粒细胞集落刺激因子作用研究进展

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)主要用于各种原因引起的粒细胞减少症。近年的研究发现,G-CSF具有免疫调节、血管保护、促进血管发生、抗动脉粥样硬化等作用。本文主要综述了G-CSF在糖尿病及并发症领域应用研究进展,其作用机制涉及调节中性粒细胞的功能、内皮祖细胞的动员、影响树突状细胞和T细胞的功能等。     

粒细胞集落刺激因子在乳腺癌新辅助化疗中的疗效分析

目的：探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）在乳腺癌新辅助化疗（NAC）中的作用。方法：将接受NAC且骨髓抑制风险评估大于20％的56例Ⅱ、Ⅲ期原发性乳腺癌患者随机分为预防性治疗（n=26）组和常规治疗（n=30）组。预防性治疗组在化疗结束24h后使用G-CSF进行骨髓支持治疗;常规治疗组在化疗后第1、3、5、7d复查血常规,并对发生Ⅲ、Ⅳ级骨髓抑制的患者进行G-CSF升白细胞治疗。观察并比较两组在NAC后临床完全缓解（cCR）、部分缓解（PR）、疾病稳定（sD）、疾病进展（PD）、骨髓抑制程度以及不良反应等方面的差异。结果：两组在年龄、月经状况、病理类型及临床分期方面比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。预防性治疗组在骨髓抑制及其他不良反应方面显著少于常规治疗组（P〈0．05）。常规治疗组在临床cCR、PR、sD和PD方面优于预防性治疗组（P〈0．05）。结论：预防性骨髓支持治疗可明显减少NAC的骨髓毒性及其他不良反应,增加患者化疗耐受性,提高其生活质量。但是,与常规治疗相比较,预防性骨髓支持治疗可能降低NAC的临床疗效,其具体机制需进一步研究。     

粒细胞集落刺激因子在脑出血大鼠中的抗凋亡作用

目的:研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对脑出血大鼠神经保护作用的机制。方法:胶原酶定位注射构建脑出血大鼠模型,然后给予G-CSF腹腔注射连续5d,用Hoechst33258荧光染色的方法检测G-CSF的抗凋亡作用。结果:术后给予G-CSF的大鼠出血灶所在大脑半球神经细胞凋亡明显低于未给药组。结论:G-CSF在脑出血大鼠脑内具有抗凋亡作用,该作用可能参与其对脑出血大鼠的神经保护作用。     

重组人粒细胞集落刺激因子应用在乳腺癌化疗后骨髓抑制的预防效果分析

目的:研究分析重组人粒细胞集落刺激因子应用在乳腺癌化疗后骨髓抑制的预防效果。方法:选取320例拟行同一化疗方案的乳腺癌患者作为观察对象,依照随机数字表法分为观察组、对照组,每组患者各160例。观察组化疗1个疗程后给予重组人粒细胞集落刺激因子,对照组在骨髓抑制出现后给予重组人粒细胞集落刺激因子。观察比较两组的骨髓抑制、生活质量情况。结果:①化疗后,两组白细胞、中性粒细胞均下降,但观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);②化疗后,两组生活质量评分均降低,但观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重组人粒细胞集落刺激因子应用在乳腺癌化疗后骨髓抑制的预防效果显著,早期应用,可提高白细胞、中性粒细胞数目,提高生活质量,值得临床应用。     

重组人粒细胞集落刺激因子对乳腺癌化疗后骨髓抑制的疗效分析

目的 该文旨在研究探讨应用重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony-stimulating fac-tor,rhG-CSF)对乳腺癌患者化疗后骨髓抑制的治疗效果.方法 采用回顾性研究,方便选出2013年5月—2016年5月在某医院使用多西他赛(docetaxel)75 mg/m2、环磷酰胺(cyclophosphamide)500 mg/m2化疗方案的100例浸润性乳腺癌患者,在化疗第1个周期结束后1~2 d内皮下注射rhG-CSF为治疗组,化疗后1~2 d内未皮下注射rhG-CSF为对照组,评估两组化疗后骨髓抑制的程度.结果 在应用rhG-CSF的50例患者中,白细胞减少症的发生率为24%,中性粒细胞减少症发生率为20%;在对照组50例患者中,二者发生率分别为80%和70%,差异有统计学意义(P<0.01).治疗组与对照组化疗前白细胞计数差异无统计学意义(P=0.648>0.05),两组化疗前中性粒细胞计数差异无统计学意义(P=0.104>0.05);化疗后两组白细胞和中性粒细胞计数差异有统计学意义(P<0.01).结论 浸润性乳腺癌患者在第一周期化疗后1~2 d内给予rhG-CSF,能减少白细胞降低比率,使骨髓抑制得以减轻,确保化疗顺利进行.     

