腺苷A1受体激动剂诱导心脏缺血预处理延迟效应的实验研究

目的探讨腺苷A1受体激动剂能否诱导心脏缺血预处理的延迟保护及其与锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)表达的关系.方法按随机数字表法将60只鼠分为6组,每组10只.A组:用腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(CCPA)预处理; B组:为缺血对照,静脉注射生理盐水;C组:注射反义全巯代磷酸化寡核苷酸(ODN)后再注射生理盐水;D组、E组和F组在预处理前分别静脉注射Mn-SOD反义ODN、意义ODN、错配ODN.观察左心室压力变化最大速率(±dp/dtmax)的恢复率,肌酸激酶同工酶(CK-MB)释放活性,心肌三磷酸腺苷(ATP)、丙二醛(MDA)含量和Mn-SOD活性.结果 A组、E组和F组±dp/dtmax恢复率、心肌ATP含量和Mn-SOD活性均高于B组、C组和D组(P<0.05,0.01),而CK-MB释放活性和MDA含量均低于B组、C组和D组(P<0.05).结论腺苷A1受体激动剂可诱导预处理的延迟效应,减轻心肌缺血-再灌注损伤,其机制与Mn-SOD的高表达有关.     

腺苷A_1受体激动剂后处理对兔心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的 探讨腺苷A1受体激动剂(2-氯环戊腺苷,CCPA)后处理对兔心肌缺血-再灌注损伤的保护作用.方法 32只兔随机均分为四组:假手术组(S组,开胸后仅行左冠状动脉套线而不阻断160min)、缺血-再灌注组(IR组,行左冠状动脉前降支阻断40 min,再灌注120 min)、缺血后处理组(lPC组,结扎左冠状动脉前降支40 min,再通30 s,结扎30 s,重复3次,再灌注120 min)和CCPA后处理组(APC组,结扎左冠状动脉前降支40 min,开放左冠状动脉1 min内予以静推CCPA100 μg/kg,冉灌注120 min).分别于左冠状动脉前降支阻断前20 min(T1)、左冠状动脉前降支阻断20 min(T2)、左冠状动脉前降支阻断40 min(T3)、心肌再灌注1 h(T4)和心肌再灌注2 h(T5)抽取颈内动脉血测定血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量.再灌注末抽血离心测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),测定心肌梗死面积.结果 和IR组相比,IPC组和APC组再灌注各个时间点cTnI均降低(P<0.05);IPC组和APC组梗死面积均小于IR组(P<0.05);IPC组和APC组血清中sOD的活性高于IR组,MDA的含量低于IR组(P<0.05).结论 腺苷A1受体激动剂后处理具有类似缺血后处理的心肌保护作用.其机制可能是通过减少氧自山基的生成,增强心肌抗氧化能力.     

腺苷A1受体诱导预处理延迟效应对供心保存的影响及机制探讨

目的　探讨腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应对保存大鼠心脏的影响及其机制。方法　Wistar大鼠随机分为 8组 ,A、C组以高选择性腺苷A1受体激动剂 (CCPA)预处理 ;D、E、F组在CCPA预处理前分别注射锰 超氧化物歧化酶 (Mn SOD)反义、有意义、错配寡核苷酸 (ODN) ;B、G组注射生理盐水 ,H组只注射反义寡核苷酸。 2 4h后 ,A、B组用 4℃St.Thomas液保存 4h ,复灌 1h ,而另 6组采取低温缺血 3h ,复灌 1h。观测心功能、磷酸肌酸激酶 (CK mb)、三磷酸腺苷 (ATP)含量等。结果　A组左室内压上升与下降最大速率恢复率 (±dp/dtmax,% )为 6 2 .83± 17.2 7,6 6 .81± 18.99,心肌ATP含量 (10 3 μmol/g)为3.6 7± 1.4 2 ;而B组分别为 4 0 .4 1± 18.2 9,4 4 .70± 2 5 .14 ,1.4 6± 0 .5 4 ;A组均明显高于B组 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1orP <0 .0 5 )。C组±dp/dtmax恢复率、ATP、Mn SOD活性均明显高于D、G、H组 (P <0 .0 1orP <0 .0 5 ) ,而与E、F组比较 ,差异无显著性。结论　腺苷A1受体激动剂能诱导预处理的延迟效应 ,改善离体大鼠心脏的保存效果 ,而该效应与Mn SOD的高表达有关。     

