的影响文献报道不多。目的：探讨缺血预处理对骨骼肌缺血再灌注期间收缩功能的影响。设计：以实验动物为研究对象的随机对照研究。单位：华中科技大学同济医学院及解放军第二五二医院。材料：实验地点为解放军第二五二医院中心实验室。选用健康雄性SD大鼠14只。方法：采用大鼠后肢缺血再灌注模型，将14只大鼠随机分为对照组和实验组。对照组：持续缺血4h，再灌注1h；实验组：缺血5min，再灌注5min，重复3次后。持续缺血4h再灌注1h。测定缺血再灌注期间腓肠肌收缩功能变化及再灌注1h后，血清磷酸激酶(CK)，丙二醛和腓肠肌^99锝^m亚甲基二磷酸钠(^99Tc^mMDP)吸收量变化。主要观察指标：缺血预处理对腓肠肌收缩力及对血清CK。丙二醛及^99Tc^mMDP吸收量的影响。结果：实验组腓肠肌收缩力在缺血4h时为(14．32&;#177;5．05)g，再灌注1h时为(25．71&;#177;7．58)g，对照组分别为(0.4．73&;#177;2．05)g，两者相比差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，实验组血清CK为(104．85&;#177;9．84)nkat／L，丙二醛为(3988．60&;#177;455．92)nmol/L，^99Tc^mMDP吸收量为(56．0&;#177;8．1)mBq/g&;#183;min，对照组CK为(136．36&;#177;14．50)nkat／L，丙二醛为(6542．90&;#177;536．72)nmol／L，^99Tc^mMDP吸收量为(97．3&;#177;5．8)mBq／g&;#183;min，两者相比差异有显著性意义(P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)。结论：缺血预处理能有效改善缺血再灌注期间骨骼肌的收缩力，减轻骨骼肌坏死程度。因此，缺血预处理对缺血骨骼肌的收缩功能具有保护作用。     

内给氧改善缺血再灌注后脑组织能量代谢的实验研究

目的：探讨内给氧改善大鼠脑组织缺血再灌注后能量代谢障碍，起到脑保护作用的机制。方法：30只Wiatax大鼠随机分成3组：假手术组、缺血组、治疗组，制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型，予内给氧治疗后，分别测定各组大鼠脑组织中的三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)，乳酸含量及Na^+-K^+-ATPase活性，计算能量负荷值。结果：内给氧治疗组的ATP含量(2．3309&;#177;0．0866)mg／L、能量负荷值为0．0960&;#177;0．0052，Na^+-K^+-ATPase活性为(0．903&;#177;0．117)μkat／g，均高于缺血组[(0．8199&;#177;0．0591)mg／L，0．1663&;#177;0．0044，(0．465&;#177;0．064)μkat／g]差异存显著性意义(P&;lt;0．05)，乳酸含量(16．0342&;#177;1．0136)mmol／g低于缺血组(24．2513&;#177;4．3571)mmol／g，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：内给氧可明显改善大鼠脑缺血再灌注后能量代谢，具有脑保护作用。     

