凋亡抑制基因Survivin在人肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨凋亡抑制基因Survivin在人肝癌 (HCC)中的表达及其临床意义。　方法 :应用SABC免疫组化染色技术和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测 95例HCC及其癌旁组织、8例非肝癌肝组织Survivin蛋白以及 8例HCC组织SurvivinmRNA的表达 ,分析其与病理分级、临床分期和肿瘤大小等临床指标之间的关系。　结果 :HCC组织中Survivin基因蛋白表达率显著高于癌旁组织和非肝癌肝组织 (5 9.77%vs 2 6 .0 0 %和 5 9.77%vs0 .0 0 % ,P <0 .0 1) ;HCC组织中SurvivinmRNA表达阳性率显著高于癌旁组织 (37.5 %vs 0 .0 0 % ,P <0 .0 1) ;Sur vivin蛋白表达与肝癌组织学分级、临床分期、肿瘤大小无相关关系。　结论 :Survivin基因在HCC组织表达上调 ,提示该基因参与了HCC的发生过程 ;Survivin基因表达与组织分化程度无关 ,提示其可能成为HCC特异性诊断指标或基因治疗的新靶点。     

PEG10基因在不同转移潜能肝癌细胞中表达的定量分析

目的通过对不同转移潜能的肝癌细胞株中PEG10基因(parternal express gene 10)表达水平的定量分析,探讨其作为肝癌转移基因的可能性。方法提取肝癌细胞株HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H的RNA,反转录合成第一链cDNA,对反转录产物进行荧光定量PCR。用管家基因-βactin的cDNA起始浓度作为参照标化PEG10的cDNA起始浓度,对标化结果进行方差分析。结果HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H标化后的PEG10 cDNA相对起始浓度分别为(3.15±0.05)×10-3(、5.06±0.03)×10-3(、6.14±0.09)×10-3,各肝癌细胞系之间PEG10表达量差异也存在极显著性意义(P<0.01)。结论PEG10基因表达水平与肝癌细胞的转移潜能呈正相关,可以推测PEG10基因可能是促使肝癌转移的癌基因。     

MLLT10在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的探讨MLLT10的表达水平在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及临床意义。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库对MLLT10在HCC癌组织及癌旁正常组织中的表达水平进行分析,分析MLLT10的表达水平与HCC患者的年龄、性别、血清甲胎蛋白(AFP)、肿瘤TNM分期、病理分级、整体生存率和无进展生存率的关系。结果 MLLT10在HCC癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。性别、肿瘤TNM分期和病理分级与HCC癌组织MLLT10的表达水平有关(P<0.05)。年龄和血清AFP水平与HCC癌组织MLLT10的表达水平无关(P>0.05)。MLLT10高水平表达HCC患者的整体生存率和无进展生存率均低于MLLT10低水平表达者,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 MLLT10可能参与HCC的发生和发展,有望成为检测HCC的肿瘤标志物和预后判断因子。     

PEG10基因siRNA真核表达载体的构建及其对肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的:构建针对遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体,体外观察其对肝癌HepG2细胞凋亡的影响. 方法:设计针对PEG10基因的3个siRNA靶序列,构建真核表达载体siRNA1,siRNA2和siRNA3,脂质体分别转染HepG2细胞后实时定量PCR,检测其对HepG2细胞PEG10基因表达的影响,MTT法、流式细胞仪和激光共聚焦检测转染siRNA后的HepG2细胞的生长活性及凋亡. 结果:成功构建了针对PEG10基因的3个特异性siRNA表达载体. 它们不同程度地抑制了HepG2细胞PEG10基因的表达,以siRNA2抑制效率最高,可达93.99%. HepG2细胞的生长也明显受到抑制(P＜0.05),大量HepG2细胞凋亡,siRNA2凋亡率最高,为66.91%. 结论:靶向PEG10基因的siRNA表达载体可抑制肝癌HepG2细胞的生长,诱导细胞凋亡,该作用与降低PEG10基因的表达有关.     

印迹基因SGCE在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨印迹基因SGCE在原发性肝细胞癌中的表达及其意义.方法 构建肝癌组织的基因表达谱文库,并对肝癌和正常肝脏组织基因表达谱的数据进行比较分析,寻找差异表达基因.收集临床组织样本,应用荧光定量PCR方法,检测肝癌和相应癌旁组织中SGCE和PEG10基因的表达水平.结果 基因表达谱数据提示,印迹基因SGCE的表达水平...     

