热痹康汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清IL-1β及IL-4的影响

目的：观察热痹康汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清白介素-1β（IL-1β）及白介素-4（IL-4）的影响,以初步揭示热痹康汤治疗类风湿关节炎的机理,并为其在临床上治疗类风湿关节炎提供实验依据。方法：采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型,以甲氨蝶呤作对照,观察热痹康汤对各组大鼠的关节肿胀指数以及血清IL-1β、IL-4水平的影响。结果：热痹康汤能降低CIA大鼠血清IL-1β的水平,升高IL-4的水平,作用与甲氨蝶呤相当。结论：热痹康汤能下调CIA大鼠血清IL-1β水平、提高IL-4的水平,是其治疗类风湿关节炎的作用机理之一。     

橙皮苷对大鼠胶原性关节炎的治疗作用及部分机制

目的 研究橙皮苷(HDN)对胶原性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及部分机制.方法 用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)联合氟氏完全佐剂(FCA)诱导CIA大鼠模型;采用足爪肿胀及病理组织学变化等指标观察HDN(80、160、320 mg/kg)对CIA大鼠的影响;ELISA法测定外周血清白介素17(IL-17)水平;体外用药(HDN ...     

刺山柑果实精制提取物抗类风湿关节炎的实验研究

目的评价刺山柑果实精制提取物对弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的治疗效果。方法采用弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原为造模剂分别建立大鼠类风湿性关节炎模型,测定刺山柑精制提取物对关节炎大鼠足趾肿胀抑制率和相关炎症因子表达的影响。结果刺山柑精制提取物对大鼠佐剂性关节炎继发性病变具有一定的治疗作用,治疗效果均持续至实验结束,其中刺山柑高剂量的抑制率基本稳定在20%以上,对大鼠关节周围组织滑膜内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、干扰素-γ(IFN-γ)有一定下调作用。刺山柑提取物对Ⅱ型胶原诱导的大鼠类风湿关节炎足趾肿胀也具有显著抑制作用,100 mg/kg剂量组在给药后3 d,开始出现一定程度的抑制足关节的肿胀,给药后14 d抑制率达到40.3%(P0.05)。结论刺山柑精制提取物具有抑制弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的作用,能有效缓解其关节附件的肿胀,其作用机制可能是通过下调TNF-α、IL-1、IFN-α等相关炎症因子的表达。     

性别差异对牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎模型的影响

目的 构建雌性及雄性牛Ⅱ胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)模型,比较性别差异对CIA模型关节及关节外表现的影响。方法 选用雌性及雄性SD大鼠并注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂诱导CIA模型,评估各组大鼠的一般情况、关节炎指数、足肿胀度、血清炎症因子及纤溶酶原激活物抑制剂水平、脾指数、膝关节及踝关节病理、右后足爪骨破坏情况、肺间质病变情况。结果 雌性CIA大鼠的关节炎指数在初次免疫后第21天较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),但两组足肿胀度在观察的任一时间点均无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠血清肿瘤坏死因子α、白介素1β和脾指数均较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05,P<0.001),纤溶酶原激活物抑制剂水平无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠膝关节和踝关节病理的炎症细胞浸润及滑膜增生评分较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),雌性CIA大鼠膝关节软骨损伤及右后足爪骨破坏程度均较雄性显著升高(P<0.05);雌性和雄性CIA大鼠均出现了肺间质炎症细胞浸润及轻度纤维化,但雌性比雄...     