粒细胞集落刺激因子预防肺癌化疗后骨髓抑制

[目的]探讨中晚期肺癌化疗后骨髓抑制的预防方法.[方法]符合入组标准的中晚期非小细胞肺癌病例随机分为预防用药组和治疗用药组,预防用药组于化疗后第5、6天预防性使用粒细胞集落刺激因子(G-CSFs);治疗用药组于化疗后白细胞＜3.5×109 /L或中性粒细胞＜2.0×109 /L时连续每天使用G-CSFs直至白细胞≥3.5×109/L且中性粒细胞≥2.0×109 /L时停用.两组均观察白细胞、中性粒细胞减少症发生率,白细胞、中性粒细胞减少平均持续时间和下降值及平均医疗费用.所有数据应用SPSS 10.0统计软件包计算.数值变量用成组设计的t或t检验进行统计分析,分类变量用x2检验进行统计分析.[结果]可评价者65例,其中预防用药组33例,治疗用药组32例.在中性粒细胞、白细胞重度血液学毒性上,预防用药组均较治疗用药组明显减轻,差异有显著性;在中性粒细胞、白细胞的下降值及减少症持续时间方面,预防用药组也均较对照组明显减少,差异有显著性.平均治疗费用方面预防用药组较治疗用药组明显减少,差异有显著性.[结论]中晚期肺癌化疗后预防性使用粒细胞集落刺激因子,可减少重度骨髓抑制的发生、降低骨髓抑制的程度、持续时间和相关的医疗费用,值得推荐使用.     

粒细胞集落刺激因子及其McAb的研究

利用B细胞杂交瘤技术,用rhG-CSF免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,成功地建立了3株能持续分泌特异抗rhG-CSF McAb的杂交瘤细胞。取其中2D_4-B_4杂交瘤细胞进行染色体数目测定,并将2D_4-B_4瘤细胞注入小鼠腹腔,获得抗体阳性腹水,测定提纯抗体IgG亚型、特异性、稳定性和亲和力,证实该McAb可以和hG-CSF及小鼠G-CSF特异结合。为进一步研究hG-CSF和人工合成G-CSF打下良好的基础。     

粒细胞集落刺激因子对SCID小鼠急性脑梗死的治疗作用

目的探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对严重免疫缺陷（SCID）小鼠急性脑梗死的治疗作用。方法SCID小鼠大脑中动脉闭塞后,立即皮下注射G-CSF,连续3d,对照组注射同样剂量磷酸缓冲液（PBS）,3d后观察脑梗死体积变化、梗死边缘血管再生情况、细胞凋亡和炎症反应情况。结果G-CSF对SCID小鼠急性脑梗死后梗死体积无影响,能促进脑梗死边缘血管再生和抑制细胞凋亡,但梗死边缘CD11b和F4/80阳性细胞数均较对照组明显增加,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论SCID小鼠急性脑梗死后,立即注射G-CSF对脑组织有保护作用,但同时也加重急性梗死后的炎症反应。     

粒细胞集落刺激因子作用后骨髓象分析

目的总结粒细胞集落刺激因子（G—CSF）作用后骨髓象变化特征，以减少白血病误诊的发生。方法对42例多种原因导致的粒细胞缺乏症（粒缺）患者G-CSF使用前及使用5～7d进行骨髓象分析，观察其形态变化特征，并对粒系相对值进行统计比较。结果使用G—CSF5～7d后骨髓原始、早幼粒细胞比例明显增高，和使用前比较差异有显著统计学意义（P〈0．01），且形态和相应阶段正常形态变化较大，有其独特改变。结论G-CSF使用后原始、早幼粒细胞比例明显增高，部份病例甚至超过20％，易误诊为白血病；骨髓检验人员要熟悉并掌握G-CSF使用后骨髓象特征及变化规律，以减少白血病误诊的发生。     

