氟西汀对慢性应激大鼠海马磷酸化微管相关蛋白-2表达的影响

目的探讨慢性应激大鼠海马磷酸化微管相关蛋白-2（p-MAP-2）表达的变化及经典抗抑郁剂氟西汀的效应。方法24只SD大鼠,随机分为3组：正常对照组,慢性应激组,慢性应激伴随给予氟西汀（FLU,10mg·kg^-1）组。慢性应激28d之后,用开场实验及新奇抑制摄食模型评价氟西汀的抗抑郁活性,用免疫组织化学方法及Western blot方法检测海马p-MAP-2的表达。结果慢性应激28d可以导致大鼠自发活动明显减弱,新奇抑制摄食潜伏期显著延长,慢性应激同时伴随给予氟西汀可以逆转这些行为学变化,提示氟西汀在慢性应激模型上具有良好的抗抑郁作用;免疫组化研究发现,与对照组比较,慢性应激可以导致大鼠海马p-MAP-2表达水平明显降低,而同时伴随给予氟西汀可以提高其表达水平;Western blot结果进一步研究发现,慢性应激可以使大鼠海马p-MAP-2A以及低分子量p-MAP-2C表达明显降低,而同时伴随给予氟西汀可以逆转这些变化。结论海马p-MAP-2各亚型表达的变化与氟西汀在慢性应激模型上抗抑郁活性有关。     

远志YZ-50对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及血清CRH ACTH和COR的影响

目的观察中药远志YZ-50对慢性应激抑郁模型大鼠行为学和血清促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、血清皮质醇（COR）含量的影响。方法选择Open-filed法评分相近的♂wistar大鼠100只分为空白对照组、模型组、地昔帕明（20mg·kg^-1）、远志YZ-50低、高剂量（2．8、5．6g生药／kg）,每组20只。选用慢性轻度不可预见性应激结合孤养造模,观察各组大鼠敞箱实验、体重以及糖水摄入等行为学指标变化,采用放射免疫方法检测大鼠血清中CRH、ACTH和COR含量。结果慢性应激抑郁大鼠体重增加缓慢,敞箱实验中的水平运动、垂直运动得分、糖水消耗明显下降,而且其血清CRH、ACTH和COR含量显著增加。地昔帕明组和远志YZ-50低、高剂量组均能有效改善慢性应激抑郁大鼠模型的行为学和神经内分泌变化。结论慢性轻度不可预见性应激结合孤养造模可使大鼠行为学及神经内分泌发生异常改变,引起抑郁状态,远志YZ-50对此具有不同程度的拮抗作用,发挥出一定的抗抑郁作用。     

巴戟天水提物对大鼠低速率差式强化程序和小鼠强迫性游泳的影响

目的：更深入和全面地评价巴戟天水提物的抗抑郁作用。方法：采用大鼠低速率差式强化程序（ＤＲＬ７２ｓ）和小鼠强迫性游泳法。结果：在大鼠ＤＲＬ７２ｓ模型上，巴戟天水提物５０ｍｇ／ｋｇ与抗抑郁剂地昔帕明５ｍｇ／ｋｇ的作用一致，均显著增加大鼠ＤＲＬ－７２ｓ的强化数，减少反应数和降低效应比率。在小鼠强迫性游泳模型上，巴卉天水提物５０ｍｇ／ｋｇ与地昔帕明２０ｍｇ／ｋｇ和阿米替林２０ｍｇ／ｋｇ的作用类似，明显缩短     