小鼠胶原诱导性关节炎模型的建立及其免疫学变化研究

目的 胶原诱导性关节炎模型(collagen induced arthritis,CIA)是研究类风湿性关节炎发病机制和治疗药物筛选的理想模型,也是目前国际上公认的关节炎模型.但是,目前鲜见Ⅱ型胶原诱导CIA模型的系统免疫学变化的报道.因此,本研究采用DBA/1小鼠诱导了CIA模型,并对其免疫学改变进行了系统研究.方法 将牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂混和并充分乳化,于DBA/1小鼠尾根部皮内注射进行初次免疫,20 d后同样方法进行再次免疫.应用千分尺测量CIA模型小鼠的左右两侧足掌厚度,并进行关节炎评分.酶联免疫吸附试验测定小鼠血清Ⅱ型胶原特异性抗体,Luminex技术和αLISA技术测定血清及培养上清中的细胞因子水平.结果CIA小鼠于造模后23 d开始,陆续出现前肢、后肢的红肿、功能障碍,发病率高达100％,且随着时间的延长其关节肿胀程度呈进行性加重,关节炎评分增高.CIA小鼠脾脏指数较正常组明显升高,且Ⅱ型胶原刺激的特异性T细胞增殖明显增强.细胞因子检测结果表明,脾细胞培养上清中IFN-γ和1L-4含量及IFN-γ/IL-4比值明显升高,TNF-α和IL-1β水平亦显著升高.此外,CIA小鼠血清中存在高水平的Ⅱ型胶原特异性抗体.结论 Ⅱ型胶原诱导CIA模型发病率高,免疫学改变以Th1细胞因子升高为主,兼有细胞免疫功能及体液免疫功能损伤.     

桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠TNF-α与RANKL表达的影响

目的:观察桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠血清中TNF-α与关节滑膜组织RANKL表达的影响,并初步探讨其治疗机制。方法:以弗氏完全佐剂诱导产生免疫性关节炎模型,用不同剂量桂枝芍药知母汤(GSZ汤20.6 g/kg、10.3 g/kg)给模型动物灌胃用药,观察用药后动物血清TNF-α水平与致炎对侧膝关节滑膜组织RANKL表达。结果:桂枝芍药知母汤用药4周后,可明显增加模型大鼠体重增长速度,减轻关节肿胀程度(P<0.05 orP<0.01);使模型大鼠血清TNF-α水平降低(P<0.01)以及滑膜组织RANKL表达下降(P<0.01),本实验条件下,GSZ汤20.6g/kg剂量时的疗效与MTX相当。结论:桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠有治疗作用,其机制可能与抑制TNF-α分泌,降低RANKL表达有关。     

嗜碱性粒细胞在胶原诱导性关节炎模型小鼠Th1/Th2应答失衡中的作用

目的探讨嗜碱性粒细胞在胶原诱导性关节炎模型小鼠Th1/Th2失衡中的作用。方法取4~6周龄C57/BL6小鼠,经初次和3周后二次背部和足底多点胶原免疫,建立胶原诱导性关节炎小鼠模型。分别在建模(初次免疫)前、建模后1、3、6和9周眶静脉采血和采集淋巴结细胞,利用流式细胞术对嗜碱性粒细胞数量和表达IL-4的比例检测,ELISA方法检测血清IL-4和IFN-γ水平,并对模型进行评分。结果成功建立关节炎小鼠模型;模型建立后1周CIA模型小鼠血清IFN-γ/IL-4水平的比值显著低于建模前和对照组小鼠,提示以Th2应答为主,同时外周血中嗜碱性粒细胞的数量和表达IL-4的比例显著高于对照组;而建模后6和9周CIA模型小鼠血清IFN-γ/IL-4水平的比值显著高于对照组,提示以Th1应答为主,同时外周血中嗜碱性粒细胞的数量与对照组比较有降低的趋势。结论嗜碱性粒细胞可能通过影响Th1/Th2应答失衡参与CIA模型小鼠的发病。     

