益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、VEGF/KDR表达的影响

目的:观察益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、VEGF/KDR表达的影响。方法:建立人肝癌移植瘤模型,分为7组,分别以益气化瘀解毒方、黄芪、莪术、重楼、壁虎、顺铂药物干预21 d后,取瘤组织行免疫组化检测。结果:①对MVD的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较有统计学意义(P<0.05);除黄芪、莪术外的其它组与空白组比较有统计学意义(P<0.05)。②对HIF1a的影响:全方组与除黄芪外的其它组比较有统计学意义(P<0.05);各组与空白组比较有统计学意义(P<0.05)。③对VEGF表达的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较均有统计学意义(P<0.05);莪术组与空白组比较无统计学意义(P>0.05)。④对KDR表达的影响:全方组与其它各组比较均有统计学意义(P<0.05);黄芪组与空白组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:益气化瘀解毒方能明显抑制人肝癌裸鼠移植瘤MVD、HIF1a、VEGF和KDR的表达而发挥抗血管生成作用;各单味药对其作用各有侧重,但作为整方的有机组成从不同环节发挥了协同作用。     

益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤血管拟态相关因子的影响

目的探讨益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌移植瘤血管拟态相关因子表达的影响。方法瘤细胞接种建立人肝癌移植瘤模型,随机分为益气化瘀解毒方组(全方组)、黄芪组、莪术组、重楼组、壁虎组、顺铂组及模型组,除模型组外,各给药组予相应药物干预。21d后,采用免疫组化法检测瘤组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、E-钙黏附蛋白(E-cad)表达,免疫荧光法观察血管生成拟态结构,实时荧光定量PCR检测瘤组织Twist1、Bcl-2表达。结果与模型组比较,给药后各给药组瘤体积减小(P0.05),全方组优于黄芪组、重楼组、壁虎组(P0.05);各组血管生成拟态结构荧光表达稀少,模型组、顺铂组最为明显;除黄芪组外,各给药组HIF-1α及MMP-9、MMP-2表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),全方组最为明显;全方组、黄芪组E-cad表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);全方组、重楼组、壁虎组与模型组比较Bcl-2表达明显降低(P0.05),其中全方组Bcl-2表达明显优于其他给药组(P0.05);全方组、莪术组、重楼组、顺铂组Twist1表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气化瘀解毒方及其单味药通过下调HIF-1α、Twist1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9及上调E-cad表达,从而抑制血管生成拟态形成。     

胃移停颗粒对S180小鼠抑瘤作用及其对P53和PCNA表达的影响

目的探讨胃移停颗粒的抑瘤作用和可能机制。方法观察胃移停颗粒及其拆方对S180肉瘤小鼠的抑制作用,并用免疫组化的方法研究胃移停颗粒及其拆方在S180肉瘤生长过程中对P53、PCAN表达的影响。结果胃移停颗粒抑瘤作用明确,且能显著降低P53、PCAN阳性细胞数。胃移停颗粒与其拆方各组比较,除益气活血解毒组无显著性差异(P>0.05),其余两组差异有显著性意义(P<0.05～0.01)。结论以益气活血解毒立法处方抑瘤作用确切,较益气组和益气解毒组作用明显;胃移停颗粒能抑制P53和PCNA的表达,对肿瘤生长过程中肿瘤细胞的基因水平有影响作用。     

健脾消癌方及拆方对结肠癌原位种植瘤裸鼠模型钙黏蛋白、波形蛋白表达的影响

目的:探讨健脾消癌方及拆方对结肠癌原位种植瘤裸鼠模型上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关因子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达的影响。方法:分为健脾益气组、化瘀解毒组、全方组及5-氟尿嘧啶(5-Fu)组干预结肠癌原位种植瘤裸鼠模型,并设立模型组、正常组作为对照,通过免疫组织化学方法检测各组癌及癌旁组织中E-cadherin及Vimentin的表达水平。结果:(1)在E-cadherin的表达方面,各组均较模型组升高,全方组与5-Fu组最高(P0.01);全方组明显高于健脾益气组、化瘀解毒组(P0.05、0.01),全方组与5-Fu组相比无显著差异(P0.05)。(2)在Vimentin表达水平方面,各组均较模型组降低,其中全方组和5-Fu组最低(P0.01);全方组比健脾益气组、化瘀解毒组Vimentin下降有显著性差异(P0.05);全方组与5-Fu组相比无显著差异(P0.05)。结论:(1)健脾消癌方全方较拆方组分有较强的促进E-cadherin表达、降低Vimentin表达的作用,两组分发挥了协同作用,使全方呈现出最强效应。(2)健脾消癌方可能通过促进肿瘤细胞间的同质黏附从而阻断上皮间质转化而抗结肠癌转移侵袭。     