丁型肝炎病人肝组织中HDAg和肝细胞凋亡双标记表达

目的 探讨肝细胞凋亡在丁型肝炎发病机制中的作用。方法 采用免疫经双重染色和ＴＵＮＥＬ技术，检测７９例丁肝病人肝组织ＨＤＡｇ和肝细胞凋亡分布及其关系，以５４例乙型肝炎病人肝组织作对照。结论 ＨＤＡｇ以肝细胞核表达为主，ＨＤＡｇ、凋亡细胞表达分布与肝组织病理损害程度一致（Ｐ〈０．０１），多数凋亡细胞位于ＨＤＡｇ阳性部位或附近，肝细胞凋亡在各型肝炎中的分布强度差别有显著性意义（Ｐ〈０．０１）。结论 ＨＤ     

顺铂诱导肝细胞性肝癌细胞凋亡及其临床意义

目的：探讨顺铂（ＣＤＤＰ）体内诱导肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法：１８例ＨＣＣ患者随机分成２组,１０例行ＣＤＤＰ诱导治疗,另８例作对照。用流式细胞仪（ＦＣＭ）检测２且患者患者手术切除之肿瘤组织,作凋亡及细胞周期分析。结果：ＣＤＤＰ治疗组肝癌细胞凋亡率较对照组显著增高。ＣＤＤＰ治疗组肿瘤细胞Ｇ０－Ｇ１期对照组明显增加;而Ｓ期细胞有显著减少。细胞增殖指数（ＰＩ）在ＣＤＤＰ治     

促凋亡基因bax在肝细胞癌的表达及其临床意义

目的：研究促凋亡基因bax在肝细胞癌（HCC）的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化SP方法，检测44例原发性肝细胞癌（包括其中22例肝癌伴肝硬化）、肝硬变20例和正常肝组织中bax蛋白的表达。结果：bax阳性率在HCC为2．27％（1／44）、肝硬变为30％（6／20）和10例正常肝组织为50％（6／20）和10例正常肝组织为50％（5／10）。结论：肝癌与肝硬化之间以及肝癌与正常肝组织间均有显著差别P＜0．05，bax参与细胞凋亡的调节作用。     

PTPRO在肝细胞肝癌中表达的性别差异及其与预后的关系

目的:检测受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase receptor-type O,PTPRO)在人类肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达水平,研究该基因的表达是否具有性别差异,并是否与HCC肝切除术后肿瘤复发相关,是否可以作为判断预后的指标?方法:①利用实时荧光定量聚合酶链反应和免疫组织化学的方法,分别检测59例男性及22例女性HCC患者肿瘤组织及癌旁组织中PTPRO及雌激素受体(estrogen receptors,ERs)的表达水平;②通过t检验分析PTPRO?ERs在肿瘤?瘤旁及不同性别间的表达差异,并通过相关性分析及F检验了解PTPRO表达与ERs是否具有相关性;③通过Kaplan-Meier曲线研究不同PTPRO表达水平与HCC患者术后复发率之间的关系?结果:①PTPRO?ER?琢在HCC组织中的mRNA及蛋白水平明显低于癌旁肝硬化组织(P < 0.000 1);②HCC癌旁组织中PTPRO?ER?琢的表达水平,男性显著低于女性(P < 0.05);③Kaplan-Meier曲线及Log-rank检验表明HCC癌旁组织中PTPRO水平与HCC复发水平呈负相关(P < 0.000 1)?结论:PTPRO是一种具有性别差异性的抑癌基因,可作为判断HCC肝切除术后预后的指标?     