化瘀通络方抑制类风湿关节炎滑膜炎症机制研究

目的:观察化瘀通络方对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜组织miR-155及T细胞相关因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达的影响。方法:复制CIA大鼠模型,随机分为6组,正常组、模型组、阳性药物组、大剂量治疗组、中剂量治疗组、小剂量治疗组,每组各10只,造模成功后灌胃干预,进行行为学测定及表征评估,完成后取血清及关节滑膜进行滑膜病理学观察及滑膜微血管计数,并采用ELISA法、Real-Time PCR法进行相关指标的测定。结果:模型组miR-155-5p mRNA表达水平与正常组比较均有明显增高。治疗组和阳性药物组miR-155-5p mRNA表达水平与模型组比较均明显下降。血清IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10含量,模型组明显高于正常组(P0.01),用药后阳性药物组和治疗组明显下降(P0.01)。结论:化瘀通络方对CIA大鼠滑膜炎有较好的改善作用,可减少滑膜血管翳的形成,同时下调miR-155、IFN-γ、IL-2的表达,对IL-4、IL-10表达则有明显的上调作用。IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的表达变化与miR-155明显相关,说明化瘀通络方可能通过调节miR-155调控T细胞相关因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10,从而改善类风湿关节炎滑膜炎。     

胶原性关节炎大鼠炎性细胞因子的动态观察

目的 以胶原性关节炎（CIA）大鼠模型为基础，动态观察CIA大鼠血清中炎性细胞因子水平的变化。方法 建立CIA大鼠模型。分别于初次免疫后第0、10、20、30、40、50、60天记录大鼠的体重，测量大鼠后足体积和足垫厚度，计算关节炎指数；HE染色光镜下观察关节滑膜病理变化；采用ELISA方法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平变化。结果 造模成功后的CIA大鼠14d左右出现炎症反应，30d左右达高峰，以后炎症逐渐减轻。与同期空白对照组大鼠相比，CIA大鼠血清中TNF-α水平10d明显升高（P<0.01），IL-1β和IL-6水平20d明显升高（P<0.05），三者水平均30d达高峰（P<0.01），以后持续存在，但水平有所降低。结论 CIA大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6在RA的整个病程中一直发挥着重要作用。     

穴位埋线对大鼠CIA模型Treg/Th17相关细胞因子及滑膜组织病理形态学的影响

目的通过观察穴位埋线对大鼠胶元诱导型关节炎(CIA)模型血清Treg/Th17相关细胞因子及滑膜组织病理形态学的影响,从细胞因子角度以及组织病理形态学改变探讨其的作用机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型组、来氟米特组、穴位埋线治疗组、来氟米特+穴位埋线治疗组。动态观察大鼠一般情况、各项关节炎活动指标、HE染色观察滑膜病理改变、ELISA法检测血清中IL-6、IL-17和TGF-β1含量。结果与模型组比较,各治疗组均能有效改善CIA大鼠关节肿胀以及关节炎指数;提高血清中TGF-β1含量和降低血清中IL-6、IL-17含量,各治疗组能有效减轻CIA模型滑膜组织关节炎炎症及病理形态的改变。结论穴位埋线治疗具有免疫调节作用,其可能调节Th17/Treg细胞平衡而显著减轻关节炎症和破坏。     

丹溪痛风胶囊对类风湿性关节炎大鼠血清IL-17和IL-23水平的影响

目的:观察丹溪痛风胶囊对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)大鼠的治疗作用及对血清白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)和IL-23水平的影响。方法:32只大鼠随机分成正常组,模型组,丹溪痛风胶囊低剂量组、高剂量组。除正常组外,其余各组采用牛Ⅱ型胶原诱导法制备类风湿性关节炎大鼠模型,各组分别灌胃给予相应药物。给药28 d后,检测各组大鼠足跖肿胀度和关节炎指数,显微镜下观察大鼠关节滑膜的病理变化,ELISA法检测血清中IL-12和IL-23的水平。结果:模型组大鼠足跖肿胀度和关节炎指数明显增高,与正常组比较,差异有统计学意义(P0.01);模型组大鼠关节滑膜水肿、增生明显,并有大量炎细胞浸润;模型组大鼠血清中IL-12和IL-23的水平均显著升高,与正常组比较,差异有统计学意义(P0.01)。丹溪痛风胶囊低剂量组和高剂量组大鼠的足跖肿胀度和关节炎指数均不同程度降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01);丹溪痛风胶囊低剂量和高剂量均能明显改善模型大鼠关节滑膜的病理变化;丹溪痛风胶囊低剂量组和高剂量组大鼠血清中IL-12和IL-23的水平均明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:丹溪痛风胶囊通过下调血清中IL-12和IL-23的水平起到治疗RA的作用。     

宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响

目的:观察宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响。方法:将大鼠随机分为正常组(N组)和模型复制组,模型复制组经成功复制CIA大鼠模型后,随机分为模型组(M组)和宣痹汤组(X组)。X组灌胃给予宣痹汤3周,同时M组和N组给予9.0 g/L氯化钠注射液3周。其间测量非致炎足踝关节直径,并进行关节炎指数评分。灌胃结束后,经股动脉取全血,使用ELISA法测定血清INFγ和IL-4水平;使用流式细胞术,以外周血CD4 INFγ 和CD4 IL-4 T细胞分别代表Th1和Th2细胞,测定各自在淋巴细胞所占比例,计算Th1/Th2比值,并将CIA大鼠踝关节直径与Th1/Th2比值进行相关性分析。结果:与M组相比,CIA大鼠关节直径、关节炎指数评分均有改善(P<0.05);血清INFγ和IL-4水平,Th1所占比例以及Th1/Th2比值均显著下降(P<0.01),Th2所占比率显著上升(P<0.01),且CIA大鼠临床症状的改善与Th1/Th2比值降低具有相关性(r=0.846,P<0.01)。结论:宣痹汤能有效缓解CIA大鼠临床症状,恢复Th1/Th2漂移,这可能是其临床治疗类风湿关节炎的机制之一。     

胶原性关节炎大鼠血清中IL-17水平的分析

目的 检测胶原性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠血清IL-17的水平.并分析其与抗Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ,CII)抗体以及关节炎症指数的关系.方法 建立CIA模型.ELISA法检测IL-17及抗CII抗体的水平;并观察CIA大鼠炎症指数.结果 CIA大鼠血清IL-17和抗CII抗体水平均高于对照组.且CIA组IL-17与关节炎炎症指数和血清抗CII抗体水平呈正相关关系.结论 CIA大鼠血清IL-17水平升高,且与病情活动有关.     

桂枝芍药知母汤对转基因小鼠胶原诱导性关节炎T淋巴细胞增殖的影响

目的:观察经方桂枝芍药知母汤对HLA-DR4转基因小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)T淋巴细胞增殖的影响,以探讨桂枝芍药知母汤治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机理。方法:采用HLA-DR4转基因小鼠CIA动物模型,评价造模后桂枝芍药知母汤早期给药对T淋巴细胞增殖的影响。结果:与模型组比较,该方能明显抑制RA转基因小鼠T淋巴细胞增殖(P<0.05或P<0.01)。结论:桂枝芍药知母汤有改善RA的病情和症状,抑制T淋巴细胞增殖作用,这可能是本方治疗类风湿性关节炎取得良好疗效的机理之一。     

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎大鼠RANKL／0PG水平的影响

目的：研究桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原蛋白诱导类风湿关节炎大鼠踝关节骨组织细胞RANKL表达的影响,以证明桂枝芍药知母汤可通过抑制破骨细胞的分化与活化,达到缓解或阻止关节的损伤,已达到对类风湿关节炎骨破坏的抑制作用。方法：采用Ⅱ型胶原蛋白诱导类风湿关节炎大鼠模型,灌胃给药30d后用原位杂交技术检测踝关节局部的OPG／RANKL水平。结果：桂枝芍药知母汤能降低CIA踝关节组织RANKL、OPG表达水平。结论：桂枝芍药知母汤可以抑制CIA模型鼠关节RANKLInRNA的表达水平,提高OPGmRNA的表达水平,降低RANKL／OPG的比值,可能通过抑制了破骨细胞的分化与活化,从而可能缓解或阻止关节的损伤破坏。     