大鼠心脏缺氧缺血再灌注损伤与果糖二磷酸镁的保护途径

目的：观察具有改善心脏能量代谢作用的果糖二磷酸镁对实验性大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护性途径。方法：实验于2005-03在锦州医学院药理学实验室完成。24只SD大鼠随机分为3组：对照组、缺血再灌注组和果糖二磷酸镁组，每组8只。3组大鼠均实施主动脉递引灌流，采用Langendorff方法用KH缓冲液[(NaCI 118．5，NaCO325．0，KH2PO4 1．2，KCI 4．8，MgSO4 1．2，CaCl2 2．0，葡萄糖1．0)mmol／L]制备离体大鼠心脏缺血再灌注模型，将果糖二磷酸镁(2.4mmol／L)加入灌流液内，停灌时间30min，再灌注时间1h。分别在心脏灌流稳定20min，再灌注60min记录左室收缩压、左室压力变化速率，并收集1min冠状动脉血流量。取左心室标本测总超氧化物歧化酶活性用黄嘌呤氧化酶法，测组织丙二醛含量用硫代巴比妥酸法。结果：24只SD大鼠均进入结果分析。①再灌注后左室收缩压比较：果糖磷酸镁组明显低于缺血再灌注组[(73．0&;#177;6．8，109．0&;#177;9．2)mmHg，τ=10．789，P&;lt;0．05)]。②再灌注后左室压力变化速率比较：缺血再灌注组明显低于对照组[(913&;#177;233，1889&;#177;304)mmHg／s，τ=6．756，P&;lt;0．01)]。③再灌注后心脏冠状动脉血流量比较：果糖磷酸镁组明显高于缺血再灌注组[(4．6&;#177;0.4，3．5&;#177;0．5)mL／min,τ=2．693，P&;lt;0．05)]。④再灌注后左心室肌组织总超氧化物歧化酶活性比较：果糖磷酸镁组明显高于缺血再灌注组[(33．06&;#177;3．03，22．18&;#177;4．79)NU／mg，(τ=8．123，P&;lt;0．01)]。⑤再灌注后左心室肌组织丙二醛含量比较：缺血再灌注组组明显高于对照组[(10.00&;#177;1．13，2．56&;#177;0．63)nmol／mg，(τ=18．76，P&;lt;0．01)]。结论：果糖二磷酸镁对再灌注损伤心肌可改善其收缩功能，并降低心肌组织中的丙二醛含量，从而减少氧自由基的产生，起到抗脂质过氧化而保护心肌的作用。     

降钙素基因相关肽对全脑缺血脑组织的保护作用

目的：通过降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peotide，CGRP)对实验小鼠能量代谢的研究，进一步探讨CGRP，对缺血脑组织的保护作用。方法：实验小鼠在缺血前给予CGRP，并在处死后测定缺血脑组织的三磷酸腺苷(ATP)和乳酸含量。ATP的测定采用虫荧光素一荧光素酶生物发光法；乳酸的测定采用对羟基联苯显色法。脑缺血模型的制作：采用小鼠断头缺血法。结果：CGRP对实验小鼠全脑缺血有明显的预防保护作用，表现为：CGRP可使缺血脑组织中乳酸水平减少，使ATP水平明显增加。而这种作用与给药剂量和给药方式有关，即在CGRP的剂量为2．67BU／g时效果较好，ATP为(5．4&;#177;2．3)pmol／g，乳酸为(1．4&;#177;0．4：)mg／g，与模型组(2．6&;#177;1．3)pmol／g，(3．2&;#177;2．0)mg／g比，差异有显著性意义(P＜0．05)。且随着给药时间的延长，缺血脑组织中乳酸水平降低更加明显(P＜0．05)，ATP水平显著增高(P＜0．05)。CGRP对小鼠缺血脑组织的保护作用在超过一定剂量后无显著作用。结论：CGRP对全脑缺血小鼠有确切的预防保护作用，但应掌握合适剂量。     

脑缺血再灌注损伤后炎症反应与赛来昔布的脑保护作用

目的：细胞间黏附分子1及白细胞浸润参与了脑缺血再灌注损害过程，观察赛来昔布对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死体积、脑缺血坏死区周边细胞间黏附分子1和白细胞浸润的影响，探讨其是否具有脑保护作用。方法：实验于2003-12／2004-02在大连医科大学附属第二医院中心实验室进行。SD大鼠36只随机分为3组：赛来昔布组(n=16)、安慰剂组(n=16)及假手术组(n=4)，其中赛来昔布组和安慰剂组按脑缺血再灌注2，4，6，24h分为4个亚组(n=4)。手术前10min赛来昔布组用赛来昔布灌胃(0．25mg／g,以3mL生理盐水溶解)，安慰剂组安慰剂灌胃，剂量相同，然后参照改良的Longa-Zea线栓法制作大脑中动脉闭塞及再通模型，假手术组仅做颈部正中切口暴露右侧颈总动脉后缝合皮肤。观察大鼠大脑中动脉闭塞2h再灌注2，4，6，24h4个时相点梗死体积，缺血区白细胞计数，并应用免疫组织化学法染色观察细胞间黏附分子1阳性微血管数。结果：36只大鼠进入结果分析。①赛来昔布组再灌注后2，4，6，24h的梗死体积明显小于同时段安慰剂组[(4．8l&;#177;0．13)％，(8．22&;#177;0．25)％，(11．83&;#177;0．62)％，(15．93&;#177;0．42)％，(6．56&;#177;2．07)％，(10．12&;#177;2．37)％，(13．53&;#177;1．47)％，(17．86&;#177;2．78)％，P&;lt;0．05]。②假手术组细胞间黏附分子1阳性表达为(0．63&;#177;0．62)个，未见白细胞浸润。脑缺血再灌注后，脑缺血坏死区周边微血管内皮细胞细胞间黏附分子1达及白细胞浸润增多，并于24h达高峰，此时细胞间黏附分子1表达及白细胞浸润赛来昔布组低于同期安慰剂组[(43．00&;#177;1．41)，(6．25&;#177;1．26)，(59．50&;#177;2．25)，(6．75&;#177;1.8)个，P&;lt;0．01]。结论：赛来昔布可缩小脑缺血再灌注后的脑梗死体积，抑制局灶性脑缺血再灌注时炎症反应，非特异性地起到脑保护作用。 黏附分子l；白细胞     