健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及Caspase-3,Bcl-xL,Bax蛋白表达的影响

目的:观察健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-x L(B-cell lymphoma/leukemia-x L,Bcl-x L)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响。方法:建立裸鼠肠癌原位瘤模型,分为模型组,健脾益气组(15 g·kg-1),化瘀解毒组(15 g·kg-1),健脾消癌方组(全方组,15 g·kg-1),5-氟尿嘧啶组(5-Fu,20 mg·kg-1),共5组。分别予以相应药物干预4周,观察裸鼠体重、瘤体抑制率、转移率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Caspase-3,Bcl-x L,Bax蛋白表达。结果:健脾益气组、全方组体重下降低于模型组(P0.05),化瘀解毒组体重下降高于模型组(P0.05);健脾益气组对瘤体的抑制与模型组比较无统计学差异,与空白组比较,化瘀解毒组、全方组对瘤体均有较好抑制作用(P0.05);各组均出现不同程度地转移,其中模型组、健脾益气组总体转移率达90%,化瘀解毒组、全方组转移率分别为70%,60%,低于模型组(P0.05);与模型组比较,化瘀解毒组及全方组能够上调Bax蛋白表达,下调Caspase-3,Bcl-x L蛋白表达(P0.01)。结论:健脾消癌方中健脾益气组优势在于稳定体重,化瘀解毒组优势在于抑制肿瘤,抑制转移;全方组能够稳定体质量,抑制肿瘤,抑制转移,全方配伍疗效最优,其抗肿瘤机制可能是上调凋亡相关蛋白Bax及下调Caspase-3,Bcl-x L,诱导肿瘤细胞凋亡。     

益气化瘀解毒方对HBV相关性肝癌中乙肝病毒x蛋白的影响

目的 乙型肝炎病毒(HBV)是原发性肝癌发生发展的重要诱因,乙肝病毒x蛋白(HBx)是HBV引起疾病过程中的关键致病基因.探讨益气化瘀解毒方对HBV相关性肝癌中HBx表达的影响.方法 实验分为空白对照组、益气化瘀解毒方组、重楼皂苷I组、二甲双胍组、益气化瘀解毒方加重楼皂苷I组、益气化瘀解毒方加二甲双胍组,以HBV质粒转染HepG2的受体细胞(HepG 2.2.15)作为观察对象,免疫印迹法(Western blot,WB)、实时荧光定量PCR法检测不同药物组对HepG 2.2.15细胞中HBx基因蛋白和mRNA表达水平的影响;重楼皂苷I作为益气化瘀解毒方中的一部分,并通过分子对接验证重楼皂苷I对肝癌的影响.结果 益气化瘀解毒方组、重楼皂苷1组、二甲双胍组、益气化瘀解毒方加重楼皂苷I组、益气化瘀解毒方加二甲双胍组组均能不同程度下调HBx、mRNA表达(P<0.01);分子对接结果表明重楼皂苷I与HBx有较好的亲和性.结论 益气化瘀解毒方可通过下调关键致癌基因HBx的方式来抑制肝癌的发生,从而对肝癌起到一定的治疗作用,重楼皂苷I可能为该方的主要活性成分.     