高+Gz反复暴露后大鼠心脏组织应激性差异表达基因的分离

目的筛选 Gz反复暴露后大鼠心脏组织特异性应激基因。方法采用动物离心机处理对照组和实验组大鼠,实验组G值为 10Gz,增长率为1G／s。峰值持续3min,共做3次,两次间歇30min．对照组动物在离心机经历类似实验步骤,所承受的G值为 1Gz;反复暴露后1h提取实验组和对照组大鼠心脏组织总RNA,分离纯化poly A RNA,与Atlas Rat Stress Array膜杂交。并用半定量RT—PCR进行差异基因表达的特异性鉴定。结果得到10个差异表达基因,其中8个在 Gz反复暴露后大鼠心脏组织中表达上调,2个表达下调,选取热休克蛋白70、P21和血红素加氧酶-1基因作为候选基因,经半定量RT—PCR得到特异性验证,P21和血红素加氧酶-1表达水平升高,热休克蛋白70表达下降。结论应用Atlas Rat Stress Array杂交技术可以发现与 Gz反复暴露相关的特异性应激基因,为 Gz反复暴露对心脏组织的作用机制研究提供新的思路和方法。     

铁缺乏致聋相关基因表达谱的实验研究

目的应用基因表达谱芯片研究铁缺乏耳聋Wistar大鼠耳蜗膜性结构基因表达的改变。方法选用体重28—45g的健康、无耳疾、ABR阈值正常的幼龄Wistar大鼠23只，随机分成两组。正常大鼠对照组12只，喂以标准鼠饲料12周；缺铁耳聋大鼠组11只，缺铁饲料喂养12周；将包含了4096条大鼠的靶基因用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片，取缺铁耳聋组和正常对照组的耳蜗膜性组织mRNA，通过逆转录方法将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA上，制成cDNA探针，并与表达谱芯片进行杂交后扫描。用RT-PCR方法验证部分差异表达基因。结果缺铁耳聋组与正常对照组比较，筛选出差异表达的基因896条，其中上调基因447条，下调基因449条。肌动蛋白基因及其相关调节蛋白基因的表达发生了改变。其中肌动蛋白基因arpelb，actcl，actb，actal都表现为下调，肌动蛋白的抑制蛋白基因profilinⅡ上调。细胞骨架蛋白tubulin、myosin和热休克蛋白HSP下调。选取5条差异表达基因BC072490（Ctsb）、CF111145（Actb）、NM013146（Caldl）、AB011679（Tubb5）、BC063175（Ctsl）用RT-PCR验证，RT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论铁缺乏通过影响耳蜗膜性结构中多种基因的表达，包括肌动蛋白基因及其相关调节蛋白基因的表达从而导致感音神经性聋。     

cDNA-RDA技术分离新的肝硬化相关基因片段

目的：分离在肝硬化组织上调表达的新基因，以阐述肝硬化发生的分子机制。方法：利用优化的代表性差异分析方法分析正常肝脏及肝硬化组织表达基因的差异。两轮杂交后的产物克隆到T栽体中，斑点杂交筛选阳性克隆以获得差异表达基因片段，并进一步以半定量RT-PCR鉴定。结果：上调表达的克隆包括与一些序列和功能完全未知的基因同源的cDNA以及未曾报道过的在肝脏病变中发生表达变化的已知基因——钙结合酪氨酸磷酸化调节蛋白、雌激素应答B盒蛋白等。结论：利用优化的代表性差异分析方法成功分离获得在肝硬化组织中上调表达的基因片段，其中一些新基因的克隆及其在肝硬化发生中的作用有待进一步研究。     

度洛西汀与氟西汀治疗精神分裂症后抑郁对照研究

目的比较度洛西汀与氟西汀治疗精神分裂症后抑郁的临床疗效和安全性。方法46例诊断为精神分裂症后抑郁的患者随机分为两组,分别用度洛西汀和氟西汀治疗6周,采用汉密尔顿抑郁量表（HAMD）,简明精神病评定量表（BPRS）阴性症状量表（SANS）及副反应量表（TESS）于治疗前和治疗后2,4、6周末分别评定疗效和副反应症状。结果度洛西汀和氟西汀组HAMD评分差异无显著性,副反应症状差异也无显著性。结论度洛西汀治疗精神分裂症后抑郁的临床疗效于与氟西汀相当。安全性高,不良反应轻微,可以用于精神分裂症后抑郁的治疗。     