保存液中加入硝酸甘油提高离体犬肺的保存效果

在研究不同器官保存液的基础上，我们先后开发了SDMC-1、2液，可有效应用于离体心脏的保存。为了提高肺保存的效果，我们将保存液中加入硝酸甘油（NTG），用于供肺的灌洗及保存，取得了较好的效果，报道如下。     

缺血预处理对兔离体心脏长期保存的心肌保护作用

目的　观察缺血预处理对离体心脏长期保存的心肌保护作用。方法　将 2 4只家兔随机分为 4组 ,每组 6只 ,分成空白对照组、预处理组、保存组和预处理后保存组。离体兔心脏用Langendorff装置灌注稳定后 ,分别给予缺血预处理后再灌注、心脏保存 1 8h后再灌注及缺血预处理后再经 1 8h保存后再灌注 60min ,观察左室收缩功能的恢复率、冠脉回流液中碱性磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶 (LDH)的浓度以及心肌形态结构改变。结果　预处理组同空白对照组相比 ,各项指标差异无显著性 (P >0 .0 5)。单纯保存组同对照组相比 ,左室收缩功能明显减弱 ,冠脉回流液中心肌酶的漏出明显增加 ,光镜及电镜观察心肌损伤严重。而经预处理后再保存组 ,左室收缩功能的恢复率较单纯保存组有明显提高 [(51 .9± 7.5) %比 (36 .6± 4 .9) % ,P <0 .0 5] ,心肌酶漏出明显减少 [CK :(31 2± 52 )IU/L比 (642± 1 0 8)IU/L ;LDH :(2 9± 9)IU/L比 (76± 1 0 )IU/L ,P <0 .0 5] ,光镜及电镜观察 ,心肌损伤程度明显减轻。结论　缺血预处理过程本身对心肌细胞无明显损伤 ,是比较安全的 ;缺血预处理对离体心脏长期保存有明显的保护作用     

St．Thomas Ⅰ号液和改良Collins液对保存心脏代谢和功能的影响

以Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅠ号液（Ⅰ组）和改良Ｃｏｌｌｉｎｓ液（Ⅱ组）作为心停跳冲洗液保存成年猪心４～６小时，离体再灌注复苏，测试心功能和代谢（ＭＶＯ２）及冠状动脉阻力指数（ＣＲＩ）。结果表明ＭＶＯ２在再灌注１５和６０分钟时Ⅰ组明显高于Ⅱ组（Ｐ＜０．０１），说明在相同条件下，Ⅰ组能摄取更多的氧；Ⅱ组ＣＲＩ始终高于Ⅰ组，在再灌注１和１５分钟差别显著（Ｐ＜０．０５）；心功能指标ＭＣＩ，ＭＳＶＩⅠ组均优于Ⅱ组，其中ＭＳＷＩ则Ｐ＜０．０１。     

腺苷A1受体系统在兔脑预缺血延迟相保护效应中的作用

目的 探讨腺苷A1受体系统在兔脑预缺血延迟相保护效应中的作用。方法 股动脉放血至平均动脉压35－40mmHg时,阻断双侧颈总动脉诱导脑缺血。脑缺血3min存活3d（预缺血处理）后、脑缺血10min（预缺血延迟相保护模型）;用腺苷A1受体激动剂氮6－环戊基腺苷（CPA）代替预缺血处理,用其拮抗剂8－环戊基－1,3－二丙基黄嘌呤（DPCPX）阻断该受体;免疫组化分析热休克蛋白70（SHP70）表达。观察缺血3d后海马CA1区正常神经密度和HSP70的表达。结果 （1）CPA能减轻脑缺血损害,但其保护作用不如预缺明显（约占后者的70％）,DPCPX阻断该受体后,预缺血延迟相保护作用消失;（3）3min脑预缺血神经元无损害,但伴HSP70明显表达;DPCPX阻断腺苷A1受体后,3min脑预缺血发生明显损害,且HSP70表达明显削弱。结论 （1）预缺血延迟相保护作用与腺苷A1受体系统激活有关;（2）DPCPX阻断预缺血延迟相保护作用的机制与削弱HSP70表达有关。     