健脾疏肝活血化瘀法对人肝癌细胞裸鼠复种移植瘤的抑制作用观察

目的 :探讨健脾疏肝活血化瘀药物对人肝癌细胞复种移植瘤在裸鼠体内的抑瘤作用。方法 :建立肝癌(HepG2)小鼠模型 ,观察不同组方的健脾疏肝活血化瘀药物对其肿瘤的影响。结果 :Ⅳ号方 (黄芪、柴胡、莪术等 )与Ⅰ号方 (黄芪 )、Ⅱ号方 (柴胡 )、Ⅲ号方 (莪术 )相比,其肿瘤体积和体重以及抑瘤率的治疗后、治疗前后差值 ,均有显著性差异 ,P均<0.05。Ⅴ号方 (蒸馏水 )与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号方治疗后、治疗前后差值比较 ,亦有显著性差异。结论 :健脾疏肝活血化瘀药物有明显的抑瘤作用 ,且健脾疏肝活血化瘀法明显优于益气健脾法、疏肝理气法和活血化瘀法 ;从而 ,从治疗角度进一步反证了肝郁脾虚、瘀血内阻是原发性肝癌的主要病机     

解毒化瘀健脾方对慢性萎缩性胃炎伴异型增生大鼠PTEN、E-cad表达的影响

目的观察解毒化瘀健脾方对慢性萎缩性胃炎伴异型增生模型大鼠的抑癌基因磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)和上皮细胞钙黏蛋白(E-cad)基因的影响。方法运用综合造模方法 N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG),建立慢性萎缩性胃炎伴异型增生病变大鼠模型,随机分为模型组、西药组(维甲酸)、中药组(解毒化瘀健脾方),进行相应药物干预,另选取正常大鼠作为正常对照组。应用Real-time PCR、Western blotting技术检测大鼠PTEN、E-cad mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与正常对照组比较,模型组PTEN、E-cad mRNA及蛋白表达量显著降低(P0.01);中药组E-cad mRNA及蛋白表达量差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,中药组和西药组PTEN、E-cad mRNA及蛋白表达量显著增加(P0.05)。与西药组比较,中药组PTEN、E-cad mRNA表达量明显升高(P0.01);中药组PTEN蛋白表达量降低,E-cad蛋白表达升高(P0.01)。结论解毒化瘀健脾方可诱导慢性萎缩性胃炎伴异型增生胃黏膜细胞PTEN、E-cad基因的蛋白表达量上升,从而实现对慢性萎缩性胃炎伴异型增生的治疗,逆转胃癌前病变。     

黄芪、莪术单药及配伍通过影响上皮间质转化抑制Lewis荷瘤小鼠肺转移的研究

目的通过观察黄芪、莪术及其配伍应用对Lewis荷瘤小鼠肺转移灶数目及肿瘤上皮间质转化的影响,研究其基于上皮间质转化机制抑制肿瘤转移的作用,并分析黄芪、莪术配伍应用的意义。方法将50只C57 Lewis荷瘤小鼠模型随机分为模型组、顺铂组、黄芪单药组、莪术单药组及黄芪-莪术配伍组,接种后次日开始连续15 d,分别给予相应药物干预,处死后解剖取出肺脏,解剖显微镜下观察双肺表面超过2 mm结节数目;剥离腋下种植瘤体,EnVision法检测肿瘤组织中E-cad、MMP-2、MMP-9表达。结果顺铂组和配伍组肺转移结节数量少于模型组(均P0.05),单药组肺转移灶数量虽均少于模型组但差异无统计学意义(P0.05);各中药组均不及顺铂组(P0.05),配伍组少于黄芪、莪术单药组,但差异无统计学意义(P0.05)。E-cad表达,与模型组相比,顺铂组、配伍组升高(均P0.05),单药组与模型组比差异均无统计学意义(P0.05);各中药组低于顺铂组(均P0.05),配伍组高于莪术组(P0.05),与黄芪组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-2表达,各组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-9表达,顺铂组、配伍组、莪术单药组低于模型组(均P0.05),黄芪组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);各中药组高于顺铂组(均P0.05),配伍组低于黄芪组(P0.05),与莪术单药组接近,差异无统计学意义(P0.05)。结论黄芪-莪术配伍抑制肿瘤转移的效果优于单用黄芪、莪术,其作用机制为提高E-cad蛋白表达、降低MMP-9表达;黄芪、莪术配伍使用在提高E-cad表达上优于单用黄芪、莪术,在降低MMP-9表达上与莪术相近、优于单用黄芪。     