寡聚核苷酸芯片技术筛选电离辐射后大鼠PC12细胞的差异表达基因

目的为探讨中枢神经系统辐射损伤的分子机理，采用寡聚核苷酸芯片技术研究16Gy^60Coγ射线照射前后PC12细胞基因的表达变化。方法采用大鼠寡聚核苷酸芯片技术进行辐射相关基因的筛查，芯片探针进行荧光交换标记，且每个基因重复3次点阵；分析结果，选取感兴趣基因进行RT-PCR半定量验证。结果基因芯片筛查有40个差异表达基因，其中上调基因37个，下调基因3个。这些差异基因主要涉及细胞周期、代谢、信号转导、免疫与应激、细胞增殖、生长发育及细胞凋亡等多个方面。RT-PCR结果显示照射后48hPC12细胞OAS1、GARG16和IL6 mRNA表达水平均上调，与芯片结果一致。结论PC12细胞可用于神经细胞辐射后信号转导、细胞代谢、生长发育、应激反应以及细胞增殖等方面的研究。     

阿米替林、SSRIs、SSRIs加中藏药治疗高原地区老年抑郁症的临床对比研究

目的：比较阿米替林、帕罗西汀、氟西汀＋中藏药治疗高原地区老年抑郁症的疗效和不良反应。方法：对中度高原地区（海拔2260m）符合CCMD-3抑郁发作诊断标准的患者随机分为5组,分别给予阿米替林、帕罗西汀、氟西汀＋红景天,氟西汀＋逍遥丸、氟西汀＋红景天＋逍遥丸,治疗疗程（6～8）周。用汉米顿抑郁量表（HAMD）、不良反应量表（TESS）进行评分。结果：阿米替林、帕罗西汀、氟西汀＋红景天、氟西汀＋逍遥丸、氟西汀＋红景天＋逍遥丸5组显效率差别无显著性。帕罗西汀、氟西汀＋中藏药3组显效快,4周内的HAMD减分值高于阿米替林组。氟西汀＋中藏药3组不良反应较阿米替林、帕罗西汀组少,差别有显著性。结论：中藏药：红景天、逍遥丸能提高高原老年抑郁症患者对抗抑郁剂治疗的耐受性,氟西汀＋中藏药疗效可靠、副作用小,是治疗高原地区老年抑郁症的理想药物。     

莫沙必利联合氟西汀治疗功能性消化不良临床观察

目的：观察莫沙必利联合氟西汀治疗功能性消化不良（FD）的临床疗效。方法：选择FD 94例,随机分为观察组与对照组各47例。观察组给予口服莫沙必利加氟西汀治疗;对照组口服莫沙必利加谷维素治疗。两组均加用奥美拉唑抑酸治疗。结果：两组均治疗4周后进行疗效评定,观察组总有效率85.1%,对照组53.2%,两组比较,差异非常显著（P〈0.01）。结论：莫沙必利联合氟西汀治疗FD疗效较好。     

伯氏疟原虫抗体芴醇株抗性转化相关基因的克隆

目的：研究药物敏感虫株伯氏疟原虫K173株及其在本芴醇压力下的本芴醇抗性株之间基因表达的差异状况,克隆抗性相关基因,方法：采用mRNA差异显示技术寻相关基因,并用Northern杂交证实,结果：采用24种引物组合进行mRNA差异显示,克隆到30余个差异表达基因片段,对其中8个进行了Northern杂交鉴定及测序,结果表明,与敏感株相比,克隆CB52在本芴醇抗性株中表达明显增多,而在氯喹抗 株中的表达有所减少,说明克隆CB52确与本芴醇抗性相条新基因序列,结论：克隆CB52基因表达水平的改变与伯氏疟原虫本芴醇抗性的产生相关,疟原虫原本芴醇的抗性机制在基因水平同于氯喹抗性。     