粒细胞集落刺激因子治疗心肌梗死研究进展

虽然近年来对心肌梗死的治疗有了很大进展，但针对心肌梗死后的不可逆改变：心肌细胞、小血管的损失以及心室重塑，目前尚无满意的对策。因此，探寻修复心肌梗死后受损心脏的方法，成为目前众多学者的研究热点。本文就近年来粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony stimulating factor，G-CSF）治疗心肌梗死的研究进展作一综述。     

粒细胞集落刺激因子对骨髓和外周血中骨髓来源的抑制细胞影响的初步研究

摘要：目的探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）用于造血干细胞动员对健康供者骨髓和外周血中骨髓来源的抑制细胞
（MDSC）的影响和MDSC与移植物抗宿主疾病（GVHD）的关系。方法对12例健康造血干细胞供者,在G-CSF动员前和
动员后第5天分别获取骨髓、外周血及外周血干细胞采集物,用流式细胞术检测其中MDSC的含量变化,统计分析MDSC
与GVHD的关系。结果在正常生理状态下,健康供者外周血、骨髓中均能检测到MDSC,MDSC在外周血中占单个核细
胞比例为（1.35±0.35）%,骨髓中为（2.44±1.11）%,骨髓中MDSC比外周血中高（P=0.015）;G-CSF动员5 d后MDSC在外周
血中占单个核细胞比例为（4.01±1.82）%,骨髓中为（4.38±2.19）%,动员后骨髓与外周血中MDSC比例相比无明显变化
（P=0.083）。动员后外周血中MDSC含量明显高于动员前（P=0.047）,而动员前后骨髓MDSC细胞比例变化无统计学意
义（P=0.761）。采集物中MDSC细胞数量与GVHD发生率呈明显负相关关系（P=0.048）。结论健康人PB与BM中均能
检测到MDSC,且骨髓中比外周血中要高;G-CSF能动员骨髓中MDSC到达外周血,使外周血中MDSC增高;G-CSF动员
的外周血干细胞采集物中MDSC增加与造血干细胞移植后低GVHD发生率有关。     

rhG-CSF cDNA高表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５２ｎｇ／ｍｌ，７２ｈ为２３０ｎｇ／ｍｌ，显示ｒｈＧ－ＣＳＦ获得了暂时性高表达。结论：ｐＥＤ－ＧＣＳＦ是一个能在哺乳动物细胞中高效表达ｒｈＧ－ＣＳＦ的真核表达质粒。     

癌症化疗患者应用重组人粒细胞集落刺激因子持续时长的相关因素研究

目的 :探讨癌症化疗患者应用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)持续时长的相关因素.方法 :回顾性分析在本院接受化疗的癌症患者且应用rhG-CSF治疗的患者118例,根据应用重组人粒细胞集落刺激因子持续平均时长,将患者分为长持续时间组和短持续时间组,比较两组患者的性别比例、年龄分布、BMI指数,肿瘤类型,肿瘤分级,中性粒细胞含量,血红蛋白,血小板计数,血肌酐,卡氏评分,化疗方案确定癌症化疗患者应用重组人粒细胞集落刺激因子持续时长的相关影响因素,再通过多因素分析确定癌症化疗患者应用重组人粒细胞集落刺激因子持续时长的独立影响因素.结果 :通过单因素分析确定年龄分布、BMI指数,肿瘤分级,中性粒细胞含量为癌症化疗患者应用重组人粒细胞集落刺激因子持续时长的相关影响因素;通过多因素分析确定年龄分布、BMI指数,肿瘤分级,中性粒细胞含量为癌症化疗患者应用重组人粒细胞集落刺激因子持续时长的独立影响因素.结论 :对于癌症化疗患者应用rhG-CSF药物需要足够的持续时长才能起作用,对于年龄较大,BMI指数较低,肿瘤分级较晚以及中性粒细胞含量较低的患者需要应用rhG-CSF药物更长的时间,要引起临床足够的重视.     

