LC-MS2法鉴别菊花槐米胶囊中掺加的尼群地平成分

目的：建立菊花槐米胶囊中非法掺加尼群地平成分的鉴别方法。方法：采用色谱柱C18（250mm×2．0mm）；乙腈-水（50：50）为流动相；流速：0．2mL·min^-1；采用电喷雾离子化（ESI）方式；二级质谱母离子m／z359，碰撞能量20V。结果：在高效液相色谱、质谱中，样品出现与尼群地平成分一致的色谱峰、质谱峰。结论：本方法简单可行，结果准确可靠，可用于菊花槐米胶囊中掺加尼群地平成分的定性鉴别。     

一种自适应局部概念漂移的数据流分类算法

目的：建立神脑舒胶囊中非法添加盐酸多塞平成分的鉴别方法。方法：采用色谱柱C18（250mm×2．0mm）；乙腈-10mmol·L^-1醋酸铵-三乙胺（65：35：0．5）（用醋酸调pH6．2）为流动相；流速：0．2mL·min^-1；电喷雾离子化（ESI）seall方式；二级质谱母离子m／z280，碰撞能量15V。结果：在高效液相色谱、紫外光谱、质谱中，样品出现与盐酸多塞平成分一致的色谱峰、光谱图、质谱峰。结论：本方法简单可行，结果准确可靠，可用于神脑舒胶囊中添加盐酸多塞平成分的定性鉴别。     

LC-MS/MS法同时检测筋骨痛消胶囊中非法添加的醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬

目的:采用LC-MS/MS联用技术建立检测筋骨痛消胶囊中非法添加醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬的方法。方法:色谱柱为SHIMADZU shim-pack VP-ODS（250mm×4.6mm,5μm）,0.02mol·L^-1醋酸铵0.1%醋酸水溶液:乙腈（53:47）为流动相,流速1.0ml·min^-1;Agilent6310离子阱质谱仪,电喷雾离子源（ESI）,雾化气压力38psi,干燥气温度350℃,流速9ml·min^-1,扫描范围50～500m/z。结果:在高效液相色谱、质谱中,样品出现与醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬成分一致的色谱峰、质谱峰。结论:本方法选择性强,灵敏度高,可用于筋骨痛消胶囊中非法添加醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬的定性鉴别。     

LC-MS/MS法对风湿骨痛宁胶囊中非法添加双氯芬酸的检查

目的采用LC-MS/MS联用技术,建立风湿骨痛宁胶囊中非法添加双氯芬酸的鉴别方法。方法色谱柱为SHIMADZU shim-pack VP-ODS,(0.02mol.-L1乙酸铵-0.1%乙酸)水溶液-乙腈(55:45)为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长为280nm;Agilent 6310离子阱质谱仪,电喷雾离子源(ESI),雾化气压力为40psi,干燥气温度为350℃,流速为9mL.min-1,扫描范围150~500m.z-1。结果在高效液相色谱、质谱中,样品出现与双氯芬酸成分一致的色谱峰、质谱峰。结论本方法简单可行,结果准确可靠,可用于风湿骨痛宁胶囊中添加双氯芬酸成分的定性鉴别。     

LC-MS/MS法对乌蛇葛根胶囊中非法添加双氯芬酸的检查

目的:采用LC-MS/MS联用技术,建立乌蛇葛根胶囊中非法添加双氯芬酸的鉴别方法。方法:色谱柱为Shimadzu Shim-pack VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm),0.02 mol.L-1醋酸铵-0.1%醋酸水溶液及乙腈(55∶45)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长为280 nm;Agilent6310离子阱质谱仪,电喷雾离子源(ESI),雾化气压力27.6 kPa,干燥气温度350℃,流速9 mL.min-1,扫描范围m/z 150～500。结果:在高效液相色谱、质谱中,样品出现与双氯芬酸成分一致的色谱峰、质谱峰。结论:本方法简单可行,结果准确可靠,可用于乌蛇葛根胶囊中添加双氯芬酸成分的定性鉴别。     

高效液相色谱法测定红毛五加中绿原酸的含量

目的:采用LC／MS2方法鉴定出中药红毛五加中绿原酸成分,并用高效液相色谱法测定其含量。方法:采用Zorbax SB-C18色谱柱(150 mm×4．6mm,5μm);流动相为乙腈和水(含0．16％甲酸)二元梯度洗脱系统;流速为1．0mL·min-1,检测波长327 nm。质谱条件:Agilent多级离子阱质谱仪:电喷雾化学电离源(ESI);负离子检出模式。结果:绿原酸的线性范围为 10-100 mg·L-1(r=0.9997),加样回收率为99．2％-101．8％;红毛五加中绿原酸的含量为0．58-5．45mg．g-1。结论:本方法灵敏、快速、重现性好,有助于红毛五加质量控制方法的研究。     