腺苷A1受体系统对兔脑缺血损伤的保护效应

目的　探讨腺苷A1 受体系统对兔脑缺血的保护作用。方法　家兔 2 4只随机分为对照组 (Ⅰ组 ,n =8)、缺血组 (Ⅱ组 ,n =8)和腺苷A1 受体激动药 +缺血组 (Ⅲ组 ,n =8) ,股动脉抽血至平均动脉压 35～ 40mmHg时 ,阻断双侧颈总动脉诱导脑缺血。观察术后第 3天海马CA1 区神经元密度。结果　 (1 )Ⅱ组神经元密度为 (76 50± 1 5 2 6)个 /毫米 ,显著低于Ⅰ组神经元密度 (2 0 8 1 3±1 1 0 8)个 /毫米 (P <0 0 5) ;而Ⅲ组神经元密度 [(1 30 78± 1 8 0 7)个 /毫米 ]明显高于Ⅱ组 (P <0 0 5)。结论　激活腺苷A1 受体系统能减轻脑缺血性损害     

腺苷A2受体激动剂对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响

目的:研究腺苷A2受体激动剂对大鼠缺血再灌注损伤（I/R）时肝细胞凋亡的影响。方法:通过门静脉插管，分别用60 mL 4℃ HTK保存液和含有腺苷A2受体激动剂CGS21680（30 μg/100 mL）HTK保存液灌注大鼠肝脏, 然后切取肝脏4℃ HTK液中保存24h，Krebs-Henseleit缓冲液常温连续再灌注45 min。检测灌注期间丙氨酸氨基转移酶（ALT）和谷氨酸乳酸脱氢酶(GLDH)及门静脉压力（PVP）的变化。灌注结束时检测灌洗液中细胞凋亡、脂质过氧化物（LPO）和胆汁分泌量的变化。结果:与对照组相比, CGS21680组大鼠灌注液中ALT，GLDH 和PVP明显降低(均P<0.01)， 胆汁分泌量明显增加 (P<0.01), LPO含量明显降低(P<0.05)，细胞凋亡明显减少(P<0.05)。结论:腺苷A2受体激动剂可减轻离体大鼠肝脏I/R损伤和细胞凋亡的发生率，其作用机制可能与氧自由基的减少有关。     

腺苷与单磷酯A联合预处理对供心保存的实验研究

目的　探讨腺苷与单磷酯A联合预处理对供心保存的效果。方法　健康大白兔 39只 ,随机分为 4组。A、B组以单磷酯A预处理 2 4h后 ,制成离体心脏 ,A组再用腺苷预处理 ;C组用腺苷作经典预处理 ;D组仅注射生理盐水作对照。各组预处理后 ,用 4℃改良St.Thomas液诱导心脏停搏 ,低温保存 4h ,复灌 1h。观察心功能恢复率、心肌三磷酸腺苷 (ATP)和丙二醛 (MDA)含量、心肌磷酸肌酸激酶 (CK mb)释放量等。结果　A、B、C、D组心功能恢复率 (+dp/dtmax ,% )分别为 :70 .97± 17.92 ,6 5 .5 4± 2 2 .6 2 ,6 4 .36± 16 .10 ,39.0 7± 13.78;A组高于B、C、D组 ,并与D组的差异有显著性 (P <0 .0 1)。A、B、C、D组心肌组织ATP含量 (10 -3 μmol/g湿重 )分别为 :5 .4 6± 1.37,3.97± 1.0 4 ,4 .4 5± 1.2 9,2 .0 7± 0 .74 ;A组高于B、C、D组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5orP <0 .0 1)。结论　用单磷酯A和腺苷联合预处理 ,对供心有一定的保护效果。     