原花青素对CIA大鼠足爪组织中NF-κB/p65蛋白和血清中某些促炎性细胞因子表达的影响

目的研究原花青素对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎(CIA)大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB/p65蛋白表达的抑制作用和血清中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α等水平的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导的CIA大鼠模型,免疫组化法检测足爪组织中NF-κB/p65蛋白的表达,ELISA法检测CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量。结果原花青素能剂量依赖性地下调NF-κB/p65蛋白的表达,降低CIA大鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平。结论原花青素对CIA大鼠炎症的抑制作用可能与其下调NF-κB/p65蛋白表达、降低促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的水平有关。     

原花青素对CLA大鼠足爪组织中NF-κB／p6S蛋白和血清中某些促炎性细胞因子表达的影响

目的研究原花青素对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎（CIA）大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB／p65蛋白表达的抑制作用和血清中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α等水平的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导的CIA大鼠模型，免疫组化法检测足爪组织中NF-κB／p65蛋白的表达，ELISA法检测CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量。结果原花青素能剂量依赖性地下调NF-κB／p65蛋白的表达，降低CIA大鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平。结论原花青素对CIA大鼠炎症的抑制作用可能与其下调NF—KB／p65蛋白表达、降低促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的水平有关。     

龙须藤提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠的影响

目的研究龙须藤乙酸乙酯提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨其作用机理。方法建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,观察大鼠足趾肿胀度的变化,用免疫组化法检测大鼠踝关节滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果龙须藤乙酸乙酯提取物能抑制大鼠足趾肿胀及滑膜组织中TNF-α、IL-6及IL-8的表达。结论龙须藤乙酸乙酯提取物对类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理是降低滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的表达水平。     

唾液乳杆菌对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型的脾脏T细胞及炎症因子影响

目的 探讨唾液乳杆菌对类风湿性关节炎（RA）的治疗效果及作用。方法 选择牛Ⅱ型胶原为免疫原,对雄性SD大鼠建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型。随机选取24只造模成功的大鼠,随机分成CIA模型组、唾液乳杆菌组、甲氨蝶呤组,每组8只,另外选择8只大鼠作为健康组。健康组和CIA模型组均给予细菌培养基灌胃;唾液乳杆菌组给予唾液乳杆菌灌胃;甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤药物灌胃,每组连续灌胃4周。结束后评定关节炎指数,测量发病足厚度,观察踝关节组织病理改变并进行组织病理学染色;检测脾脏辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞（Treg）的含量,评估各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果 与健康组相比,CIA模型组、唾液乳杆菌组及甲氨蝶呤组的关节炎指数评分（t=82.31、257.33、234.21）,发病足厚度（t=21.47、56.14、51.44）,血清中IL-1β(t=3...     

五味润僵汤治疗类风湿关节炎的实验研究

目的:研究五味润僵汤对类风湿性关节炎患者的疗效。方法:建立Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型。测量大鼠足肿胀度,计算肿胀率及关节炎指数。采用酶联免疫吸附测定法检测各组血清中的TNF-α和IL-1B表达的影响,并与模型组、正常组进行对比研究。结果:CIA大鼠有明显持续的局部关节肿胀的临床表现。给药后各组治疗均能减少大鼠足爪肿胀和关节指数,与模型组相比差异显著(P<0.01)。正常组的血清中TNF-α和IL-1B呈低表达,与模型组血清中的TNF-α和IL-1B的高表达有显著性的差异(P<0.01)。治疗组血清中TNF-α和IL-1B较接近于正常组的表达,与模型组差异有显著性(P<0.01)。结论:五味润僵汤治疗Ⅱ型胶原诱导性关节炎具有显著疗效,能够明显减轻大鼠的足爪肿胀,降低血清中TNF-α和IL-1B水平。