ACL和MCL细胞mRNA差异显示研究初步报告

目的 :研究ACL和MCL细胞在mRNA表达水平上的差别。方法 :培养人ACL和MCL细胞 ,提取总RNA ,用mRNA差异显示技术寻找ACL和MCL细胞在mRNA表达水平上的差异表达带 ,将有差异的条带回收、扩增、克隆化及ReverseNorthern杂交 ,筛选出阳性克隆进行cDNA测序并进行NCBI基因数据库分析。结果 :在ACL和MCL细胞之间找到 6个差异表达的基因 ,分别为C4M2 ,C1A1,A4M1,A1A2 ,G4A1,C7A2。结论 :ACL和MCL细胞在基因表达水平上有区别 ,已找到的基因可作为探针筛选cDNA文库进一步研究其功能。     

Aortic stiffness and aerobic exercise: mechanistic insight from microarray analyses

INTRODUCTION/PURPOSE: Regular aerobic exercise reduces aortic stiffness. However, the mechanisms by which chronic exercise lowers arterial stiffness are not known. To determine the molecular mechanisms of these changes, the alteration of gene expression in the aorta by aerobic exercise training was measured with the microarray technique. METHODS/RESULTS: The differences in expression levels of 3800 genes in the abdominal aorta of sedentary control rats (8 wk old) and exercise-trained rats (8 wk old, treadmill running for 4 wk) were compared by the microarray analysis. Aortic pulse wave velocity (PWV) was lower and systemic arterial compliance was higher (both P < 0.05) in the exercise-trained group than in the control group. Of the 323 genes that displayed differential expression (upregulation of 206 genes and downregulation of 117 genes), a total of 29 genes (24 upregulated and 5 downregulated genes) were identified as potential candidate genes that may be involved in vasodilation and arterial destiffening. Using real-time quantitative polymerase chain reaction, we confirmed the results of microarray analysis that prostaglandin EP2 receptor (PGE-EP2R), prostaglandin EP4 receptor (PGE-EP4R), C-type natriuretic peptide (CNP), and endothelial nitric oxide synthase (eNOS) genes were differentially expressed. Furthermore, there were modest correlations between arterial stiffness and levels of these factors. Differential expression of eNOS gene was further verified at protein level by using Western blot analysis. CONCLUSION: These results suggest that exercise training induces the altered expression in several genes including prostaglandin, CNP, and nitric oxide in the aorta and that these molecular changes (particularly eNOS as its protein expression was altered) may contribute, at least in part, to the beneficial effect of exercise training on aortic stiffness.     

应用基因表达谱芯片技术研究膦甲酸钠处Jurkat细胞后的差异表达基因

目的 筛选膦甲酸钠处理人T淋巴细胞系Jurkat细胞后的差异表达基因。方法 应用基因表达谱芯片技术对膦甲酸钠处理的Jurkat细胞和以生理盐水处理的相同细胞的mRNA进行检测。结果 Jurkat细胞经膦甲酸钠处理后,所检测的1152条目的基因中,有94条产生差异表达,其中38条基因表达增强,56条基因表达降低。结论 应用基因表达谱芯片成功筛选了膦甲酸钠处理淋巴细胞后差异表达基因,为进一步阐明膦甲酸钠的免疫调节机制及深人了解膦甲酸钠用于治疗病毒性肝炎的药理作用机制提供依据。     