超氧化物歧化酶介导腺苷延迟预处理的研究

目的 探讨以腺苷介导延迟预处理与锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的关系。方法大鼠随机分 6组,B组以腺苷 A1受体激动剂 CCPA预处理,24 h后制成离体心脏,低温缺血 3 h,复灌1h。观测心功能、SOD等。A组为缺血对照;C、E、F组在预处理前分别静注Mn-SOD反义、意义、错配寡核苷酸(ODN)。结果 B、C组左室压力上升最大速率恢复率(％)分别为 72.62±16.28,50.00±17.02、Mn-SOD活性(IU/mg.prot)分别为67.81±19.12,35.70±15.02,B组都高于C组,差异有显著性(P<0.05)。结论 Mn-SOD参与腺苷 A1受体介导的延迟预处理。     

腺苷预处理对心脏直视手术心肌保护作用的临床研究

目的　探讨腺苷预处理对心脏直视手术的心肌保护效果。方法　将 30例择期心脏瓣膜置换术患者随机分成治疗组和对照组 ,治疗组在开心术前实施腺苷预处理。观察血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、磷酸肌酸激酶同工酶 (CK MB)、血浆丙二醛 (MDA)、心肌三磷酸腺苷 (ATP)、能量储备(EC)及心肌超微结构 (线粒体计分 )的变化。结果　主动脉开放后 30min ,治疗组cTnT为 ( 0 .42±0 .1 8) μg/L、CK MB为 ( 35.42± 1 5.87)U/L、MDA为 ( 4 .2 8± 0 .35)mmol/L升高值均明显低于对照组 [( 1 .1 6± 0 .32 ) μg/L、( 56.2 6± 1 6.36)U//L、( 6.37± 2 .46)nmol/L(P <0 .0 5) ];治疗组ATP含量( 1 5.86± 3.51 ) μmol/g干重和EC值 0 .4857± 0 .0 578均明显高于对照组 [( 6.2 5± 2 .79) μmol/g干重、0 .2 992± 0 .0 4 1 9(P <0 .0 1 ) ];治疗组线粒体计分 0 .860 2± 0 .2 381明显低于对照组 2 .740 6±0 .9792 ,(P <0 .0 1 )。结论　腺苷预处理对心脏具有明显的保护作用     

含钾通道开放剂的HTK液对大鼠心功能以及线粒体结构和功能的影响

目的 观察含钾通道开放剂的供心保存液对心功能以及能量代谢、线粒体呼吸酶活性及超微结构的影响.方法 将SD大鼠分为HTK组、Pi组、5HD组、1098组和5HD+1098组.切取SD大鼠心脏,建立Langendorff灌注模型,平衡10 min,然后按分组进行如下处理:HTK组心脏以Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate液(HTK液)停搏;Pi组心脏以含0.5 mmol/L吡那地尔(Pi)的HTK液停搏;1098组心脏以含0.5 mmol/L Pi和100 μmol/L HMR1098的HTK液停搏;5HD组心脏以含0.5 mmol/L Pi和100 μmol/L五羟葵酸(5HD)的HTK液停搏;5HD+1098组心脏以含0.5 μmol/L Pi、100 μmol/L 5HD和100μmol/L HMR1098的HTK液停搏.停搏后,将心脏置于各组相应的液体(4℃)中保存8 h,然后用含氧的37℃克-亨液(K-H液)再灌注60 min.观察各组平衡末、保存末、再灌注末时的心功能、线粒体呼吸酶活性、心肌ATP含量及心肌细胞线粒体超微结构的改变.结果 Pi组保存末、再灌注末的心功能(心率、左心室舒张末压、左心室发展压和冠状动脉流量)、心肌线粒体呼吸酶(NADH氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶)活性及ATP含量均优于其他各组(P<0.01或P<0.05),同时线粒体的结构改变也最轻.结论 含Pi的HTK液能改善大鼠心脏保存效果;Pi对能量状态的维持以及对线粒体结构与功能的保护可能是其心肌保护的重要机制.     