未成熟网织红细胞指数对肿瘤化疗粒细胞刺激因子预处理的临床意义

目的探讨未成熟网织红细胞指数（IRF）对肿瘤化疗白细胞减少的预测作用,并观察肿瘤患者行粒细胞刺激因子化疗前预处理的疗效。方法采用回顾性研究和前瞻性研究两种方法,分析白细胞减少的恶性肿瘤化疗患者未成熟网织红细胞指数（IRF）和白细胞减少的相关性。在前瞻性研究中,100例肿瘤化疗患者随机分成治疗组50例（重组粒细胞集落刺激因子预处理）和对照组50例（未行重组粒细胞集落刺激因子预处理）,在化疗结束后比较两组白细胞减少的发生率。结果未成熟网织红细胞指数（IRF）和白细胞减少呈正相关,高荧光强度网织红细胞比率（HFR%）呈负相关,具有统计学意义（P〈0.05）。未成熟网织红细胞指数（IRF）越低,骨髓抑制的发生率越高。恶性肿瘤患者进行粒细胞刺激因子化疗前干预可显著降低白细胞减少发生率（P〈0.001）。结论未成熟网织红细胞指数（IRF）可作为评价肿瘤化疗前骨髓造血功能的早期指标,对指导粒细胞集落刺激因子等药物的临床应用有一定的参考价值。     

G-CSF对血管性痴呆大鼠海马Ach含量及CHAT活性的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)干预对血管性痴呆(VD)大鼠的作用及机制。方法 54只SD大鼠随机分为3组:假手术组、VD模型和G-CCF组各18只,后2组采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立大鼠VD模型,G-CSF组大鼠每日皮下注射G-CSF 50μg/kg,术后7、14、28 d用Morris水迷宫进行定向航行观察大鼠逃避潜伏期,评价大鼠空间学习记忆能力,Western Blot检测大鼠海马区脑组织Ach、CHAT蛋白表达的变化。结果 (1)逃避潜伏期变化:术后7、14、28 d,与假手术组比较,VD模型组和G-CSF组平均逃避潜伏期均延长(P<0.01);与VD模型组比较,G-CSF组平均逃避潜伏期缩短(P<0.01)。(2)Ach、CHAT蛋白表达:术后7、14、28 d,与假手术组比较,VD模型组Ach、CHAT蛋白表达均明显减少(P<0.01);与VD模型组比较,G-CSF组Ach、CHAT蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论 G-CSF促进血管性痴呆大鼠海马区Ach、CHAT蛋白表达,改善大鼠学习记忆功能。     

内皮祖细胞对心梗后心衰患者心功能改变的影响

目的研究应用粒细胞集落刺激因子动员内皮祖细胞治疗心肌梗死后心力衰竭患者心功能的改变。方法选取38例心肌梗死后心衰患者,随机分成治疗组和对照组,治疗组在常规治疗(包括药物和介入治疗)基础上给予内皮祖细胞动员剂G-CSF(600μg/d)静脉注射,连续注射7 d。检测两组治疗前、治疗后第7天和第4个月BNP值及外周血内皮祖细胞数量,行心脏超声检测LVSD、EDV、LVEF。结果治疗组的内皮祖细胞数量较对照组增加明显,尤其第7天增加有显著差异(P<0.01)。两组患者血浆BNP值较治疗前均显著下降恢复正常值(P<0.01);两组心功能指标治疗后均有所好转(P<0.05),治疗组较对照组改善明显(P<0.05),尤以治疗组LVEF值第4个月增加明显,差异有显著性(P<0.01)。结论内皮祖细胞治疗心肌梗死后心衰患者,可有效减轻心室重构,改善心功能。     