HPLC法测定菊花槐米胶囊中非法添加苯磺酸氨氯地平、吲达帕胺

目的:建立反相HPLC法,测定保健食品菊花槐米胶囊中非法添加的苯磺酸氨氯地平、吲达帕胺.方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)分析技术,Shimadzu VP-ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.02 mol·l-1磷酸二氢钠溶液(pH3.50)-乙腈(65∶35),流速为1.0 ml·min-1,柱温为30℃,检测波长为220 nm,进样量为10μl.结果:苯磺酸氨氯地平在0.0802～0.8020 μg范围内线性关系良好,平均回收率为99.8％,RSD为1.4％;吲达帕胺在0.1020～1.0200 μg范围内线性关系良好,平均回收率为99.1％,RSD为1.2％.结论:本方法简便、快捷、灵敏度高、专属性强、重复性好,可用于测定菊花槐米胶囊中非法添加的苯磺酸氨氯地平、吲达帕胺.     

HPLC-MS法鉴别唐乐舒胶囊中非法添加的格列本脲、

目的建立唐乐舒胶囊中非法添加格列本脲、格列齐特、格列美脲成分的鉴别方法。方法采用VP-ODS C18(250mm×2.0 mm)色谱柱;甲醇-0.2%冰醋酸(70∶30)为流动相;流量:0.2 ml.min-1;电喷雾离子化(ESI)scan方式。再用两种HPLC条件进行验证。结果在高效液相色谱、紫外光谱、质谱中,样品分别出现与格列本脲、格列齐特、格列美脲成分一致的峰。结论本方法简单可行,结果准确可靠,可用于唐乐舒胶囊中添加格列本脲、格列齐特、格列美脲成分的定性鉴别。     

HPLC／MS／MS测定恒河猴血浆中纳曲酮及其代谢物纳曲醇的浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定恒河猴血浆中纳曲酮及其代谢物纳曲醇的浓度。方法:液相色谱:色谱柱为Nucleocil ODS(5μm,50 mm×2.0 mm),流动相为乙腈-甲醇-水-冰醋酸(20:20:60:1),流速为0.2 mL·min-1;质谱:离子源为Turbo Ionspray源,采用多反应监测(MRM)方式进行检测,m／z342.3→324.3(纳曲酮)、m／z 344.3→326.6(纳曲醇,代谢产物)、m／z 328.4→310.4(纳洛酮,内标)。样品经有机相提取纯化后进样。结果:纳曲酮和纳曲醇的线性范围分别为0.098-150 ng·mL-1和0.781-25 ng·mL-1,萃取回收率均大于75％,日内误差(RSD)均小于9.3％,日间误差(RSD)均小于12％。结论:本方法准确、快速、灵敏、专属性好,适用于动物试验及临床上测定血浆中纳曲酮及其代谢物纳曲醇的浓度和药代动力学研究。     

LC-MS/MS检测强力追风活络胶囊中非法添加的双氯芬酸

目的 采用LC-MS/MS法鉴别强力追风活络胶囊中非法添加的双氯芬酸.方法 色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为0.02 mol·L-1乙酸铵的0.1%乙酸水溶液-乙腈(55:45),流速1.0 mL·min-1,检测波长280 nm;Agilent 6310高子阱质谱仪,电喷雾离子源(ESI),雾化气压力40 psi,干燥气温度350℃,流速9 mL·min-1,扫描范围150～500 m/z.结果 在高效液相色谱图、质谱图中,样品出现与双氯芬酸成分一致的色谱峰、质谱峰.结论 所建方法简单可行,结果准确可靠,可用于强力追风活络胶囊中添加双氯芬酸成分的定性鉴别.     

LC/MS/MS与GC/MS法分析鉴定小鼠尿中沙美特罗的代谢产物

目的:鉴定沙美特罗在小鼠尿中的主要代谢产物.方法:ig给药后,收集小鼠尿液,经固相提取,葡萄糖醛酸酶水解,进行LC/MS/MS分析和硅烷化后进行GC/MS分析同时分离鉴定沙美特罗代谢产物.结果和结论:在给药后尿样中发现沙美特罗原型和4种代谢产物M1～M4,其结构推测为19-羟基沙美特罗(M1)、2-羰基沙美特罗(M2)、19-羰基沙美特罗(M3)和19-羟基-8-甲氧基沙美特罗(M4).     