纳洛酮对急性心肌梗死再灌注后梗死面积和肌酸激酶同工酶活性的影响

目的：通过制造大鼠急性心肌梗死再灌注损伤模型，探讨纳络酮对大鼠急性心肌梗死再灌注损伤的保护作用。方法：实验于2003—05／10在兰州医学院解剖教研室实验室完成。成年SD大鼠30只随机分为手术对照组、单纯缺血再灌注组、缺血加纳络酮组，每组10只。用戊巴比妥钠(40mg／kg)腹腔注射麻醉大鼠，从根部结扎左冠状动脉前降支制备心肌缺血-再灌注模型。单纯缺血再灌注组在结扎左冠状动脉前降支心肌缺血30min后，剪断结扎线恢复心肌再灌注4．5h。缺血加纳洛酮组在术前10min及结扎后0．5h．4h，静脉注射纳洛酮0．517mg／kg。其余两组注射同体积的生理盐水。处死大鼠后迅速摘取心脏，经处理后氯化三苯基四氮唑法染色和数码照相计算机图象分析系统计算心肌梗死面积，测定血清中肌酸激酶同工酶含量。结果：30只大鼠全部进入结果分析。缺血加纳洛酮组与单纯缺血再灌注组比较，心肌梗死面积明显缩小[(37．53&;#177;5．77)％，(26．73&;#177;3．67)％，P&;lt;0．01]，血清中肌酸激酶同工酶活性明显降低[(210．59&;#177;17．87)kat／L，(153．12&;#177;22．16)kat／L，P&;lt;0．01]。结论：纳洛酮可明显缩小缺血再灌注心梗面积，降低血清肌酸激酶同工酶含量．改善心功能。     

红景天对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的：利用SD大鼠制备肠缺血再灌注模型，观察红景天对肠缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。 方法：实验于2005—08／2006—05在第四军医大学西京医院胃肠外科实验室完成。雄性SD大鼠30只，体质量200～250g，随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组、红景天处理组，每组10只。红景天液制法参照中药质量标准：取红景天生药102g，加水煎煮2次。第1次1．5h，第2次1h。滤过，滤液合并后加水调至120mL，每只大鼠2mL／d，相当于生药5g／（kg&;#183;d）。缺血再灌注模型制备：动物于术前12h禁食．不禁水。以2％盐酸氯胺酮（100mg／kg）腹腔注射麻醉。生理盐水2mL／d，连续灌胃5d后，取正中切口入腹后分离肠系膜上动脉，以无创伤血管夹阻断肠系膜上动脉根部造成小肠完全缺血60min。然后松夹进行再灌注60min。假手术组：生理盐水2mL／d，连续灌胃5d后，只分离肠系膜上动脉，但不作阻断。红景天处理组：红景天按5g/kg生药，溶于2mL水中灌胃给药，连续5d后，分离肠系膜上动脉。夹闭肠系膜上动脉60min后再灌注60min。检测各组大鼠小肠黏膜中肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6水平，以及其中的超氧化物歧化酶和丙二醛的含量。 结果：30只大鼠均进入结果分析。①缺血再灌注组肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6水平均高于假手术组和红景天处理组[肿瘤坏死因子α：（2．57&;#177;0．29），（0．32&;#177;0．06），（1．06&;#177;0．11）μg／L；白细胞介素-6：（965．73&;#177;42．01），（122．46&;#177;1．74），（385．03&;#177;13．50）ng／L。P〈0．01]。②缺血再灌注组丙二醮水平高于假手术组和红景天处理组[（0．68&;#177;0．11），（0．33&;#177;0．10），（0．54&;#177;0．12）nmol／g，P〈0．01]；超氧化物歧化酶水平低于假手术组和红景天处理组[（34．12&;#177;5．31），（92．63&;#177;3．82），（55．66&;#177;5．92）NU／g，P〈0．01]。 结论：红景天可通过抑制细胞因子表达及清除氧自由基的方式，对肠缺血再灌注损伤起到保护作用。     