顺铂诱导肝细胞性肝癌细胞凋亡及其临床意义

日的 :探讨顺铂 (CDDP)体内诱导肝细胞性肝癌 (HCC)细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法 :18例HCC患者随机分成 2组 ,10例行CDDP诱导治疗 ,另 8例作对照。用流式细胞仪 (FCM )检测 2组患者手术切除之肿瘤组织 ,作凋亡及细胞周期分析。结果 :CDDP治疗组肝癌细胞凋亡率较对照组显著增高 (P <0 .0 1)。CDDP治疗组肿瘤细胞G0 -G1 期较对照组明显增加 (P <0 .0 5 ) ;而S期细胞有显著减少 (P <0 .0 1)。细胞增殖指数 (PI)在CDDP治疗组显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :CDDP在体内能显著增加HCC细胞的凋亡。小剂量CDDP诱导治疗为肝癌辅助治疗可行方法之一     

FHIT在原发性肝细胞癌中的表达及其与细胞凋亡及增殖的关系

目的:通过检测原发性肝癌组织中FHIT蛋白的表达及观察细胞凋亡、增殖状况,探讨原发性肝癌中FHIT蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和图像分析技术检测50例肝癌及相应的癌旁组织和30例正常肝组织中的FHIT蛋白和Ki-67抗原,采用TUNEL法和图像分析技术检测上述组织中的细胞凋亡状况....     

人原发性肝癌胰岛素样生长因子2基因的印迹状态

目的研究人原发性肝癌中胰岛素样生长因子2(insulin like growth factor Ⅱ,IGF2)基因印迹状态,为进一步研究肝癌发生机理提供线索。方法用限制性片段长度多态性检测IGF2基因杂合状态,用逆转录-酶联聚合反应半定量检测IGF2基因在肝癌及癌旁组织中的表达,分析IGF2印迹状态、表达量与人原发性肝癌的关系。结果55．6％(10／18)的肝癌组织存在IGF2基因印迹的重新获得,与之相对的远癌组织有60％(6／10)也发生了IGF2基因印迹的重新获得。50％(9／18)的癌组织IGF2基因过度表达,但表达量与基因印迹的改变没有显著相关性。结论IGF2基因印迹的重新获得可能参与了肝癌的发生。     

胃癌组织PTEN蛋白表达及其与凋亡的关系

目的：研究胃癌组织中抑癌基因PTEN蛋白表达及其与凋亡的关系。方法：应用免疫组织化学S-P法检测20例正常胃粘膜及80例胃癌组织中PTEN蛋白的表达；采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术，检测其凋亡指数。结果：20例正常胃粘膜组织PTEN全部阳性表达，肿瘤组织PTEN阳性率为52．5％（42／80），PTEN表达水平与组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。胃癌组织凋亡指数（AI）和TNM分期、组织分化程度密切相关（P〈0．05）。PTEN蛋白表达水平与凋亡指数呈显著正相关（P〈0．01）。结论：PTEN在胃癌的发生发展过程中可能起重要作用，胃癌凋亡的抑制可能与PTEN蛋白表达下调有关。     

重组腺病毒介导的野生型p53基因对HepG2细胞抑制作用的研究

目的:研究重组腺病毒介导的野生型p53基因对人肝癌细胞系HepG2的抑制作用。方法:用MTT比色法检测重组人p53腺病毒(Ad-p53)在不同感染滴度、不同感染时间对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用,用流式细胞仪检测Ad-p53作用后HepG2细胞的凋亡率;采用瘤内注射的方法观察Ad-p53对裸鼠移植瘤的抑制作用。结果:Ad-p53对HepG2细胞有明显的抑制效应,效靶比(MOI)越高、作用时间越长,抑制作用越强;当rAd-p53在125MOI效靶比时,细胞生长基本达到完全抑制;p53转导显著增加了HepG2细胞的凋亡率;瘤内注射Ad-p53后,荷瘤裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制。结论:Ad-p53对人肝癌HepG2细胞有明显的抑制效应,其抑制效应具有时间、剂量依赖关系,Ad-p53转导野生型p53基因可能是一种有效的肝癌基因治疗途径。     

ZD6474对肝癌细胞和乙肝相关肝癌细胞增殖的影响

目的:探讨ZD6474对肝癌细胞株HepG2和乙肝相关肝癌细胞株HepG2.2.15细胞增殖的影响.方法:用WST方法检测ZD6474对细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测ZD6474对细胞周期及凋亡的影响.结果:ZD6474可以显著抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,6.4 μmol/L的ZD6474可以抑制(46.86±10.32)％的HepG2和(41.24±7.35)％的HepG2.2.15细胞增殖,其抑制增殖作用随剂量增加而增强(P＜0.05).ZD6474诱导细胞产生G0/G1期阻滞,6μmol/L的ZD6474可诱导71.90％的HepG2和69.90％的HepG2.2.15细胞阻滞于G0/G1期.结论:ZD6474可以抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,其机制可能与诱导细胞周期阻滞有关.     