益气化瘀解毒方加减联合索拉非尼治疗原发性肝癌疗效研究

目的:比较索拉非尼与益气化瘀解毒方联合索拉非尼治疗原发性肝癌的临床疗效。方法:将56例原发性肝癌患者随机分为对照组和联合组,对照组予以索拉非尼口服,联合组在口服索拉非尼的基础上予以益气化瘀解毒方治疗。结果:两组患者基线资料比较无统计学意义(P>0.05)。两组患者半年、1年、两年生存率分别是:对照组与联合组,78.6%与96.4%,60.7%与85.7%,14.3%与39.3%,差异具有统计学意义(P<0.05)。患者两组PFS比较,对照组(4.55±0.41)个月,联合组(6.99±0.60)个月,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者生活质量评分,治疗前对照组与联合组无统计学意义,治疗后对照组高于联合组,且差异具有统计学意义。两组患者不良反应率比较,对照组与联合组无统计学意义。结论:尽管益气化瘀解毒方加减未能减轻索拉非尼毒副作用,但益气化瘀解毒方联合索拉非尼能延长患者半年、一年及两年生存率,同时能延长患者疾病无进展生存时间,改善患者生活质量。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

阴阳升降理论探析与启迪

通过梳理《内经》及相关医家关于阴阳升降的论述,探讨阴阳升降的内容及阴阳升降的不同内涵。从阐述人体生理变化和脏腑特点、阐述疾病的病机、解释治则治法和方药配伍应用等方面分析阴阳升降对临床的启迪作用。     

非酒精性脂肪肝诊治的问题及对策

目的探讨非酒精性脂肪肝临床治疗中有效对策。方法结合近代非酒精性脂肪肝治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治非酒精性脂肪肝。结果中西医结合防治此病有效。结论中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》虚劳病精气神调治原则与方法

从中医精气神辨识角度认识虚劳病,总结虚劳病病因病机。通过观察面容、形态、神色、五官、舌象、脉象等辨识精气神状态,确立虚劳病精气神调治原则。在精气神辨识理论指导下,对《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》相关条文、方药进行解析,总结虚劳病相关治则治法。根据精气神调养原则,为虚劳病临床应用提供指导。     

从“方药离合”看中医学的方药共荣

通过对历代方剂与本草的应用演变和发展过程的论述,揭示了中医方药共荣关系,并以黄柏、升麻等药为例,强调方药配伍运用是方药共荣的核心环节.随后,结合中医发展的现实环境,分析了坚持方药共荣的正确方向,对于防止重药轻方的错误倾向,提高中医临床疗效,启迪现代研究思路,均具有重要的学术价值和现实意义.     

五脏补血法理论及临床应用探讨

血液的生成与五脏关系密切,据此确立五脏补血法:养心补血法、健脾补血法、润肺补血法、滋肝补血法、益肾补血法。     

全蝎配伍蜂房之祛风攻毒作用探析

通过梳理古本草文献中全蝎、蜂房的有关记载和现代临床对该药对的配伍应用,探讨并阐释该药对祛风攻毒增效的作用机制,认为全蝎配蜂房,药力迅捷,内走脏腑,外达肢节,透骨搜风,既可祛风通络止痛,又可攻毒散结消痈.尤其适宜于治疗风湿顽痹、痈疽恶疮、癌肿等.     

高脂血症诊治研究中问题及策略

目的:探讨高脂血症诊临床治疗中有效对策。方法:结合近代高脂血症诊治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治高脂血症。结果:中西医结合防治此病有效。结论:中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

证素等概念的辨析

阐述了证素的概念,证素与证候、证名、病因、病位、病势、病机、病理等概念的区别与关系.     

丹栀逍遥散及其提取物镇静催眠作用研究

目的探讨丹栀逍遥散原方及提取物镇静催眠作用。方法将小鼠分为14组,正常对照组、原方组及各组分低中高剂量组,通过测定小鼠自主活动次数,采用戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量镇静催眠协同作用实验观察丹栀逍遥散原方及各提取物镇静催眠作用。结果丹栀逍遥散原方及提取物均无改变小鼠自主活动的功能,表明均无中枢兴奋性作用;丹栀逍遥散石油醚提取液高、中剂量具有显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的作用(P<0.01或P<0.05),石油醚提取液高剂量能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠个数(P<0.01)。结论丹栀逍遥散石油醚提取部位可能为丹栀逍遥散的中枢抑制作用的有效部位。