重组人粒细胞集落刺激因子对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠凋亡诱导因子表达的影响

目的:研究分析重组人粒细胞集落刺激因子对新生SD大鼠凋亡诱导因子表达的影响。方法:随机选取7日龄SD大鼠36只,随机分为假手术组（A组）、脑缺血再灌注组（B组）和药物治疗组（C组）,每组各12只。采用Longa线栓法制作大鼠大脑动脉闭塞再灌注模型,C组大鼠在脑缺血2 h后及24 h时给予药物灌注,其余2组给予大鼠注射等量的0.9%氯化钠注射液。实验结束后,采用Longa 5分制标准评分法在24 h时对大鼠的神经功能进行评分,采用免疫组织化学法对大鼠的组织磷酸化c-jun氨基末端激酶、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶进行检测,同时采用原位末端转移酶标记对神经细胞凋亡、TTC染色测脑梗死体积进行相关检测。对凋亡相关基因的表达及凋亡水平进行评价。结果:A组仅有一小部分凋亡细胞,B、C 2组在灌注24 h后可以发现大量的凋亡细胞,细胞核均呈棕褐色,主要分布在缺血脑组织中周围;C组脑梗死程度较B组减轻（P<0.01）。结论:重组人粒细胞集落刺激因子可以起到保护新生SD大鼠神经细胞的作用,避免发生缺血缺氧性脑损伤,这种糖蛋白与细胞凋亡相关基因的表达有关。     

Traf6通过降低TAK1活性抑制乳腺癌MCF 7细胞增殖能力

【摘要】 目的 探讨肿瘤坏死因子相关受体因子6（Traf6）对乳腺癌MCF 7细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法 采用pGPU6/Neo载体构建稳定敲除Traf6的MCF 7细胞株,应用实时定量PCR和免疫印迹验证Traf6基因和蛋白的均低表达,采用细胞计数试剂盒 8（CCK8）法检测MCF 7细胞增殖情况,流式细胞仪检测MCF 7细胞周期的变化,蛋白印记法（Western Blot）检测MCF 7细胞中周期蛋白A（Cyclin A）、周期蛋白B（Cyclin B）、周期蛋白依赖激酶（CDK/p34）表达量和转录生长因子β 活化激酶1（TAK1）磷酸化水平。结果 使用pGPU6/Neo载体能够稳定的敲除MCF 7细胞中Traf6的表达,敲除Traf6能够抑制MCF 7细胞增殖并诱导其凋亡,将细胞阻滞在G1期,同时抑制细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B及CDK/p34的表达及TAK1磷酸化。结论 Traf6表达的降低能抑制TAK1信号通路活性,进而抑制乳腺癌MCF 7细胞增殖能力。     

Expression of transcription factor Oct4 in bladder cancer cell line T24 and its effects on the biological characteristics of the cells

The expression of octamer binding factor 4 （Oct4） gene in bladder cancer cell line T24 and its effects on the biological characteristics of the cells were investigated. RT-PCR and Western blot were employed to detect the expression of Oct4 in T24 cells. The changes of biological characteristics in T24 cells were analyzed before and after gene-silencing by Boyden chamber and MTT. The results showed that the expression of Oct4 gene was detectable in T24 cells by RT-PCR and Western blot. The expression of Oct4 gene and protein was down-regulated by siRNA, and average number of transwell cells in interference group, negative control group and blank control group was 101.40±54.56, 104.20± 10.03 and 111.00±11.90, respectively. There was significant difference in the proliferation abilit,） of the cells from 48 h, 72 h to 96 h after the interference by siRNA between interference group and negative group or blank control group （P〈0.05）. It was suggested that Oct4 gene was related with proliferation ability of T24 cells, but not with invasive capability.     

小鼠乳腺癌细胞4T1对不同品系小鼠乳腺癌模型的影响

目的:将小鼠乳腺癌细胞4T1接种到两种不同品系的小鼠脂肪垫,观察植瘤小鼠的生物学状态、成瘤大小、转移情况以及生存周期等指标,为建立不同品系小鼠的乳腺癌模型提供参考。方法:将小鼠乳腺癌细胞4T1胰酶消化去除上清,用PBS洗两遍,最后用生理盐水调整细胞数量为1×106个,分别接种到裸鼠和BABL/c小鼠的脂肪垫。比较各组老鼠的成瘤率、成瘤时间以及生存期等实验指标。结果:原位注射1×106个4T1细胞时两组均能成瘤,但是裸鼠的成瘤率高于BABL/c小鼠;裸鼠的成瘤大小明显大于BABL/c小鼠;裸鼠的生存期明显短于BABL/c小鼠;裸鼠出现肺转移结节明显多于BABL/c小鼠。结论:不同免疫能力的小鼠对接种相同数量的细胞数可能会产生不同的实验结果,在选择构建小鼠乳腺癌模型的时候一定要综合考虑所选用品系的小鼠是否会对实验结果带来影响。