抑癌基因Runx3增强顺铂致肝癌细胞的凋亡效应

目的:探讨腺病毒介导的Runx3基因(Ad-Runx3)与化疗药物顺铂(DDP)联合应用对肝癌细胞HLE增殖的抑制效果.方法:检测肝癌细胞HLE中Runx3基因启动子区域甲基化状态及表达情况.通过Ad-Runx3感染肝癌细胞HLE,利用RT-PCR方法检测Runx3基因在肝癌细胞中的转录,用Ad-Runx3联合化疗药物...     

肝癌中PTEN基因及蛋白表达的意义

目的:研究肝癌中PTEN基因mRNA和蛋白的表达与肝癌病理之间的关系。方法:应用RT-PCR法检测28例肝癌组织和对应的癌旁组织中PTEN基因mRNA表达,并通过电泳凝胶图像系统分析其相对表达量。同时采用免疫组化方法检验51例肝癌石蜡切片中PTEN蛋白表达(其中包括与28例新鲜组织相对应的标本)。结果:RT-PCR检测PTENmRNA表达率肝癌中为35.71%,癌旁组织中为71.43%,PTEN基因在肝癌细胞中表达显著低于癌旁肝组织。免疫组化检测肝癌中PTEN蛋白的检出率为66.7%,PTEN蛋白表达与肝癌的病理分级和癌栓形成呈负相关。结论:PTEN基因缺失和肝癌的分化程度以及癌栓形成、转移密切相关。     

顺铂化疗对肝细胞性肝癌syndecan-1蛋白表达的影响

目的探讨术前化疗药物顺铂对肝细胞肝癌syndecan-1表达的影响.方法应用免疫组化技术(ABC法)检测syndecan-1在未化疗组和顺铂化疗组肝细胞肝癌的表达.结果在47例肝细胞癌中,31例未化疗者syndecan-1阳性表达13例,而在16例化疗者中syndecan-1阳性表达13例.化疗组syndecan-1阳性表达率高于未化疗组,有显著性差别(P＜0.05).结论顺铂化疗会增加肝细胞肝癌syndecan-1的表达,从而有助于预后的改善.     

Tiam1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的：检测肝细胞癌（ HCC ）标本中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（ Tiam1）的表达,探讨Tiam1在肝细胞癌发生、发展及转移中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）和免疫组化方法检测Ti-am1 mRNA和蛋白质在肝癌组织和癌旁肝组织中的表达,并分析Tiam1的表达与肝癌转移的关系。结果 Tiam1 mRNA在癌旁肝组织中的相对表达量（0．136＆#177;0．136）明显低于肝细胞癌组织（0．718±0．089）（ P＜0．05）。 Ti-am1在肝细胞癌转移组mRNA的相对表达量（0．917±0．123）明显高于非转移组（0．678±0．136）（P＜0．05）。Tiam1蛋白在癌旁肝组织中的阳性率（38．4％）明显低于肝细胞癌组织（80．7％）（P＜0．05）。 Tiam1在肝细胞癌转移组蛋白表达阳性率（90．9％）明显高于非转移组（73．3％）（P＜0．05）。结论 Tiam1的表达升高在肝细胞癌的发生发展过程中起重要作用,可作为预测肝细胞癌转移的参考指标。     

黏着斑激酶在乙肝相关性肝细胞癌中的表达

目的研究黏着斑激酶(FAK)在肝细胞癌,尤其是乙肝病毒相关性肝细胞癌中的作用。方法应用免疫组化法检测肝细胞癌患者67例(其中53例有乙肝病毒感染)。本组手术切除标本均经石蜡包埋,病理检验。结果FAK在HBsAg(+)组的癌组织与HBsAg(-)组癌组织中表达的差异有显著性(P<0.05);在肝癌组织及癌旁组织的表达的差异也有显著性(P<0.05)。结论FAK在乙型肝炎相关性肝细胞癌的发生发展过程中起重要作用,其可能成为治疗乙肝相关性肝细胞癌的治疗靶点。