大鼠胰腺缺血再灌注损伤微循环改变的实验

目的：探讨胰腺缺血再灌注后微循环的改变与胰腺损伤的关系。方法：实验于2002—12／2004—01在徐州医学院神经生物学研究中心实验室，解放军第九十七医院实验科、徐州市心血管研究所实验室完成。24只大鼠随机分为假手术组，缺血再灌注1h组，缺血再灌注6h组，每组8只。测定血淀粉酶，脂肪酶了解胰腺外分泌功能；光镜、电镜观察胰腺组织结构改变；微循环显微镜检测胰腺微循环的血管直径、血流速度、血流状态；测定胰腺组织干／湿比，了解组织含水量的变化。结果：24只大鼠全部进入结果分析。①胰腺缺血再灌注后血清淀粉酶、脂肪酶含量：缺血再灌注1h组淀粉酶和脂肪酶含量高于假手术组[(26．67&;#177;9．99)μkat／L,(5．24&;#177;1．82)μkat／L,(14．53&;#177;3．98)μkat／L,(2．83&;#177;1．64)μkat／L，(t=2．60，349，P&;lt;0．05)]，缺血再灌注6h时明显高于假手术组[(41．59&;#177;10．95)μkat／L，(10．66&;#177;2．61)μkat／L，(t=7．35，7．54，P&;lt;0．01)]。淀粉酶、脂肪酶随着再灌注时间延长而增加。②胰腺缺血再灌注后形态学改变：缺血再灌注1h组光镜下呈现急性水肿性胰腺炎表现，缺血再灌注6h组损伤加重，出现出血、坏死。③胰腺缺血再灌注后微循环的改变：缺血再灌注1h组和缺血再灌注6h组的微动脉口径小于假手术组[(18&;#177;6)μm，(20&;#177;9)μm，(22&;#177;8)μm，(t=2．42—3．85，P&;lt;0．05)]。缺血再灌注1h组和缺血再灌注6h组的微静脉口径均较假手术组扩张[(30&;#177;8)μm，(35&;#177;15)μm，(25&;#177;10)μm，(t=2．42—3．85，P&;lt;0．05)]，缺血再灌注6h组较缺血再灌注1h组微静脉口径明显扩张(t=3．69，P&;lt;0．05)。缺血再灌注1h组与缺血再灌注6h组的血流速度均较假手术组减缓[(0．44&;#177;0．12)mm／s，(0．21&;#177;0．04)mm／s，(0．56&;#177;0．03)mm／s，(t=2．42—4．19．P&;lt;0．05—0．01)]，并且缺血再灌注6h组较缺血再灌注1h组血流速度显著减缓(t=5．19，P&;lt;0．01)。④胰腺再灌注后胰腺组织干湿比的改变：缺血再灌注1h组胰腺干湿比明显少于假手术组[(26．5&;#177;2．3)％，(30．1&;#177;2．1)％，(t=3．23，P&;lt;0．05)]，缺血再灌注6h组胰腺干湿显著减少[(20．4&;#177;2．2)％，(t=8．23，P&;lt;0．01)]。结论：胰腺缺血再灌注1h时即发生微循环障碍及组织损伤，再灌注6h微循环障碍进一步恶化，胰腺缺血再灌注后，胰腺组织损伤与微循环紊乱的发展呈现一致性。     