LC/MS/MS法测定辛伐他汀血浆浓度及其在健康人体内的药物动力学研究

目的:建立人体血浆中辛伐他汀的LC/MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在男性健康志愿者体内的药物动力学行为,评价其生物利用度和生物等效性。方法:采用两制剂双周期自身对照试验设计。18名男性健康志愿者随机交叉服用单剂量辛伐他汀试验片剂和参比片剂20mg,采用液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)分析方法测定血浆辛伐他汀的浓度。采用DAS2.0程序计算药物动力学参数和相对生物利用度,并进行等效性评价。结果:测定单剂量口服20mg辛伐他汀参比片剂和试验片剂的AUC_((0→24))分别为(14.90±5.86)和(14.37±4.94)ng·h·ml~(-1),AUC_((0→∞))分别为(15.62±6.29)和(14.78±5.02 )ng·h·ml~(-1);C_(max)分别为(4.54±2.11)和(4.00±1.34)ng·ml~(-1);T_(max)分别为(1.75±0.79)和(1.39±0.65)h。以AUC_((0→24))与AUC_((0→∞))计算相对生物利用度分别为(108.0±52.7)%和(106.4±52.5)%。结论:该法准确灵敏,测得的数据可靠,统计分析表明两种制剂生物等效。     

低剂量甲氨蝶呤给药类风湿性关节炎病人血浆浓度的测定

目的 建立一种快速、灵敏地测定类风湿性关节炎病人血浆中低浓度甲氨蝶呤(MTX)的方法.方法 采用高效液相色谱(HLPC)串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Ultimate XB-C18柱,流动相为乙腈(1%甲酸):甲酸铵水溶液(20 mmol/L)＝30 ︰ 70,流速为0.2 ml/min,柱温为25℃.样品提取采用液-液萃取的方法,即先用三氟乙酸沉淀蛋白,再用乙酸乙酯提取.提取的样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测(MRM)对甲氨蝶呤(m/z 455.2→308.2)和内标多索茶碱(m/z 267.1→181.1)进行测定.结果 甲氨蝶呤血药浓度在1～100 ng/ml范围内线性关系良好(r =0.9998),分析方法的最低检测限为0.5 ng/ml,其高、中、低(50、10、2 ng/ml)3 个浓度的平均提取回收率分别为41.2%、49.2%和43.4%, 日内(n = 5)、日间(n = 3)相对标准偏差值(RSD)均<15 %.结论 本方法简单快捷、灵敏、准确、重现性好,可用于低剂量给药的类风湿性关节炎病人的临床血药浓度监测和药动学研究.     

LC/MS/MS法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的 建立一种快速、灵敏地测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪(1amotrigine,LTG)的LC/MS/MS方法.方法 采用高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Welch Materials XB-C18柱,流动相甲醇-水(95:5,V/V,含5 mmol/L甲酸铵),流速0.3ml/min,柱温...     

国产盐酸舍曲林胶囊和片剂的人体药物动力学及生物等效性

目的研究国产盐酸舍曲林胶囊及片剂的相对生物利用度、药物动力学特征及生物等效性.方法采用随机、开放、3×3拉丁方设计实验,18名男性健康受试者分别单剂量口服含舍曲林50 mg的试验片剂、胶囊及参比制剂.采用HPLC-MS/MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度,计算3者的药物动力学参数及评价其生物等效性.结果 18例健康志愿者口服参比制剂和试验制剂舍曲林胶囊及片剂后,参比制剂中舍曲林的主要药物动力学参数cmax为(10.14±3.43)μg·L-1;tmax为(4.44±1.10)h;AUC0～96为(262.82±100.66)μg·h·L-1;t1/2为(29.19±4.91)h.试验制剂片剂中舍曲林的主要药物动力学参数cmax为(10.16±3.22)μg·L-1;tmax为(4.33±1.85)h;AUC0～96为(269.71±107.47)μg·h·L-1;t1/2为(30.99±6.49)h.试验制剂胶囊中舍曲林的主要药物动力学参数cmax为(10.39±3.59)μg·L-1;tmax为(4.94±1.30)h;AUC0～96为(264.45±112.57)μg·h·L-1;t1/2为(29.68±5.25)h.试验制剂片剂和胶囊分别对参比制剂的相对生物利用度F为(103.4%±18.2%)、(99.8%±13.6%).结论经统计学分析,国产试验制剂胶囊剂和片剂与参比制剂具有生物等效性.     