γ线照射小鼠胸腺组织基因表达转录谱分析

目的 探讨6 Gy γ线照射后不同时间小鼠胸腺组织基因表达转录谱的动态变化。方法 应用快速高通量的cDNA基因芯片技术进行研究。结果 1随照射后时间推移,差异表达基因数目和种类逐渐减少,如照射后1、6、14和28 d差异基因数量分别为878、318、162和25;2辐射所诱导的胸腺组织差异表达基因广泛涉及细胞周期、免疫和应激、细胞凋亡、细胞信号转导、转录调节、DNA合成修复和重组、细胞骨架、离子通道和运输、代谢、蛋白翻译和合成、发育、细胞分化多个方面;3照射后对某些重要差异表达基因的分析表明,与细胞周期相关的基因有5个(上调3个:Cyclin G、Anxa1、Fgf1,下调2个:Cdc2a、Cdc25b);与免疫应激相关的5个(上调4个:IL-18、Casp1、IL-15、IL-7,下调1个:Cd28);与细胞凋亡相关的7个(上调4个:Casp1、Anxa1、Perp、IL-7,下调3个:Pten、Api5、Fas)。结论 6 Gy γ线照射后,小鼠胸腺组织差异表达基因随照射后时间延长不仅涉及多个靶点、多个层次,显示出多样性变化的特点,而且显示出时间上的明显差异;从基因水平上揭示了中等剂量照射小鼠胸腺组织损伤修复和重建基因的变化规律,为辐射免疫损伤与修复的分子机制和防治措施的研究提供了新的启示。     

应用肿瘤相关寡核苷酸芯片筛选乳癌差异表达基因

目的：应用寡核苷酸芯片技术研究乳癌基因表达谱。方法：根据文献获取目的基因，查询相应基因mRNA序列，通过计算机设计并合成探针，将探针点样于经化学修饰的载玻片上，制备含288种基因的肿瘤相关基因寡核苷酸芯片。提取乳癌与相应正常乳腺组织总RNA，通过逆转录制备荧光标记的cDNA探针并与芯片杂交，经洗片后扫描获取图像，计算机分析比较乳癌组织与正常乳腺组织的差异表达基因。结果:检测16例乳癌组织与正常乳腺组织标本，有10例基因表达存在明显差异，其中表达增高的有6种，表达降低的有4种。结论：乳癌组织与正常乳腺组织存在部分差异表达的基因，乳癌的发生发展与这些基因密切相关；寡核苷酸芯片技术在乳癌相关基因的研究中具有重要意义。     

旋转细胞培养系统模拟微重力环境对小鼠成纤维细胞lncRNA表达的影响

目的 研究旋转细胞培养系统(RCCS)模拟微重力环境对小鼠成纤维细胞株L929 lncRNA表达的影响.方法 体外培养L929细胞,随机分为模拟微重力组(SMG组)和正常重力组(NG组),每组3个样本.SMG组回转器轴心与地面平行旋转,NG组回转器轴心与地面垂直旋转,两组转速一致.RCCS培养7d,收集样本,提取样本总RNA,进行荧光标记和芯片杂交.利用Agilent Mouse lncRNA芯片分别检测SMG组和NG组L929细胞的lncRNA和mRNA表达,筛选差异表达显著的lncRNA,RT-qPCR验证芯片结果;利用GO和Pathway分析差异表达lncRNA的功能分布,结合mRNA差异表达谱,进行lncRNA-mRNA联合分析.结果 lncRNA芯片检测分析发现,RCCS模拟微重力环境下小鼠成纤维细胞L929共有238条差异表达的lncRNA,其中134条表达上调,104条表达下调;差异表达的mRNA共有237条,其中53条表达上调,184条表达下调.获取差异表达lncRNA的聚类分析图,对差异表达显著的4条lncRNA芯片结果进行RT-qPCR验证,结果相吻合.GO分析结果显示差异表达的lncRNA与巨噬细胞分化、伤口愈合的负性调节等生物学过程相关,Pathway分析结果显示差异表达的lncRNA与系统性红斑狼疮、TGF-β等信号通路相关.同时成功构建了lncRNA-mR-NA-TF可视化网络图.结论 RCCS模拟微重力环境显著影响L929细胞的lncRNA及mRNA表达谱,基于芯片技术的ln-cRNA靶基因预测和功能富集分析可为失重应激损伤机制探讨和修复措施建立提供理论依据.     