缺血后处理对肺再灌注损伤中脂质过氧化反应的调整

目的：缺血后处理即在全面恢复再灌注前反复短暂多次预再灌、停灌，探讨缺血后处理对在体大鼠肺缺血再灌注损伤的脂质过氧化反应的影响。方法：实验于2004-05／06在汕头大学医学院附属肿瘤医院中心实验室完成。通过阻断左肺门建立大鼠在体左肺缺血再灌注模型，将24只健康雌性SD大鼠随机分为①假手术组8只：持续灌注105min。②缺血再灌注组8只：缺血45min，再灌注60min。③缺血后处理组8只：缺血45min后，短暂再灌注1min，缺血1min，反复5次，然后再全面恢复灌注60min。试验结束后处死动物，切取新鲜肺左叶组织制成100g／L组织匀浆，测定丙二醛含量用硫代巴比妥酸比色法，测定超氧化物歧化酶活性用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)。结果：3组24只动物均进入结果分析。①肺组织丙二醛含量测定结果：假手术组为(0.934&;#177;0.086)μmol／g，对照组为(1.230&;#177;0．169)μmol／g，缺血后处理组为(1.064&;#177;0．090)μmol／g，缺血后处理组与对照组相比明显降低(P&;lt;0．05)。②超氧化物歧化酶活性测定结果：假手术组为(2．838&;#177;0．509，)μkat/g，对照组为(1．183&;#177;0．222)μkat／g，缺血后处理组为(2．008&;#177;0．298)μkat／g，缺血后处理组与对照组相比显著升高(P&;lt;0．01)。结论：对照组与假手术组相比，肺组织经历45min缺血60min再灌注后丙二醛含量明显升高，抗自由基酶类超氧化物歧化酶活性显著下降，说明再灌注期肺组织脂质过氧化反应增强，抗氧化能力降低。缺血后处理组较对照组肺组织中脂质代谢产物丙二醛含量下降，抗自由基酶超氧化物歧化酶活性增加，表明缺血后处理可减轻在体大鼠肺缺血再灌注损伤的脂质过氧化反应而产生肺保护作用。     