液相色谱串联质谱法测定人血清中硝苯地平的浓度

目的建立液相色谱串联质谱法测定人血清中硝苯地平浓度。方法血清样品用甲醇沉淀蛋白,内标为尼群地平,色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×150mm,5μm),柱温为30℃,流动相为甲醇-水(90:10,V/V),流速为0.5ml·min-1。质谱采用ESI离子源负离子检测,定量分析的离子对为:m/z345.1/122.0(硝苯地平),m/z359.2/122.0(内标尼群地平)。结果硝苯地平在0.5μg·L-1～50μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9987),批内批间RSD均小于15%,提取回收率为64.06%～77.10%。结论该方法快速,灵敏,准确,可用于硝苯地平的临床药动学研究。     

Advanced glycation end-products/peptides: a preliminary investigation by LC and LC/MS

An investigation on AGE-peptides, originating by proteolysis of in vitro glycated proteins, was carried out by LC methods with different detection applied to the mixture produced by proteinase K digestion of in vitro glycated human serum albumin (HSA). Classical approaches, like spectroscopic (UV, fluorescence) and mass spectrometric methods (MALDI, LC/ESI/MS), show that the digestion mixture is highly complex. However, there are clearcut differences between the digestion mixtures of glycated and unglycated HSA, in the former case allowing identification of possible glycated peptides belonging to the AGE-peptide class. MS/ MS experiments on selected species seem to be promising as regards structural information.     

代谢组学分析技术平台和数据处理的新进展

分析技术和生物计量学促进了代谢组学的飞速发展。代谢组学快速、灵敏、可定量、非侵入性以及系统性的特点,使其在新药研发、药物毒性筛选、疾病诊断等领域显示出广阔的前景。本文综述了代谢组学研究中的某些关键问题:样品处理方法,分析技术和数据处理的方法和原则,代谢组动态变化、生物标记物的鉴定和代谢途径的检索近年来的进展。评价了各种分析手段的优缺点,并展望代谢组学发展前景。     

Strategy for identification of leachables in packaged pharmaceutical liquid formulations

Drug stability is one of the key properties to be monitored in pharmaceutical drug development. Drug degradation products, impurities and/or leachables from the drug product and packages may have significant impacts on drug efficacy, safety profile and storage conditions. In the registration stability samples of an ophthalmic pharmaceutical drug product, an unknown compound was found at a level of 0.19% by HPLC analysis. Subsequent liquid chromatography/mass spectrometry (LC/MS) analysis with electrospray ionization (ESI) indicated that the unknown was not related to the drug substance and was most likely a leachable. Identification of this unknown leachable was needed to evaluate the impact on drug safety. Through systematic extraction of various components or component combination of the packaging materials, and subsequently LC/MS analysis, the unknown was found to be a leachable coming from the varnish applied to the label. In general, using LC/MS alone is not sufficient to elucidate the structure of a complete unknown. Gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) was then conducted with a chemical ionization (CI) source to determine the retention time and mass of the compound of interest. Both CI and ESI sources generated the same protonated molecular ion [M+H] and similar fragmentation ions, which provides a good correlation of the unknown eluted in the liquid chromatogram and in the gas chromatogram. GC/MS with electron impact (EI) was then conducted to obtain the EI mass spectrum of this unknown. It was identified as monomethyl derivative of mephenesin through the NIST library search. The identification strategy utilized electrospray LC/MS and GC/MS with chemical and electron ionization sources which provided complimentary information for structure elucidation of this unknown compound. This combination approach in conjunction with systematic extraction was necessary for the determination of the source of this unknown in the pharmaceutical drug stability studies.     

PMEA-Na在beagle犬血浆中的液相色谱/质谱/质谱联用法测定及其药代动力学

目的建立LC/MS/MS法测定犬血浆中PMEA-Na浓度,进行其药代动力学研究.方法血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,采用多反应监测法测定其血药浓度.色谱柱为Xterra MS柱,流动相为甲醇水甲酸(25750.5),流速为 0.25 ml·min-1.Beagle犬分3个剂量组经静脉给药,给药剂量分别为 1.0、3.0 和 6.0 mg·kg-1.药代动力学参数通过DAS软件计算获得.结果PMEA-Na线性范围0.02～20 mg·L-1 (r=0.999);最低检测浓度为 20 μg·L-1,方法回收率为 97.1%～107.3%,日内日间变异分别小于 6.5%、10.8%.beagle 犬在 1.0, 3.0 与 6.0 mg·kg-1剂量下单次iv PMEA-Na后,测得其AUC分别为 2.3±0.5, 8.2±1.3 and 18.5±1.3 mg·L-1·h; t1/2 为 3.9±1.8, 8.4±1.5 and 8.9±0.6 h; CL为 0.44±0.09, 0.35±0.05 and 0.31±0.03 ml·h-1·kg-1.结论本方法专属性强,准确性好,可用于PMEA-Na血药浓度测定和药代动力学研究.