用微阵列方法分离+GZ反复暴露后大鼠心脏组织应激性差异表达基因

目的筛选 Gz反复暴露后大鼠心脏组织特异性应激基因。方法提取 Gz反复暴露后1h及对照组大鼠心脏组织总RNA，分离纯化Poly A RNA，与Atlas Rat Stress Array膜杂交，经半定量RT-PCR进行差异基因表达的特异性鉴定。结果初步得到10个差异表达基因，选取HSP70、HSP60、HSPB2、HO-1、HMG2、LCAD作为候选基因，经半定量RT-PCR做特异性验证，发现 Gz反复暴露后1h，HSPB2、HO-1和LCAD mRNA水平升高，HSP70和HMG2 mRNA水平下调，HSP60表达水平未发生改变。结论HSPB2、HO-1是 Gz反复暴露后大鼠心脏组织中早期重要的保护性物质；应用Atlas Rat Stress Array为研究 Gz反复暴露对心脏组织的作用机制提供新的思路和方法。     

应用cDNA微矩阵基因芯片筛选运动性心肌肥大相关基因的初步研究

目的 :应用cDNAchip(cDNA芯片或微矩阵基因芯片 )技术筛选运动性心肌肥大相关基因。方法 :摘取运动组和对照组小鼠心脏 ,按一步法抽提总RNA并纯化mRNA ,将 2 30 4个点包括10 3个阴性及对照基因和 2 2 0 1条小鼠靶基因的PCR扩增产物 ,按微矩阵 (12× 12点× 16亚矩阵 ,点间距离 375 μm)点制于硅烷化玻片上 ,制备成cDNA芯片。将等量抽提纯化的运动组和对照组小鼠心肌组织mRNA ,分别与掺入的荧光分子Cy3和Cy5经逆转录合成cDNA荧光探针 ,混合后再与cD NA芯片杂交 ,通过芯片扫描仪对荧光信号图像进行扫描 ,经计算机分析比较运动组和安静对照组心肌组织中基因表达谱的变化。结果 :在 2 2 0 1条待研究基因中 ,两组小鼠心肌组织间存在差异表达的基因。具有显著表达差异的基因有 71条 ,其中上调基因有 37条 ,下调基因有 34条。结果显示 :cDNA芯片技术筛选运动性心肌肥大相关基因具有高通量、高敏度、高效率、大规模和并行性等优点。     

Delayed expression of hpS2 and prolonged expression of CIP1/WAF1/SDI1 in human tumour cells irradiated with X-rays, fission neutrons or 1 GeV/nucleon Fe ions.

PURPOSE: Differences in gene expression underlie the phenotypic differences between irradiated and unirradiated cells. The goal was to identify late-transcribed genes following irradiations differing in quality, and to determine the RBE of 1 GeV/n Fe ions. MATERIALS AND METHODS: Clonogenic assay was used to determine the RBE of Fe ions. Differential hybridization to cDNA target clones was used to detect differences in expression of corresponding genes in mRNA samples isolated from MCF7 cells irradiated with iso-survival doses of Fe ions (0 or 2.5 Gy) or fission neutrons (0 or 1.2 Gy) 7 days earlier. Northern analysis was used to confirm differential expression of cDNA-specific mRNA and to examine expression kinetics up to 2 weeks after irradiation. RESULTS: Fe ion RBE values were between 2.2 and 2.6 in the lines examined. Two of 17 differentially expressed cDNA clones were characterized. hpS2 mRNA was elevated from 1 to 14 days after irradiation, whereas CIP1/WAF1/SDI1 remained elevated from 3 h to 14 days after irradiation. Induction of hpS2 mRNA by irradiation was independent of p53, whereas induction of CIP1/WAF1/SDI1 was observed only in wild-type p53 lines. CONCLUSIONS: A set of coordinately regulated genes, some of which are independent of p53, is associated with change in gene expression during the first 2 weeks post-irradiation.