大鼠脑组织缺血再灌注后促红细胞生成素对神经元的保护

目的：观察促红细胞生成素对缺血再灌注大鼠脑组织海马CA1区神经元数量、凋亡细胞数量变化、脑组织匀浆一氧化氮含量、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性改变的影响。方法：实验于2003-03／2004-12在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室完成。选择健康Wistar大鼠66只，随机分为正常对照组6只，缺血再灌注生理盐水组30只(生理盐水对照组)，缺血再灌注促红细胞生成素组30只(促红细胞生成素治疗组)。除正常对照组线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型，缺血2h后再灌注。促红细胞生成素组于再灌注开始时经腹腔按2000U／kg注入生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(200U／mL)，生理盐水对照组经腹腔注入等量的生理盐水。再灌注后观察时相点为2．6，12，24，48h，每个时间点6只。应用苏木精-伊红染色观察脑海马CA1区细胞数量情况，应用末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法检测海马CA1区神经元凋亡情况，应用硝酸还原酶法测定脑组织一氧化氮含量，羟胺法测定脑组织超氧化物歧化酶活性，硫代巴比妥酸法测定脑组织中丙二醛含量。结果：66只大鼠全部进入结果分析。①脑海马CA1区细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后12，24，48h比生理盐水对照组细胞数明显增加[(286.7&;#177;33.8)，(268.6&;#177;44.5)个／视野；(271．9&;#177;30．4)．(240．8&;#177;22，5)个／视野：(258，3&;#177;29．5)，(2018&;#177;307)个／视野；(t=3.189～5.589，P&;lt;0.01)]。②脑海马CA1区凋亡细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后6，12，24，48h比生理盐水对照组阳性细胞数明显减少[(21.5&;#177;5.8)，(28．4&;#177;6．51个／视野：(327&;#177;4．6)，(48.8&;#177;7.6)个／视野；(42.8&;#177;6.6)，(60．7&;#177;10.2)个／视野；(51.8&;#177;9.5)个／视野，(81.6&;#177;12．3)个／视野，(t=3.457～6.347,P&;lt;0.01)1。③脑组织一氧化氮含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6．12，24，48h比生理盐水对照组一氧化氮含量明显降低[(48．2&;#177;5．1)，(59，4&;#177;5．5)mmol／L;(51．4&;#177;6，3)，(66，3&;#177;98)mmol／L：(59．7&;#177;6．6)，(80.7&;#177;10.2)mmol／L；(55．7&;#177;8．1)，(77．8&;#177;9.2)mmol／L：(49.3&;#177;6．7)，[67．3&;#177;7，1)mmol／L，(t=3．258～5，624，P&;lt;0．01)]。④脑组织超氧化物歧化酶活性：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组超氧化物歧化酶活性明显增高[(3.78&;#177;0.74)，(3.21&;#177;0．31)μkat／L；(3．41&;#177;0.43)，(2．92&;#177;0.31)μkat／L；(3．21&;#177;0．35)，(2．51&;#177;0．27)μkat／L；(3．64&;#177;0．55)，(3.01&;#177;0.32)μkat／L；(4．10&;#177;0.56)，(3.55&;#177;0.41)μkat／L，(t=3．485～6，457，P&;lt;0．01)]。⑤脑组织丙二醛含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组丙二醛含量明显降低[(40.7&;#177;4．4)，(54.6&;#177;6．7)μmol／L；(51.3&;#177;5.4)，(65.7&;#177;8．8)μmol／L；(61.7&;#177;7．2)，(77.4&;#177;7.5)μmol／L；(53.8&;#177;6．4)，(67．8&;#177;9.1)μmol／L；(39．7&;#177;4．0)，(53．3&;#177;4.9)μmol／L，(t=3.541～6.045，P&;lt;0．01)]。结论：促红细胞生成素可增加大鼠局灶性脑缺血再灌注组织海马cAl区细胞存活数量，对海马CA1区细胞凋亡具有阻抑作用，降低一氧化氮生成量，使脂质过氧化反应的程度减轻，起到了对神经细胞的保护作用。     

促红细胞生成素预处理对肢体缺血再灌注损伤的影响

目的：观察促红细胞生成素预处理对骨骼肌缺血再灌注损伤的影响。 方法：实验于2004—08／2005—01在解放军第二五二医院中心实验室完成。①采用大鼠右后肢缺血再灌注模型，将30只实验大鼠随机分为3组，每组10只。假手术组：仅显露股血管鞘，不做缺血再灌注，经腹腔注射同体积生理盐水；对照组：经腹腔注射同体积生理盐水，持续缺血4h．再灌注1h。促红细胞生成素预处理组（预处理组）：经腹腔注射5000u／kg人重组促红细胞生成素，24h后持续缺血4h，再灌注1h。②测定各组血清磷酸激酶，乳酸脱氢酶丙二醛和腓肠肌^99Tc^m亚甲基二磷酸钠吸收量变化。③电镜观察腓肠肌超微结构变化。 结果：30只大鼠全部进入结果分析。①对照组和预处理组血清磷酸激酶[（121．627&;#177;18．112），（84．417&;#177;14．594）μkat／L]、乳酸脱氢酶[（20．065&;#177;4．676），（13．354&;#177;5．229）μkat/L]明显高于假手术组[（50．247&;#177;16．066），（7．732&;#177;1．256）μkat／L1（P〈0．05）；对照组和预处理组丙二醛[（10．36&;#177;2．65），（6．55．&;#177;2．19）nmol／L]及^99Tc^m亚甲基二磷酸钠吸收量[（16．69&;#177;3．14），（11．66&;#177;3．87）％／（g&;#183;min）]均明显高于假手术组[（3．54&;#177;1．89）nmol／L，（9．12&;#177;1．96）％／（g&;#183;min）（P〈0．05）]。②预处理组各指标与对照组相比显著降低（P〈0．05）。 结论：促红细胞生成素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤具有保护作用。