丙泊酚或与腺苷联合预处理对犬心脏缺血-再灌注损伤的作用

目的 观察丙泊酚预处理及与腺苷联合预处理对犬心脏缺血-再灌注损伤的作用。方法 21只杂种犬随机分为丙泊酚预处理组（A组）、丙泊酚与腺苷联合预处理组（B组）和缺血-再灌注组（C组）,每组7只。C组经历稳定60min,左前降支结扎60min与松开结扎再灌注120min;A组在缺血前30min持续输注丙泊酚直至冠脉结扎前,再行上述缺血-再灌注;B组在丙泊酚输注期间、缺血前10min推注腺苷后续缺血-再灌注处理同C组。于缺血前、缺血15、30、60min及再灌注30、60、120min时抽取冠状静脉窦血样检测乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）的活性。实验结束后用Even’s蓝与TTC双染法测量危险及梗死的心肌面积。结果 从缺血30min起,各组血清CK显著升高直至实验结束;A、B组在缺血与再灌注期间CK显著低于C组（P〈0．05,0．01）。各组心脏间危险面积无显著性差异,而A、B组梗死面积显著低于C组（P〈0．01）。上述各指标A、B组间无显著性差异。结论 丙泊酚单纯预处理与联合腺苷预处理均可减轻麻醉犬心脏缺血-再灌注损伤,缩小梗死面积。腺苷对丙泊酚预处理的心脏保护作用无附加影响。     

硫化氢在兔离体心脏保存中的保护作用

目的 研究硫化氢(H2S)在兔离体心脏低温保存中的作用,并探讨其作用机制.方法 获取40只大白兔的离体心脏,应用Langendorff灌注装置对兔离体心脏分别进行灌注后保存.根据离体兔心灌注和保存液的不同,分为5组,每组8只.对照组:单纯Krebs-Henseleit(K-H)液;硫氢化钠(NariS)组:K-H液中加入1 μmol/L的NariS(H2S的供体);NariS+格列本脲(G1i)组:K-H液中加入1 μmol/L的NariS和10 μmol/L的Gli;G1i组:K-H液中加入10 μmol/L的Gli;STH组:单纯St.Thomas液.各组心脏在灌注和保存6 h后,留取心脏标本,检测各组兔离体心脏低温保存6 h后心功能恢复率、心脏复跳时间、心肌三磷酸腺苷(ATP)含量和含水量变化,使用电子显微镜观察心尖部组织的结构变化.结果 心脏保存6 h后,NariS组心脏复跳时间最短、心功能恢复率、心肌ATP含量最高,均优于STH组,但差异无统计学意义(P＞0.05);与NariS+Gli组、Gli组和对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).NariS组左心室功能和结构损伤较轻,其次是STH组,NariS+Gli组、Gli组及对照组的左心室功能及心肌组织结构损伤严重.结论 硫化氢在兔离体心脏低温保存6 h内具有良好的保护作用.开放KATP通道可能是硫化氢发挥保护作用的重要机制.     

尼可地尔超极化心脏保存液保存兔心的效果

目的 研究钾通道开放剂尼可地尔（nicorandil）在心脏保存中的作用。方法 40个兔心随机分成4组，分别用含尼可地尔的KH液（超级化心脏保存液）、UW液、STH液和KH液保存。采用Langendorff灌注模型和工作心模型，保存前、后测左室发展压、心室内压上升最大速率、心室内压下降最大速率、冠状动脉流量、肌酸激酶及乳酸脱氢酶，记录各组心跳停止和心电活动停止所需时间、心肌含水量、保存后心肌ATP含量。结果 尼可地尔组的各项指标（除心肌含水量外）均优于STH组和KH组，达到了UW液的效果，结论 尼可地尔超级化心脏保存液保存兔心效果较好。